pH響應的半乳糖化殼聚糖-聚乙二醇聚合物鍵合阿霉素前體藥物及其制備和用圖
【專利摘要】本發明涉及一種具有鄰基效應的pH響應半乳糖化殼聚糖?聚乙二醇聚合物鍵合阿霉素前體藥物及其制備方法和在醫藥上的用途。其特征為：(1)單甲醚聚乙二醇首先經過羧基化，然后與半乳糖化殼聚糖中氨基形成酰胺鍵，制備得到殼聚糖?聚乙二醇藥物載體；(2)組氨酸中的氨基與戊二醛發生反應得到具有醛基的組氨酸；(3)對阿霉素上的氨基進行保護，再進行組氨酸羧基與阿霉素中羥基的酯化反應，然后進行脫保護；(4)含有醛基的組氨酸阿霉素酯與殼聚糖?聚乙二醇進行席夫堿反應，并用氰基硼氫化鈉還原；(5)通過透析法制備載藥膠束；(6)所制備的載藥膠束具有良好的pH響應性及肝靶向性，可進一步研制開發為治療肝癌的新型靶向制劑。
【專利說明】
pH響應的半乳糖化殼聚糖-聚乙二醇聚合物鍵合阿霉素前體 藥物及其制備和用途
技術領域
[0001] 本發明涉及一種聚合物鍵合阿霉素的前體藥物，具體涉及具有pH響應性的殼聚 糖-聚乙二醇嫁接物與抗腫瘤藥物阿霉素的化學鍵合前體藥物，以及其制備方法和在醫學 上的用途，屬于高分子材料和生物醫學工程領域。
【背景技術】
[0002] 惡性腫瘤是一種嚴重威脅人類生命的重大疾病，肝癌是常見的消化系統腫瘤之 一。阿霉素是臨床常用的蒽環類抗腫瘤藥物，能嵌入DNA中，阻止RNA轉錄過程，抑制RNA的合 成，也能阻止DNA的復制。阿霉素藥抗瘤譜廣，療效高，主要用于惡性淋巴肉瘤、乳腺癌、卵巢 癌、小細胞肺癌、胃癌、肝癌及膀胱癌等。然而小分子藥物易于被身體所吸收，體內分布廣 泛，缺乏特異性；因此現有的鹽酸阿霉素注射液，在殺傷腫瘤細胞的同時，也產生明顯的全 身不良反應，如心肌退行性病變、心肌間質水腫、骨髓抑制等，臨床應用受到限制。
[0003] 殼聚糖是一類由氨基葡萄糖組成的陽離子聚合物，能夠通過堿或酶使甲殼素脫乙 酞基而得到。這種天然的多糖是一種具有生物相容性、生物可降解性、低毒的聚陽離子天然 高分子材料。聚乙二醇具有良好的血液相容性，其水合的懸掛長鏈影響血液與材料界面微 觀動力學環境，使血漿蛋白與材料間的相互作用降低，可以提高生物利用度和降低毒副作 用。殼聚糖經聚乙二醇修飾后，所得的殼聚糖-聚乙二醇在水性介質中可以通過自組裝形成 膠束。
[0004] 高分子載體藥物包括：（1)高分子作為載體對藥物進行物理包裹；（2)小分子藥物 與高分子載體的連接，后者可以先把小分子藥物連接到單體之上然后聚合，也可以直接往 高分子載體上連接。由兩親嵌段共聚物分子在水性介質中自聚集形成的聚合物膠團 (polymermicelles，PM)，是傳遞藥物的新型納米給藥載體。因其具有一些特有的藥物載體 性質，如粒徑小，在體內和體外具有良好的穩定性和生物相容性，藥物的控制釋放以及生物 膜通透性等特性，被認為是一種具有廣闊前景的新型靶向給藥系統。聚合物膠團通過"增強 滲透與保留作用"，被動靶向腫瘤部位。在肝癌的治療中，可以通過肝靶向的靶點實驗主動 靶向，其中主要的靶點為:無唾液酸糖蛋白受體，甘露糖受體介導，脂蛋白受體，甘草酸/甘 草次酸特異性結合受體。通過在嵌段物上連接半乳糖基，即可靶向與肝細胞的無唾液酸糖 蛋白受體。腫瘤細胞的旺盛生長，大量的酸性代謝物外排，使得腫瘤細胞外出現酸性的微環 境。利用對PH敏感的載體制備pH敏感制劑，使藥物在特定的pH靶區釋藥，也可以利用弱酸 性條件下能夠水解的化學鍵將藥物鍵合與載體上，實現定點釋藥。
