駱駝刺提取物作為制備治療腸易激綜合征藥物的應用

駱駝刺提取物作為制備治療腸易激綜合征藥物的應用【專利摘要】本發明涉及中藥及其用途
技術領域：
，是一種駱駝刺提取物作為制備治療腸易激綜合征藥物的應用。本發明首次公開了駱駝刺提取物對IBS?D具有良好的治療效果，具體的，駱駝刺提取物具有升高腹部回縮反射的容量閾值、降低空腸平滑肌運動波振幅、降低糞便含水量、升高血清K+含量、降低紅細胞壓積等作用，在抑制內臟超敏性方面或改善由應激或腸易激引起的排便異常方面具有良好的效果，多個病理環節多措并舉，將對IBS?C、IBS?D以及IBS?A均具有良好的治療效果，并且，采用純中藥制方，副作用小。【專利說明】駱駝刺提取物作為制備治療腸易激綜合征藥物的應用
技術領域：
[0001]本發明涉及中藥及其用途
技術領域：
，是一種駱駝刺提取物作為制備治療腸易激綜合征藥物的應用。【
背景技術：
】[0002]隨著社會競爭、生存壓力的增大，因應激導致的胃腸功能紊亂性疾病----腸易激綜合征（irritablebowelsyndrome，IBS)的患病率達到8%至16%。IBS是一種以慢性或者反復發作的腹痛伴排便習慣改變為特征的功能性腸病，并缺乏形態學和生化標志的異常。根據患者排便情況可分為便秘型腸易激綜合征（constipation-predominantofirritablebowelsyndrome,IBS-C)、腹瀉型腸易激綜合征（diarrhea-predominantofirritablebowelsyndrome，IBS-D)和腹瀉便秘交替型腸易激綜合征（alternating-predominantofirritablebowelsyndrome,IBS-A)。在我國，臨床上以IBS-D最為多見。[0003]IBS的共同特征是胃腸運動功能改變和內臟器官的敏感性異常。腹脹、便秘和腹瀉是IBS最常見的臨床癥狀，胃腸道動力是研究重點。有報道提示IBS患者食管括約肌的張力低于正常，伴有收縮異常，有學者認為IBS患者存在胃排空延遲的現象，也有一些學者認為只有伴有消化不良的IBS患者才有胃排空延遲的現象，還有一些學者認為IBS患者存在小腸運動異常，如:大多數研究認為腹瀉型IBS患者存在小腸運動加快，便秘型IBS患者小腸運動減慢，另外有研究顯示腹瀉型IBS患者在消化間期復合移行復合運動有縮短現象存在，有研究發現精神因素，特別是一些負面的因素如焦慮、抑郁、暴躁等都可以引起迷走神經興奮性增高，導致IBS患者腸道運動增強，引起一些胃腸道的腺體分泌增加，導致IBS患者腹痛、腹瀉、便秘等癥狀的加劇。多年來，普遍形成共識的是認為腸道動力異常是IBS癥狀產生的主要病理生理基礎，IBS患者的腸道動力異常主要具有兩個特征:第一，廣泛性，即可涉及到全胃腸道(包括膽管系統）；第二，高反應性，即對各種生理和非生理刺激的動力反應過強，呈反復發作過程。[0004]IBS是一種全球性疾病，人群患病率較高，其癥狀可反復發作，嚴重影響患者的生活質量，并占用了大量的醫療資源。隨著現代醫學的發展目前臨床上治療IBS的藥物日漸增多，但仍然沒有一種藥物對IBS治療完全有效。目前臨床上西醫對改善IBS的治療藥物包括：調節胃腸動力和感覺藥物、止瀉藥、消除胃漲劑、微生態制劑、抗抑郁及鎮痛治療藥等。因西藥多只能阻斷一二個病理環節，且其不良反應多，藥物的費用高，病人往往難以接受長期服用藥物治療，故其療效不盡理想，癥狀反復，嚴重影響了患者的生存質量。故在其治療上，西醫目前尚缺乏任何單一的理想的藥物被證實能有效治療IBS。