一種含多糖、黃酮和生物堿的葵花盤提取物及其制備方法
【專利摘要】本發明提供一種含多糖、黃酮和生物堿的葵花盤提取物及其制備方法，葵花盤為純天然中藥或藥食同源材料，經科學提取制成抗痛風，治療高尿酸血癥，提高免疫力，降血糖血脂，保腎護肝，消腫抗炎止痛的功能性保健藥食同源保健品，能夠溶解尿酸石，降低血尿酸濃度，消腫抗炎，調整嘌呤和尿酸代謝，平衡體內酸堿，平衡體內激素的功效；產品安全、無副作用，具有顯著保健功效，可長期服用，具有很好的市場開發前景。
【專利說明】
-種含多糖、黃酬和生物堿的葵花盤提取物及其制備方法
技術領域
[0001] 本發明屬于中藥領域，具體設及一種葵花盤提取物，其包含多糖、總黃酬和總生物 堿，同時還提供了其制備方法。
【背景技術】
[0002] 向日葵作為一種重要的油料植物，在全世界范圍內廣泛種植。葵花盤為除葵花子 后的向日葵盤，傳統的應用方法是將除葵花子后的葵花盤作為牲畜飼料喂養牲畜或作為燒 材取暖做飯，沒有發揮出其更大的經濟效益和醫療作用。我國中醫理論認為：向日葵花盤， 藥性甘、寒，歸肝經，功用清熱平肝，止痛止血;主治高血壓病、頭痛頭暈、耳鳴、痛經、子宮出 血、瘡疹。《河北中草藥》曰："葵花盤清熱燥濕，舒氣散結。治頭痛、頭暈、風火牙痛，目赤云 繫，頸前腹痛，外用于蜂窩織炎"，具有明顯消炎、利尿、降壓的作用。我國是向日葵的種植大 國，葵花盤的資源豐富，從葵花盤中提取和制備具有藥理活性的成分不僅能提供更多的臨 床用藥，而且還能廢物利用、變廢為寶，起到非常好的環保作用，并且藥物為純天然來源，污 染少，毒副作用小。
[0003] 因此，需要進一步研究葵花盤的活性成分，W開發更多的應用價值。
【發明內容】
[0004] 為了改善現有技術中葵花盤應用單一、資源浪費的問題，本發明對葵花盤中的活 性成分做了具體研究，并意外地發現經葵花盤提取得到的提取物具有較好的治療痛風的技 術效果。本發明是通過W下的技術方案來實現的。
[0005] 本發明的目的之一是提供一種葵花盤提取物，其特征在于由葵花盤用乙醇提取得 到。在所得到的葵花盤提取物中，含有葵花盤多糖、葵花盤總黃酬和葵花盤總生物堿。
[0006]
【申請人】發現，葵花盤生物堿可W特異性結合尿酸形成葵花堿尿酸復合物，復合物 可W經肝臟代謝排出體外。同時抑制炎性細胞的趨化和減少炎癥因子釋放，對于急性發作 的痛風關節炎具有獨特的抗炎消腫效用。葵花盤總黃酬是一種很強的抗氧劑，可有效清除 體內的氧自由基，阻止核酸的氧化，起到降低嚷嶺含量的作用;黃酬還可W降低血糖和甘油 Ξ醋，降低毛細血管脆性，增加通透性可W減輕腎臟細胞壓力，透過更多尿酸。同時可W穩 定腎蛋白小管，有利于腎臟代謝尿酸;黃酬可W抑制炎性生物酶的滲出，可W止痛。葵花盤 多糖是多糖一種，多糖是由多個單糖分子縮合、失水而成，是一類分子結構復雜且龐大的糖 類物質。具有增強人體免疫功能，對腎小球蛋白可W起到調控作用，還具有抗氧化的作用， 多糖可W促進骨組織的再生和愈合，有降血糖和血脂作用。
[0007] 為了達到更好的治療痛風的效果，在本發明的葵花盤提取物中，葵花盤多糖的含 量W葡萄糖計為42.9%-56.4%，葵花盤總黃酬的含量W蘆下計為58.3%-74.0%，葵花盤總生 物堿的含量W甲基葵花堿計為72.0%-81.5%。
