一種槐花珍在制備治療高血脂癥藥物中的應用

一種槐花珍在制備治療高血脂癥藥物中的應用
【專利摘要】本發明涉及槐花珍在制備治療高血脂癥藥物中的應用，可有效解決高血脂癥的治療用藥問題，方法是，取鮮槐花，洗凈，真空干燥，然后與土炒懷山藥、粉葛、玫瑰花、陳皮和甘草混合均勻，粉碎成細粉，即為槐花珍，包裝，滅菌。本發明原料豐富，制備方法簡單，有效用于治療高脂血癥，實現槐花珍在制備治療高血脂癥藥物中的應用，是治療高脂血癥藥物上的創新，經濟和社會效益顯著。
【專利說明】
一種槐花珍在制備治療高血脂癥藥物中的應用
技術領域
[0001] 本發明涉及醫藥，特別是一種槐花珍在制備治療高血脂癥藥物中的應用。
【背景技術】
[0002] 高脂血癥是指血脂水平過高，可直接引起一些嚴重危害人體健康的疾病，如動脈 粥樣硬化、冠心病、胰腺炎等，高脂血癥可分為原發性和繼發性兩類。原發性與先天性和遺 傳有關，是由于單基因缺陷或多基因缺陷，使參與脂蛋白轉運和代謝的受體、酶或載脂蛋白 異常所致，或由于環境因素(飲食、營養、藥物)和通過未知的機制而致。繼發性多發生于代 謝性紊亂疾病(糖尿病、高血壓、黏液性水腫、甲狀腺功能低下、肥胖、肝腎疾病、腎上腺皮質 功能亢進），或與其他因素年齡、性別、季節、飲酒、吸煙、飲食、體力活動、精神緊張、情緒活 動等有關。
[0003] 高脂血癥的臨床表現主要是脂質在真皮內沉積所引起的黃色瘤和脂質在血管內 皮沉積所引起的動脈硬化。盡管高脂血癥可引起黃色瘤，但其發生率并不很高;而動脈粥樣 硬化的發生和發展又是一種緩慢漸進的過程。因此在通常情況下，多數患者并無明顯癥狀 和異常體征。不少人是由于其他原因進行血液生化檢驗時才發現有血漿脂蛋白水平升高。
[0004] 現雖有治療高脂血癥的多種藥物，但由于種種原因，其使用和療效并不盡人意，因 此，研制新的治療高脂血癥的藥物是必需認真解決的技術問題。

【發明內容】

[0005] 針對上述情況，為克服現有技術之缺陷，本發明之目的就是提供一種槐花珍在制 備治療高血脂癥藥物中的應用，可有效解決高血脂癥的治療用藥問題。
[0006] 本發明解決的技術方案是，一種槐花珍在制備治療高血脂癥藥物中的應用，該槐 花珍是，取鮮槐花，洗凈，真空干燥，然后與土炒懷山藥、粉葛、玫瑰花、陳皮和甘草混合均 勻，粉碎成細粉，即為槐花珍(粉），包裝，滅菌。
[0007] 本發明原料豐富，制備方法簡單，有效用于治療高脂血癥，實現槐花珍在制備治療 高血脂癥藥物中的應用，是治療高脂血癥藥物上的創新，經濟和社會效益顯著。
【具體實施方式】
[0008] 以下結合具體情況對本發明的【具體實施方式】作詳細說明。
[0009] 本發明在具體實施中，一種槐花珍在制備治療高血脂癥藥物中的應用，該槐花珍 是，取鮮槐花，洗凈，60 °C真空干燥，然后與土炒懷山藥、粉葛、玫瑰花、陳皮和甘草混合均 勻，粉碎成過1 〇〇目篩的細粉，即為槐花珍(粉），包裝，滅菌，鮮槐花與土炒懷山藥、粉葛、玫 瑰花、陳皮和甘草的重量比為3:2:1:0.5:0.3:0.2。
[0010]在上述組分中，其中槐花是豆科植物的花及花蕾，鮮槐花是指從槐樹上采集的新 鮮槐花，槐花味苦，性平，無毒，具有清熱、涼血、止血、降壓的功效。對吐血、尿血、痔瘡出血、 風熱目赤、高血壓病、高脂血癥、頸淋巴結核、血管硬化、大便帶血、糖尿病、視網膜炎、銀肩 病等有顯著療效;還可以驅蟲、治咽炎。槐花能增強毛細血管的抵抗力，減少血管通透性，可 使脆性血管恢復彈性的功能，從而降血脂和防止血管硬化。
