用于預防或治療脂質相關的心血管疾病和肥胖的包含紫花地丁提取物,或紫花地丁、桃仁 ...的制作方法
【專利摘要】本發明涉及用于預防或治療脂質相關的心血管疾病和肥胖的包含紫花地丁提取物，或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物的藥物組合物或食品添加劑組合物，和用于治療脂質相關的心血管疾病或肥胖的方法，其包括施用該藥物組合物至需要其的對象。本發明的紫花地丁提取物，或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物顯示在降低體重、體脂、血液中的總膽固醇，和降低血壓中是有效的，并且因而可以用于有效預防或治療脂質相關的心血管疾病或肥胖。
【專利說明】
用于預防或治療脂質相關的心血管疾病和肥胖的包含紫花地 丁提取物，或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物的組 合物
技術領域
[0001] 本發明涉及用于預防或治療脂質相關的心血管疾病或肥胖的包含紫花地丁 (Viola Herba)提取物，或紫花地丁、桃仁(Persicae Semen)、桂枝(Cinnamomi Ramulus)和 甘草屬(Glycyrrhiza spp.)的提取物的藥物組合物，并且涉及用于預防脂質相關的心血管 疾病或肥胖的方法，所述方法包括施用所述藥物組合物至需要其的對象。
[0002] 另外，本發明涉及用于預防或改善脂質相關的心血管疾病或肥胖的包含紫花地丁 提取物，或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物的食品添加劑組合物。
【背景技術】
[0003] 在過去的十年里，韓國成年人的膳食脂肪攝取持續增加。根據韓國國民健康和營 養調查（Korean National Health&Nutrition Examination Survey)，通過2010年的身體 質量指數(BMI)確定的肥胖的患病率對于男性而言為36.3%，而對于女性而言為24.8%。具 體而言，在過去的十年里，肥胖在男性中持續增加。根據在2005年進行的調查的結果，在韓 國成年人中，來自脂肪的卡路里攝取超過20%。特別地，因為動物脂肪攝取的增加已經是顯 著的，并且脂肪攝取和飽和脂肪酸攝取的總量也已經增加，所以膳食脂肪攝取的量、種類和 脂肪酸攝取的水平是影響血液中脂質濃度的重要的決定因素。上述的飲食習慣的改變已知 為與心血管疾病發生風險的增加有關。根據韓國統計局（Statistics Korea)2012年9月的 報告，第一死因是癌癥，然后是腦血管疾病，并且第三是心血管疾病。已知，循環系統疾病比 如動脈粥樣硬化、心肌梗死和中風與其它慢性疾病相比更加嚴重地受到膳食攝取的影響。 迄今為止已知的相關風險因素包括血液中的膽固醇水平、血液中的甘油三酯水平、高血壓、 抽煙、血栓癥、糖尿病、肥胖等。在它們中，膽固醇水平和高血壓已知為引起動脈粥樣硬化和 心肌梗死的主要風險因素。因此，將血液中膽固醇濃度維持在正常水平對于預防上述疾病 的發生是重要的。
[0004] 同時，當體內的膽固醇水平處于恰當的控制之下時，膽固醇將不在血漿或組織中 累積。然而，體內膽固醇水平的增加可能導致引起膽固醇代謝調控紊亂的高膽固醇血癥，從 而引起脂蛋白的組分一一比如低密度脂蛋白（LDL)-膽固醇和高密度脂蛋白（HDL)-膽固 醇一一的量變。具體而言，在血液中存在的膽固醇中，LDL-膽固醇已知為心血管疾病的風險 因素，并且甘油三酯濃度水平的增加已知降低HDL-膽固醇的濃度和增加乳糜微粒殘留 物一一其主要由甘油三酯組成，因而成為冠狀動脈疾病的主要起因。另外，血脂可以比其它 類型的脂質更好地穿過血管內皮細胞并且因而可以成為動脈粥樣硬化的主要起因，并且餐 后甘油三酯水平的迅速增加已知與中風的發生密切相關。相比之下，HDL-膽固醇可以從血 管壁去除膽固醇，并且因而已知為心血管疾病的預防因素。因此，為了預防或治療由于脂質 代謝紊亂發生的多種疾病，將由甘油三酯、膽固醇、磷脂類和游離脂肪酸組成的血脂的各種 組分中的每一種維持在正常水平是重要的。
[0005] 目前，推薦攝取膳食纖維、皂苷、維生素 C、維生素 D和必需氨基酸的膳食療法被用 作適當地控制血脂組分從而預防和治療脂質代謝紊亂的治療方法。但是，食療可能不能長 期維持，這是因為他們經常伴隨由于限制飲食而引起的精神不適。可選地，除了食療之外， 藥物治療也已經被用于治療脂質代謝紊亂。但是，用于降低血脂水平的藥物治療必須在整 個生命過程中維持，這可能引起肝功能不全和并發癥比如肌病。具體而言，當肝功能值增加 為正常肝功能值的至少3倍時，可以不再應用藥物治療。因此，對于發現用作治療脂質相關 的心血管疾病或肥胖的活性成分的天然物質存在不斷增長的需要。
[0006] 肥胖或肥胖癥狀是集合術語，其指人的體重過高的身體狀況，并且從病理學觀點， 它指的是根據WHO標準，當人的身體質量指數(BMI)是30或更高時的情況。但是，在韓國，具 有25或更高的BMI值的人被診斷為具有肥胖。在大多數情況下，肥胖指的是他或她的體重高 于正常體重時人的身體狀況。但是，它也指當身體組成之中的脂質含量高時的狀態，雖然體 重本身可能不是過高的。肥胖指的是在身體內具有過量的脂肪累積的人的身體狀態，其導 致脂肪組織中脂肪細胞的數量或尺寸的增加。肥胖就其本身而言可能不是問題，但是當它 導致由其誘發的社交障礙和由于過多的體脂而引起的繼發性并發癥時可能變得嚴重。例 如，肥胖可能誘發重大疾病，比如高血壓、高血脂癥、外感熱病(heat disease)、糖尿病、動 脈粥樣硬化、脂肪肝、關節紊亂（joint disorder)、關節炎、性功能障礙、和癌癥，并且因而 已經被看作重要疾病。當人的體重增加至超過正常體重的20%時，糖尿病的發生率高于正 常人10倍。進一步，它可能使他的或她的心肺功能惡化，從而縮短他們的預期壽命。復雜因 素比如高血壓、糖尿病、高膽固醇血癥、和動脈粥樣硬化可能對心臟功能具有影響，其引起 熱衰竭和誘發猝死。另外地，在女性中，子宮內膜癌的發生率增加，而且膽石病的可能性也 可能更高。在男性中，肥胖增加結腸直腸癌和前列腺癌的風險。而且，體重的增加使得人們 開始在意他們周圍的其他人的目光，并且其不斷增長的困擾可以使得他們避免與其他人接 觸，這使得他們更可能獨自生活。另外，身體上的自卑可能導致他們自信心的喪失，并且甚 至可能影響他們的自我意識。
