鬼針草總黃酮的制藥應用
【專利摘要】本發明提供鬼針草總黃酮在制備治療動脈粥樣硬化藥物中的應用。此外，本發明還提供了一種藥物組合物，包含有效量的鬼針草總黃酮和一種或多種藥學上可接受的輔料。經實驗證實，鬼針草總黃酮能明顯降低血脂、提高血清NO含量、降低ET?1含量，并抑制斑塊進展，因此可以有效治療動脈粥樣硬化。
【專利說明】
鬼針草總黃酮的制藥應用
技術領域
[0001] 本發明涉及心內科治療領域，具體涉及鬼針草總黃酮在制備治療動脈粥樣硬化藥 物中的應用。
【背景技術】
[0002] 鬼針草，又名鬼骨草、一包針、刺針草、婆婆草、盲腸草等，為菊科(Compos i tae)管 狀花亞科鬼針草屬(BidensL.)植物，一年生草本，其藥材資源非常豐富，主要分布于我國東 北、河北、山東、山西、河南、江蘇、云南、四川、兩廣等地，生于水邊、河岸、濕地、荒地及山坡 等處，極易米集。
[0003] 鬼針草所含化學成分種類較多，文獻報道曾從該植物中分離得到揮發油類、甾醇、 查耳酮、橙酮、聚乙炔類等，其活性成分以聚乙炔類和黃酮類成分為主。已分離出多種聚乙 炔類成分。乙醇提取物的正丁醇部分鑒定出4個黃酮成分，為金絲桃戒(hyperoside)、奧卡 寧(okanin)、異奧卡寧-7-0-葡萄糖戒和海生菊戒(maritimein)。鬼針草各部位中黃酮類成 分有較大差異，在花果期，葉和花序中總黃酮含量較高(分別為6.67 %和6.68 % )，莖枝中含 量較低(0.89%)。葉中分離鑒定了 21種揮發性成分，主要為脂肪烷和脂肪酸類，另外含少量 的醛、酮烯、腈、胺及呋喃類成分;其中脂肪類化合物占相當比例。分離出的4種酚酸類成分， 經理化測試及光譜分析，分別鑒定為水楊酸、原兒茶酸、沒食子酸、脂肪酸類化合物。還有甾 體類化合物如菠留醇、胡蘿卜苷，谷留醇、豆留醇-3-〇-i3_D-葡萄糖苷。鬼針草含有豐富的氨 基酸，如天冬氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、谷氨酸、丙氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、脯氨酸、酪氨酸、賴 氨酸等17種氨基酸，其中8種為人體必需氨基酸，總蛋白質157.89g/kg，總游離氨基酸含量 達139.89g/kg，必需氨基酸總量57.09g/kg。鬼針草所含氨基酸與傳統名貴藥材亞香棒蟲 草、冬蟲夏草相比，在種類上多了胱氨酸，在含量上脯氨酸、谷氨酸高于兩者，其他氨基酸含 量相當。另外鬼針草中還含有11種人體必需微量元素，測定結果表明，Mg含量最高，P、Fe、Ca 含量較高，Cu、Zn次之，1111、(：〇、附、1〇、(>含量最低，鬼針草中含有豐富的？，是其調節神經、催 眠、鎮靜等作用的內在原因。維生素在鬼針草中也有分布，如維生素出、維生素 Β2、β-胡蘿卜 素。
[0004] 鬼針草藥用歷史悠久，在民間驗方中有小人參之稱。其生物活性多樣，且作用溫和 持久，具有較高的藥用價值，對消化系統、中樞神經系統及心血管系統顯示較強的藥理作 用。近年來對鬼針草藥材進行了一些開發和利用，目前國內的鬼針草產品有悅年片、鬼針草 口服液、鬼針草保健沖劑等，但也僅限于防治高血壓等疾病，還未見對鬼針草總黃酮在動脈 粥樣硬化方面的報道。專利ZL200510097338.4中記載了鬼針草總黃酮的制備方法，在此將 其全文引入本發明中。
[0005] 冠狀動脈硬化是極為常見的一種心腦血管疾病，動脈粥樣硬化是動脈硬化的血管 病中常見的最重要的一種，其特點是受累動脈病變從內膜開始。一般先有脂質和復合糖類 積聚、出血及血栓形成，纖維組織增生及鈣質沉著，并有動脈中層的逐漸蛻變和鈣化，病變 常累及彈性及大中等肌性動脈，一旦發展到足以阻塞動脈腔，則該動脈所供應的組織或器 官將缺血或壞死。由于在動脈內膜積聚的脂質外觀呈黃色粥樣，因此稱為動脈粥樣硬化。
[0006] 動脈粥樣硬化是動脈硬化的一種，大、中動脈內膜出現含膽固醇、類脂肪等的黃色 物質，多由脂肪代謝紊亂，神經血管功能失調引起。常導致血栓形成、供血障礙等。也叫粥樣 硬化。
[0007] 動脈粥樣硬化的癥狀主要決定于血管病變及受累器官的缺血程度，主動脈粥樣硬 化常無癥狀，冠狀動脈粥樣硬化者，若管徑狹窄達75%以上，則可發生心絞痛、心肌梗塞、心 律失常，甚至猝死。腦動脈硬化可引起腦缺血、腦萎縮，或造成腦血管破裂出血，腎動脈粥樣 硬化常引起夜尿、頑固性高血壓、嚴重者可有腎功能不全。腸系膜動脈粥樣硬化可表現為飽 餐后腹痛便血等癥狀。下肢動脈粥樣硬化引起血管腔嚴重狹窄者可出現間歇性跛行、足背 動脈搏動消失，嚴重者甚至可發生壞疽。