越來越多的研究表明，中醫藥在調節治療此類功能失調性疾病作用上占有很大的優勢。因此，從傳統中醫藥寶庫中探索和尋找治療IBS的藥材或提取物成了目前研究的熱點。[0005]胳盤刺(學名:AlhagisparsifoliaShap.)屬豆科、落葉草本。從沙漠和戈壁深處吸取地下水份和營養，是一種自然生長的耐旱植物，因為這種植物莖上長著刺狀的很堅硬的小綠葉，故叫駱駝刺，是草本植物，是戈壁灘和沙漠中駱駝唯一能吃的賴以生存的草，故又名駱駝草。駱駝刺主要分布在沙漠和戈壁深處吸取地下水分和營養，是一種自然生長的耐旱植物。主要產于寧夏、新疆、甘肅，生長于海拔150米至1500米的沙荒地、鹽漬化低濕地和覆沙戈壁上。駱駝刺能分泌糖類物質，干燥后收集的刺糖是少數民族用于治療腹痛腹脹、痢疾腹瀉、滋補強壯、平衡體液和異常膽液質的民間用藥。[0006]駱駝刺目前主要用于防風固沙及作為飼料使用，雖然也作為維藥的常用藥，但由于對駱駝刺的化學成分及藥理作用機制不詳等原因，導致只知道不同的部位可以治療不同的疾病，但具體是什么成分有效，具體的藥理作用、其所帶來的副作用還處于不明了狀態，導致不能合理的利用駱駝刺中的多種有效化學成分，這樣極大程度的導致對駱駝刺藥用資源的浪費。故非常需要對駱駝刺進行系統的藥效物質基礎分析，闡明其中的有效化學成分及其物質基礎，從而合理利用駱駝刺中各種有效成分制成所需藥物，真正實現合理利用地產藥用資源。[0007]因此本著就地取材、因地制宜的原則，篩選具有抗IBS作用的民族新藥候選藥物就成了刻不容緩的治療手段。該候選藥物的篩選一旦成功，并進行研制生產，能夠充分發揮中醫藥在調節治療功能失調性疾病作用上的優勢，后期該產品的上市，必將滿足患者的需求，市場前景也將非常廣闊。【
發明內容】[0008]本發明提供了一種駱駝刺提取物作為制備治療腸易激綜合征藥物的應用，克服了上述現有技術之不足，其能有效解決由于西醫只能阻斷一二個病理環節使得目前尚缺乏任何單一的理想的藥物能有效治療IBS的問題。[0009]本發明的技術方案是通過以下措施來實現的：一種駱駝刺提取物作為制備治療腸易激綜合征藥物的應用。[0010]下面是對上述發明技術方案的進一步優化或/和改進：[0011]上述駱駝刺提取物作為制備治療腸易激綜合征藥物的應用，其特征在于駱駝刺提取物按下述制備方法得到：第一步，取干燥的駱駝刺地上部分，粉碎后得到駱駝刺粉，用60%至80%的乙醇回流提取2次至3次，每次乙醇回流提取的時間為1小時至3小時，每次乙醇回流提取時乙醇的用量為駱駝刺粉與乙醇的體積比為1:8至1:12,合并每次乙醇回流提取的提取液得到乙醇混提液；第二步，將乙醇混體液濃縮至溶液中含生藥量為〇.5g/ml至1.5g/ml的濃縮液;第三步，用石油醚萃取濃縮液2次至5次，每次石油醚萃取時所取用石油醚的體積為待萃液體積的1倍至3倍，最后一次石油醚萃取完成后，靜置到出現明顯分層，棄去石油醚層留下水層;第四步，對第三步中得到的水層用乙酸乙酯萃取2次至5次，每次乙酸乙酯萃取時所取用乙酸乙酯的體積為待萃液體積的1倍至3倍，最后一次乙酸乙酯萃取完成后，靜置到出現明顯分層，棄去乙酸乙酯層留下水層;第五步，對第四步中得到的水層用正丁醇萃取2次至5次，每次正丁醇萃取時所取用正丁醇的體積為待萃液體積的1倍至3倍，將每次正丁醇萃取完成后得到的正丁醇層混合后得到正丁醇混萃液;第六步，對正丁醇混萃液進行干燥至物料中的含水量不大于10%即得到駱駝刺提取物。[0012]上述駱駝刺提取物作為制備治療腸易激綜合征藥物的應用，其特征在于第三步中靜置時間為2小時至6小時，第四步中靜置時間為2小時至6小時。