[0007] 為了預防肥胖并且維持健康的體重，有必要維持終身的均衡飲食和規律的鍛煉。 具體而言，脂肪細胞一旦產生，不可能被自然地去除并且在體內永久地保留，但是它們在尺 寸上可以減小。因此，小心不變得肥胖是重要的。因此，體重可以主要地通過降低卡路里攝 取同時增加戶外活動和鍛煉的量而降低。但是，如上面所描述，由于脂肪細胞一旦形成就幾 乎不能去除，因此人們經常采用藥物連同減肥膳食攝取來降低脂肪吸收。但是，這些藥物可 能誘發不良反應，比如心血管疾病(例如高血壓)和中風，并且一旦停止施用藥物，體重常常 開始增加。對于嚴重的肥胖，可以進行減肥手術，其可以包括去除體脂的手術或限制食物攝 取的胃成形術或胃囊帶術等。
[0008] 當前使用的抗肥胖藥物的實例包括減食欲劑，并且是熱代謝促進劑、消化吸收抑 制劑和激素調節劑等，減食欲劑通過減少食物攝取量或調節身體代謝和增加體內的放熱反 應來發揮作用。減食欲劑的實例包括腎上腺素能藥物、5-羥色胺能藥物和腎上腺素能-5-羥 色胺能藥物，并且在它們中，5-羥色胺能藥物的銷售由于心臟瓣膜病的副作用已經被禁止。 熱代謝促進劑的實例包括麻黃素-咖啡因組合藥物和脂肪細胞3受體激動劑，并且消化吸收 抑制劑的實例包括由賽尼可（Xenical)代表的脂肪酶抑制劑，和被稱為奧利斯特拉 (Olestra)的低脂食品添加劑。迄今為止已經使用的抗肥胖藥物在其副作用方面已經有了 眾多報道，包括起伏不定的效應、厭食癥、頭痛、血壓升高、脂肪痢、腹瀉、精神障礙 (pyschonia)等，其似乎是由于以下事實:產品沒有被科學地證明或者已經強調了在短的時 間段內具有減少體重的作用。因此，對于基于中藥開發新型天然物質存在持續的需求，該物 質具有證明的安全性并具有改進的抗肥胖效果以及較少的副作用。
【發明內容】
[0009] 技術問題
[0010] 當嘗試發現具有預防或治療脂質相關的心血管疾病或肥胖的效果但是具有較少 的副作用的天然物質時，本發明的發明人已經確認了紫花地丁提取物，或紫花地丁、桃仁、 桂枝和甘草屬的提取物具有抗肥胖作用，比如抑制體重增加、抑制膳食攝取量、和降低體 月旨，并且具有通過降低甘油三酯一一其是血液中存在的中性脂肪、降低LDL-膽固醇、增加 HDL-膽固醇、增加脂肪組織內的脂聯素 mRNA表達、增加線粒體解偶聯蛋白-2 (UCP-2 )mRNA、 和降低血壓來治療脂質相關的心血管疾病的作用，從而完成本發明。
[0011] 技術方案
[0012] 本發明的目標是提供用于預防或治療脂質相關的心血管疾病或肥胖的包含紫花 地丁提取物，或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物的藥物組合物。
[0013] 本發明的另一個目標是提供用于預防或改善脂質相關的心血管疾病或肥胖的包 含紫花地丁提取物，或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物的食品添加劑組合物。
[0014] 本發明的進一步的目標是提供用于治療脂質相關的心血管疾病或預防肥胖的方 法，其包括施用上述藥物組合物給需要其的對象。
[0015] 有益效果
[0016] 本發明的紫花地丁提取物，或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物在降低體 重、體脂和血液中的膽固醇以及降低血壓方面是有效的，并且因而可以被用于有效預防或 治療脂質相關的心血管疾病或肥胖。
[0017] 另外，在動脈粥樣硬化小鼠模型中，紫花地丁提取物已經顯示了在降低粥樣硬化 病變的發生和抑制肝組織和血液中的脂質堆積中是有效的，并且因而可以有效地用于預防 或治療動脈粥樣硬化。
【附圖說明】
[0018] 圖1示出了圖解根據周齡的以下幾組中的體重分析結果的圖：飼喂紫花地丁提取 物，或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物的正常飲食組(正常組）；飼喂高脂飲食(HFD) 的對照組;飼喂HFD和賽尼可的組;飼喂HFD和紫花地丁提取物的組;飼喂HFD和桃仁、桂枝和 甘草屬的提取物的組;和飼喂HFD和紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物的組。
[0019] 圖2示出了圖解在對照組和本發明的每一個實驗組的脂肪組織中的脂聯素 mRNA表 達的圖。
[0020] 圖3示出了圖解在對照組和本發明的每一個實驗組的脂肪組織中的UCP-2mRNA表 達的圖。
[0021] 圖4示出了圖解在對照組和本發明的每一個實驗組中測量的血壓的圖。
[0022] 圖5示出了圖解紫花地丁提取物對動脈粥樣硬化小鼠模型的體重增加的抑制作用 的圖。
[0023] 圖6示出了圖解紫花地丁提取物能夠降低動脈粥樣硬化小鼠模型中肝組織中脂肪 細胞的尺寸和脂肪沉積的作用的圖。
[0024] 圖7示出了圖解紫花地丁提取物對動脈粥樣硬化小鼠模型中肝臟重量的增加的抑 制作用的圖片。
[0025] 圖8是圖解紫花地丁提取物能夠降低動脈粥樣硬化小鼠模型中粥樣硬化病變的發 生的作用的圖(A:含有被染色的脂肪的動脈組織的切片的圖片，B:含有測量的粥樣硬化病 變的圖）。
[0026]圖9是圖解紫花地丁提取物能夠增加 AMPK活性并抑制脂肪酸合成酶(FAS)和固醇 調節元件-結合蛋白-1 (SREBP-1)蛋白的表達的作用的圖。
【具體實施方式】
[0027]實施本發明的最佳模式
[0028] 為了完成上述目標，在一方面，本發明提供了用于預防或治療脂質相關的心血管 疾病或肥胖的包含紫花地丁提取物，或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物的藥物組合 物。
[0029] 當以發現具有較少副作用的能夠預防或治療脂質相關的心血管疾病或肥胖的天 然物質為目的而對多種天然物質進行研究時，本發明的發明人已經發現紫花地丁提取物， 或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物的作用。