[000引進一步地，所述的葵花盤提取物通過包括如下步驟的方法制備得到： 1)將葵花盤粉碎，加入4-10質量倍的50%-95%乙醇，加熱回流提取1 -3次，每次1 -3小 時，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至藥材質量的ο. 5-2倍，得醇提液； 2) 將步驟1)所得的醇提液過濾，取濾液； 3) 將步驟2)所得的濾液經強酸性陽離子交換樹脂充分吸附后，先用蒸饋水W4- 6BV/h 的流速洗去水溶性雜質，再用5-10質量倍的50%-95%乙醇W1-3BVA的流速進行洗脫，收集 洗脫液，減壓濃縮，干燥，即得葵花盤總黃酬； 4) 將步驟3)中已進行洗脫的強酸性陽離子交換樹脂用含氨水1%-5%的50%-95%乙醇溶 液W1-3BVA的流速進行洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，干燥，即得葵花盤總生物堿； 5) 將步驟1)醇提后的藥渣驚干，揮盡乙醇后，再用蒸饋水回流提取1-3次，每次1-3小 時，每次所用蒸饋水的質量為藥渣質量的4-10倍，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至藥材 質量的0.5-2倍，得水煎液； 6) 將步驟5)所得的水煎液經澄清劑處理，離屯、，上清液加入3-5質量倍的95%乙醇，攬 勻，離屯、，所得沉淀物真空干燥，即得葵花盤多糖； 7) 將步驟3)所得的葵花盤總黃酬、步驟4)所得的葵花盤總生物堿和步驟6)所得的葵 花盤多糖混合均勻，即得葵花盤提取物。
[0009] 其中，所述的強酸性陽離子交換樹脂優選為732型或HZ002型，所述的澄清劑優選 為殼聚糖。
[0010] 本發明的葵花盤提取物作為活性成分可被廣泛應用于藥品和/或保健品中。因此， 本發明的另一個目的是提供一種藥物組合物，其特征在于含有上述的葵花盤提取物和任選 地藥學上可接受的輔料。所述藥物組合物的劑型可W為片劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、散 劑、微丸、溶液劑、糖漿劑、乳劑或注射劑。
[0011] 另一方面，本發明還設及所述葵花盤提取物的制備方法，其特征在于包括W下步 驟： 1) 將葵花盤粉碎，加入4-10質量倍的50%-95%乙醇，加熱回流提取1 -3次，每次1 -3小 時，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至藥材質量的0.5-2倍，得醇提液； 2) 將步驟1)所得的醇提液過濾，取濾液； 3) 將步驟2)所得的濾液經強酸性陽離子交換樹脂充分吸附后，先用蒸饋水W4- 6BV/h 的流速洗去水溶性雜質，再用5-10質量倍的50%-95%乙醇W1-3BVA的流速進行洗脫，收集 洗脫液，減壓濃縮，干燥，即得葵花盤總黃酬； 4) 將步驟3)中已進行洗脫的強酸性陽離子交換樹脂用含氨水1%-5%的50%-95%乙醇溶 液W1-3BVA的流速進行洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，干燥，即得葵花盤總生物堿； 5) 將步驟1)醇提后的藥渣驚干，揮盡乙醇后，再用蒸饋水回流提取1-3次，每次1-3小 時，每次所用蒸饋水的質量為藥渣質量的4-10倍，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至藥材 質量的0.5-2倍，得水煎液； 6) 將步驟5)所得的水煎液經澄清劑處理，離屯、，上清液加入3-5質量倍的95%乙醇，攬 勻，離屯、，所得沉淀物真空干燥，即得葵花盤多糖； 7) 將步驟3)所得的葵花盤總黃酬、步驟4)所得的葵花盤總生物堿和步驟6)所得的葵 花盤多糖混合均勻，即得葵花盤提取物。
[0012] 其中，所述的強酸性陽離子交換樹脂優選為732型或HZ002型，所述的澄清劑優選 為殼聚糖。
[0013] 本發明還設及所述的葵花盤提取物或藥物組合物在制備抗痛風藥物中的用途。