[0011 ] 土炒懷山藥是懷山藥用用東墻土或灶心土 (公知技術），以增強補脾健胃的功效。
[0012] 粉葛:粉葛是豆科，葛屬植物葛的變種(拉丁學名:Pueraria Iobata(WillcL)Ohwi var. thomsonii (Benth · )Vaniot der Maesen)，中藥名，主治外感發熱、頭項強痛、麻疹初 起、疹出不暢、溫病口渴、消渴、泄瀉、痢疾、尚血壓、冠心病。
[0013] 玫瑰花甘、微苦，溫。歸肝、脾經，行氣解郁，和血，止痛。用于肝胃氣痛，食少嘔惡， 月經不調，跌撲傷痛。
[0014] 陳皮味苦、辛，性溫，歸肺、脾經，理氣健脾，燥濕化痰。
[0015] 甘草氣微，味甜而特殊。功能主治清熱解毒、祛痰止咳、脘腹等。
[0016] 上述組分的有效組合，互相支持，具有降血脂之功效，有效用于治療高脂血癥，實 現槐花珍在制備治療高血脂癥藥物中的應用，并經實地試驗和應用取得了非常好的有益技 術效果，有關試驗資料如下：
[0017] 1實驗材料
[0018] 1.1實驗動物及環境
[0019] 大鼠，種系：Wistar，等級：SPF級，雄性，180-220g，合格證號：37005400000040，提 供單位：山東魯抗醫藥股份有限公司。實驗動物使用許可證號2015-005。飼料為消毒飼料， 墊料為消毒墊料，均由河南省實驗動物中心提供。飲水為消毒蒸餾水。飼養條件:溫度20~ 25°C，相對濕度40%~60%，自然光照，每籠6只，常規飼養，隔天更換墊料。
[0020] 1.2實驗藥品和試劑
[0021 ]槐花珍，河南中醫藥大學實驗室提供，每袋IOg，每次1-2袋，每天3次；；辛伐他汀 片，山東魯抗醫藥集團賽特有限責任公司；生理鹽水，河南雙鶴華利藥業有限公司生產；丙 二醇，天津市致遠化學試劑有限公司；吐溫-80,天津市富宇精細化工有限公司；脫氧膽酸 鈉，北京奧博星生物有限責任公司；丙硫氧嘧啶片，上海朝暉藥業有限公司;膽固醇，上海吳 縣生物化學廠;總膽固醇(T-CHO)測試盒，南京建成生物工程研究所;甘油三酯(TG)測試盒， 南京建成生物工程研究所；高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)測試盒，南京建成生物工程研究 所;低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)測試盒，南京建成生物工程研究所。
[0022] 高脂肪乳的配置：油相:豬油25g、膽固醇10g、丙硫氧嘧啶片lg、吐溫-80 25ml;水 相:蒸餾水30ml、1.2-丙二醇20ml、脫氧膽酸鈉2g。制備方法：油相:豬油25g放入200ml的燒 杯里，加熱至100°C，加入膽固醇IOg熔化，再加入丙硫氧嘧啶片Ig，充分混勻后加入吐溫-80 25ml;水相：蒸餾水30ml加入到200ml燒杯里，60 °C水浴鍋水浴，加入1，2-丙二醇20ml，脫氧 膽酸鈉2g充分溶解;然后將水相加入油相，充分攪拌，冷卻后放4 °C冰箱保存備用。
[0023]高脂飼料的配置:豬油10%，蛋黃粉5%，膽固醇1%，丙硫氧嘧啶0.2%。脫氧膽酸 鈉〇. 5 %，蔗糖5 %，基礎飼料78.3 %的比例配置 [0024] 1.3實驗儀器
[0025] FA(N)/JA(N)系列電子天平，上海民橋精密儀器有限公司；HWS12型電熱恒溫水浴 鍋，上海一恒科學儀器有限公司；KDC-160HR高速冷凍離心機，科大創新股份有限公司中佳 分公司；680型酶標儀，美國BIO-RAD公司；可調式移液器，上海雷勃分析儀器有限公司。 [0026] 1.4統計學處理方法