[0013]上述駱駝刺提取物作為制備治療腸易激綜合征藥物的應用，其特征在于第六步的干燥溫度為50°C至70°C。[0014]本發明首次公開了駱駝刺提取物對IBS-D具有良好的治療效果，具體的，駱駝刺提取物具有升高腹部回縮反射的容量閾值、降低空腸平滑肌運動波振幅、降低糞便含水量、升高血清K+含量、降低紅細胞壓積等作用，在抑制內臟超敏性方面或改善由應激或腸易激引起的排便異常方面具有良好的效果，多個病理環節多措并舉，將對IBS-C、IBS-D以及IBS-A均具有良好的治療效果，并且，采用純中藥制方，副作用小。【附圖說明】[0015]圖1為駱駝刺提取物對IBS-D大鼠模型腹部回縮反射的容量閾值條狀圖。[0016]圖2為正常組大鼠模型的平滑肌運動波振幅圖。[0017]圖3為模型組IBS-D大鼠模型的平滑肌運動波振幅圖。[0018]圖4為陽性對照組IBS-D大鼠模型的平滑肌運動波振幅圖。[0019]圖5為高劑量組IBS-D大鼠模型的平滑肌運動波振幅圖。[0020]圖6為低劑量組IBS-D大鼠模型的平滑肌運動波振幅圖。[0021]圖7為駱駝刺提取物對IBS-D大鼠糞便含水率的影響條狀圖。[0022]圖8為駱駝刺提取物對IBS-D大鼠模型血清K+的影響條狀圖。[0023]圖9為駱駝刺提取物對IBS-D大鼠紅細胞壓積的影響條狀圖。[0024]圖10為駱駝刺提取物對IBS-D大鼠模型胸腺系數的影響條狀圖。【具體實施方式】[0025]本發明不受下述實施例的限制，可根據本發明的技術方案與實際情況來確定具體的實施方式。本發明中所提到各種化學試劑和化學用品如無特殊說明，均為現技術中公知公用的化學試劑和化學用品;本發明中的百分數如沒有特殊說明，均為質量百分數;本發明中的溶液若沒有特殊說明，均為溶劑為水的水溶液，例如，鹽酸溶液即為鹽酸水溶液。[0026]下面結合實施例及附圖對本發明作進一步描述：[0027]實施例1，該駱駝刺提取物作為制備治療腸易激綜合征藥物的應用。駱駝刺提取物可以為根據現有技術得到的駱駝刺提取物。[0028]實施例2,作為實施例1的優化，駱駝刺提取物可以按下述制備方法得到：第一步，取干燥的駱駝刺地上部分，粉碎后得到駱駝刺粉，用60%至80%的乙醇回流提取2次至3次，每次乙醇回流提取的時間為1小時至3小時，每次乙醇回流提取時乙醇的用量為駱駝刺粉與乙醇的體積比為1:8至1:12,合并每次乙醇回流提取的提取液得到乙醇混提液;第二步，將乙醇混體液濃縮至溶液中含生藥量為0.5g/ml至1.5g/ml的濃縮液;第三步，用石油醚萃取濃縮液2次至5次，每次石油醚萃取時所取用石油醚的體積為待萃液體積的1倍至3倍，最后一次石油醚萃取完成后，靜置到出現明顯分層，棄去石油醚層留下水層;第四步，對第三步中得到的水層用乙酸乙酯萃取2次至5次，每次乙酸乙酯萃取時所取用乙酸乙酯的體積為待萃液體積的1倍至3倍，最后一次乙酸乙酯萃取完成后，靜置到出現明顯分層，棄去乙酸乙酯層留下水層;第五步，對第四步中得到的水層用正丁醇萃取2次至5次，每次正丁醇萃取時所取用正丁醇的體積為待萃液體積的1倍至3倍，將每次正丁醇萃取完成后得到的正丁醇層混合后得到正丁醇混萃液;第六步，對正丁醇混萃液進行干燥至物料中的含水量不大于10%即得到駱駝刺提取物。