用于治療癌癥的組合制劑的制作方法

用于治療癌癥的組合制劑的制作方法
【專利摘要】描述了用于治療癌癥的組合制劑。所述組合制劑包含：(a)能夠與MHC II類分子結合的LAG?3蛋白或其衍生物；和(b)抗腫瘤劑，其中所述抗腫瘤劑是基于鉑的抗腫瘤劑或拓撲異構酶I抑制劑。還描述了使用所述組合制劑治療癌癥的方法。
【專利說明】用于治療癌癥的組合制劑
[0001] 本發明涉及組合制劑和藥物組合物以及其作為藥物，特別是用于治療癌癥之藥物 的用途以及用于治療癌癥的方法。
[0002] 可以用一種或更多種細胞毒性抗腫瘤藥物（"化學治療劑"）作為標準化方案的一 部分治療癌癥。化學療法的目的可以是治愈患者或延長壽命或減輕癥狀。
[0003] 常規的化學治療劑通過殺傷快速分裂的細胞，利用大多數癌細胞的一種特性起作 用。然而，化學療法還損害在正常情況下快速分裂的細胞，例如在骨髓、消化道和毛囊中的 細胞。這引起化學療法最常見的副作用:骨髓抑制(血細胞的產生減少，因此也引起免疫抑 制）、粘膜炎(消化道內襯的炎癥)和禿頭癥(脫發）。
[0004] 需要提供更有效的癌癥治療以及提供副作用減少的有效的癌癥治療。
[0005] 淋巴細胞活化基因3(lymphocyte activation gene 3，LAG_3)是具有四個胞外Ig 超家族結構域的CD4同源I型膜蛋白。與CD4類似，LAG-3在T細胞的表面寡聚化并且以比CD4 顯著更高的親和力與抗原呈遞細胞(APC)上的MHC II類分子結合。LAG-3在活化的CD4陽性 和⑶8陽性Τ淋巴細胞上表達，在那里其與在細胞表面處的⑶3-TCR復合體締合并負調控信 號轉導。因此，它負調控Τ細胞的增殖、功能和穩態。
[0006] 已顯示LAG-3衍生的可溶性融合蛋白以比⑶4高得多的親合力與MHC II類分子結 合以提高MHC II類陽性巨噬細胞和未成熟樹突細胞在體外誘導Τ細胞應答的能力，并增加 病毒和腫瘤特異性細胞毒性Τ細胞的體外誘導。因此，LAG-3融合蛋白被用作全身免疫刺激 劑以及作為癌癥疫苗的佐劑。
[0007] W0 2009/044273描述了使用重組LAG-3蛋白或其衍生物以用于加強單核細胞介導 的免疫應答，特別是誘導血液中單核細胞數目的提高以用于治療癌癥。
[0008] 現在已經出人意料地發現，施用能夠與MHC II類分子結合的LAG-3蛋白或其衍生 物，以及基于鉬的抗腫瘤劑(anti-neoplastic agent)或拓撲異構酶I抑制劑對于減少腫瘤 生長聚有協同作用。
[0009] 根據本發明提供了組合制劑，其包含：（a)能夠與MHC II類分子結合的LAG-3蛋白 或其衍生物;和(b)抗腫瘤劑，其中所述抗腫瘤劑是基于鉑的抗腫瘤劑或拓撲異構酶I抑制 劑。
[0010] 本文使用的術語"組合制劑"是指"成套藥盒(kit of parts)"，在該意義上如上定 義的組合組分(a)和(b)可獨立地給藥或通過使用具有不同量的組合組分(a)和(b)的不同 固定組合給藥。所述組分可以同時施用或相繼施用。如果組分相繼施用，則優選地選擇施用 的時間間隔以使得組合使用所述組分的治療效果高于僅使用組合組分(a)和(b)中任一種 將獲得的效果。
[0011] 組合制劑的組分可以以一個組合單位劑型或者作為組分(a)的第一單位劑型和分 開的組分(b)的第二單位劑型存在。在組合制劑中待施用的組合組分(a)與組合組分(b)總 量的比可以變化，例如以應對待治療的患者亞群的需求或單個患者的需求，這可能是由于， 例如患者的特定疾病、年齡、性別或體重。
[0012] 優選地，存在至少一種有益效果，例如增強抗腫瘤劑的效果，或相互增強組合組分 (a)和(b)的效果，例如與有效劑量的組合組分(a)和(b)的一個或兩個相比，大于疊加效應、 額外的有利效果、較小的副作用、較低的毒性或組合的治療效果，以及非常優選地組合組分 (a)和(b)的協同作用。
[0013]本發明的組合制劑可作為用于向哺乳動物（優選人)施用的藥物組合制劑提供。 LAG-3蛋白或其衍生物可任選地與可藥用載體、賦形劑或稀釋劑一起提供，和/或抗腫瘤劑 可任選地與可藥用載體、賦形劑或稀釋劑一起提供。
[0014] LAG-3或其衍生物可以以摩爾當量為0 · 25mg至30mg、lmg至30mg或6mg至30mg的 LAG-3衍生物LAG-3Ig融合蛋白MP321的劑量存在。已示出每次皮下（s.c.)注射6mg至30mg 劑量的頂P321是安全的并基于在轉移性腎細胞癌患者中獲得的藥代動力學數據的結果提 供可接受的全身性暴露。在注射有劑量超過6mg的頂P321的患者中在皮下（s. c)注射后至少 24小時獲得高于lng/ml的頂P321的血濃度。
[0015] 本發明的組合制劑可包含多個劑量的LAG-3蛋白或其衍生物。
[0016] 抗腫瘤劑的劑量將取決于所使用的特定抗腫瘤劑。
[0017] 基于鉑的抗腫瘤劑是在癌癥化學療法中使用的鉑的配位絡合物。認為它們在DNA 中形成抑制DNA修復和/或DNA合成的交聯，從而導致細胞死亡。使用鉑化合物的癌癥治療的 主要劑量限制性副作用是外周神經毒性。基于鉑的抗腫瘤劑的實例包括順鉑、卡鉑、奧沙利 鉑、賽特鉑、吡鉑、奈達鉑和Triplatin。
[0018] 卡鉑或順式-二氨（環丁烷-1，1-二羧酸酯-0，0')鉑（II)(商品名Paraplatin和 Paraplatin-AQ)用于針對一些形式的癌癥(主要是卵巢癌、肺癌、頭頸癌以及子宮內膜癌、 食道癌、膀胱癌、乳腺癌和宮頸癌；中樞神經系統或生殖細胞腫瘤;骨原性肉瘤，以及作為用 于干細胞或骨髓移植物的制劑）。與其母體化合物順鉑相比，它大大降低了副作用。卡鉑給 藥的指南可從美國食品和藥物管理局(FDA)獲得。