[0027]數據分析用SPSS17.0醫用統計包進行數據資料的統計學處理，計量資料用平均數 土標準差(x±s>表示，各組間比較采用單因素方差分析，方差檢驗齊者用LSD法，方差不齊 者用Games-Howell法檢驗，等級資料采用Ridit檢驗。
[0028]實驗方法與結果
[0029] 取體重180-200g雄性大鼠60只，隨機分為5組，每組12只。其中4組造高脂血癥模 型，分別上午灌服大、小劑量的槐花珍混懸液(88/1^、48/1^，0.48/1111、0.28/1111，21111/10(^)、 辛伐他汀片混懸液（1.67mg/kg)和同體積的生理鹽水(2ml/100g)，給藥組上午給予相應藥 物，下午給高膽固醇乳2ml/100g;同時每天給予高脂飼料喂養，每天給藥一次，連續給藥21 天。另一組為空白對照組，不造高脂血癥模型，僅灌同體積的生理鹽水。每周稱體重一次，根 據體重調整用藥量。于第21日給藥后2小時摘眼球取血，3000r/min離心5min，分離血清，分 裝后于一 20°C冷凍保存測定生化指標，供測定血清總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固 醇水平、低密度脂蛋白膽固醇水平，結果見表1。稱重后取肝臟組織少許，按1:9的比例加生 理鹽水，置于玻璃勾衆管內，全程冰上操作；研磨完全后3 OOOrpm · mif1離心15min，制備 肝臟勻漿，測肝勻漿TC、TG水平，結果見表2。大鼠取血后脫頸錐處死，解剖取肝臟，稱重，計 算肝指數(肝臟比重=肝重/體重X 100%)，結果見表3。各組取肝臟正中葉相同部位的組 織，4%多聚甲醛固定，石蠟包埋，切片，蘇木素-伊紅(HE)染色，觀察肝臟組織形態學變化。 [0030] 2.1(1)膽固醇的測定
[0031] 試劑組成及配制（96T)
[0035] 混勻后，37 °C孵育10分鐘，51 Onm，酶標儀測定各孔吸光度。
[0036] 計算公式:血清中等液體樣本計算公式:酶標儀比色:膽固醇量(mmol/L) =(樣本 OD值一空白OD值）+ (標準OD值一空白OD值）X校準品濃度(5.17mmo I /L)。
[0037] (2)甘油三脂的測定
[0038] 試劑組成及配制（96T)
[0042] 混勻后，37 °C孵育10分鐘，51 Onm，酶標儀測定各孔吸光度。
[0043] 計算公式:血清中等液體樣本計算公式:酶標儀比色:膽固醇量(mmo I /L )=(樣本 OD值一空白OD值）+ (標準OD值一空白OD值）X校準品濃度(2.26mmo I/L)。
[0044] (3)高密度蛋白膽固醇(HDL-C)的測定
[0045]試劑組成及配制(96T)
[0049] 混勻后，37 °C孵育5分鐘，546nm，酶標儀測定各孔吸光度A2。
[0050] 計算公式:血清中等液體樣本計算公式:酶標儀比色:HDL-C(mmol/L) = {(樣本A2 值一樣本Al值)一(空白A2值一空白Al值）} + {(標準A2值一標準Al值)一(空白A2值一空白 Al值)}X校準品濃度(1.8mm〇l/L)。
[0051 ] (4)低密度蛋白膽固醇(LDL-C)的測定
[0052] 試劑組成及配制（96T)
[0057] 混勻后，37 °C孵育5分鐘，546nm，酶標儀測定各孔吸光度A2。