[0030] 本發明的發明人用水提取了紫花地丁，或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的混合 物，并且從而獲得了紫花地丁提取物，或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物。他們對紫 花地丁提取物，和紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物進行了實驗，以檢查它們在預防 或治療心血管疾病或肥胖中的作用，并且確認了紫花地丁提取物，和紫花地丁、桃仁、桂枝 和甘草屬的提取物具有抑制體重增加，抑制膳食攝取量和降低體脂，以及也降低甘油三 酯一一其是血液中的中性脂肪，降低LDL-膽固醇，增加 HDL-膽固醇，增加脂肪組織內的脂聯 素 mRNA表達，增加 UCP-2mRNA表達和降低血壓的作用。
[0031] 另外，他們還使用患有動脈粥樣硬化的載脂蛋白E(ApoE)基因缺失的小鼠模型對 紫花地丁提取物進行了實驗以檢查其對預防或治療動脈粥樣硬化的作用，并且確認了紫花 地丁提取物具有抑制體重增加;抑制肝臟重量增加和降低脂肪沉積;降低粥樣硬化病變的 發生；降低總膽固醇、LDL-膽固醇、甘油三酯和葡萄糖的水平;增加 AMPK活性;和抑制FAS和 SREBP-1蛋白的表達的作用。
[0032] 因此，確認了紫花地丁提取物，和紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物可用于 預防、治療或改善脂質相關的心血管疾病或肥胖。
[0033] 如本文所使用，術語"脂質相關的心血管疾病"可以共同地指循環血管疾病、心臟 病、腦血管疾病等，具體地選自以下的至少一種:動脈粥樣硬化、高血壓、心肌梗死、中風、高 血脂癥、缺血性心臟病、心律失常、心力衰竭、心絞痛、心內膜炎、心臟瓣膜紊亂、傳導紊亂和 缺血性腦血管疾病，但不限于此。
[0034] 如本文所使用，術語"循環血管疾病"共同地指在多種器官中發生的疾病，所述器 官包括參與體循環的心臟和與肺循環相關聯的其它器官。
[0035] 如本文所使用，術語"心臟病"共同地指與負責人體血液供給的心臟相關的疾病， 包括缺血性心臟病、心律失常、心力衰竭等。缺血性心臟病的代表性實例可以包括心絞痛、 心肌梗死等，并且它們指的是由于降低或阻斷血液流動至心肌連同冠狀動脈疾病的進行而 發生的急性或慢性心臟紊亂。其它心臟病包括心內膜炎、心臟瓣膜紊亂、傳導紊亂、心律失 常、心力衰竭等。具體而言，心力衰竭指的是其中心臟不能充分地將通過靜脈系統返回至心 臟的血液栗出的狀態。
[0036] 如本文所使用，術語"腦血管疾病"指的是由于腦中的血管的問題引起的突然的腦 部功能紊亂而使得人虛脫的疾病，根據發生的類型，其可以細分為由于血管的局部破裂的 顱內出血引起的出血性腦血管疾病和由于腦部血管中的堵塞或血液流動不充足引起的缺 血性腦血管疾病，但不限于此。
[0037] 如本文所使用，術語"肥胖"指的是其中存在過多的體脂的身體狀況，并且從臨床 觀點，它在韓國指具有25或更高的BDI，和根據WHO標準具有30或更高的BDI的狀態。肥胖通 常指他或她的體重超過平均體重時人的身體狀態，但是，它還可以指當身體組成中的脂質 含量相對高，但是身體自身可能沒有過分超重時人的身體狀況。肥胖是成年人和兒童二者 中發生的疾病。
[0038] 如本文所使用，術語"抗肥胖"是包含預防、治療和改善肥胖在內的術語。因此，如 本文所使用，術語"抗肥胖組合物"指的是用于預防或治療如上面所限定的肥胖的藥物組合 物。
[0039]如本文所使用，術語"紫花地丁"指的是屬于堇菜科家族的東北堇菜（Viola mandshurica)或屬于堇菜科家族的陰地堇菜(Viola yezoensis)的全部植物。紫花地丁具 有特殊的氣味，是刺激性的，并且味道是苦的和辛辣的。此外，它具有緩解發燒和解毒的功 效。它包含皂素、黃酮類化合物、蠟酸、不飽和脂肪酸等。但是，紫花地丁提取物對脂質相關 的心血管疾病或肥胖的作用還沒有被確定。
[0040]如本文所使用，術語"桃仁"指的是屬于薔薇科(Rosaceaas)家族的碧桃(Prunus persica)或山桃(Prunus davidiana)的種子（品種)或種子和分枝。它幾乎沒有氣味，是油 狀的，味道是苦的和甜的，并且在沒有被支持(side)的情況下不斷地保持相同的性質。由于 桃仁可以去除淤血，所以它可以被用于治療腹痛、月經受阻、痛經、挫傷、肺膿腫、闌尾炎等。 由于高脂含量，它可以潤滑腸道并且因而對于治療便秘是有效的，并且也可用于治療由于 血熱引起的皮膚刺激;皮膚干燥;雀斑等。其分枝可以緩解突然的深度腹痛。
[0041]如本文所使用，術語"桂枝"指的是屬于樟屬（Cinnamomum sp.)的樹的分枝或樹 皮。具體地，它可以是屬于樟屬的肉桂（Cinnamomum cassia)或越南肉桂（Cinnamomum 1 oureiri i )的分枝或樹皮，但是不限于此。其藥理作用包括抑制大腸桿菌、枯草桿菌 (Bacillus substilis)、金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus)、肺炎鏈球菌 (Streptococcus pneumonia)等的生長，抑制流感病毒、利尿作用等。
[0042]如本文所使用，術語"甘草屬"指的是屬于甘草屬的多年生植物。具體地，甘草屬可 以是光果甘草（glycyrrhiza glabra)、烏拉甘草(glycyrrhiza uralensis)、脹果甘草 (glycyrrhiza inflata)、刺果甘草（glycyrrhiza pallidiflora)、圓果甘草（glycyrrhiza squamulosa)、或glycyrrhiza echinata，但不限于此。在本發明中，甘草屬可以與附連的其 根或莖一起使用，或在剝離它們之后使用。
[0043] 如本文所使用，術語"提取物"指的是使用提取溶劑獲得的藥草的流浸膏，但是不 限于此，并且可以指通過提取獲得的流浸膏、流浸膏的稀釋液或濃縮液、通過干燥流浸膏獲 得的干燥產物、由其獲得的粗提純產品或提純產品。
[0044] 在本發明中，提取物可以使用提取溶劑通過提取獲得，或者通過將分餾溶劑加入 至使用提取溶劑通過提取獲得的提取物通過分餾法獲得。提取溶劑可以不被限制，可以使 用水、有機溶劑、或其混合的溶劑。有機溶劑的實例可以是Ch醇、極性溶劑比如乙酸乙酯或 丙酮、非極性溶劑比如己烷或二氯甲烷、或其混合的溶劑。優選地，可以使用水、&- 4醇、或其 混合的溶劑。在本發明的實施方式中，使用水作為提取溶劑獲得提取物。