[0019] 奧沙利鉑或[(1R，2R)_環己烷-1，2-二胺（乙二酸-0,(/ )鉑（11)(商品名Eloxatin) 包含正方形平面鉑（II)中心。與順鉑和卡鉑相反，奧沙利鉑包含二齒配體1，2-環己二胺代 替二個單齒氨合物配體。它還具有二齒草酸鹽基團。奧沙利鉑具有針對結腸癌的抗腫瘤活 性。奧沙利鉑通過在DNA中形成鏈內和鏈間交聯而發揮功能。在DNA中的交聯阻止DNA復制和 轉錄，從而導致細胞死亡。在輔助治療情形下奧沙利鉑的推薦劑量為每兩周靜脈內重復注 射85mg/m 2,進行12個周期。在治療轉移性結直腸癌中奧沙利鉑的推薦劑量為每兩周靜脈內 重復注射85mg/m2，直至出現疾病進展或不可接受的毒性。
[0020] 拓撲異構酶抑制劑是設計來干擾拓撲異構酶(拓撲異構酶I和II)之作用的藥劑， 拓撲異構酶是在正常細胞周期中通過催化DNA鏈的磷酸二酯骨架斷裂和再連接而控制DNA 結構變化的酶。認為拓撲異構酶抑制劑阻斷細胞周期的連接步驟，從而產生損害基因組完 整性的單鏈和雙鏈斷裂。這些斷裂的引入隨后導致凋亡和細胞死亡。
[0021] 人DNA拓撲異構酶I (Top 1)是在復制和轉錄期間使DNA超螺旋松弛的必需酶。Topi 產生DNA單鏈斷裂，這使得經切割的鏈繞雙螺旋軸旋轉。Topi還將經切割的鏈重新連接成重 新建立的完整雙鏈DNAJopl-DNA中間體(稱為切割復合物)是瞬時的且在正常情況下以低 水平存在。然而，用Topi抑制劑(例如喜樹堿)的治療穩定了可切割復合物、阻止DNA再連接 并誘導致命的DNA鏈斷裂。癌細胞對這些DNA損傷的產生選擇性地敏感。
[0022] 拓撲替康（topotecan)或（S)-10_[(二甲基氨基）甲基]-4-乙基_4,9_二羥基-1H- 吡喃并[3'，4' ：6,7]氮茚并[l，2-b]喹啉-3，14(4H，12H)_二酮單鹽酸鹽(商品名:Hycamtin) 是拓撲異構酶I抑制劑類的化學治療劑。它是喜樹堿的水溶性衍生物。它以鹽酸鹽的形式用 于治療卵巢癌和肺癌以及其他癌癥類型。拓撲替康是喜樹堿的半合成衍生物。喜樹堿是從 喜樹(Camptotheca acuminata)的樹皮中提取的一種天然產物。拓撲異構酶I是通過打開單 鏈斷裂釋放DNA中扭轉應變(torsional strain)的核酶。一旦拓撲異構酶I產生單鏈斷裂， 貝IJDNA可以在前進的復制叉前面旋轉。拓撲替康插入DNA堿基之間。當DNA復制機器到達拓撲 替康插入位點時，這種插入破壞了DNA復制機器。這種破壞阻止DNA復制，并最終導致細胞死 亡。哺乳動物細胞不能有效地修復這些雙鏈斷裂。該過程引起DNA鏈斷裂，從而導致凋亡。 [00 23] Hycamtin膠囊的推薦劑量為2.3mg/m2身體表面積/天，連續施用五天，在每個療程 開始之間間隔3周。
[0024] 另一種喜樹堿衍生物伊立替康(CPT11)被批準用于治療結腸癌。
[0025] 本發明的組合制劑可包含多個劑量的抗腫瘤劑。
[0026] LAG-3蛋白可以是分離的天然或重組LAG-3蛋白。LAG-3蛋白可包含來自任何合適 物種的LAG-3蛋白（例如靈長類動物或鼠 LAG-3蛋白，但優選人LAG-3蛋白）的氨基酸序列。在 Huard等(Proc · Nat 1. AcacL Sci · USA，11:5744-5749，1997)的圖 1 中提供了 人和鼠 LAG-3蛋白 的氨基酸序列。在下圖13中重復了人LAG-3蛋白的序列（SEQ ID N0:1)。在Huard等的圖1中 還鑒定了人LAG-3的四個胞外Ig超家族結構域(D1、D2、D3和D4)的氨基酸序列，其在以下氨 基酸殘基處：1-149(D1) ;150-239(D2);240-330(D3)4P331-412(D4)。
[0027] LAG-3蛋白的衍生物包括能夠與MHC II類分子結合的LAG-3蛋白的片段、變體或突 變體。已知LAG-3蛋白的幾種衍生物能夠與MHC I I類分子結合。在Huard等 (Proc·Natl .Acad· Sci ·USA，11:5744-5749，1997)中描述了這樣的衍生物的許多實例。該文 件描述了在LAG-3蛋白上MHC II類結合位點的特征。描述了用于制備LAG-3突變體的方法以 及用于確定LAG-3突變體與II類陽性Daudi細胞結合能力的定量細胞粘附測定。測定了 LAG-3的幾個不同突變體與MHC II類分子的結合。一些突變能夠減少II類結合，而其他突變則提 高LAG-3對II類分子的親和力。許多對于結合MHC II類蛋白所必需的殘基在LAG-3 D1結構 域之大的30個氨基酸額外環結構的堿基處簇集。人LAG-3蛋白D1結構域之額外環結構的氨 基酸序列為圖 13中加下劃線的序列GPPAAAPGHPLAPGPHPAAPSSWGPRPRRY(SEQ ID N0:2)。
[0028] LAG-3蛋白衍生物可包含人LAG-3D1結構域的30個氨基酸的額外環序列或具有一 個或更多個保守氨基酸替換的這樣的序列的變體。所述變體可包含與人LAG-3D1結構域的 30個氨基酸的額外環序列具有至少70%、80%、90%或95%氨基酸同一性的氨基酸序列。
[0029] LAG-3蛋白的衍生物可包含LAG-3蛋白（優選人LAG-3蛋白）的結構域D1和任選結構 域D2的氨基酸序列。
[0030] LAG-3蛋白的衍生物可包含與LAG-3蛋白（優選人LAG-3蛋白）的結構域D1或結構域 D1和D2具有至少70%、80%、90%或95%氨基酸同一性的氨基酸序列。
[0031] LAG-3蛋白的衍生物可包含LAG-3蛋白（優選人LAG-3蛋白）的結構域D1、D2、D3和任 選D4的氨基酸序列。