[0005] 在已有以聚合物膠束作為藥物載體的方法中，大多是對藥物進行物理包載，一般 是運用藥物的疏水性使得藥物與載體疏水基團的相互作用進入核內，存在載藥量不確定或 載藥量較小等缺點;也有采用化學鍵合法將藥物直接接入疏水端，在CN101564539A中，利用 順烏頭酸酐將阿霉素與殼聚糖以酰胺鍵相連，此情況下，當載藥膠束進入體內后，酰胺鍵難 以水解而導致藥物不能快速釋放且釋放率較低，因此，載藥膠束的生物利用度降低。本發明 將阿霉素通過氨基酸酯鍵結合到載體上，一方面可以通過控制阿霉素的投料量來決定膠束 的載藥量，另一方面，通過引入咪唑基，由于鄰基效應催化酯基的水解，使載藥膠束具有更 好的pH響應性，在腫瘤組織的微酸性環境中，能夠盡快釋放藥物，發揮藥效。
【發明內容】
[0006]本發明的一個目的是提供殼聚糖-聚乙二醇聚合物鍵合阿霉素前體藥物，具有代 表性的結構通式為：
[0007:
[0008] 其中X與η的積表示阿霉素化學修飾比例;y為殼聚糖中為被聚乙二醇和阿霉素化 學結合的氨基葡萄糖單元和乙酰化氨基葡萄糖單元數;η為聚乙二醇的化學修飾比例;阿霉 素與載體之間連有具有鄰基效應的組氨酸，能使其在較弱的酸性條件下水解釋放阿霉素； 所述的殼聚糖聚乙二醇聚合物中殼聚糖的分子量在1~IOOkDa;聚乙二醇的分子量為：1000 ~5000;殼聚糖的脫乙酰度為:60%~95% ;氨基取代度為:5%~50%。
[0009] 本發明的第二個目的是提供殼聚糖-聚乙二醇嫁接物鍵合阿霉素前體藥物的合 成，通過以下方案實現：
[0010] (1)半乳糖化殼聚糖-聚乙二醇聚合物制備:稱取殼聚糖于1~2%的乙酸水溶液中 溶脹，加入乳糖，殼聚糖單體與乳糖的摩爾比為100:1~20:1，于40°C水浴條件下攪拌24h， 加入弱還原劑氰基硼氫化鈉并攪拌Ih，將反應液置于透析袋中，蒸餾水透析，冷凍干燥，得 到半乳糖化殼聚糖;稱取單甲醚聚乙二醇和3,3'_二硫代二丙酸酐，溶于干燥后的N，N-二甲 基甲酰胺，加入4-二甲氨基吡啶溶解，加入三乙胺，單甲醚聚乙二醇與3,3'_二硫代二丙酸 酐的摩爾比為1:1.2,與35°C條件下反應24h，加入乙醚沉淀，真空干燥得到羧基化的聚乙二 醇;稱取羧基化的聚乙二醇加入到二甲基亞砜中溶解，并加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基） 碳二亞胺鹽酸鹽攪拌活化lh，將其加入到半乳糖化殼聚糖溶液中，聚乙二醇和半乳糖化殼 聚糖單體的摩爾比為1:20-1:5，常溫下攪拌反應48h，將反應液置于透析袋中，蒸餾水透析， 冷凍干燥，得到半乳糖化殼聚糖-聚乙二醇聚合物。
[0011] (2)阿霉素中氨基的保護：精確稱取阿霉素于蒸餾水中，加入三乙胺攪拌8h，加入 等摩爾量的鄰苯二甲酸酐，在100°c的條件下回流反應2.5h，停止加熱降至室溫后，用乙酸 乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯相并旋干，經抽濾得到沉淀，于80°C下干燥8h。
[0012] (3)組氨酸的醛基化:組氨酸加入到KOH的乙醇溶液中，攪拌至完全溶解。組氨酸的 乙醇溶液逐滴加入到戊二醛的乙醇溶液中。該反應在50°C的條件下攪拌反應lh。減壓蒸餾 并干燥。