第三步中，第一次進行石油醚萃取時的待萃液為濃縮液，后面幾次進行石油醚萃取時的待萃液為上次石油醚萃取后得到的水層;第四步中，第一次進行乙酸乙酯萃取時的待萃液為第三步最后得到的水層，后面幾次進行乙酸乙酯萃取時的待萃液為上次乙酸乙酯萃取后得到的水層;第五步中，第一次進行正丁醇萃取時的待萃液為第四步最后得到的水層，后面幾次進行正丁醇萃取時的待萃液為上次正丁醇萃取后得到的水層；先采用石油醚進行萃取，能夠除掉濃縮液中大部分的油性雜質，使后面幾步的萃取更加方便快捷。[0029]實施例3，作為實施例2的優化，第三步中靜置時間為2小時至6小時，第四步中靜置時間為2小時至6小時。靜置2小時至6小時能夠達到較好的分層效果。[0030]實施例4,作為實施例2和實施例3的優化，第六步的干燥溫度為50°C至70°C。[0031]實施例5,該駱駝刺提取物可以按下述制備方法得到第一步，取2.4kg干燥的駱駝刺地上部分，粉碎后得到駱駝刺粉，用70%的乙醇回流提取3次，每次乙醇回流提取的時間為2小時，每次乙醇回流提取時乙醇的用量為駱駝刺粉與乙醇的體積比為1:10,合并每次乙醇回流提取的提取液得到乙醇混提液；第二步，將乙醇混體液濃縮至溶液中含生藥量為I.〇g/ml的濃縮液;第三步，用石油醚萃取濃縮液3次，每次石油醚萃取時所取用石油醚的體積為待萃液體積的1倍，最后一次石油醚萃取完成后，靜置到出現明顯分層，棄去石油醚層留下水層;第四步，對第三步中得到的水層用乙酸乙酯萃取3次，每次乙酸乙酯萃取時所取用乙酸乙酯的體積為待萃液體積的1倍，最后一次乙酸乙酯萃取完成后，靜置到出現明顯分層，棄去乙酸乙酯層留下水層;第五步，對第四步中得到的水層用正丁醇萃取3次，每次正丁醇萃取時所取用正丁醇的體積為待萃液體積的1倍，將每次正丁醇萃取完成后得到的正丁醇層混合后得到正丁醇混萃液;第六步，對正丁醇混萃液在50°C條件下進行干燥至物料中的含水量不大于10%即得到駱駝刺提取物。[0032]駱駝刺提取物對腸易激綜合征的影響評價實驗。[0033]1、造模[0034]采取傳統束縛應激刺激聯合高乳糖飼料喂養方式建立腹瀉型腸易激綜合征（IBS-D)大鼠模型。[0035]1.1、高乳糖飼料配方：[0036]參考文獻將普通飼料配方中淀粉改為乳糖。配方如表1所示：[0037]1.2、模型制備[0038]1.2.1、動物和分組：取6周齡（140±20g)SD大鼠50只，雄性，適應性飼養5d后隨機分為5組:正常組、模型組、陽性對照組、高劑量組和低劑量組，每組10只。[0039]造模當日即給予每只SD大鼠高乳糖飼料喂養，每日上午用醫用橡皮膏束縛模型組、陽性對照組、高劑量組、低劑量組的各大鼠雙后肢，并懸掛lh，使之無法行動，煩躁不安，造成一定的應激刺激，持續7天。[0040]每日觀察每只SD大鼠如下狀態:激惹行為、好斗傾向、排便次數、糞便形態、毛色和精神狀況。[0041]2、給藥[0042]2.1、受試品:駱駝刺提取物；[0043]2.2、給藥劑量及給藥周期:造模首日開始給藥，高劑量組和低劑量組的大鼠分別以400mg/kg、20〇11^/1^胳§它刺提取物灌胃給藥14天，陽性對照組大鼠以60mg/kg的馬來酸曲美布汀灌胃給藥14天。[0044]2.3、日常觀察:每日觀察動物激惹行為、好斗傾向、排便次數、糞便形態、毛色和精神狀況。[0045]3、試驗[0046]3.1、腹部回縮反射的容量閾值[0047]連續給藥14天后禁食24h，禁水12h，各SD大鼠分別于清醒狀態下放入自制的固定器，將6F導尿管經肛門緩慢插入，氣囊末端距肛門約2cm并固定。30min后經外口氣囊內先后注入37°C生理鹽水(0.8ml，0.9ml，Iml，I.Iml和1.2ml)擴張，以腹部回縮反射作為標準，記錄容量閾值。為得到準確的評估結果，對每一閾值都重復進行3次擴張，數據取均值。