[0032] LAG-3蛋白的衍生物可包含與LAG-3蛋白（優選人LAG-3蛋白）的結構域D1、D2和D3 或結構域D1、D2、D3和D4具有至少70%、80%、90%或95%氨基酸同一性的氨基酸序列。 [0033]氨基酸序列之間的序列同一性可通過比較序列的比對來確定。當被比較的序列中 的等效位置被相同的氨基酸占據時，那么該分子在該位置是相同的。將比對評分為同一性 百分比，其是在被比較序列共有位置上相同氨基酸數目的函數。當比較序列時，最佳比對可 能需要將空位引入一個或更多個序列中以考慮所述序列中可能的插入和缺失。序列比較方 法可采用空位罰分以使得對于所比較序列中相同數目的相同分子具有盡可能少空位的序 列比對(這反映了兩個比較序列之間更高的相關性)將比具有許多空位的序列實現更高的 得分。考慮到空位罰分，最大百分比同一性的計算包括產生最佳比對。
[0034]用于進行序列比較的合適的計算機程序可從商業和公共部門廣泛獲得。實例包括 MatGat(Campanel la等，2003，BMC Bio informatics 4: 29;可從 http: //bit incka · com/ ledion/matgat獲得程序）、Gap(Needleman&Wunsch，1970, J.Mol .Biol .48:443-453)、FASTA (Altschul等，1990，J.Mol ·Biol · 215:403-410;可從http://www. ebi .ac ·uk/fasta獲得程 序）、Clustal W 2.0 和 X 2.0(Larkin 等，2007，Bioinformatics 23:2947-2948;可從 http: //www · ebi · ac · uk/tools/clustalw2獲得程序）和EMB0SS成對比對算法（Needleman& Wunsch，1970，同上；Kruskal，1983，在：Time warps,string edits and macromolecules： the theory and practice of sequence comparison，Sankoff&Kruskal(編輯），第1-44 頁，Addison Wesley;可從http://www. ebi .ac .uk/tools/emboss/align獲得程序）。所有程 序都可以使用默認參數運行。
[0035]例如，可以使用EMBOSS成對比對算法的"needle"法進行序列比較，當考慮兩個序 列的整個長度時，其決定了這兩個序列的最佳比對(包括空位)并提供百分比同一性得分。 氨基酸序列比較（"蛋白質分子"選項）的默認參數可能是空位延伸罰分:〇. 5,空位開放罰 分：10.0,矩陣：Blosum 62〇
[0036] 序列比較可以在參照序列的全長上進行。
[0037] LAG-3蛋白衍生物可任選地通過接頭氨基酸序列與免疫球蛋白Fc氨基酸序列（優 選人IgGl Fc氨基酸序列)融合。
[0038]可使用如Huard等（同上）中所述的定量細胞粘附測定來確定LAG-3蛋白的衍生物 與MHC II類分子結合的能力。LAG-3蛋白的衍生物對MHC II類分子的親和力可以是人LAG-3 蛋白對Π 類分子親和力的至少20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或100%。優選 地，LAG-3蛋白的衍生物對MHC II類分子的親和力是人LAG-3蛋白對II類分子的親和力的至 少 50 %。
[0039]能夠與MHC II類分子結合的合適的LAG-3蛋白衍生物的實例包括包含以下的衍生 物：
[0040] 人LAG-3序列的23至448位氨基酸殘基；
[0041 ] LAG-3的結構域D1和D2的氨基酸序列；
[0042] LAG-3的結構域D1和D2的氨基酸序列，其中在一個或更多個以下位置具有氨基酸 替換：73位ARG被替換為GLU; 75位ARG被替換為ALA或GLU; 76位ARG被替換為GLU; 30位ASP被 替換為ALA; 56位HI S被替換為ALA; 77位TYR被替換為PHE; 88位ARG被替換為ALA; 103位ARG被 替換為ALA; 109位ASP被替換為GLU; 115位ARG被替換為ALA;
[0043] 54至66位氨基酸殘基缺失的LAG-3D1結構域的氨基酸序列；
[0044] 重組可溶性人LAG-3Ig融合蛋白（IMP321)-在轉染有編碼與人IgGl Fc融合的 hLAG-3的胞外結構域的質粒之中國倉鼠卵巢細胞中產生的200-kDa二聚體。
[0045] 根據本發明，還提供了藥物組合物，其包含(a)能夠與MHC II類分子結合的LAG-3 蛋白或其衍生物；（b)抗腫瘤劑，其中所述抗腫瘤劑是基于鉑的抗腫瘤劑或拓撲異構酶I抑 制劑;和(c)可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。
[0046] 根據本發明，還提供了本發明的組合制劑或藥物組合物，其用作藥物。
[0047] 本發明還提供了本發明的組合制劑或藥物組合物，其用于預防、治療或改善癌癥。
[0048] 根據本發明還提供了本發明的組合制劑或藥物組合物在制備用于預防、治療或改 善癌癥的藥物中的用途。
[0049] 根據本發明還提供了預防、治療或改善癌癥的方法，其包括向有此預防、治療或改 善需要的對象施用能夠與MHC II類分子結合的LAG-3蛋白或其衍生物和抗腫瘤劑，其中所 述抗腫瘤劑是基于鉑的抗腫瘤劑或拓撲異構酶I抑制劑。
[0050] 可向對象依次施用LAG-3蛋白或其衍生物和抗腫瘤劑，即可以在抗腫瘤劑之前、同 時與之后施用LAG-3蛋白或其衍生物。
