多顆粒藥物遞送系統的制作方法

多顆粒藥物遞送系統的制作方法
【專利摘要】本發明涉及多顆粒藥物遞送系統、其制備方法和被這樣的系統填充的膠囊。
【專利說明】多顆粒藥物遞送系統
[0001] 本發明設及多顆粒藥物遞送系統、其制備方法和填充運樣的系統的膠囊。
[0002] 口服遞送活性藥物成分(在下文中縮寫為API)是在制藥技術的重要研究領域。在 局部作用的API到達治療活性的位點的途中W及全身性暴露的化合物到達藥物吸收位點的 途中，API的生物利用度受到幾個障礙的損害。它開始于胃腸道的惡劣條件下大量API的腔 不穩定性，尤其是在胃中。因此，遞送系統不得不應對酸性和酶屏障W將API完整地帶到吸 收或局部作用的位點。另一個很大的障礙就是通過腸壁滲透的步驟。特別是，大分子過于龐 大而不能通過腸壁被動地被吸收。將使用吸收的其他方式，如細胞旁(paracellular)轉運、 胞轉作用或被腸 M-細胞攝取。一些API在胃腸腔、在粘膜有局部治療作用，無論是結合特定 的細胞受體或結合由上皮產生的細胞因子。在運些情況下，與通過胃腸粘膜的全身性暴露 相關的障礙有益于局部作用的大分子。在運兩個情況中，即，全身暴露的API或局部作用的 API,共同的挑戰是將它們遞送至作用位點，而不損害其生物活性。
[0003] 在口服給藥后用于保護和遞送API至在胃腸道內的其作用位點的各種選擇中，可 考慮基于脂質的藥物遞送。然而，標準的基于脂質的系統不能夠祀向腸的特定區域。此外， 技術挑戰之一是含水環境將需要許多API。親水性的微環境可通過反相微乳液或脂質體來 獲得。使用脂質體或W/0型微乳液的基本問題是，在胃腸道中稀釋后，緊跟著發生相變導致 膠體的不穩定。此外，運些基于脂質的制劑通過脂溶性酶(包括憐脂酶A2)被消化，運降解了 脂質體和其他基于憐脂的系統。因此，需要更穩定的親水性隔室來包涵藥物。
[0004] 將API包涵在親水性隔室的一種選擇是微膠囊化。已描述了用于生產微球和微膠 囊的許多不同技術。對運些技術的概述由M.Whelehan等，Journal of Microencapsulation，2011;28(8) :669-688提供。振動噴嘴技術是用于生產微球和微膠囊 的廣泛使用的方法。運種技術例如公開于W0 2009/130225和由M.化mar等，發表于化urnal of Microencapsulation ,2007年2 月；24(1) :72-81，C.-Y.化等，發表于 Journal of Microencapsulation，2010 ; 27(2): 171-177，H. Brandenberger等，發表于Journal of Biotechnology 63(1998)73-80和G.Auriemma等，發表于Carbohydrate Polymers 92 (2013)367-373。
[0005] 公知的方法的缺點在于，所得到的聚合物顆粒需要被凝膠化W固化所述顆粒。此 凝膠化一般在溶解的二價或Ξ價金屬離子(如化2+)的存在下通過離子凝膠化完成。例如，使 藻酸鋼溶液的液滴落入含有化Ch溶液的硬化浴中，W凝膠化該液滴，在快速離子型反應中 形成海藻酸巧。然而，到現在為止，一直將二價和Ξ價鹽的水溶液用作硬化浴。因此，在水性 硬化浴中所獲得的微粒的分散體不適合用于例如直接被填充到明膠膠囊中，因為存在于水 相中的水會軟化或者甚至溶解膠囊殼。因此，凝膠化的微粒應被收集并在進一步加工成單 位劑量之前干燥。此外，微粒的保存穩定性，特別是在水性硬化浴中的保存穩定性較低。運 需要在微粒的沉淀后立即將其收集和干燥。最后，通過在水浴中硬化微粒的包封率較低。