[0013] ⑷酯化反應:將步驟⑶中得到的醛基化組氨酸，N-羥基琥拍酰亞胺(NHS)，N，N-二環己基碳二亞胺(DCC)(摩爾比為5:6:10)溶于IOmlDMF中，室溫下攪拌反應24h，過濾除去 副產物后，用過量的乙醚沉淀過濾并真空干燥。將鄰苯二甲酰阿霉素溶于DMSOlOml中，并加 入等摩爾量的活化醛基化組氨酸，于40 °C下反應48h。加入IOml水，用乙酸乙酯萃取三次，合 并乙酸乙酯相旋轉蒸發并干燥的酯化產物。
[0014] (5)阿霉素中氨基的脫保護:在干燥的燒瓶中加入50mL甲醇、酯化產物、三乙胺、水 合肼，攪拌均勻，水浴加熱，保持溫度為(60±5)°C反應6h。加入少量鹽酸中和，冰水浴降溫 至10°C以下，抽濾至干。于70~80 °C烘干8~IOh。
[0015] (6)組氨酸阿霉素酯與載體的鍵合:稱取殼聚糖-聚乙二醇并溶于蒸餾水中，加入 步驟(6)所得產物，并加入適量乙酸調節pH至3-4,于40°C條件下反應24h，并加氰基硼氫化 鈉還原數小時，透析并冷凍干燥得到載藥聚合物。
[0016] (7)載藥膠束的制備:精確稱取載藥聚合物溶于DMF中，并超聲IOmin，用蒸餾水透 析48h，冷凍干燥的聚合物膠束。
[0017] 本發明的第三個目的是提供殼聚糖-聚乙二醇嫁接物鍵合阿霉素前體藥物在體外 的釋藥的pH響應性。結果表明，通過本發明的鍵合方法在體外具有較高的pH響應性，能在pH 為5.5的條件下快速釋放。同時提供了載藥膠束與純阿霉素對比的血藥濃度的變化和肝靶 向性的相關數據，結果表明，該載藥膠束能在血液中的保留時間長，且具有較強的肝靶向 性。
[0018] 本發明的有益之處是:一方面，藥物和載體之間通過一個具有鄰基效應的組氨酸 酯鍵進行連接，在組氨酸的結構中存在咪唑基，且在m立，使得藥物進入腫瘤微酸性的環境 之后能盡快釋藥，而在其他的部位基本不釋藥，使得藥物定點釋放；另一方面，殼聚糖進行 半乳糖化，得到具有肝靶向性的藥物載體。該前體藥物有望解決抗腫瘤化療藥物在體內的 靶向性和藥物的定點釋放，從而降低藥物的毒性。本發明已在模擬不同體內環境下進行pH 相應性分析，證明該前體藥物具有良好的pH響應性。
【附圖說明】
[0019] 圖1為殼聚糖-聚乙二醇嫁接物鍵合阿霉素前體藥物在不同pH釋放介質中的釋放 曲線。
[0020] 圖2為載藥膠束與阿霉素在不同時間的血藥濃度變化。
[0021] 圖3為載藥膠束與阿霉素在不同器官的濃度分布。
【具體實施方式】
[0022] 本范明通過實施例和附圖進一步的說明，本發明并不僅限于此。
[0023] 實施例1
[0024]半乳糖化殼聚糖-聚乙二醇聚合物制備：
[0025] (1)殼聚糖的半乳糖化:稱取市售的殼聚糖3.2g于2% (v/v)的60ml乙酸水溶液中， 常溫下攪拌Ih，使殼聚糖充分溶脹后，加入0.3g乳糖，于40°C水浴條件下攪拌24h，加入弱還 原劑氰基硼氫化鈉并攪拌lh，將反應液置于透析袋(MWC0 = 3500)中，蒸餾水透析，冷凍干 燥，得到半乳糖化殼聚糖。采用硫酸苯酚法測定半乳糖的接枝率，經測定，所得的半乳糖化 殼聚糖的半乳糖接枝率為0.315%。
[0026] (2)單甲醚聚乙二醇羧基化:稱取單甲醚聚乙二醇1.4g和3，3'_二硫代二丙酸酐 0.426g，溶于分子篩干燥后的N，N-二甲基甲酰胺，加入4-二甲氨基吡啶溶解，加入三乙胺， 于35°C條件下反應24h，加入大量的乙醚沉淀，真空干燥得到羧基化的聚乙二醇。