[0051] LAG-3蛋白或其衍生物和抗腫瘤劑可在相差96小時、72小時、48小時、24小時或12 小時內向對象施用。
[0052] 或者，可向對象共施用LAG-3蛋白或其衍生物和抗腫瘤劑，例如作為包含LAG-3蛋 白或其衍生物和抗腫瘤劑的組合物，或通過同時施用分開劑量的LAG-3蛋白或其衍生物和 抗腫瘤劑。
[0053]根據一些實施方案，向對象施用多個劑量的LAG-3蛋白或其衍生物和/或多個劑量 的抗腫瘤劑。
[0054] 根據一些實施方案，在每次施用兩個或更多個劑量的抗腫瘤劑之前、同時或之后 施用一個劑量的LAG-3蛋白或其衍生物。
[0055] 例如，可以在每次施用兩個或更多個劑量的抗腫瘤劑的96小時、72小時、48小時、 24小時或12小時內施用一個劑量的LAG-3蛋白或其衍生物。
[0056] 根據本發明在組合治療中使用的組分之合適劑量的選擇可由技術人員來確定和 優化，例如，通過對患者進行觀察，包括患者的整體健康狀況和對組合治療的響應。例如，如 果確定患者沒有表現出所期望的治療效果或相反地，如果患者正在經歷數量過多或引起麻 煩的嚴重程度的不期望的或不良副作用，則可能需要優化。
[0057] 應該對根據本發明在組合治療中使用的組分的劑量進行選擇以提供治療有效量 的組合中的組分。組合治療的"有效量"是導致與癌癥相關的至少一種病理參數降低的量。 例如，在一些實施方案中，組合治療的有效量是與沒有進行組合治療的癌癥相關參數的預 期降低相比，有效實現參數降低至少約10 %、20 %、30 %、40 %、50 %、60 %、70 %、80 %或 90%的量。例如，所述參數可以是腫瘤生長。
[0058]根據本發明，與作為單一療法的抗腫瘤劑或者LAG-3蛋白或其衍生物的效果相比， 可采用組合治療來提高抗腫瘤劑或者LAG-3蛋白或其衍生物的治療效果，或降低所得組合 中單個組分的劑量，同時防止或進一步降低單個組分不期望的或有害的副作用的風險。
[0059] 在一個實施方案中，規定LAG-3蛋白或其衍生物和抗腫瘤劑的劑量各自在各化合 物作為單一療法的通常所規定劑量范圍內。可以規定化合物為單獨劑量或組合劑量。與任 一化合物作為單一療法的效果相比，這樣的組合提供了提高的效力。
[0060] 在另一個實施方案中，規定LAG-3蛋白或其衍生物和抗腫瘤劑的劑各自低于各組 分作為單一療法的通常所規定劑量，但為在組合中具有治療效力的劑量。可以規定組分為 單獨劑量或組合劑量。可以選擇組合中成分的劑量以提供與LAG-3蛋白或其衍生物或者抗 腫瘤劑作為單一療法之類似水平的治療效力，但是與各化合物作為單一療法的規定劑量相 比，其優點是較低劑量的LAG-3蛋白或其衍生物和抗腫瘤劑降低了不利的副作用的風險。
[0061] 在另一個實施方案中，抗腫瘤劑的規定劑量在單一療法的通常所規定劑量范圍 內，并且規定LAG-3蛋白或其衍生物的劑量低于單一療法的通常所規定劑量。
[0062] 在又一個實施方案中，抗腫瘤劑的規定劑量低于單一療法的通常所規定劑量，并 且規定LAG-3蛋白或其衍生物的劑量在單一療法的通常所規定劑量范圍內。
[0063]低于單一療法的通常所規定劑量的優選劑量是通常所規定劑量的至多50%或至 多25 %的劑量。
[0064] 當以單獨劑量施用時，LAG-3蛋白或其衍生物和抗腫瘤劑可以基本上同時施用（例 如，在相差約60分鐘、約50分鐘、約40分鐘、約30分鐘、約20分鐘、約10分鐘、約5分鐘或約1分 鐘內）或者在時間上間隔約1小時、約2小時、約4小時、約6小時、約10小時、約12小時、約24小 時、約36小時、約72小時、或約96小時、或更長時間。
[0065] 技術人員將能夠確定并優化依次施用的合適的時間過程，這取決于LAG-3蛋白或 其衍生物和抗腫瘤劑的特定組合。優選地選擇所述時間過程以使得存在至少一種有益效 果，例如增強LAG-3蛋白或其衍生物或者抗腫瘤劑的效果，或者相互增強組合組分的效果， 例如與非有效劑量的組合組分的一個或兩個相比，大于疊加效應、額外的有利效果、較小的 副作用、較低的毒性或者組合治療效果，以及非常優選組合組分的協同作用。
[0066]應理解，最佳時間過程將取決于這樣的因素，例如在施用后達到化合物的峰血漿 濃度所花費的時間以及每個化合物的消除半衰期。優選地，時間差小于待施用的第一組分 的半衰期。
[0067] 技術人員還將能夠確定用于施用的適當時機。在某些實施方案中，抗腫瘤劑可以 在早晨施用，而LAG-3蛋白或其衍生物在當天晚些時候施用至少一次。在另一些實施方案 中，抗腫瘤劑和LAG-3蛋白或其衍生物可以在基本上相同的時間施用。
[0068] 在一些實施方案中，可以（例如，由醫務人員）向對象施用抗腫瘤劑，以及可以為對 象提供一定劑量的LAG-3蛋白或其衍生物(例如以預填充注射器的形式）以隨后施用（例如 在同一天的晚些時候或第二天）。
[0069] 對象可以在數周、數月或數年的時間段內接受抗腫瘤劑和LAG-3蛋白或其衍生物 的劑量。例如，1周、2周、3周、1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個 月、10個月、11個月、1年、2年、3年、4年、5年或更長時間。
[0070] 優選地，對象是哺乳動物對象，更優選人對象。
[0071 ]根據本發明可治療的癌癥的實例包括乳腺癌、卵巢癌、肺癌、頭癌、頸癌、子宮內膜 癌、食道癌、膀胱癌、宮頸癌、骨原性肉瘤、結腸癌、結腸直腸癌、淋巴瘤和中樞神經系統或生 殖細胞腫瘤。
[0072] 一般而言，本發明組合的組分或本發明的組合物可通過已知的方法，以任何合適 的制劑，通過任何合適的途徑施用。在一些實施方案中，LAG-3蛋白或其衍生物經胃腸外施 用(包括皮下、靜脈內或肌內注射）。在一些實施方案中，抗腫瘤劑是靜脈內施用的。在一些 具體的實施方案中，LAG-3蛋白或其衍生物是皮下施用的，而抗腫瘤劑是靜脈內施用的。