[0006] W0 2007/129926公開了一種方法W將生物活性大分子包封到聚合物顆粒中，運通 過乳化/內部凝膠化的過程實現，其包括形成水包油乳液，然后分散的不溶性巧絡合物的增 溶作用觸發所述分散于內相的聚合物的凝膠化。分散在油相中的所得的凝膠狀顆粒通過伴 隨著高速離屯、循環的相分配而回收。水包油乳液通過機械攬拌制得。如果使用石蠟油和脫 水山梨糖醇單油酸醋，則外部油相為混合物。所獲得的聚合物顆粒的尺寸為直徑小于10WI1。
[0007] EP-A-1 475 070公開了一種水包油乳液組合物，其包含微凝膠，其制備如下:通過 溶解具有凝膠化能力的親水性化合物于水中或含水組分中，使其冷卻并固化W形成凝膠， 并粉碎所述凝膠。
[0008] 因此，仍然需要進一步的多顆粒藥物遞送系統，其能克服上述問題并且能夠W更 經濟有效的方式被更容易地制備。尤其，需要多顆粒藥物遞送系統，其適合于被直接填充至 例如明膠、徑丙基甲基纖維素化PMC)、或其它類型的膠囊中，而無需中間分離和干燥步驟。
[0009] 現已令人驚訝地發現，微凝膠顆粒可W在非水浴中獲得，特別是脂質硬化浴。運允 許使用在硬化浴中獲得的微凝膠顆粒的分散體制備口服劑型(如膠囊），而無需該微凝膠顆 粒的中間分離和干燥步驟。此外，令人驚訝地發現，通過使用非水性硬化浴，包封率顯著增 加，且由此獲得的微凝膠顆粒具有增加的穩定性，即使在硬化浴中長期膽存。
[0010] 因此，本發明設及多顆粒藥物遞送系統，其包含含有活性藥物成分的微凝膠顆粒， 所述微凝膠顆粒分散在液體中的非水性組合物中。
[0011] 在本發明上下文中，"微凝膠顆粒"表示凝膠(微凝膠)形成的微粒。微凝膠顆粒優 選是運樣的:其可由振動噴嘴技術(也稱為"造粒(prilling)")獲得。特別地，微凝膠顆粒是 運樣的：其不通過乳化方法獲得。微凝膠分散在液體非水性組合物中。因此，所述藥物遞送 系統也可W稱為分散體，優選基于脂質的微凝膠分散體。
[0012] 術語"多顆粒"應被理解為表示多個單獨的顆粒，其可W是相同或不同的類型，如 將在下文更詳細地解釋。
[0013] 術語"非水"定義為液體組合物中含有的水少于20重量％、優選小于10重量％、更 優選小于5重量％、甚至更優選小于3重量％、仍然更優選小于2重量％、如小于1重量％，其 各自基于該液體組合物的總重量。最優選地，所述液體組合物基本上不含水，尤其是無水 的。
[0014] 在優選的實施方案中，非水性組合物僅包含藥學上可接受的成分。因此，該組合物 優選不含有任何有毒的有機溶劑，如正己燒或正下醇。在非水性組合物的合適的溶劑是，例 如，藥學上可接受的醇，如乙醇、二甘醇單乙酸和脂質。合適的脂質組合物將在下文更詳細 地說明。在一個實施方案中，非水性組合物不包含任何石蠟油。
[0015] 本發明的多顆粒藥物遞送系統適合于口服給藥之后遞送API至其藥理作用位點或 吸收位點。因此，微凝膠顆粒保護API例如不被酶降解，且可選擇在微凝膠顆粒中的聚合物 W使得它為進一步促進API的局部作用或全身吸收提供粘膜粘附。本發明的多顆粒藥物遞 送系統的進一步的優點是，微凝膠顆粒分散在非水性液體中，特別是脂質組合物，使得該系 統可W例如被包含在明膠膠囊中用于口服給藥。
[0016] 微凝膠顆粒中所含的API不限于特定理化性質。API可W是親水性或疏水性的。然 而，如果使用聚合物的水溶液制備微凝膠顆粒，親水的API是優選的。微凝膠顆粒可W包含 一種或多種API,其為純凈形式或例如為含有API的囊泡形式。本發明的多顆粒藥物遞送系 統特別適合于體積大的API分子，否則其難W在口服給藥后被運送到其藥理作用的位點。特 別是對于體積大的API分子，難W維持通過胃腸道的運輸過程中的良好環境，W保持它們的 生物活性。此問題成功地被本發明解決。