[0045] 如本文所使用，術語"紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物"指的是通過提取包 含紫花地丁，和桃仁、桂枝和甘草屬的混合物以1:1至1:5的重量比的組合混合物獲得的提 取物。優選地，重量比在1:2至1:4的范圍內，更優選地1:3,但不限于此。另外，桃仁、桂枝和 甘草屬的混合物可以以1:1:1至6:2:1的重量比混合，具體地以3:2:2的重量比混合，但不限 于此。
[0046] 紫花地丁提取物或包含紫花地丁和桃仁、桂枝和甘草屬的混合物的組合混合物的 提取物可以通過常規的提取方法和本領域中已知的分離和提純方法制備。提取方法的實例 可以包括，但不限于，熱浴提取法、熱水提取法、浸漬法、回流提取法、超聲波提取法等。
[0047] 在本發明中，紫花地丁提取物，或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物通過以 下方法獲得:提取紫花地丁的整個植物，提取桃仁的桃仁樹的種子，提取桂枝的肉桂或越南 肉桂的樹皮，以及提取甘草屬的除了樹皮外的整個植物，但是也可以使用其它部分。
[0048] 在本發明的示例性制備實施方式（制備實施例1)中，本發明的紫花地丁提取物通 過將5至20倍體積的提取溶劑加入到干重的紫花地丁中獲得。桃仁、桂枝和甘草屬的混合物 的提取物通過以下方法獲得:經由熱水提取法提取3:2:2的混合比的干燥的桃仁、桂枝和甘 草屬的混合物。紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物通過以下方法獲得:使用水作為提 取溶劑，提取包含紫花地丁，和桃仁、桂枝和甘草屬的混合物以1:3的重量比（25wt %: 75wt%)的組合混合物。
[0049] 在本發明的示例性實施方式(實施例2)中，施用本發明的紫花地丁提取物至高脂 飲食組一一與沒有治療的高脂飲食組中的那些相比一一顯示從11周齡開始降低小鼠的體 重，而施用紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物一一與僅施用紫花地丁提取物時相 比一一顯示更加顯著地降低了小鼠的體重（圖1和表1)。
[0050] 在本發明的另一示例性實施方式(實施例3)中，紫花地丁提取物顯示在降低體重 和抑制膳食攝取量中是有效的，并且紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物顯示更加顯著 地降低體重和抑制膳食攝取量(表2)。
[0051] 在本發明的進一步示例性實施方式(實施例4)中，檢查了紫花地丁提取物，或紫花 地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物對血脂的作用，并且確認了施用紫花地丁提取物，或桃 仁、桂枝和甘草屬的提取物降低了總膽固醇和LDL-膽固醇的水平同時增加了 HDL-膽固醇的 水平。施用紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物顯示降低血糖、總膽固醇、甘油三酯、 LDL-膽固醇的濃度同時增加 HDL-膽固醇的濃度(表3)。
[0052]在本發明的仍進一步示例性實施方式(實施例5)中，對高脂飲食組施用桃仁、桂枝 和甘草屬的提取物顯示顯著地增加了參與葡萄糖代謝和脂質分解的脂聯素 mRNA的表達，并 且對高脂飲食組施用紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物也顯示增加了脂聯素 mRNA的 表達(圖2)。
[0053]另外，對高脂飲食組施用紫花地丁提取物，或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提 取物顯示增加了 UCP-2mRNA的表達，并且對高脂飲食組施用紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬 的提取物顯示顯著地增加了脂聯素 mRNA的表達(圖3)。
[0054]在本發明的又進一步的示例性實施方式(實施例6)中，與高脂飲食對照組相比，對 高脂飲食組施用紫花地丁提取物，和紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物二者顯示了導 致血壓的降低，因而確認了它們在治療脂質相關的心血管疾病中的作用（圖4)。
[0055]在本發明的又另一進一步示例性實施方式中，給患有動脈粥樣硬化的ApoE基因缺 失小鼠模型施用紫花地丁提取物同時飼喂高脂飲食。另外，給對照組飼喂一般食物并且給 陽性對照組施用阿托伐他汀(實施例7-1)。
[0056] 結果，確認了施用紫花地丁提取物對抑制體重增加;抑制肝臟重量;降低脂肪細胞 的尺寸和肝臟組織中脂肪沉積；降低粥樣硬化病變的發病率；降低總膽固醇、LDL-膽固醇、 甘油三酯和葡萄糖的濃度;增加 AMPK活性;和抑制FAS和SREBP-1蛋白的表達的作用(實施例 7-2到7-7)。
[0057] 如本文所使用，術語"預防"指的是通過施用根據本發明的藥物組合物來抑制或延 遲脂質相關的心血管疾病或肥胖的發生的多種活動，并且術語"治療"指的是通過施用藥物 組合物來改善或有利地改變患有或懷疑患有脂質相關的心血管疾病或肥胖的對象的癥狀 的多種活動。
[0058]本發明的藥物組合物可以進一步包含藥學上可接受的載體。如本文所使用，術語 "藥學上可接受的"指的是對暴露于組合物的細胞或人無毒的特性。上述載體可以是本領域 中已知的任何物質，比如緩沖劑、防腐劑、止痛劑、增溶劑、等滲劑、穩定劑、賦形劑、潤滑劑 等。另外，本發明的藥物組合物可以配制成用于口服施用的制劑，比如粉劑、顆粒劑、片劑、 膠囊劑、懸浮劑、乳劑、糖漿劑、氣霧劑等，外用制劑，栓劑和無菌注射劑。而且，其可以以用 于皮膚的外用制劑的形式使用，比如藥膏劑、洗劑、噴霧劑、貼劑(patch)、霜劑、粉劑、懸浮 劑、凝膠劑或皮膚病學藥物。可以包含在本發明的組合物中的載體、賦形劑和稀釋劑是:乳 糖、葡聚糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、木糖醇、赤蘚糖醇、麥芽糖醇、淀粉、阿拉伯樹膠橡膠、藻 酸鹽、明膠、磷酸鈣、硅酸鈣、纖維素、甲基纖維素、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羥基苯 甲酸甲酯、羥基苯甲丙酯酸、滑石、硬脂酸鎂、礦物油等。對于制劑，可以使用常用的填充劑、 膨脹劑、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、稀釋劑比如表面活性劑或賦形劑。