[0073]可使用藥物制劑領域的技術人員已知的和在相關文本和文獻例如在Remington: The Science and Practice of Pharmacy(Easton,Pa. ：Mack Publishing Co.，1995)中描 述的常規方法來制備合適的藥物組合物和劑型。
[0074] 為了使施用方便和劑量均勻，以單位劑型配制本發明的組合或組合物是特別有利 的。本文使用的術語"單位劑型"是指適合以單元劑量(unitary dosage)用于待治療個體的 物理離散單位。換言之，組合物被配制成離散劑量單位，各自含有經計算以產生與所需藥物 載體相關的期望治療效果之預定"單位劑量"量的活性劑。本發明的單位劑型的規格取決于 待遞送的活性劑的獨特特征。還可以通過參考成分的常用劑量和施用方式來確定劑量。應 指出，在一些情況下，組合中兩個或更多個單獨的劑量單位提供治療有效量的活性劑，例 如，一起服用的兩個片劑或膠囊劑可提供治療有效劑量，以使得各片劑或膠囊劑中的單位 劑量是治療有效量的約50%。
[0075] 用于腸胃外施用的根據本發明的制劑包括無菌的水性和非水性溶液、混懸液和乳 劑。可注射的水性溶液含有水溶性形式的活性劑。非水性溶劑或載劑的實例包括脂肪油，例 如橄欖油和玉米油;合成的脂肪酸酯，例如油酸乙酯或甘油三酯;低分子量醇，例如丙二醇； 合成的親水聚合物，例如聚乙二醇、脂質體等。腸胃外制劑還可含有助劑，例如增溶劑、防腐 劑、潤濕劑、乳化劑、分散劑和穩定劑，水性混懸液可含有提高混懸液粘度的物質，例如羧甲 基纖維素鈉、山梨糖醇和葡聚糖。可通過并入滅菌劑、通過截留細菌的過濾器過濾、輻照或 加熱來使可注射的制劑無菌。還可使用無菌可注射介質制備它們。活性劑還可以是干燥的 形式，例如，凍干的形式，其可在即將通過注射施用前用合適的載劑再水化。
[0076] 除了先前描述的制劑，活性劑還可被配制為用于活性劑受控釋放(優選在延長的 時間段內持續釋放）的長效制劑(depot preparation)。這些持續釋放劑型通常通過植入施 用(例如，皮下或肌內或通過肌內注射）。
[0077] 本發明的組合制劑可以與組合的組分施用的說明書一起包裝。說明書可以記錄在 合適的記錄介質或基質上。例如，說明書可以被印刷在基質(例如紙或塑料)上。說明書可以 作為在容器或其組件的標簽中的包裝插頁存在（即，與包裝或分包裝有關）。在另一些實施 方案中，說明書可以作為存在于合適的計算機可讀存儲介質(例如，CD-ROM、磁盤)上的電子 存儲數據文件存在。組合制劑的一些或所有組分可以包裝在合適的包裝中以保持無菌。
[0078] 在下面的實施例中參考附圖描述了本發明的一些實施方案，其中：
[0079] 圖1示出了在癌癥治療中施用LAG-3衍生物和拓撲替康的作用；
[0080] 圖2示出了在癌癥治療中施用LAG-3衍生物和卡鉑的作用；
[0081] 圖3示出了在癌癥治療中施用(A)LAG-3衍生物和卡鉑，或(B)LAG-3衍生物和奧沙 利鉑的作用；
[0082] 圖4示出了在癌癥治療中施用LAG-3衍生物和奧沙利鉑的作用：（A)示出了對腫瘤 尺寸的作用，和(B)示出了對存活的作用；
[0083] 圖5示出了與免疫球蛋白Fc(IgFc)序列融合的LAG-3蛋白的衍生物的示意圖；
[0084] 圖6示出了LAG-3衍生物與MHC II類陽性細胞的結合；
[0085] 圖7示出了通過阻斷LAG-3與MHC II類分子結合的抗體抑制LAG-3衍生物與MHC II 類陽性細胞的結合；
[0086] 圖8示出了通過LAG-3衍生物活化THP-1細胞，如通過CCL4分泌確定的；
[0087] 圖9示出了通過LAG-3衍生物活化THP-1細胞，如通過TNF-α分泌確定的；
[0088]圖10示出了通過阻斷LAG-3與MHC II類分子結合的抗體抑制LAG衍生物誘導的單 核細胞活化；
[0089] 圖11示出了通過LAG-3衍生物活化抗原呈遞細胞(APC);
[0090] 圖12示出了通過LAG-3衍生物活化⑶8陽性T細胞;和
[0091] 圖13示出了成熟人LAG-3蛋白的氨基酸序列。四個胞外Ig超家族結構域在以下氨 基酸殘基處：1_149(D1) ;150-239(02);240-330(03);和331-412(04)。人1^6-3蛋白01結構 域之額外環結構的氨基酸序列以下劃線粗體示出。
[0092] 實施例1
[0093] 在癌癥治療中施用LAG-3衍生物和拓撲異構酶I抑制劑的作用
[0094]使用結直腸腺癌細胞系CT26建立鼠同源皮膚腫瘤模型。
[0095] 在第0天通過皮下（s .c .)注射，向四組BALB/c小鼠（5周齡）的右側脅(flank)植入 四分之一最小致瘤劑量(minimum tumorigenic dose，MTD)的腫瘤細胞(0.5 X 105個細胞）。 按照下列時間表，用磷酸緩沖鹽水(PBS)(第1組小鼠）、LAG-3衍生物MP321(第2組小鼠）、 頂P321和拓撲替康(第3組小鼠）或拓撲替康單獨(第4組小鼠）注射小鼠：
[0096] 第1組(8只小鼠）：陰性對照：在D11、D14、D18、D21、D25和D28皮下（s. c.)注射PBS;
[0097] 第2組（7只小鼠）：在011、014、018、021、025和028皮下（8.(：.)注射頂？321(5(^8， 1.9mg/ml)；
[0098] 第3組（8只小鼠）：在D11、D14、D18、D21、D25和D28皮下（s.c.)注射頂P321(50yg， 1.9mg/ml)，并且在D10、D13和D17腹膜內（i.p.)注射拓撲替康(45yg，2.5mg/kg);