[0027] (3)殼聚糖-聚乙二醇接枝物的制備:稱取羧基化的聚乙二醇0.375g加入到二甲基 亞砜中溶解，并加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽攪拌活化lh，將其加入 到半乳糖化殼聚糖（l.Og)溶液中，常溫下攪拌反應48h，將反應液置于透析袋(MWC0 = 3500) 中，蒸餾水透析，冷凍干燥，得到半乳糖化殼聚糖-聚乙二醇聚合物。
[0028]載藥膠束的制備：
[0029] (1)阿霉素中氨基保護:精確稱取鹽酸阿霉素12mg于IOml的蒸餾水中，加入三乙胺 攪拌6h，加入鄰苯二甲酸酐3mg，在HKTC的條件下回流反應2.5h，停止加熱降至室溫后，用 乙酸乙酯萃取三次（10ml X3)，合并乙酸乙酯相并旋干，經抽濾得到沉淀，于60°C下干燥8h。
[0030] (2)組氨酸的醛基化:稱取組氨酸0.1648g加入到KOH的乙醇溶液(A溶液）中，攪拌 至完全溶解。量取戊二醛2ml (含戊二醛0.5g)溶于乙醇(B溶液）中，并加熱至50°C。將A溶液 緩慢逐滴加入到B溶液中，半個小時內加完，再繼續反應半個小時，減壓蒸餾并干燥。
[0031] (3)酯化反應:稱取醛基化組氨酸，N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)，N，N-二環己基碳二亞 胺(DCC)(摩爾比為5:6:10)溶于IOmlDMF中，室溫下攪拌反應24h，過濾除去副產物后，用過 量的乙醚沉淀過濾并真空干燥。將鄰苯二甲酰阿霉素溶于DMSOlOml中，并加入等摩爾量的 活化醛基化組氨酸，于40°C下反應48h。加入IOml水，用乙酸乙酯萃取三次，合并乙酸乙酯相 旋轉蒸發并干燥的酯化產物。
[0032] (4)阿霉素中氨基的脫保護:在干燥的燒瓶中加入50mL甲醇、酯化產物、三乙胺、水 合肼，攪拌均勻，水浴加熱，保持溫度為(60±5)°C反應6h。加入少量鹽酸中和，冰水浴降溫 至10 °C以下，抽濾至干。于80 °C烘干8h。
[0033] (5)組氨酸阿霉素酯與載體的鍵合:稱取殼聚糖-聚乙二醇并溶于蒸餾水中，加入 實施例4所得產物，并加入適量乙酸調節pH至4-5，于40°C條件下反應24h，并加入氰基硼氫 化鈉攪拌數小時，透析并冷凍干燥得到載藥聚合物。
[0034] (6)載藥膠束的制備:精確稱取載藥聚合物IOOmg溶于DMF中，并超聲lOmin，用蒸餾 水透析48h，冷凍干燥的聚合物膠束。
[0035]體外釋藥行為的測定：
[0036]精確稱取載藥膠束50mg各3份，用PBS(pH 5·5,7·4)緩沖分散，并轉移至透析袋 (MWC0:3500)。分別放入裝有對應的緩沖液燒杯中。于37°C，IOOprm恒溫攪拌，在設定的時間 點定時定點取樣，更換為新鮮的釋放介質，并量取緩沖液的體積。紫外可見分光光度法測定 釋放液中的藥物含量，計算藥物的累計釋放量，計算公式如式(1)。
[0037] Q=Ef=I^iFi (1)
[0038] 其體外釋藥情況如圖1所示，在pH為5.5的條件下，釋藥速率大且釋放的量遠大于 pH為7.4環境下的釋放速率與釋放率。由此可以說明該載藥膠束的具有較高的pH響應性。在 12h時，膠束在pH為7.4的條件下溶出度僅為12.86%，而在pH為5.5的條件下溶出度為 63.46% .