[0008]
【申請人】在醫療實踐中，發現鬼針草總黃酮對于動脈粥樣硬化具有顯著的治療效 果，從而完成了本發明。
【發明內容】
[0009] 在本發明的第一個方面，在于提供鬼針草總黃酮在制備治療動脈粥樣硬化藥物中 的應用。
[0010] 本發明還提供了一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，包含有效量的鬼針草總黃 酮和一種或多種藥學上可接受的輔料，所述藥物組合物含有重量比為1~99%的鬼針草總 黃酮。
[0011] 所述藥物組合物還可以包含其他治療動脈粥樣硬化的活性成分，包括中藥和西藥 組分。
[0012] 優選的，所述藥物組合物含有重量比為10~60%的鬼針草總黃酮。
[0013] 本發明的鬼針草總黃酮的制備方法可以采用現有技術中的任意方法，例如專利 ZL200510097338.4中所述的方法。
[0014] 本發明的應用中，所述鬼針草總黃酮制劑劑型為膠囊劑、片劑、顆粒劑、散劑或口 服液制劑中的一種，為使上述劑型能夠實現，需在制備這些劑型時加入藥學可接受的輔料， 例如:填充劑、崩解劑、潤滑劑、助懸劑、粘合劑、甜味劑、矯味劑、防腐劑等，填充劑包括:淀 粉、預膠化淀粉、乳糖、甘露醇、甲殼素、微晶纖維素、蔗糖等，崩解劑包括:淀粉、預膠化淀 粉、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯聚乙烯吡咯烷酮、低取代羥丙纖維素、交聯羧甲基纖維 素鈉等，潤滑劑包括:硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、滑石粉、二氧化硅等，助懸劑包括:聚乙烯 吡咯烷酮、微晶纖維素、蔗糖、瓊脂、羥丙基甲基纖維素等，粘合劑包括，淀粉漿、聚乙烯吡咯 烷酮、輕丙基甲基纖維素等，甜味劑包括:糖精鈉、阿斯帕坦、鹿糖、甜蜜素、甘草次酸等，矯 味劑包括:甜味劑及各種香精，防腐劑包括:尼泊金類、苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸及其鹽類、 苯扎溴銨、醋酸氯乙定、桉葉油等。所述鬼針草總黃酮也可以制備為胃腸外給藥的劑型，包 括注射液、凍干粉針劑、輸液劑等。本領域技術人員熟知這些制劑的制備方法。
[0015] 本發明所述藥物的使用劑量和使用方法取決于諸多因素，包括患者的年齡、體重、 性別、自然健康狀況、營養狀況、化合物的活性強度、服用時間、代謝速率、病程嚴重程度以 及診治醫師的主觀判斷。本領域的技術人員根據上述因素可以容易地決定使用劑量和使用 方法。本發明的活性成分鬼針草總黃酮制成各種劑型的口服藥物，成人口服，常用劑量一次 Ο·l_50mg/kg。
【具體實施方式】
[0016]下述實施例用于舉例說明本發明鬼針草總黃酮的應用，但其不能對本發明的范圍 構成任何限制。
[0017] 試驗例 [0018] 1、材料
[0019]動物:健康新西蘭兔，體重2.0-2.5kg，雌雄各半，5月齡，由山東醫科大學實驗動物 中心提供。
[0020] 藥物與試劑:鬼針草總黃酮。辛伐他汀片，廣州南新制藥有限公司。甘油三酯(TG) 測定試劑盒、總膽固醇(TC)測定試劑盒、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固 醇(LDL-C)測定試劑盒、N0測定試劑盒，南京建成生物工程研究所;ET-1測定試劑盒，北京東 亞免疫技術研究所。
[0021] 儀器：LX20自動生化分析儀；酶標儀，日本BI0-R0D550 ;石蠟切片機，德國萊卡 LD2150。
[0022] 2、方法
[0023] 家兔動脈粥樣硬化模型的建立:取健康新西蘭兔，雌雄各半，顆粒飼料平衡喂養1 周后，隨機取10只作為正常對照組，用普通飼料喂養，其余為高脂造模組，給予高脂飼料喂 養(按1 %膽固醇、5 %豬油、10 %蛋黃粉、84 %普通飼料比例制作），各組每兔每天進食總量 相等，限制為150g，自由飲水。12周后高脂造模組取2只實驗家兔處死，光鏡下觀察主動脈內 膜明顯增厚，伴有大量泡沫細胞，內皮細胞排列紊亂、不連續，大量平滑肌細胞迀移內膜，視 為造模成功。