[0014] 本發明的積極效果在于:利用具體的制備方法從葵花盤中提取得到含有葵花盤多 糖、總黃酬和總生物堿產物等有效活性成分的提取物，該提取物為天然來源，毒副作用小， 安全性高，并且經試驗證明，對痛風具有很好的治療效果，臨床醫療效果顯著。另外，提取分 離工藝簡單，易于操作，無需特殊設備，成本低廉，所用的試劑對環境無污染，適合于大規模 的工業化生產。
【具體實施方式】
[0015] 通過W下實施例進一步舉例描述本發明，并不W任何方式限制本發明，在不背離 本發明的技術解決方案的前提下，對本發明所作的本領域普通技術人員容易實現的任何改 動或改變都將落入本發明的權利要求范圍之內。
[0016] 實施例1 葵花盤提取物的制備步驟： 1) 、取葵花盤化g粉碎后加4質量倍數的50%乙醇加熱回流提取1次，每次1小時，合并提 取液，過濾，濾液減壓濃縮至藥材質量的0.5倍，得醇提液； 2) 、步驟1)所得的醇提液過濾，取濾液； 3) 、將步驟2)所得的濾液經732型強酸性陽離子交換樹脂充分吸附后，先用蒸饋水W4 BVA的流速洗去水溶性雜質，再用5質量倍數的50%%乙醇WlBV/h的流速進行洗脫，收集洗 脫液，減壓濃縮，干燥，即得葵花盤總黃酬;其含量W蘆下計為61.4%; 4) 、將步驟3)中已進行洗脫的732型強酸性陽離子交換樹脂再用含氨水5%的50%乙醇 溶液W IBV/h的流速進行洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，干燥，即得葵花盤總生物堿。其含量 W甲基葵花堿計含量為75.8% ; 5) 、將步驟1)醇提后的藥渣驚干，揮盡乙醇后，再用蒸饋水回流提取1次，每次1小時， 每次所用蒸饋水的質量為藥渣質量的4倍，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至藥材質量的 0.5倍，得水煎液； 6) 、將步驟5)所得的水煎液經殼聚糖處理，離屯、，上清液加入3質量倍量的95%乙醇，攬 勻，離屯、，所得沉淀物真空干燥，即得葵花盤多糖;按蔥酬-硫酸法測得其含量W葡萄糖計為 45.2%； 7) 將步驟3)所得的葵花盤總黃酬、步驟4)所得的葵花盤總生物堿和步驟6)所得的葵 花盤多糖混合均勻，即得葵花盤提取物。
[0017] 實施例2 葵花盤提取物的制備步驟： 1) 、取葵花盤1kg粉碎后加6質量倍數的75%乙醇加熱回流提取2次，每次2小時，合并 提取液，過濾，濾液減壓濃縮至藥材質量的1倍，得醇提液； 2) 、步驟1)所得的醇提液過濾，取濾液； 3) 、將步驟2)所得的濾液經監002型強酸性陽離子交換樹脂充分吸附后，先用蒸饋水W 5BVA的流速洗去水溶性雜質，再用8質量倍數的75%乙醇W2BV/h的流速進行洗脫，收集洗 脫液，減壓濃縮，干燥，即得葵花盤總黃酬;其含量W蘆下計為66.4%; 4) 、將步驟3)中已進行洗脫的監002型強酸性陽離子交換樹脂再用含氨水3%的體積百 分濃度為75%乙醇溶液W2BV/h的流速進行洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，干燥，即得葵花 盤總生物堿，其含量W甲基葵花堿計含量為76.8% ; 5) 、將步驟1)醇提后的藥渣驚干，揮盡乙醇后，再用蒸饋水回流提取2次，每次2小時，每 次所用蒸饋水的質量為藥渣質量的8倍，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至藥材質量的1 倍，得水煎液； 6) 、將步驟5)所得的水煎液經殼聚糖處理，離屯、，上清液加入4質量倍量的95%乙醇，攬 勻，離屯、，所得沉淀物真空干燥，即得葵花盤多糖;按蔥酬-硫酸法測得其含量W葡萄糖計為 49.8%； 7) 、將步驟3)所得的葵花盤總黃酬、步驟4)所得的葵花盤總生物堿和步驟6)所得的葵 花盤多糖混合均勻，即得葵花盤提取物。