[0039]
[0040]圖1膠束在不同pH條件下的釋放曲線 [0041 ]體內血藥濃度變化與肝靶向性的測定：
[0042]以生理鹽水配置純阿霉素和載藥膠束，其濃度為100yg/mL，用于注射用。
[0043] 取小鼠3組，禁食12h，自由飲水，以相當于2mg/kg阿霉素劑量分別尾靜脈注射給予 載藥膠束，分別在時間為0.12511、0.2511、0.511、111、211、311、411、811、2411將小鼠斷頭取血樣測定 阿霉素濃度。同時取肝臟、心臟、腎、肺、脾等器官，測定阿霉素濃度。
[0044] 用同樣的方法給小鼠注射純阿霉素溶液，測定其血藥濃度和肝臟、心臟、腎、肺、脾 中阿霉素濃度。
[0045]
[0046] 圖2阿霉素與載藥膠束血藥濃度的變化
[0047] 阿霉素與載藥膠束血藥濃度隨時間的變化結果如圖2所示，在血液中，膠束進入體 內后，血液中藥物濃度呈現一個先急劇上升，后緩慢降低的過程;而純阿霉素則其濃度很快 達到最大值，并在血液中迅速減少，在8h時，血液中的藥物濃度基本為零。因此，一方面，載 藥膠束在血液中達到的最大藥物濃度值較低，可以減小周邊的不良反應;另一方面，載藥膠 束的保留時間比游離阿霉素長。
[0048] 各器官的最高藥物濃度如圖3可知，對于純阿霉素注射液，心臟中的藥物濃度最 高，其次是肝臟，所以純阿霉素的心臟毒性強。對于載藥膠束注射液，藥物濃度由高到低排 列為:肝臟、脾、肺、腎、心臟，可見載藥膠束具有較強的肝靶向性。
[0049]
[0050] 圖3體內組織分布圖(a)載藥膠束分布圖；（b)純阿霉素分布圖 [0051 ] 實施例2
[0052] 根據實施例1中同樣的方法制備半乳糖化殼聚糖和羧基化聚乙二醇，精確稱取半 乳糖化殼聚糖l.〇g，羧基化的聚乙二醇〇.417g，并加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞 胺鹽酸鹽攪拌反應48h，反應后將反應液置于透析袋中，蒸餾水透析，冷凍干燥，得到半乳糖 化殼聚糖-聚乙二醇聚合物。
[0053] 在實施例1同樣條件下進行阿霉素氨基保護。組氨酸的醛基化：稱取組氨酸 0.1648g加入到KOH的乙醇溶液(A溶液）中，攪拌至完全溶解。量取戊二醛2ml (含戊二醛 0.5g)溶于乙醇(B溶液）中，并加熱至40 °C。將A溶液緩慢逐滴加入到B溶液中，0.5h內加完， 再繼續反應lh，減壓蒸餾并干燥。其他步驟按實施例1進行制備得到阿霉素載藥膠束，進行 體外釋藥實驗，在12h時，膠束在pH為7.4的條件下溶出度僅為16.05%，而在pH為5.5的條件 下溶出度為54.36% ·
[0054] 實施例3
[0055] 殼聚糖的半乳糖化:稱取市售的殼聚糖3.2g于2% (v/v)的60ml乙酸水溶液中，常 溫下攪拌lh，使殼聚糖充分溶脹后，加入0.2g乳糖，于35°C水浴條件下攪拌36h，加入弱還 原劑氰基硼氫化鈉并攪拌lh，將反應液置于透析袋(MWC0 = 3500)中，蒸餾水透析，冷凍干 燥，得到半乳糖化殼聚糖，備用。采用硫酸苯酚法測定半乳糖的接枝率，經測定，所得的半乳 糖化殼聚糖的半乳糖接枝率為0.275%。
[0056]按照實施例1制備羧基化聚乙二醇，精確稱取半乳糖化殼聚糖1.0 g，羧基化的聚乙 二醇0.625g，并加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽攪拌反應48h，反應后將 反應液置于透析袋中，蒸餾水透析，冷凍干燥，得到半乳糖化殼聚糖-聚乙二醇聚合物，備 用。
[0057]按照實施例1對阿霉素的氨基進行保護。組氨酸的醛基化:稱取組氨酸0.1648g加 入到KOH的乙醇溶液(A溶液）中，攪拌至完全溶解。量取戊二醛2ml (含戊二醛0.5g)溶于乙醇 (B溶液）中，并加熱至30 °C。將A溶液緩慢逐滴加入到B溶液中，0.5h內加完，再繼續反應2h， 減壓蒸餾并干燥。其他步驟按實施例1進行制備得到阿霉素載藥膠束，進行體外釋藥實驗， 在12h時，膠束在pH為7.4的條件下溶出度僅為24.47%，而在pH為5.5的條件下溶出度為 68.92%〇