[0099] 第4組(8只小鼠）：在D10、D13和D17腹膜內（i . p.)注射拓撲替康(45yg，2.5mg/kg)。
[0100] 每周兩次通過使用卡尺測量兩個垂直的腫瘤直徑監測腫瘤生長。結果示于圖1中。 腫瘤尺寸意指以_2計的截面面積。
[0101 ]結果表明，MP321單獨對腫瘤生長沒有作用，拓撲替康對減少腫瘤生長有一些作 用，但頂P321和拓撲替康的組合治療具有更大的（即，協同）作用。
[0102] 實施例2
[0103] 在癌癥治療中施用LAG-3衍生物和基于鉑的抗腫瘤劑的作用
[0104]使用淋巴瘤細胞系EL4建立鼠同源皮膚腫瘤模型。
[0105] 在第0天通過皮下（s.c.)注射向C57B1/6小鼠（5周齡)的右側脅植入最小致瘤劑量 (MTD)的腫瘤細胞(5X10 5個細胞）。按照以下時間表，用磷酸緩沖鹽水(PBS)(第1組小鼠）、 頂P321 (第2組小鼠）、MP321和卡鉑(第3組小鼠）或卡鉑單獨(第4組小鼠）注射小鼠：
[0106] 第1組(8只小鼠）：陰性對照:在07、011、014、019、021和024皮下（8.(3.)注射?83 ;
[0107] 第2組（8只小鼠）：在07、011、014、019、021和024皮下（8.(：.)注射1]\03321(5(^ 8， 3.96mg/ml)；
[0108] 第3組（8只小鼠）：在07、011、014、019、021和024皮下（8.(：.)注射1]\03321(5(^ 8， 3.96mg/ml)，并且在D6、D10、D13和D17腹膜內（i.p.)注射卡鉑(288yg，16mg/kg);
[0109] 第 4組(8 只小鼠）：在D6、D10、D13 和D17 腹膜內（i.p.)注射卡鉑（288yg，16mg/kg)。
[0110] 每周兩次通過使用卡尺測量兩個垂直的腫瘤直徑監測腫瘤生長。結果示于圖2中。 腫瘤尺寸意指以_2計的截面面積。
[0111] 結果表明，IMP321單獨對腫瘤生長沒有作用，卡鉑單獨有很小的作用（如果有的 話），但MP321和卡鉑的組合治療減少了腫瘤生長，從而證明了組合施用的協同作用。
[0112] 實施例3
[0113] 在癌癥治療中施用LAG-3衍生物和不同的基于鉑的抗腫瘤劑的作用 [0114]使用淋巴瘤細胞系EL4建立鼠同源皮膚腫瘤模型。
[0115] 在第0天通過皮下（s.c.)注射向C57B1/6小鼠（5周齡)的右側脅植入最小致瘤劑量 (MTD)的腫瘤細胞(5X10 5個細胞）。按照以下時間表，用磷酸緩沖鹽水(PBS)(第1組小鼠）、 頂P321 (第2組小鼠）、頂P321和卡鉑(第3組小鼠）、卡鉑單獨(第4組小鼠）、MP321和奧沙利 鉑(第5組小鼠）或奧沙利鉑單獨(第6組小鼠）注射小鼠：
[0116] 第1組（10只小鼠）：陰性對照:在07、011、014、018、021和025皮下（8.(：.)注射?83 ;
[0117] 第2組（10只小鼠）：在07、011、014、018、021和025皮下（8.(3.)注射頂卩321(5(^ 8， 1.9mg/ml)；
[0118] 第3組（9只小鼠）：在07、011、014、018、021和025皮下（8.。.）注射1]\03321(5(^ 8， 1.911^/1111)，并且在06、010、013和017腹膜內（;[4.)注射卡鉬(288以8，1611^/1^) ;
[0119] 第 4組（10 只小鼠）：在D6、D10、D13 和D17 腹膜內（i.p.)注射卡鉑（288yg，16mg/kg);
[0120] 第5組（10只小鼠）：在07、011、014、018、021和025皮下（8.(3.)注射頂卩321(5(^ 8， 1.9mg/ml)，并且在D6和D10腹膜內（i ·ρ·)注射奧沙利鉬(54yg，3mg/kg);
[0121] 第6組（10只小鼠）：在D6和D10腹膜內（i .p.)注射奧沙利鉑(54yg，3mg/kg)。
[0122] 每周兩次通過使用卡尺測量兩個垂直的腫瘤直徑監測腫瘤生長。結果示于圖3A (對于卡鉑)和圖3B(對于奧沙利鉑）中。腫瘤尺寸意指以mm2計的截面面積。
[0123] 結果表明，MP321單獨具有很小的作用(如果有的話），卡鉑單獨具有一些作用，而 頂P321和卡鉑的組合治療有更大的（即，協同）作用。奧沙利鉑單獨具有作用，但頂P321和奧 沙利鉑的組合治療具有甚至更大的（即，協同）作用，在第17天腫瘤生長被完全抑制。
[0124] 實施例4
[0125] 在治療癌癥中施用LAG-3衍生物和基于鉑的抗腫瘤劑的作用
[0126] 評估了在C38結腸腺癌腫瘤模型中LAG-3衍生物MP321(也稱為hLAG-3Ig)和奧沙 利鉑的組合治療的作用。在該模型中，腫瘤碎片經手術皮下植入。當治療開始時(在第12天， 當平均腫瘤體積為200_3時），腫瘤相對成熟，因此為現實的腫瘤提供了很好的模型。
[0127] 從Division of Cancer Treatment,Tumor Repository,NCI(Frederick,MD,USA) 冷凍獲得小鼠結腸38(C38)腫瘤碎片。將C38碎片在DMS0/SVF/RPMI 1640培養基（10/10/80) 中于液氮中冷凍儲存直至使用。將該碎片在37 °C下解凍5分鐘，在RPMI 1640培養基中潤洗 兩次，之后皮下(SC)植入小鼠中。將C38腫瘤連續地移植到C57B1/6小鼠中。
[0128] 將小的C38腫瘤碎片（20-30mg)經皮下植入12只C57BL/6小鼠的右側脅。當腫瘤尺 寸達到500mm3-1000mm3時，經手術切除腫瘤并將小的C38腫瘤碎片（20-30mg)經皮下植入接 受者C57BL/6小鼠的右側脅。