[001引實施例3 葵花盤提取物的制備步驟： 1 )、將葵花盤化g粉碎加10質量倍數的75%乙醇加熱回流提取3次，每次3小時，合并提取 液，過濾，濾液減壓濃縮至藥材質量的2倍，得醇提液； 2) 、步驟1)所得的醇提液過濾，取濾液； 3) 、將步驟2)所得的濾液經監002型強酸性陽離子交換樹脂充分吸附后，先用蒸饋水W 6BVA的流速洗去水溶性雜質，再用10質量倍數、濃度為95%乙醇W3BV/h的流速進行洗脫， 收集洗脫液，減壓濃縮，干燥，即得葵花盤總黃酬;其含量W蘆下計為70.5%; 4) 、將步驟3)中已進行洗脫的監002型強酸性陽離子交換樹脂再用含氨水5%的95%乙 醇溶液W 3BV/h的流速進行洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，干燥，即得葵花盤總生物堿，其含 量W甲基葵花堿計含量為77.6% ; 5) 、將步驟1)醇提后的藥渣驚干，揮盡乙醇后，再用蒸饋水回流提取3次，每次3小時， 每次所用蒸饋水的質量為藥渣質量的10倍，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至藥材質量的 2倍，得水煎液； 6) 、將步驟5)所得的水煎液經殼聚糖處理，離屯、，上清液加入5倍量95%乙醇，攬勻，離 屯、，所得沉淀物真空干燥，即得葵花盤多糖；按蔥酬-硫酸法測得其含量W葡萄糖計為 53.7%； 7) 、將步驟3)所得的葵花盤總黃酬、步驟4)所得的葵花盤總生物堿和步驟6)所得的葵 花盤多糖混合均勻，即得葵花盤提取物。
[0019] 試驗例1:用動物模型證明治療痛風疾病的藥理作用 一、 試驗材料 1.動物:昆明種小鼠，體重(20g ± 2g)，由吉林大學臨床動物研究中屯、提供。
[0020] 2.給藥樣品誼白對照組(蒸饋水），本發明組(實施例1、2、3制備得到的葵花盤提 取物） 二、 試驗方法 1.鎮痛實驗 取雄性小鼠40只，隨機分為空白對照組，葵花盤提取物組(實施例1，實施例2，實施例 3)，每組10只。按120mg kg-i給藥，1次一天，空白對照組給予等量蒸饋水，連續給藥5天，于末 次給藥1小時后，每組各取10只小鼠腹腔注射0.7%醋酸0.1ml g-i，記錄各組小鼠20min內扭 體次數。
[0021] 表1.對醋酸所致小鼠扭體反應的影響
與空白對照組比較，沖<0.05，*沖<0.01 2.小鼠血尿酸(UA)、黃嚷嶺氧化酶(X0D)及尿素氮(BUN) 取雄性小鼠100只，隨機分為正常組、模型組、本發明葵花盤提取物組(實施例1，實施例 2,實施例3)，每組20只。除正常組外，每組均W酵母30g · kg-i灌胃，連續一周。從第3天開始 本發明組灌胃，按120mg kg-i給藥，連續給藥5d。小鼠摘除眼球法取血，分離血清，在波長 690nm、530nm 和640nm處測定 UA、X0D 和腳N值。
[0022] 表2.對酵母膏致高尿酸血癥小鼠血清UA、X0D及腳N的影響
與正常組比較沖<0.05，*沖<0.01;與模型組比較沖<0.05，*沖<0.01 n=20 Ξ、試驗結果 上述表1和表2的試驗結果表明，本發明的葵花盤提取物能顯著減輕化學物質產生的疼 痛，說明本發明的葵花盤提取物具有鎮痛作用。另外，本發明的葵花盤提取物能顯著抑制黃 嚷嶺氧化酶活性，減少尿酸的生成，表明能明顯降低血中尿素氮，改善腎功能。