[0059]用于口服施用的固體制劑包括片劑、丸劑、粉劑、顆粒劑、膠囊劑等。上面的固體制 劑可以通過將至少一種賦形劑一一比如淀粉、碳酸鈣、蔗糖、乳糖、明膠等一一加入到紫花 地丁提取物或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物中來制備。另外，除了簡單的賦形劑 之外，可以使用潤滑劑比如硬脂酸鎂、滑石等。用于口服施用的液體制劑的實例包括懸浮 劑、內服制劑、乳化劑、糖漿劑等，并且除了簡單的稀釋劑比如水和液體石蠟之外，可以使用 多種類型的賦形劑，比如，保濕劑、甜味劑、芳香劑(fragrant)、防腐劑等。用于腸胃外施用 的制劑包括無菌水性溶液、非水性溶劑、懸浮劑、乳化劑、凍干制劑和栓劑。非水性溶劑或懸 浮劑的實例包括丙二醇、聚乙二醇、植物油比如橄欖油、可注射的酯比如乙醇化物等。栓劑 基質的實例包括聚乙二醇(Macrogol)、吐溫61、可可脂、亮葉肉實（laurinum)、甘油明膠等。
[0060] 根據本發明的實施方式的紫花地丁提取物或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提 取物的量可以不被具體限制，但是相對于最終組合物的總重量，優選地包含在〇.〇1到 100wt%，和更優選地1到100wt%的量中。
[0061] 同時，本發明的藥物組合物以藥學有效量被施用。如本文所使用，術語"施用"指的 是通過適合的方法將特定的物質引入對象，并且組合物的施用途徑可以是能夠遞送組合物 至目標組織的任何常規途徑，比如腹膜內施用、靜脈內施用、肌肉內施用、皮下施用、真皮下 施用、口服施用、局部施用、鼻內施用、肺內施用、和直腸內施用，但不限于此。
[0062] 如本文所使用，術語"對象"指的是各種動物，比如大鼠、小鼠、家畜和人，優選地， 包括人的哺乳動物，其已經患有脂質相關的心血管疾病(一種或多種)或肥胖，或者具有患 有其的可能。
[0063] 如本文所使用，術語"藥學有效量"指的是以合理的收益/風險比而不具有任何副 作用的足以治療疾病的量，從而適用于藥物治療，并且考慮到對象的性別、年齡、體重、健康 狀態、疾病的類型、疾病的嚴重程度、藥物活性、藥物敏感性、施用的方法、施用的持續時間、 藥物流出速率、治療持續時間、藥物的組合或包括組合使用的藥物的因素、和醫學領域中公 知的其它因素，本領域技術人員可以容易地確定有效劑量的水平。優選地，本發明的包含紫 花地丁提取物，或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的藥物組合物可以以0. 〇〇〇 1到l〇〇〇mg/kg 的體重，更優選地0.001到500mg/kg的體重的量每日施用。施用可以每日進行一次或者每天 以分劑量進行。
[0064] 由于本發明的紫花地丁提取物或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物使用天 然藥草材料制備，因此它將比一般的合成化合物具有更少的副作用并且因而可被安全地使 用。
[0065] 在本發明的另一方面，提供了用于預防和改善脂質相關的心血管疾病或肥胖的食 品添加劑組合物，其包含紫花地丁提取物或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物作為活 性成分。
[0066] 術語紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬、提取物、脂質相關的心血管疾病、肥胖和預防 與上面所限定的相同。
[0067] 如本文所使用，術語"改善"指的是通過施用上述組合物可改善或有利地改變脂質 相關的心血管疾病或肥胖的癥狀的多種活動。
[0068] 如本文所使用，術語"食品添加劑組合物"意思是意欲加入到任何食品以便提供期 望的作用的組合物。
[0069] 本發明的紫花地丁提取物或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物不僅顯示在 預防或治療脂質相關的心血管疾病或肥胖中是有效的，而且已經顯示是安全的，因為其源 自天然物質。因此，它們可以用于食品添加劑組合物以制造用于預防或改善肥胖的健康功 〇
[0070] 當同樣地用作食品添加劑時，紫花地丁提取物或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的 提取物可以通過加入它們被直接地使用或者可以與其它食品或食品組分組合使用，并且可 以根據常規方法適當地使用。活性成分的量可以根據它們的預期用途(預防、健康或治療處 理)適當地確定，并且從食品營養觀點考慮可接受的輔助食品添加劑(一種或多種)可以被 進一步添加至其。由于紫花地丁提取物或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物源自天然 物質，因此確保了它們的安全性，并且因而待添加至食品添加劑組合物的量可以不被具體 地限制，但是相對于總組合物的重量，優選地在0.001到1 OOwt %，更優選地0.01到80wt %的 范圍內。另外，組合物可以進一步包含其它組分，該其它組分常規地用于食品組合物以改善 氣味、味道、視覺風味等，例如，維生素六、(：、0』、81、82、86、812、煙酸、生物素、葉酸、泛酸等。 另外，可以包含礦物質，比如Zn、Fe、Ca、Cr、Mg、Mn和Cu。另外，可以包含氨基酸，比如賴氨酸、 色氨酸、半胱氨酸和纈氨酸。另外，可以添加食品添加劑，比如防腐劑（山梨酸鉀、苯甲酸鈉、 水楊酸、去氫醋酸鈉等）、殺菌劑(漂白粉和高級漂白粉、次氯酸鈉等）、抗氧化劑(丁基羥基 茴香醚(BHA)、丁基羥基甲苯(BHT)等）、著色劑（焦油色等）、固色劑（亞硝酸鈉等）、漂白劑 (亞硫酸鈉）、調味品(MSG、谷氨酸鈉等）、甜味劑（sweetenre)(甘素、環己烷氨基磺酸鹽、糖 精、鈉等）、香料(香草醛、內酯等）、膨松劑(礬、D-酒石酸氫鉀等）、增強劑、乳化劑、增稠劑 (衆糊）、成膜劑、膠基劑(gum base agent)、消泡劑、溶劑、改進劑等。添加劑可以根據食品 類型選擇，并且以適當的量使用。