[0058] 計算公式:血清中等液體樣本計算公式:酶標儀比色:HDL-C(mmol/L) = {(樣本A2 值一樣本A1值)一(空白A2值一空白A1值）} + ({(標準A2值一標準Al值)一(空白A2值一空白 Al值)}X校準品濃度(4.3mmol/L)。
[0059] (5)組織中膽固醇的測定 [0060] 試劑組成及配制（96T)
[0062] 操作表：
[0064] 混勻后，37 °C孵育10分鐘，510nm，酶標儀測定各孔吸光度。
[0065] 計算公式:組織中樣本計算公式:酶標儀比色:膽固醇量(mmo I /L )=(樣本OD值一 空白OD值）+ (標準OD值一空白OD值）X校準品濃度(5.17mmo I /L) +待測蛋白濃度 [0066] (6)組織中甘油三脂的測定
[0067]試劑組成及配制（96T)
[0072] 混勻后，37 °C孵育10分鐘，51 Onm，酶標儀測定各孔吸光度。
[0073] 計算公式:血清中等液體樣本計算公式:酶標儀比色:膽固醇量(mmo I /L)=(樣本 OD值一空白OD值）+ (標準OD值一空白OD值）X校準品濃度(2.26mmo I/L) +待測蛋白濃度
[0074] 3 結果
[0075] 表1槐花珍對高血脂癥模型大鼠血清TC、TG、HDLC及LDLC水平的影響（X土 s,.mmol/ ml,η = 12)
[0077] *表示與模型組相比ρ〈0.05 表示與模型組相比ρ〈0.01
[0078] 從上表可看出，與空白組相比，模型組血清中TC、TG和LDLC水平均顯著升高（P〈 0.01 )，血清HDLC水平顯著降低(P〈0.01 )，說明造高血脂癥模型成功；與模型組相比，大、小 劑量槐花珍組和辛伐他汀組均可以顯著降低血清TC、TG和LDLC水平（P〈0.01)，顯著升高 HDLC水平(P〈0.01)。以大劑量槐花珍組降血脂作用為強。
[0079] 表2槐花珍對高血脂癥模型大鼠肝漿TC、TG水平的影響(?士s)
[0081 ] *表示與模型組相比口〈0.05;**表示與模型組相比口〈0.01
[0082]從上表可看出，與空白組相比，模型組肝勻漿TC和TG含量均顯著升高(Ρ〈0.01)，說 明肝臟已有脂肪蓄積;與模型組相比，大、小劑量槐花珍組和辛伐他汀組均可以顯著降低肝 勻漿TC中TG水平(Ρ〈0.01)。以大劑量槐花珍組降肝勻漿中TC中TG水平作用為強。
[0083]表3槐花珍對高血脂癥模型大鼠肝臟指數的影響(x±s)
[0085] *表示與模型組相比p〈0.05 表示與模型組相比p〈0.01
[0086] 從上表可看出，與空白組相比，模型組大鼠肝臟指數顯著升高(P〈0.01);與模型組 相比，大劑量槐花珍組和辛伐他汀組均可以顯著降低高脂血脂大鼠肝臟指數(P〈〇.01)，小 劑量槐花珍組可明顯降低肝臟指數(P〈〇.05)。以大劑量槐花珍組降肝指數作用為強。
[0087] 表4槐花珍對高血脂癥模型大鼠體重的影響(8，太土&)
[0089] *表示與模型組相比p〈0.05;林表示與模型組相比p〈0.01
[0090]從上表可看出，與空白組相比，在第7、14、21天模型組大鼠的體重增長顯著很低(P 〈0.01);與模型組相比，大、小劑量槐花珍組和辛伐他汀組均可以顯著增大高脂血脂大鼠的 體重(p〈〇.〇l)。
[0091 ]表5槐花珍對高血脂癥模型大鼠肝臟的影響(單位:個）
L0093J 止常Γ+"輕度脂肪變性Γ++"中度脂肪變性Γ+++"里度脂肪變性。