[0048]3.2、在體平滑肌運動的影響[0049]連續給藥7天后各SD大鼠禁食12h，灌胃新鮮牛乳(20ml/kg)l小時后，麻醉、固定后于劍突下2cm處做正中切口，剪開后分離出回腸，將針式電極正、負極按要求連接，多道生理信號采集處理系統記錄餐后Ih空腸平滑肌運動波，分析計算運動波振幅和頻率。[0050]3.3、糞便含水量檢測[0051]分別于給藥7d和Hd時收集每只SD大鼠24h內糞便，稱量糞便的干、濕重，計算糞便含水量。[0052]3.4、血清電解質和血紅細胞壓積[0053]實驗結束后，行腹主動脈取血，其中0.5ml加入EDTA-2K抗凝，用于紅細胞壓積(HCT)測定，其余3000rpm離心10min，分離血清，用于血電解質鉀離子(K+)、鈉離子(Na+)、氯離子(Cl-)濃度測定。[0054]3.5、臟器系數[0055]上述實驗結束后，處死大鼠后摘取脾臟和胸腺，濾紙去濕，電子天平稱重，以"臟器系數=器官質量/體質量"計算胸腺和脾臟指數。[0056]4、試驗結果[0057]4.1、腹部回縮反射的容量閾值[0058]試驗結果如表2和圖1所示，與模型組比較，高劑量組和低劑量組均可顯著升高腹部回縮反射的容量閾值。[0059]4.2、駱駝刺提取物對IBS-D大鼠模型在體平滑肌運動的影響[0060]試驗結果如圖2、圖3、圖4、圖5和圖6所示，經多道生理信號采集處理系統記錄餐后Ih空腸平滑肌運動，與模型組比較，高劑量組和低劑量組均可顯著降低IBS-D大鼠空腸平滑肌運動波振幅。[0061]4.3、駱駝刺提取物對IBS-D大鼠糞便含水量的影響[0062]收集每只動物24h內排便，稱量糞便干、濕重，計算糞便含水率，進行組間對照。如表3和圖7所示，與模型組比較，胳駝刺提取物高低劑量組均能顯著降低IBS-D大鼠的糞便含水量。[0063]4.4、駱駝刺提取物對IBS-D大鼠血清電解質的影響[0064]結果見表4和圖8,與模型組比較，駱駝刺提取物可顯著升高IBS-D大鼠血清K+的含量(？〈0.01)，但各組間血清他+、(：1-、0&2+含量無統計學差異(？>0.05)。[0065]4.5、駱駝刺提取物對IBS-D大鼠紅細胞壓積(HCT)的影響[0066]結果見表5和圖9,與正常組比較，SD模型大鼠的紅細胞壓積顯著升高；與模型組比較，駱駝刺提取物可顯著降低IBS-D大鼠紅細胞壓積(p〈0.05)。[0067]4.6、駱駝刺提取物對IBS-D大鼠模型臟器系數的影響[0068]試驗結果如表6和圖10所示，與模型組比較，正丁醇高低劑量組均可顯著提高IBS-D大鼠的胸腺系數，但脾臟系數未見明顯差異。[0069]結論[0070]由上述實驗可知，駱駝刺提取物具有顯著升高IBS-D大鼠腹部回縮反射的容量閾值、降低空腸平滑肌運動波振幅、降低糞便含水量、升高血清K+含量、降低紅細胞壓積等作用，且各劑量組與陽性對照組相比效果相當，說明根據本發明實施例得到的駱駝刺提取物在抑制內臟超敏性方面或改善由應激或腸易激引起的排便異常方面具有良好的效果，確定駱駝刺提取物具有抗IBS-D的作用。[0071]IBS根據排便情況可分為便秘型腸易激綜合征（constipation-predominantofirritablebowelsyndrome,IBS-C)、腹瀉型腸易激綜合征（diarrhea-predominantofirritablebowelsyndrome，IBS-D)和腹瀉便秘交替型腸易激綜合征（alternating-predominantofirritablebowelsyndrome,IBS-A)。