[0024] 動物分組及給藥:將高脂造模組家兔隨機分組，每組10只：模型組、鬼針草總黃酮 高劑量組、中劑量組、低劑量組、陽性對照組。除正常對照組仍然喂養普通飼料外，其余各組 喂養上述高脂飼料。鬼針草總黃酮組分別灌胃給予〇. 5，2，8g/Kg;辛伐他汀組灌胃給予給予 辛伐他汀2.5mg/Kg;其余組給予相應量生理鹽水。所有動物自由飲水，每天給藥1次給藥共8 周。所有動物在給藥8周后空腹抽取耳靜脈血5mL，供檢測各組家兔血清TC、TG、LDL、HDL、N0、 ET-1使用；抽血結束后以空氣栓塞法處死所有實驗動物，無菌取出主動脈根部至主動脈穿 膈肌處動脈段作為標本，清除外膜附著組織，沿動脈長軸剪開，取斑塊最顯著部位動脈段 1 c m，置于10 %福爾馬林溶液中浸泡固定后修剪成約1 c m X 0.15 c m X 0.15 c m的組織塊，用于 病理組織學觀察。
[0025] 檢測指標及測定方法:采用酶法測定血清TC、TG、LDL、HDL水平;N0測定采用硝酸還 原酶法;ET-1采用放射免疫分析法。測量斑塊面積:病理組織塊經切片機按4μπι的厚度切割， 采用HE染色制作病理切片，計算斑塊面積占整條主動脈面積的百分比。
[0026] 按以下規定進行病變分級:①0級:無病變;②I級：病變占1-25%;③II級：病變占 26-50 %;④III級:病變占51-75 %;⑤IV級:病變占76-100 %。記分方法:①0級:計0分;②I 級:計1分;③Π 級:計2分;d)II I級:計3分;⑤IV級:計4分。
[0027] 3、數據處理計量資料以qx±s表示。試驗數據進行組間t檢驗。
[0028] 4、結果
[0029] 4.1對動脈粥樣硬化模型兔血脂的影響
[0030] 試驗結果見表1，結果表明，與空白組相比，模型組的TC、TG、LDL明顯升高（P< 0.01)、HDL明顯降低(P <0.01)，表明造模成功。與模型組相比，陽性對照組、鬼針草總黃酮 各劑量組能顯著降低動脈粥樣硬化模型兔血中TC、TG、LDL水平(P<0.05、0.01);升高動脈 粥樣硬化模型兔血中HDL水平(P<0.05、0.01)。
[0031] 表1鬼針草總黃酮對動脈粥樣硬化模型兔血脂的影響（?κ土 S，-n = l〇)
[0032]
[0033] ~與模型組比較:，<0.05，呷<0.01(下表同)' ' '
[0034] 4.2對動脈粥樣硬化模型兔MKET-1的影響
[0035] 試驗結果見表2,結果表明，與模型組相比，陽性對照組、鬼針草總黃酮各劑量組能 顯著降低動脈粥樣硬化模型兔血中ET-1水平，提高N0水平，且均具有顯著性意義(P<0.05、 0·01)〇
[0036] 表2鬼針草總黃酮對動脈粥樣硬化模型兔NO、ET-1的影響（qx± S，η = 1 〇)
[0037]
[0038] 4.3對動脈粥樣硬化模型兔動脈斑塊的影響
[0039] 試驗結果見表3,結果表明，與模型組相比，陽性對照組、鬼針草總黃酮各劑量組能 顯著降低動脈粥樣硬化模型兔斑塊面積(P<0.05、0.01)。
[0040] 表3鬼針草總黃酮對動脈粥樣硬化模型兔動脈斑塊的影響(qx±S，n = l〇)
[0041]
[0042]綜上所述，鬼針草總黃酮能明顯降低血脂、提高血清NO含量、降低ET-1含量，并抑 制斑塊進展，因此可以有效治療動脈粥樣硬化。
【主權項】
1. 鬼針草總黃酮在制備治療動脈粥樣硬化藥物中的應用。2. -種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，包含有效量的鬼針草總黃酮和一種或多種藥 學上可接受的輔料。3. 權利要求2的藥物組合物，其中所述藥物組合物含有重量比為1~99%的鬼針草總黃 酮。4. 權利要求2-3的藥物組合物，所述藥物組合物含有重量比為10~60%的鬼針草總黃 酮。5. 權利要求2-4的藥物組合物，所述藥物組合物還可以包含其他治療動脈粥樣硬化的 活性成分，包括中藥和西藥組分。6. 權利要求1的應用或者權利要求2-5的藥物組合物，其中鬼針草總黃酮可以為膠囊 劑、片劑、顆粒劑、散劑或口服液制劑中的一種。
【文檔編號】A61K36/28GK105935371SQ201610397854
【公開日】2016年9月14日
【申請日】2016年6月8日
【發明人】常方圓
【申請人】常方圓