[0094] 由表1可以看出，經Ridit檢驗，與空白組相比，模型組大鼠肝臟出現顯著的脂肪變 性的病理變化(P〈〇.01)，說明造高脂血癥模型成功。與模型組相比，大劑量槐花珍組均可顯 著減輕大鼠肝臟的病理變化(P〈〇.01)，小劑量槐花珍組均可明顯減輕大鼠肝臟的病理變化 (Ρ〈0·05)。
[0095] 各組肝臟組織形態觀察：空白組大鼠肝臟基本無異常情況，肝小葉結構正常，細胞 內未見脂滴;模型組大鼠肝小葉結構被破壞，肝細胞脂肪變性嚴重，充滿大、小脂滴，肝細胞 極度腫脹，成圓形，體積較正常明顯增加，胞質內充滿大量脂肪空泡，酷似泡沫細胞，界限不 清；辛伐他汀組大鼠肝小葉結構正常，較少肝細胞內可見細小脂滴，肝臟脂肪變性不明顯； 大劑量槐花珍組大鼠肝小葉結構基本正常，大脂滴較少，小脂滴散在分布，肝臟脂肪變性顯 著減輕；中劑量槐花珍組大鼠肝小葉結構基本正常，大脂滴較少，小脂滴散在分布，肝臟脂 肪變性明顯減輕；小劑量槐花珍組大鼠脂變肝細胞極度腫脹，成圓形，體積較正常明顯增 加，胞質內充滿大量脂肪空泡，酷似泡沫細胞，界限不清。
[0096] 臨床資料
[0097] 按照"中華心血管病雜志"編委會血脂異常防治對策專題組"血脂異常防治建議" 高脂血癥診斷標準執行· TC彡5 · 20mmol/L，TG彡 1 · 7mmol/L，LDL-C彡3 · 80mmol/L，HDL-C彡 0.88mmol/L，其中任何一項指標異常為輕型；有2-3項指標異常，且經常出現頭暈、目眩、無 力等癥狀為中型。參照"中藥新藥臨床研究指導原則"中藥療效評定標準制定本觀測的標 準：顯效：臨床癥狀消失，體征基本恢復正餐，TC水平下降>20%，TGMO%，HDL-C水平上升〉 0.26mmol/L;有效：臨床癥狀和體征基本消失，TC水平下降彡10 % -20 %，TG水平下降彡 1 % -40 %，HDL-C水平上升>0 · I Ommo I/L-0 · 26mmo I/L。
[0098] 本觀測總計輕、中型高脂血癥68例，其中男42例，女26例，年齡42-66歲。病程6個 月一 2年。槐花珍:每次1-2袋，開水沖服，每天3次。每袋IOg.-個月為一個療程。療程結束： 68例輕、中型高高脂血癥患者，10例有效、53例顯效，5例無效。總有效率92.6%。
[0099] 結論
[0100] 經上述實驗充分證明，大、小劑量槐花珍組和辛伐他汀組均可以顯著降低血清TC、 TG和LDLC水平，顯著升高HDLC水平。大、小劑量槐花珍組均可以顯著降低肝勻漿TC中TG水 平，大劑量槐花珍組均可以顯著降低高脂血脂大鼠肝臟指數，小劑量槐花珍組可明顯降低 肝臟指數，大、小劑量槐花珍組均可以顯著增大高脂血脂大鼠的體重，大劑量槐花珍組均可 顯著減輕大鼠肝臟的病理變化，小劑量槐花珍組均可明顯減輕大鼠肝臟的病理變化，以大 劑量槐花珍組降血脂作用為強，可有效用于制備治療高脂血癥的藥物，實現槐花珍在制備 治療高血脂癥藥物中的應用，具有實際的應用價值，經濟和社會效益顯著。
【主權項】
1.一種槐花珍在制備治療高血脂癥藥物中的應用，該槐花珍是，取鮮槐花，洗凈，60°c 真空干燥，然后與土炒懷山藥、粉葛、玫瑰花、陳皮和甘草混合均勻，粉碎成過100目篩的細 粉，即為槐花珍，包裝，滅菌，鮮槐花與土炒懷山藥、粉葛、玫瑰花、陳皮和甘草的重量比為3: 2：1：0.5：0.3：0.2〇
【文檔編號】A61P3/06GK105943788SQ201610428625
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2016年6月16日
【發明人】苗明三, 白明, 王燦, 付珍娜
【申請人】河南中醫學院