[0023] 試驗例2:典型臨床病例 病例1: 李某，男，48歲，患者6年前在一次飲酒后，突然發生左足背，大拇指腫痛，難W入睡，局 部灼熱紅腫。在當地服用消炎陣痛藥后，一周后疼痛緩解。W后，每遇飲酒或感冒后即易發 作，每遇發作，自服潑尼松等藥。近一年來服用上藥效果不佳。疼痛固定于左足背及左拇指。
[0024] 治療:服用本發明實施例1制備的葵花盤提取物2療程后，癥狀消失，行走自如，無 販行。為鞏固療效囑繼續服用3個療程。隨訪半年，未復發。
[0025] 病例2: 某女，67歲，曾經有關節疼痛病史亦未在意，未作治療，近兩年來由于飲食海鮮，癥狀加 重，全身各個關芐基本全部受累.醫院診斷為痛風性關節炎. 治療:服用本發明實施例1制備的葵花盤提取物1療程后，癥狀消失，正常行走活動沒有 影響，各項指標正常，飲食習慣已經基本改過來了，為鞏固療效囑繼續服用3個療程。隨訪2 年，未復發。
[0026] 病例3: 趙某，男，59歲，因連續夜間足巧趾疼痛影響睡眠而屯、煩，伴有腕腹瘡滿、大便干結，查 舌質暗紅，苔白稍厚，脈弦滑。血液檢查提示，血脂偏高，血尿酸554umol/L。患者形體豐滿， 工作應酬多，生活無規律，偏食肥厚重味，嗜飲啤酒及可樂飲品。
[0027] 服用本發明實施例1制備的葵花盤提取物，服用疼痛即有減輕，2個療程后腫脹疼 痛基本消隨訪1年，未復發。
[002引病例4: 王某，男45歲現病史：自2013年開始，患痛風3年，每年發作3-4次。既往最高尿酸值 680umol/L，發作時右腳部巧趾關節明顯疼痛，伴有紅腫現象。疼痛難忍時，應用過雙氯芬酸 鋼止痛。個人史:喜食海鮮、肉類，食用雞蛋、豆制品居多。服用情況:2015年12月29日，醫院 內靜脈血測得尿酸值517.37umol/L，肌酢：101.69皿ol/L甘油Ξ醋：1.89mmol/L丙氨酸氨轉 化酶:59.46IU/Ld2016年2月21日醫院測得尿酸值497.50umol/L。
[0029]自2016年1月4號開始服用本發明實施例1的葵花盤提取物，服用方法：10g/次/日， 晨起空腹服用。1月15日，腳部疼痛，疼痛程度患者可忍受，未服用任何止痛藥物，Ξ天后基 本好轉;2月29日，測得指尖血460皿ol/L，在此期間痛風發作，因工作原因，服用雙氯芬酸鋼 止痛，2天疼痛緩解;3月5日，患者歲腳，未誘發痛風;3月19-20日，患者左腳腳背出現疼痛， 疼痛程度患者難W忍受，因患者胃部不適，建議服用依托考昔，但患者始終沒有用藥，2-3天 癥狀緩解。目前患者感受良好，仍在繼續服用。
【主權項】
1. 一種葵花盤提取物，其特征在于由葵花盤用乙醇提取得到。2. 如權利要求1所述的葵花盤提取物，其特征在于含有葵花盤多糖、葵花盤總黃酮和葵 花盤總生物堿。3. 如權利要求2所述的葵花盤提取物，其特征在于葵花盤多糖的含量以葡萄糖計為 42.9%-56.4%，葵花盤總黃酮的含量以蘆丁計為58.3%-74.0%，葵花盤總生物堿的含量以甲 基葵花堿計為72.0%-81.5%。4. 如權利要求1-3之一所述的葵花盤提取物，其特征在于所述提取物的制備方法包括 如下步驟： 1) 將葵花盤粉碎，加入4-10質量倍的50%-95%乙醇，加熱回流提取1-3次，每次1-3小 時，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至藥材質量的〇. 