[0129] 當腫瘤達到200-300mm3的平均體積時開始處理。處理時間表如下：
[0130] 第1組(10只小鼠）：每周一次皮下(SC)注射PBS，連續4周；
[0131] 第2組(10只小鼠）：每周一次以5mg/kg/注射靜脈內（IV)注射奧沙利鉑，連續4周；
[0132] 第3組（10只小鼠）：每周一次皮下（SC)注射20yg Π 1Ρ321，連續4周；
[0133] 第4組（10只小鼠）：每周一次以5mg/kg/注射靜脈內（IV)注射奧沙利鉑并且與每周 一次皮下(SC)注射20yg頂P321組合，連續4周。
[0134] 在第12天(D12)當不同的組具有200mm3的平均腫瘤體積時開始處理。在D12、D19、 D26和D33注射PBS或奧沙利鉑。在注射奧沙利鉑后一天，也就是在D13、D20、27和D34注射 頂P321。當皮下腫瘤達到2000mm 3的最大體積時，處死動物。
[0136] *在用奧沙利鉑處理后一天進行
[0137] 結果示于圖4A中。結果表明IMP321單獨對延緩腫瘤生長沒有作用。奧沙利鉑具有 輕微的作用。奧沙利鉑和IMP321的組合具有較大的作用。在圖4B所示的存活曲線中發現了 相同的協同作用。
[0138] 實施例5
[0139] LAG-3的衍生物與MHC II類陽性細胞的結合
[0140] 對LAG-3的幾個衍生物與MHC II類陽性細胞結合的能力進行了測試：
[0141] i)通過第一接頭與免疫球蛋白Fc(Ig Fc)序列連接的LAG-3的結構域Dl-D4(LAG-3 D1D4-接頭 1-Ig，sLAG-3 D1D4-Ig或頂P321);
[0142] ii)通過第二接頭與Ig Fc序列連接的LAG-3的結構域D1-D4(LAG-3D1D4-接頭2-Ig 或SLAG-3D1D4-接頭B-Ig);
[0143] iii)通過第二接頭與Ig Fc序列連接的LAG-3的結構域D1和D2(LAG-3D1D2-接頭2-Ig或SLAG-3D1D2接頭B-Ig);和
[0144] iv)通過第一接頭與Ig Fc序列連接的LAG-3的結構域D1-D4,但在LAG-3D1結構域 的MHC II類結合位點中于R75位具有突變(R75A)，這使與MHC II類分子的結合增強了三倍 或更多（Huard等，Proc · Natl · Acad · Sci · USA，1997，94:5744) GMP321R75A) 〇
[0145] 在圖5中示出了所述衍生物。
[0146] 用不同濃度的LAG-3衍生物或用人IgG 1抗體(hIgG 1)作為陰性對照將MHC II類+ Raji細胞在4°C下孵育45分鐘。用FITC-綴合的山羊抗小鼠 Ig(Coulter)顯示與細胞表面結 合的LAG-3分子。通過流式細胞術分析細胞。表示為熒光強度單位的結果示于圖6中。結果表 明，所有的LAG-3衍生物均與MHC II類陽性細胞結合。
[0147] 實施例6
[0148] 通過阻斷LAG-3與MHC II類分子結合的抗體抑制LAG-3衍生物頂P321與MHC II類 陽性細胞的結合
[0149] 17B4和11E3是已知阻斷LAG-3與MHC II類分子結合的抗LAG-3單克隆抗體。在 頂P321標簽綴合物(LAG-3Ig-Alexa 488)(4μg/ml在4°C)與17B4或11E3阻斷抗體或與同種 型匹配的陰性對照單克隆抗體(mlgGl)預孵育之后，測定該綴合物與MHC II類-陽性B細胞 (Raji細胞)的結合。使用熒光激活細胞分選(FACS)進行細胞結合熒光的分析。結果示于圖7 中。
[0150] 結果表明通過阻斷LAG-3與MHC II類分子結合的LAG-3特異性單克隆抗體抑制了 IMP321與Raji細胞的結合。
[0151] 實施例7
[0152] 通過LAG-3衍生物活化單核細胞
[0153] 將THP-1細胞與圖5中所示的LAG-3衍生物或與作為陰性對照的人IgGl在4°C下孵 育4小時。測定了 THP-1細胞分泌的趨化因子CCL4和細胞因子腫瘤壞死因子a(TNF-a)量，并 用作單核細胞活化的量度。使用細胞計量微珠陣列(Cytometric Beads Array)在細胞上清 液中定量CCL4和TNF-α分泌。CCL4測定的結果示于圖8中，TNF-α測定的結果示于圖9中。
[0154] 結果表明，LAG-3衍生物均能夠活化THP-1單核細胞。
[0155] 實施例8
[0156] 通過阻斷LAG-3與MHC II類分子結合的抗體抑制頂P321誘導的單核細胞活化
[0157] 將IMP321 (20ng/ml)與17B4或11E3抗體預孵育（在+37°C下），之后將該混合物與 THP-1細胞孵育4小時。使用THP-1細胞分泌的CCL4的量來確定單核細胞活化的水平。兩次實 驗的結果不于圖10中。
[0158] 結果證明，MP321誘導的單核細胞活化被阻斷性抗LAG-3單克隆抗體17B4和11E3 所抑制。這表明MP321活化單核細胞的能力依賴于頂P321與MHC II類分子的結合。
[0159] 實施例9
[0160] 通過LAG-3衍生物活化原代抗原呈遞細胞(APC)
[0161] 在布雷菲德菌素(brefeldin)(-種分泌抑制劑）的存在下，將人外周血單核細胞 (PBMC)與圖5中所示的LAG-3衍生物或與作為陰性對照的人I gG 1孵育4小時。通過CCL4 (一種 已知有利于Thl和CD8陽性應答的趨化因子)和TNF-a(-種直接抑制腫瘤發生的多功能細胞 因子）的胞內染色來確定存在于PBMC中的APC的細胞因子應答。通過細胞計量術分析結果。 由在MHC II類陽性細胞中表達CCL4和/或TNF-a的細胞百分比所表示的結果示于圖11中。