[0071 ]本發明的食品添加劑組合物 其為在常規食品的制造期間加入的添加劑 可以用于制造在預防或改善脂質相關的心血管疾病或肥胖中有效的食品。含有食品添加劑 組合物的食品可以與本領域中公知的術語比如功能食品、健康功能食品等可交換地使用。
[0072] 如本文所使用，術語"功能食品"指的是使用根據韓國法律號6727對于健康功能食 品具有有用功能的材料(一種或多種)或成分(一種或多種)制造或加工的食品，并且如本文 所使用，術語"功能"指的是為了獲得對健康相關用途一一比如關于人體的結構和功能調節 營養物或生理作用一一獲得有用效果的目的攝取的活動。
[0073] 另外，如本文所使用，術語"健康功能食品"指的是為了健康補充的目的經由作為 原材料的特定組分或食品材料中包含的特定組分的提取、濃縮、提純、混合等制造或加工的 食品，和被設計和加工以通過上述組分對活的對象充分地展示生物調節功能一一比如生物 防御和生物節律、疾病的預防和痊愈等一一的食品。
[0074] 其中可以添加本發明的組合物的食品類型可以包括多種食品比如專用營養食品 (例如，牛奶配方、嬰兒配方等）、加工過的肉制品、魚肉制品、豆腐、淀粉凍、面條(例如，拉 面、細面條等）、健康補充食品、調味品（例如，醬油、豆瓣醬、紅辣椒醬、混合的豆瓣醬等）、調 味醬、糖果（例如，零食）、乳制品（例如，發酵乳、奶酪等）、其它加工食品、韓國泡菜 (kimchi)、腌制食品（各種韓國泡菜、咸菜等）、飲品（例如，水果、蔬菜飲料、豆漿、發酵飲料 等）、天然調味品（例如，拉面湯等)等。
[0075] 為了完成上面確定的目標，在本發明的另一方面，提供了用于治療脂質相關的心 血管疾病或肥胖的方法，其包括施用上述藥物組合物給需要其的對象。
[0076] 術語對象、施用、脂質相關的心血管疾病、肥胖和治療與上面限定的相同。
[0077]發明的模式
[0078] 將參照實施例在下文進一步詳細地解釋本發明，但是，公開它們是為了說明性目 的，并且不應當被解釋為限制本發明的范圍。
[0079] 制備實施例1.提取物的制備
[0080] 紫花地丁購買自Omniherb Co.(大邱，韓國），并且通過加入10倍體積的水經由熱 水提取法進行提取。桃仁、桂枝和甘草屬購買自Kwangmyungdang Medicinal Herbs(蔚山， 韓國）。干燥的藥草材料以桃仁、桂枝和甘草屬之間3:2:2的重量比進行混合，并經由熱水提 取法進行提取。紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物通過以下方法獲得:使用水作為提 取溶劑，提取包含重量比為1:3(25wt % : 75wt % )的紫花地丁，和桃仁、桂枝和甘草屬的混合 物的組合混合物。
[0081 ] 實施例1.構建高脂飲食(HFD)-誘導動物模型
[0082] 在從杰克遜實驗室（Jackson Laboratory)(巴爾港，緬因州，美國）購買雄性 C57bl/6小鼠之后使用它們。在它們中，健康的10周齡小鼠在無特定病原體(SPF)條件下經 歷維持實驗，并且允許它們自由地攝取食物和水。在從Central Lab .Animal Inc.(首爾，韓 國）購買由蛋白質（20%)、糖類(20%)和脂肪（60%)組成的高脂飲食(HFD) (Rodent diet D12492，Research Diets，New Brunswick，NJ，USA)之后使用它。
[0083]使實驗動物適應基本飼料(AIN-76A飲食)兩周，然后從8周齡開始共施用ΗΠ )飲食 和藥草藥物持續7周。實驗組一共有6組，包括：施用生理鹽水同時飼喂一般飼料的正常組 (正常飲食）、施用生理鹽水同時飼喂HFD的對照組(HFD)、施用賽尼可同時飼喂HFD的陽性對 照組（15.6mg/kg)、和施用藥物(200mg/kg)同時飼喂HFD的3個組。所有測試材料都懸浮在生 理鹽水中并使用小鼠探子每日同時口服施用。
[0084]實施例2.紫花地丁提取物，或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物對降低體重 和抑制食物攝取的作用
[0085]實驗動物的體重和飼料攝取的量使用電子秤(GP5202，Sartorius，德國）測量，分 析，并且基于體重增加相對于飼料攝取的量的比率計算飼料效率比(EFR)。
[0086] 施用紫花地丁提取物(HFD-紫花地丁）的ΗΠ )組一一與HFD-對照組相比一一顯示從 11周齡開始它們的體重的降低。施用紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物(HFD-紫花地 丁+(桃仁、桂枝、甘草屬））的ΗΠ )組一一與僅施用紫花地丁提取物的組相比一一顯示它們體 重增加的顯著降低(P<〇.〇5)(圖1)。
[0087] [表1]
[0088]
[0089] ###:ρ<0·001與正常飲食相比
[0090] *卬<0.05與冊0_對照組相比
[0091] #卬<0.01與冊0-對照組相比
[0092] 林* :p<〇 · 001與HFD-對照組相比
[0093] 如上面的表1中所見，與正常飲食組（正常組）相比，ΗΠ )組(HFD-對照組）的體重增 加是顯著的，并且施用紫花地丁提取物的ΗΠ )組(HFD-紫花地丁）顯示體重增加的顯著降低 (p<0.05)。另外，施用紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物的ΗΠ )組(HFD-紫花地丁+(桃 仁、桂枝、甘草屬））顯示體重增加的顯著降低。
[0094]另外，與HFD組相比，施用紫花地丁提取物的HFD組(HFD-紫花地丁）顯示了FER的顯 著降低，并且施用紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物的ΗΠ )組(HFD-紫花地丁+(桃仁、 桂枝、甘草屬））顯示了 FER的更顯著降低(p<0.05)(表1)。
[0095]從上面的結果，確認了紫花地丁提取物在降低體重和抑制膳食攝取的量方面是有 效的，并且紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物與紫花地丁提取物相比在降低體重和抑 制膳食攝取的量方面是更有效的。 _6] 實施例3.紫花地丁提取物，或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物對于降低體 脂重量的作用