5-2倍，得醇提液； 2) 將步驟1)所得的醇提液過濾，取濾液； 3) 將步驟2)所得的濾液經強酸性陽離子交換樹脂充分吸附后，先用蒸餾水以4- 6BV/h 的流速洗去水溶性雜質，再用5-10質量倍的50%-95%乙醇以I-3BV/h的流速進行洗脫，收集 洗脫液，減壓濃縮，干燥，即得葵花盤總黃酮； 4) 將步驟3)中已進行洗脫的強酸性陽離子交換樹脂用含氨水1%-5%的50%-95%乙醇溶 液以I-3BV/h的流速進行洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，干燥，即得葵花盤總生物堿； 5) 將步驟1)醇提后的藥渣晾干，揮盡乙醇后，再用蒸餾水回流提取1-3次，每次1-3小 時，每次所用蒸餾水的質量為藥渣質量的4-10倍，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至藥材 質量的0.5-2倍，得水煎液； 6) 將步驟5)所得的水煎液經澄清劑處理，離心，上清液加入3-5質量倍的95%乙醇，攪 勻，離心，所得沉淀物真空干燥，即得葵花盤多糖； 7) 將步驟3)所得的葵花盤總黃酮、步驟4)所得的葵花盤總生物堿和步驟6)所得的葵 花盤多糖混合均勻，即得葵花盤提取物。5. 如權利要求4所述的葵花盤提取物，其特征在于所述的強酸性陽離子交換樹脂為732 型或HZ002型，所述的澄清劑為殼聚糖。6. -種藥物組合物，其特征在于含有如權利要求1-5之一所述的葵花盤提取物和任選 地藥學上可接受的輔料。7. 如權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于為片劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、散劑、 微丸、溶液劑、糖漿劑、乳劑或注射劑。8. 如權利要求1-5之一所述的葵花盤提取物的制備方法，其特征在于包括以下步驟： 1) 將葵花盤粉碎，加入4-10質量倍的50%-95%乙醇，加熱回流提取1-3次，每次1-3小 時，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至藥材質量的〇. 5-2倍，得醇提液； 2) 將步驟1)所得的醇提液過濾，取濾液； 3) 將步驟2)所得的濾液經強酸性陽離子交換樹脂充分吸附后，先用蒸餾水以4- 6BV/h 的流速洗去水溶性雜質，再用5-10質量倍的50%-95%乙醇以I-3BV/h的流速進行洗脫，收集 洗脫液，減壓濃縮，干燥，即得葵花盤總黃酮； 4) 將步驟3)中已進行洗脫的強酸性陽離子交換樹脂用含氨水1%-5%的50%-95%乙醇溶 液以I-3BV/h的流速進行洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，干燥，即得葵花盤總生物堿； 5) 將步驟1)醇提后的藥渣晾干，揮盡乙醇后，再用蒸餾水回流提取1-3次，每次1-3小 時，每次所用蒸餾水的質量為藥渣質量的4-10倍，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至藥材 質量的0.5-2倍，得水煎液； 6) 將步驟5)所得的水煎液經澄清劑處理，離心，上清液加入3-5質量倍的95%乙醇，攪 勻，離心，所得沉淀物真空干燥，即得葵花盤多糖； 7) 將步驟3)所得的葵花盤總黃酮、步驟4)所得的葵花盤總生物堿和步驟6)所得的葵 花盤多糖混合均勻，即得葵花盤提取物。9. 如權利要求1-5之一所述的葵花盤提取物在制備抗痛風藥物中的用途。10. 如權利要求6或7所述的藥物組合物在制備抗痛風藥物中的用途。
【文檔編號】C08B37/00GK105920067SQ201610294519
【公開日】2016年9月7日
【申請日】2016年5月6日
【發明人】不公告發明人
【申請人】洮南市金塔生物科技有限公司