【主權項】
1. 一種具有鄰基效應的pH響應半乳糖化殼聚糖-聚乙二醇聚合物鍵合阿霉素前體藥 物，具有代表性的結構通式為：其中X與η的積表示阿霉素化學修飾比例;y為殼聚糖中為被聚乙二醇和阿霉素化學實 施的氨基葡萄糖單元和乙酰化氨基葡萄糖單元數;η為聚乙二醇的化學修飾比例;阿霉素與 載體之間連有具有鄰基效應的組氨酸，能使其在較弱的酸性條件下水解釋放阿霉素;所述 的殼聚糖聚乙二醇聚合物中殼聚糖的分子量在1~lOOkDa;聚乙二醇的分子量為：1000~ 5000;殼聚糖的脫乙酰度為:60%~95% ;氨基取代度為:5%~50%。2. 根據權利要求1所述的一種殼聚糖-聚乙二醇聚合物鍵合阿霉素前體藥物的制備方 法，其特征在于通過以下步驟實現： (1) 半乳糖化殼聚糖-聚乙二醇聚合物制備：稱取殼聚糖于1~2 %的乙酸水溶液中溶 脹，加入乳糖，于水浴加熱條件下攪拌數小時后，加入弱還原劑氰基硼氫化鈉并攪拌lh，將 反應液置于透析袋中，蒸餾水透析，冷凍干燥，得到半乳糖化殼聚糖;稱取單甲醚聚乙二醇 和3,3'_二硫代二丙酸酐，溶于干燥后的N，N-二甲基甲酰胺，加入4-二甲氨基吡啶溶解和三 乙胺反應，加入大量的乙醚沉淀，真空干燥得到羧基化的聚乙二醇;稱取羧基化的聚乙二醇 加入到二甲基亞砜中溶解，并加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽攪拌活化， 將其加入到半乳糖化殼聚糖溶液中，常溫下攪拌反應，將反應液置于透析袋中，蒸餾水透 析，冷凍干燥，得到半乳糖化殼聚糖-聚乙二醇聚合物。 (2) 阿霉素中氨基的保護：精確稱取阿霉素于蒸餾水中，加入三乙胺攪拌8h，加入等摩 爾量的鄰苯二甲酸酐，在l〇〇°C的條件下回流反應2.5h，停止加熱降至室溫后，用乙酸乙酯 萃取3次，合并乙酸乙酯相并旋干，經抽濾得到沉淀，于80°C下干燥8h。 (3) 組氨酸的醛基化:組氨酸加入到氫氧化鉀的乙醇水溶液溶液中，攪拌至完全溶解。 組氨酸的乙醇溶液逐滴加入到戊二醛的乙醇溶液中。該反應在50°C的條件下攪拌反應lh。 減壓蒸餾并真空干燥。 (4) 酯化反應:將步驟(3)中得到的醛基化組氨酸，N-羥基琥珀酰亞胺，N，N-二環己基碳 二亞胺溶于N，N-二甲基甲酰胺中，室溫下攪拌反應24h，過濾除去副產物后，用過量的乙醚 沉淀過濾并真空干燥。將鄰苯二甲酰阿霉素溶于二甲基亞砜中，并加入等摩爾量的活化醛 基化組氨酸，攪拌反應48h。加入適量的水，用乙酸乙酯萃取三次，合并乙酸乙酯相旋轉蒸發 并干燥的酯化產物。 (5) 阿霉素中氨基的脫保護：在干燥的燒瓶中加入甲醇、酯化產物、三乙胺、水合肼，攪 拌均勻，加熱攪拌反應數小時。加入少量鹽酸中和，冰水浴降溫沉淀，抽濾并干燥。 (6) 組氨酸阿霉素酯與載體的鍵合:稱取殼聚糖-聚乙二醇并溶于蒸餾水中，加入步驟 (5)所得產物，并加入適量乙酸調節pH至3-4，于40°C條件下反應24h，并加入還原劑氰基硼 氫化鈉攪拌數小時，透析并冷凍干燥得到載藥聚合物。 (7) 載藥膠束的制備:精確稱取載藥聚合物溶于N，N-二甲基甲酰胺中，并超聲lOmin，用 蒸餾水透析48h，冷凍干燥的聚合物膠束。3. 根據權利要求2所述的方法，其特征在于步驟（1)中，殼聚糖單體與乳糖的摩爾比為 100:1~20:1，聚乙二醇和半乳糖化殼聚糖單體的摩爾比為1:20-1:5，水浴加熱的溫度和時 間分別為30-50°(：，24-4811。4. 根據權利2所述的方法，其特征在于步驟(3)中，水浴加熱的溫度和時間分別為30-50 。(:和 l_3h。5. 根據權利2所述的方法，其特征在于步驟(5)中，反應溫度為50-80 °C，反應時間為5-8h〇6. 根據權利要求1所述的殼聚糖-聚乙二醇聚合物鍵合阿霉素前體藥物，用于制備肝靶 向性的抗腫瘤藥物。
【文檔編號】A61K31/704GK105943496SQ201610279407
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2016年4月29日
【發明人】蔣玉仁, 汪金連, 鄧友超
【申請人】中南大學