[0097]在分析了實施例1的結果之后，處死小鼠并且比較它們腹部脂肪的量。結果，如表2 中所見，ΗΠ )組(HFD-對照組）顯示了皮下脂肪、附睪周圍的脂肪組織和肝臟組織的重量的增 加。施用紫花地丁提取物的組(HFD-紫花地丁）顯示了皮下脂肪、腸道脂肪組織和肝臟組織 的重量的顯著降低。
[0098]另外，施用紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物的HFD組(HFD-紫花地丁+(桃 仁、桂枝、甘草屬））與施用紫花地丁提取物的組相比顯示了皮下脂肪、腸道脂肪組織和肝臟 組織的重量的更加顯著的降低。
[0099] [表 2]
[0100]
[0101] ###:ρ<0·001與正常飲食相比
[0102] *卬<0.05與冊0-對照組相比
[0103] #卬<0.01與冊0_對照組相比
[0104] 林* :p<0 · 001與HFD-對照組相比
[0105] 實施例4.紫花地丁提取物，或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物對血液中脂 質的作用
[0106] 將從小鼠收集的血液樣品在室溫下放置30分鐘，并在3000rpm下離心15分鐘以獲 得血清。經由血液生化分析儀測量并分析血清中葡萄糖、總膽固醇、甘油三酯、LDL和HDL的 含量(表3) 〇
[0107] [表 3]
[0108]
[0109] ##:ρ<0·01與正常飲食相比
[0110] ###:ρ<0·001與正常飲食相比
[0111] *卬<0.05與冊0_對照組相比
[0112] **卬<0.01與冊0_對照組相比
[0113] *** :ρ<0 · 001 與 HFD-對照組相比
[0114] 血液學指數的分析揭示了與正常飲食組(正常組)相比，HFD組(HFD-對照組）顯示 了血液中總膽固醇、LDL-膽固醇和甘油三酯的濃度的更高的增加，并且施用紫花地丁提取 物或桃仁、桂枝和甘草屬的提取物的ΗΠ )組顯示了總膽固醇和LDL-膽固醇的濃度的降低同 時顯示了HDL-膽固醇的濃度的增加(ρ<0.05)。
[0115]另外，當ΗΠ )組施用紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物時，葡萄糖、總膽固醇、 甘油三酯、和LDL-膽固醇、和甘油三酯的濃度顯著地降低同時HDL-膽固醇的濃度增加 (ρ < 0.05)〇
[0116]實施例5.紫花地丁提取物或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物對脂聯素和 線粒體解偶聯蛋白-2(UCP-2)基因的表達的增加的作用
[0117] 使用HFD-誘導的小鼠的腸道脂肪組織經由實時PCR進行分析，并且結果揭示了施 用紫花地丁提取物(HFD-紫花地丁)或桃仁、桂枝和甘草屬的提取物的ΗΠ )組顯示了參與葡 萄糖代謝和脂肪分解的脂聯素的mRNA表達的顯著增加，并且施用紫花地丁、桃仁、桂枝和甘 草屬的提取物的HFD組(HFD-紫花地丁+(桃仁、桂枝、甘草屬））也顯示了脂聯素的mRNA表達 的增加(圖2)。
[0118] 施用紫花地丁提取物(HFD-紫花地丁）或桃仁、桂枝和甘草屬的提取物的HFD組顯 示了UCP-2的mRNA表達的增加，并且施用紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物的ΗΠ )組 (HFD-紫花地丁+(桃仁、桂枝、甘草屬））也顯示了 UCP-2的mRNA表達的顯著增加（圖3)。
[0119] 實施例6.紫花地丁提取物和紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物對降低血壓 的作用
[0120] 經由CODA非侵入性血壓系統(Kent Scientific Co·，1'〇1'1'；[]^1:〇11，0'，1]34)測量小 鼠的尾部的血壓。總共進行4個測量，并且表示為收縮壓和舒張壓之間的平均血壓(Hg)(圖 4)。施用紫花地丁提取物(HFD-紫花地丁)和紫花地丁、桃仁、桂枝、甘草屬的提取物(HFD-紫 花地丁+(桃仁、桂枝、甘草屬））的兩個組與HFD-對照組相比均顯示了血壓的更高的降低。 [0121] 實施例7.紫花地丁提取物對動脈粥樣硬化的抑制作用
[0122] 實施例7-1.構建患有HFD誘導的動脈粥樣硬化的動物模型
[0123] 作為患有動脈粥樣硬化的實驗模型動物，6周齡的ApoE基因缺失小鼠由杰克遜實 驗室（巴爾港，緬因州，美國）提供并使其適應2周，同時自由地供給基本飼料（IN-76A飲食） 和水。在它們適應之后，在從Central Lab.Animal Inc.(首爾，韓國）購買ΗΠ )飼料之后使用 它們，并且飼料包含45 %的脂肪和0.15 %的膽固醇。
[0124] 從8周齡開始，使實驗動物經歷HFD和藥物二者的組合施用16周。實驗組總共為4 組，包括:施用生理鹽水同時飼喂一般飼料的正常組，施用生理鹽水同時飼喂HFD的ΗΠ )組， 施用藥物同時飼喂HFD的藥物治療組（東北堇菜(v.mandshurica)，150mg/kg)，和施用作為 藥物的阿托伐他汀同時飼喂ΗΠ )的陽性對照組。所有測試材料懸浮在生理鹽水中并經由小 鼠探子每日在相同的預定時間口服施用。
[0125] 實施例7-2.紫花地丁提取物對抑制體重增加的作用
[0126]在相同的預定時間使用電子秤測量實驗動物的體重，每周一次。結果，確認了與 HFD組相比，施用紫花地丁（東北堇菜）的ΗΠ )組顯示了從第3周開始對體重增加的更加顯著 地抑制，并且具體地，顯示了與用阿托伐他汀治療的陽性對照組相比對體重增加的持續抑 制(ρ<0·05)(圖 5)。
[0127] 實施例7-3.紫花地丁提取物對抑制肝臟重量增加的作用
[0128]將施用紫花地丁提取物16周的小鼠尸體解剖，并且測量由其獲得的它們的肝臟組 織的重量。結果，確認了與對照組相比，ΗΠ )組顯示肝臟重量的增加，但是施用紫花地丁（東 北堇菜)提取物的藥物治療組一一雖然飼喂HFD-一的肝臟重量與飼喂一般飼料的正常組 的肝臟重量相似(Ρ<〇.〇5)(圖6)。因此，確認了紫花地丁提取物在抑制肝臟重量增加中是 有效的。
[0129] 實施例7-4.紫花地丁提取物對抑制肝臟組織中的脂質沉積的作用