[0162] 結果表明，所有經測試的LAG-3衍生物均能誘導產生CCL4和TNF-a。
[0163] 實施例10
[0164] 通過LAG-3衍生物活化T細胞
[0165] 將人PBMC與圖5中所示的LAG-3衍生物，或與作為陰性對照的人I gG 1孵育18小時。 在孵育的最后16小時存在布雷菲德菌素。在暴露于LAG-3衍生物18小時之后，通過CCL4、 IFN- γ和TNF-a的胞內染色追蹤⑶8陽性T細胞的細胞因子應答并通過細胞計量術分析。由 在⑶3陽性/CD8陽性T細胞中表達CCL4、IFN- γ和/或TNF-a的細胞百分比所表示的結果示于 圖12中。
[0166] 結果表明，所有經測試的LAG-3衍生物均能誘導1型細胞毒性⑶8陽性T細胞(Tel細 胞)的活化。得出結論，通過與APC表達的MHC II類分子結合，LAG-3衍生物誘導了Tc 1細胞的 活化。Tel細胞的活化形成主要抗腫瘤免疫應答。
【主權項】
1. 組合制劑，其包含：（a)能夠與MHC II類分子結合的LAG-3蛋白或其衍生物;和(b)抗 腫瘤劑，其中所述抗腫瘤劑是基于鉑的抗腫瘤劑或拓撲異構酶I抑制劑。2. 根據權利要求1所述的組合制劑，其用于共施用或依次施用所述LAG-3蛋白或其衍生 物和所述抗腫瘤劑。3. 根據權利要求1或2所述的組合制劑，其中所述LAG-3蛋白或其衍生物與所述抗腫瘤 劑是分開的。4. 根據前述權利要求中任一項所述的組合制劑，其中所述LAG-3蛋白或其衍生物以摩 爾當量為〇.25mg至30mg的LAG-3Ig融合蛋白頂P321的劑量存在。5. 根據前述權利要求中任一項所述的組合制劑，其包含多個劑量的所述LAG-3蛋白或 其衍生物。6. 根據前述權利要求中任一項所述的組合制劑，其包含多個劑量的所述抗腫瘤劑。7. 根據前述權利要求中任一項所述的組合制劑，其中所述基于鉑的抗腫瘤劑包括奧沙 利鉑或卡鉑。8. 根據權利要求1至6中任一項所述的組合制劑，其中所述拓撲異構酶I抑制劑包括拓 撲替康。9. 根據前述權利要求中任一項所述的組合制劑，其中所述LAG-3蛋白的衍生物包含與 1^6-3蛋白，優選人1^6-3蛋白的結構域01和任選地結構域02具有至少70%氨基酸同一性的 氨基酸序列。10. 根據前述權利要求中任一項所述的組合制劑，其中所述LAG-3蛋白的衍生物包含與 LAG-3蛋白，優選人LAG-3蛋白的結構域Dl、D2、D3和任選地D4具有至少70 %氨基酸同一性的 氨基酸序列。11. 根據前述權利要求中任一項所述的組合制劑，其中所述LAG-3蛋白的衍生物與免疫 球蛋白Fc序列融合。12. 藥物組合物，其包含：（a)能夠與MHC II類分子結合的LAG-3蛋白或其衍生物；（b)抗 腫瘤劑，其中所述抗腫瘤劑是基于鉑的抗腫瘤劑或拓撲異構酶I抑制劑;和(c)可藥用載體、 賦形劑或稀釋劑。13. 根據權利要求1至11中任一項所述的組合制劑或根據權利要求12所述的藥物組合 物，其用作藥物。14. 根據權利要求1至11中任一項所述的組合制劑或根據權利要求12所述的藥物組合 物，其用于預防、治療或改善癌癥。15. 根據權利要求1至11中任一項所述的組合制劑或根據權利要求12所述的藥物組合 物在制備用于預防、治療或改善癌癥的藥物中的用途。16. 預防、治療或改善癌癥的方法，其包括向有此預防、治療或改善需要的對象施用能 夠與MHC II類分子結合的LAG-3蛋白或其衍生物和抗腫瘤劑，其中所述抗腫瘤劑是基于鉑 的抗腫瘤劑或拓撲異構酶I抑制劑。17. 根據權利要求16所述的方法，其中向所述對象依次施用所述LAG-3蛋白或其衍生物 和所述抗腫瘤劑。18. 根據權利要求16所述的方法，其中所述LAG-3蛋白或其衍生物在所述抗腫瘤劑之后 施用。19. 根據權利要求17或18所述的方法，其中所述LAG-3蛋白或其衍生物和所述抗腫瘤劑 在相差96小時內向所述對象施用。20. 根據權利要求16所述的方法，其中向所述對象共施用所述LAG-3蛋白或其衍生物和 所述抗腫瘤劑。21. 根據權利要求16至20中任一項所述的方法，其中以摩爾當量為0.25mg至30mg的 LAG-31 g融合蛋白頂P321的劑量向所述對象施用所述LAG-3蛋白或其衍生物。22. 根據權利要求16至21中任一項所述的方法，其中向所述對象施用多個劑量的所述 LAG-3蛋白或其衍生物。23. 根據權利要求16至22中任一項所述的方法，其中向所述對象施用多個劑量的所述 抗腫瘤劑。24. 根據權利要求22或23所述的方法，其中在每次施用兩個或更多個劑量的所述抗腫 瘤劑之前、同時或之后施用一個劑量的所述LAG-3蛋白或其衍生物。25. 根據權利要求16至24中任一項所述的方法，其中所述基于鉑的抗腫瘤劑包括奧沙 利鉑或卡鉑。26. 根據權利要求16至25中任一項所述的方法，其中所述拓撲異構酶I抑制劑包括拓撲 替康。27. 根據權利要求16至26中任一項所述的方法，其中所述LAG-3蛋白的衍生物包含與 1^6-3蛋白，優選人1^6-3蛋白的結構域01和任選地結構域02具有至少70%氨基酸同一性的 氨基酸序列。28. 根據權利要求16至27中任一項所述的方法，其中所述LAG-3蛋白的衍生物包含與 LAG-3蛋白，優選人LAG-3蛋白的結構域Dl、D2、D3和任選地D4具有至少70 %氨基酸同一性的 氨基酸序列。29. 根據權利要求16至28中任一項所述的方法，其中所述LAG-3蛋白的衍生物與免疫球 蛋白Fc序列融合。
【文檔編號】A61K31/47GK105916504SQ201480073584
【公開日】2016年8月31日
【申請日】2014年12月19日
【發明人】弗雷德里克·特里貝爾
【申請人】伊繆泰普有限公司