[0017] 此外，藥物蛋白和膚成為治療藥物的重要一類。然而，由于其大的分子量和尺寸， 它們顯示通過各種粘膜表面和生物膜的差的滲透特性。此外，它們的固有的化學和物理不 穩定性也是導致與口服遞送相關的低生物利用度的因素。本發明的多顆粒藥物遞送系統的 進一步的優點是，由于微凝膠顆粒通常提供親水環境，通常也具有親水性的蛋白質和膚可 W溶解于微凝膠顆粒中，因此容易用于祀部位。此外，該微凝膠顆粒可W成功地在胃腸道環 境中保護膚和蛋白質。因此，蛋白質和膚是在本發明的多顆粒藥物遞送系統中優選的API。
[0018] 微凝膠顆粒可W是含有凝膠化聚合物(其遍及顆粒各處形成API的基質）的珠粒形 式;或可W是微膠囊的形式，其包含含有API的核屯、和凝膠化聚合物形成的殼。
[0019] 微凝膠顆粒可具有任何合適的尺寸。顆粒的尺寸可W例如是在1至2,000皿的范圍 內，優選10至2，ΟΟΟμπι或20至2，ΟΟΟμL?，更優選在50至1，ΟΟΟμL?，且甚至更優選在80至500皿的 范圍內。在一個實施方案中，由百分之90表示的粒度分布〇9〇可W低于1000皿，例如低于70化 m，優選低于500μηι。優選地，粒度分布化0為高于ΙΟμηι，更優選高于20μηι。粒度分布的化0可在 10至lOOOwii的范圍內，優選在100至700μπι，且更優選在250至500μπι。在另一個實施方案中， 通過中值粒徑化0表不的粒度分布可W低于1,000凹1，例如低于700μηι，優選低于500μηι。優選 地，中值粒徑Dso可高于10皿，更優選高于20皿。中值粒徑Dso可在10至1,000皿的范圍內，優 選在100至700μπι，更優選在250至500μπι的范圍內。在優選的實施方案中，粒度分布同時滿足 上述的〇90值和上述的Dso值。
[0020] 此外，微凝膠顆粒可具有任何合適的形式。例如，所述顆粒可W是球形或非球形， 例如楠圓形。此外，該顆粒可顯示出類似于紅細胞的環形形狀。粒子形狀可由延伸因子描 述，其是最大費雷特直徑(Feret diameter)(連接相距最遠的兩個周長點的直線段)除W費 雷特等效矩形短邊(具有與顆粒相同面積的矩形的最短邊，和在長度上等于最大費雷特直 徑的最長邊）。優選地，顆粒的延伸因子是在1.27至2.60的范圍內，更優選在1.27至2.30的 范圍內，并且甚至更優選在1.60至2.20的范圍內。
[0021] 在運方面，令人驚訝地發現，當微凝膠顆粒根據使用水性硬化浴的現有技術制備 時，得到的粒子的延伸系數大于2.8,特別是為約2.9。通過使用非水性硬化浴，可W得到具 有較低延伸系數的微凝膠顆粒。因此，本發明還設及微凝膠顆粒，其包含至少一種凝膠形成 聚合物，該聚合物具有粒度分布化0低于lOOOwn，優選低于700μηι，且更優選低于500μηι，并且 具有的延伸系數在1.27至2.60的范圍內，優選在1.27至2.30的范圍內，且還更優選在1.60 至2.20的范圍內。在進一步的實施方案中，微凝膠顆粒具有的中值粒徑化0可低于Ι,ΟΟΟμι， 優選低于700μπι，更優選低于500μπι。運些微凝膠顆粒可含有相同的凝膠形成聚合物，作為本 發明的多顆粒藥物遞送系統中的微凝膠顆粒。
[0022] 微凝膠顆粒的上述尺寸和形狀可W使用配備Olympus SC30帖接收器的Olympus CKX41SF顯微鏡進行觀察。照片W不同的放大倍數拍攝W在視覺上觀察顆粒的形狀。該微凝 膠的顆粒大小和形狀用XPT-C(PS-P;rozesstechnik Gm地，己塞爾，瑞±)通過動態圖像分析 進行評估。該微凝膠在其硬化浴中保持懸浮，然后在近紅外光源前流動(n = 1000)。顆粒尺 寸表示為瓦德爾盤直徑(Waddle disk diameter),運是與檢測粒子具有相同面積的盤的直 徑。
[0023] 除了 API,微凝膠顆粒還包含聚合物和優選的膠凝劑。聚合物必須被凝膠化W有效 地在胃腸道的環境中保護API。合適的凝膠形成聚合物是例如殼聚糖、殼聚糖衍生物、聚丙 締酸、藻酸鹽、角叉藻聚糖、阿拉伯樹膠、結冷膠、蛋白質、黃原膠、明膠、瓊脂、果膠、透明質 酸及其鹽。運些聚合物可W單獨使用或W兩種或更多種運些聚合物的組合使用。