[0130]將施用紫花地丁提取物以及ΗΠ )持續16周的實驗小鼠解剖，并將由其獲得的肝臟 組織切成6μπι厚的樣本，并經由脂質專用染色的蘇木精-伊紅染色和紅油0染色方法檢查肝 臟組織中脂質沉積的存在。結果，確認了與正常組的那些相比，在飼喂ΗΠ )的小鼠的肝臟組 織中存在脂質沉積的發展，并且還確認了施用紫花地丁（東北堇菜）的藥物治療組的肝臟組 織中脂肪細胞的尺寸和脂質沉積降低(ρ<〇.〇5)(圖7)。
[0131] 實施例7-5.紫花地丁提取物對改善血脂的作用
[0132]將施用紫花地丁提取物以及ΗΠ )持續16周的實驗小鼠解剖，并經由快速冷凍固定 將由其獲得的動脈組織切成6μπι厚的樣本，并經由紅油0染色方法檢查在血管中形成的粥樣 硬化病變的狀態。結果，確認了與正常組的那些相比，在飼喂HFD的小鼠的動脈組織中存在 脂質沉積的發展，并且還確認了由于施用紫花地丁（東北堇菜)提取物的藥物治療組中的脂 質沉積降低，動脈壁的厚度降低(Ρ<〇.〇5)(圖8)。因此，確認了紫花地丁提取物在降低粥樣 硬化病變的產生中是有效的。
[0133] 實施例7-6.紫花地丁提取物對改善血脂的作用
[0134] 將從小鼠收集的血液樣品在室溫下放置30分鐘，并在3000rpm下離心15分鐘以獲 得血清。經由血液生化分析儀測量血清中葡萄糖、總膽固醇、甘油三酯、LDL和HDL的含量(表 4)〇
[0135] [表 4]
[0138] ##:p<0.01與正常飲食相比
[0139] ###:ρ<0·001與正常飲食相比
[0140] *卬<0.05與冊0相比
[0141] #:ρ<〇·〇1 與 HFD 相比
[0142] ***:ρ<〇·〇〇1 與 HFD 相比
[0143] 血液學指數的分析揭示了 ΗΠ )組與正常飲食(對照組)相比具有血液中更高濃度的 總膽固醇、LDL-膽固醇、甘油三酯和葡萄糖，同時具有血液中更低濃度的HDL-膽固醇。施用 紫花地丁提取物的ΗΠ )組顯示了血液中總膽固醇、LDL-膽固醇、甘油三酯和葡萄糖的濃度的 降低(p<0.05)。因此，確認了紫花地丁提取物在通過改善血脂抑制動脈粥樣硬化中是有效 的。
[0144] 實施例7-7.紫花地丁提取物對抑制參與肝臟組織中脂質合成的因子的作用
[0145] 在肝臟組織的內臟切除術之后，測量AMP活化的蛋白激酶(AMPK)的活性--其在 葡萄糖和脂質代謝中起重要作用，并且參與測量脂質合成的因子的表達量。結果，與正常組 相比，飼喂ΗΠ )的小鼠顯示了AMPK活性的降低和脂肪酸合成酶(FAS)、固醇調節元件-結合蛋 白（SREBP-1)的表達的增加。同時，紫花地丁提取物（東北堇菜）顯示了對FAS和SREBP-1蛋白 的表達以及AMPK活性的增加的抑制，并且因而確認為在抑制動脈粥樣硬化中是有效的（圖 9) 〇
[0146] 從上述可知，本發明所屬領域的技術人員將能夠理解本發明可以以其它具體的形 式體現而不改變本發明的技術概念或基本特征。就這一點而言，本文公開的示例性實施方 式僅出于說明性目的并且不應當被解釋為限制本發明的范圍。相反，本發明意欲不僅覆蓋 示例性實施方式而且覆蓋各種替代方案、修改、等價形式以及可以包含在由所附權利要求 書限定的本發明的精神和范圍內的其它實施方式。
【主權項】
1. 藥物組合物，其包含紫花地丁提取物，或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物，用 于預防或治療脂質相關的心血管疾病或肥胖。2. 權利要求1所述的藥物組合物，其中所述提取物通過使用選自以下的溶劑提取獲得： 水、&-4醇、乙酸乙酯、丙酮、己烷、二氯甲烷和其混合的溶劑。3. 權利要求1所述的藥物組合物，所述提取物通過使用水作為溶劑提取獲得。4. 權利要求1所述的藥物組合物，其中所述提取物是熱水提取物。5. 權利要求1所述的藥物組合物，其中所述紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物通 過以下方法獲得:提取包含1:1至1:5的重量比的紫花地丁，和桃仁、桂枝和甘草屬的混合物 的組合混合物。6. 權利要求1所述的藥物組合物，其中所述紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提取物通 過以下方法獲得:提取包含1:3的重量比的紫花地丁，和桃仁、桂枝和甘草屬的混合物的組 合混合物獲得。7. 權利要求1所述的藥物組合物，其中所述提取物通過抑制由于高脂飲食(HFD)引起的 體重和體脂的增加，以及降低血液中的甘油三酯、總膽固醇和低密度脂蛋白（LDL)-膽固醇 的水平，同時增加血液中高密度脂蛋白（HDL)-膽固醇的水平來改善肥胖。8. 權利要求1所述的藥物組合物，其中所述脂質相關的心血管疾病選自以下的至少一 種:動脈粥樣硬化、高血壓、心肌梗死、中風、高血脂癥、缺血性心臟病、心律失常、心力衰竭、 心絞痛、心內膜炎、心臟瓣膜紊亂、傳導紊亂和缺血性腦血管疾病。9. 食品添加劑組合物，其包含紫花地丁提取物，或紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提 取物，用于預防或改善脂質相關的心血管疾病或肥胖。10. 權利要求9所述的食品添加劑組合物，其中所述提取物通過使用選自以下的溶劑提 取獲得:水、&-4醇、乙酸乙酯、丙酮、己烷、二氯甲烷和其混合的溶劑。11. 權利要求9所述的食品添加劑組合物，其中所述提取物是熱水提取物。12. 權利要求9所述的食品添加劑組合物，其中所述紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提 取物通過以下方法獲得:提取包含1:1至1:5的重量比的紫花地丁，和桃仁、桂枝和甘草屬的 混合物的組合混合物獲得。13. 權利要求9所述的食品添加劑組合物，其中所述紫花地丁、桃仁、桂枝和甘草屬的提 取物通過以下方法獲得:提取包含1:3的重量比的紫花地丁，和桃仁、桂枝和甘草屬的混合 物的組合混合物獲得。14. 權利要求9所述的食品添加劑組合物，其中所述脂質相關的心血管疾病選自以下的 至少一種：動脈粥樣硬化、高血壓、心肌梗死、中風、高血脂癥、缺血性心臟病、心律失常、心 力衰竭、心絞痛、心內膜炎、心臟瓣膜紊亂、傳導紊亂和缺血性腦血管疾病。15. 用于治療脂質相關的心血管疾病或肥胖的方法，其包括施用權利要求1所述的藥物 組合物至需要其的對象。
【文檔編號】A61K36/54GK105916514SQ201480071171
【公開日】2016年8月31日
【申請日】2014年10月27日
【發明人】成尹映, 金鎬京, 金東善, 崔高也
【申請人】韓國韓醫學研究院