臨床上以IBS-D最為多見。IBS的共同特征是胃腸運動功能改變和內臟器官的敏感性異常。腹脹、便秘和腹瀉是IBS最常見的臨床癥狀，胃腸道動力是研究重點。有報道提示IBS患者食管括約肌的張力低于正常，伴有收縮異常，存在胃排空延遲、小腸運動異常的現象，而精神因素，特別是一些負面的因素如焦慮、抑郁、暴躁等都可以引起迷走神經興奮性增高，導致IBS患者腸道運動增強，引起一些胃腸道的腺體分泌增加，導致IBS患者腹痛、腹瀉、便秘等癥狀的加劇。多年來，普遍形成共識的是認為腸道動力異常是IBS癥狀產生的主要病理生理基礎，IBS患者的腸道動力異常主要具有兩個特征:第一，廣泛性，即可涉及到全胃腸道;第二，高反應性，即對各種生理和非生理刺激的動力反應過強，呈反復發作過程。本研究發現駱駝刺提取物具有升高腹部回縮反射的容量閾值、降低空腸平滑肌運動波振幅、降低糞便含水量、升高血清K+含量、降低紅細胞壓積等作用，在抑制內臟超敏性方面或改善由應激或腸易激引起的排便異常方面具有良好的效果，將對IBS-C、IBS-D以及IBS-A均具有良好的治療效果，并且，采用純中藥制方，副作用小。[0072]以上技術特征構成了本發明的實施例，其具有較強的適應性和實施效果，可根據實際需要增減非必要的技術特征，來滿足不同情況的需求。[0073]表1[0086]注:與空白組比較:#?〈0.05，##口〈0.01;與模型組比較:噸〈0.05，*邙〈0.01[0087]表6[0089]注:與空白組比較:#?〈0.05，##口〈0.01;與模型組比較:噸〈0.05，*邙〈0.01。【主權項】1.一種駱駝刺提取物作為制備治療腸易激綜合征藥物的應用。2.根據權利要求1所述的駱駝刺提取物作為制備治療腸易激綜合征藥物的應用，其特征在于駱駝刺提取物按下述制備方法得到:第一步，取干燥的駱駝刺地上部分，粉碎后得到駱駝刺粉，用60%至80%的乙醇對駱駝刺粉回流提取2次至3次，每次乙醇回流提取的時間為1小時至3小時，每次乙醇回流提取時乙醇的用量為駱駝刺粉與乙醇的體積比為1:8至1:12，合并每次乙醇回流提取的提取液得到乙醇混提液;第二步，將乙醇混體液濃縮至溶液中含生藥量為〇.5g/ml至1.5g/ml的濃縮液;第三步，用石油醚萃取濃縮液2次至5次，每次石油醚萃取時所取用石油醚的體積為待萃液體積的1倍至3倍，最后一次石油醚萃取完成后，靜置到出現明顯分層，棄去石油醚層留下水層;第四步，對第三步中得到的水層用乙酸乙酯萃取2次至5次，每次乙酸乙酯萃取時所取用乙酸乙酯的體積為待萃液體積的1倍至3倍，最后一次乙酸乙酯萃取完成后，靜置到出現明顯分層，棄去乙酸乙酯層留下水層;第五步，對第四步中得到的水層用正丁醇萃取2次至5次，每次正丁醇萃取時所取用正丁醇的體積為待萃液體積的1倍至3倍，將每次正丁醇萃取完成后得到的正丁醇層混合后得到正丁醇混萃液;第六步，對正丁醇混萃液進行干燥至物料中的含水量不大于10%即得到駱駝刺提取物。3.根據權利要求2所述的駱駝刺提取物作為制備治療腸易激綜合征藥物的應用，其特征在于第三步中靜置時間為2小時至6小時，第四步中靜置時間為2小時至6小時。4.根據權利要求2或3所述的駱駝刺提取物作為制備治療腸易激綜合征藥物的應用，其特征在于第六步的干燥溫度為50°C至70°C。【文檔編號】A61P1/00GK105943592SQ201610411321【公開日】2016年9月21日【申請日】2016年6月13日【發明人】魏鴻雁,馬曉玲,夏提古麗·阿不利孜,徐曉琴【申請人】新疆維吾爾自治區中藥民族藥研究所