[0024] 合適的殼聚糖衍生物是烷基化的和/或簇基烷基化的和/或聚乙二醇化的殼聚糖， 其中徑基和/或氨基(優選氨基)可W是部分或完全烷基化的和/或簇基烷基化的。在烷基化 的和/或簇基烷基化的殼聚糖中的合適的控基是飽和控基、不飽和控基或芳族控基，如烷基 或締基，尤其是那些具有1至24個，優選1至10個，更優選1至6個碳原子的烷基或締基。作為 芳族控基，苯基是合適的。控基可W被一個或多個取代基，如徑基、氨基和簇基取代。優選的 烷基是甲基，且優選的簇烷基是簇甲基。其它合適的殘基是例如鄰苯二甲酸醋、班巧酸醋和 脂肪酸醋，例如亞油酸醋和油酸醋。作為殼聚糖衍生物，Ν-Ξ甲基殼聚糖和簇甲基殼聚糖 (單-N-簇甲基殼聚糖)可W作為示例。作為蛋白質，白蛋白和乳清蛋白可W作為示例。優選 的凝膠形成聚合物是簇甲基殼聚糖。
[0025] 聚合物的凝膠化優選在作為膠凝劑的二價和/或Ξ價金屬離子的存在下獲得。例 如，海藻酸鋼凝膠在二價或Ξ價金屬離子(如化)的存在下由于海藻酸巧的形成而形成。
[0026] 合適的二價金屬離子是例如Ca2+、Mg2*、Zn2+、Ba2+和Cu 2+。合適的立價金屬離子例如 是Al3\Ca2+、Mg2+和Zn2+是優選的且Ca 2+是最優選的。其它合適的膠凝劑例如是立聚憐酸鹽、 巧樣酸、植酸和戊二醒。也可W使用兩種或更多種運些離子或物質的混合物。通過將合適的 鹽(或例如它們的水合物)溶解于組合物中（特別是脂質組合物中）而在非水液體中提供運 些離子，例如化C1減其水合物(例如化Cl2二水合物）。
[0027] 一些聚合物，例如通過溫度或抑的差異，可被凝膠化。在運些情況下，微凝膠顆粒 不必需含有膠凝劑。
[0028] 微凝膠顆粒可W含有其它成分，例如水、甘油、緩沖劑等。
[0029] 多顆粒藥物遞送系統可W包含分散在非水性液體(特別是脂質組合物）中的一種 或兩種或更多種不同類型的微凝膠顆粒。如果兩種或多種不同類型的微凝膠顆粒存在，運 些類型可W例如在其尺寸、形狀、一種或多種API、一種或多種聚合物和/或其它成分上不 同。不同類型的微凝膠顆粒也可W在其功能上不同，如持續釋放、緩釋或立即釋放的微凝膠 顆粒。
[0030] 用于分散微凝膠顆粒的液體非水性組合物沒有特別的限制。然而，其應該是藥學 上可接受的，且其不應該與通常的膠囊材料，如明膠、徑丙基甲基纖維素或淀粉產生干擾。 該組合物在50°CW下，優選在40°CW下，更優選在30°CW下，最優選在25°CW下，例如在室 溫(23°C)應該是液體。優選地，所述液體組合物包含至少一種甘油醋（即由甘油和有機酸形 成的醋;在運里也稱為"甘油醋衍生物"）或醇，如乙醇。
[0031] 甘油醋可W例如選自簇酸的甘油單醋、甘油二醋和甘油Ξ醋（即，甘油醋是分別與 一個、兩個或Ξ個有機酸形成的），所述簇酸為飽和的和/或不飽和的C2-28簇酸，優選飽和的 和/或不飽和的C2-2潑酸，更優選飽和的和/或不飽和的C2-2總酸。在進一步優選的實施方案 中，甘油醋選自飽和C6-12簇酸的甘油單醋和甘油二醋，優選其為飽和C8-10簇酸的，或不飽和 C16-20簇酸的，優選其為飽和的Cl8簇酸的甘油單醋和甘油二醋。所述簇酸的甘油單醋是特別 優選的。甘油二醋和甘油Ξ醋可包含兩個或Ξ個不同的簇酸殘基。甘油醋可進一步包含其 它殘基，如聚氧化乙締殘基，特別是一個聚氧化乙締殘基，如聚乙二醇3-20,優選聚乙二醇 3-15，更優選聚乙二醇4-10，如聚乙二醇-4、-5、-6、-7、-8或-9，特別是聚乙二醇-6和聚乙二 醇-8。
[0032] 合適的甘油醋例如是甘油單醋、甘油二醋和甘油Ξ醋，其含有乙酸醋、辛酸醋、辛 酷基癸酸醋、癸酸醋、硬脂酸醋、油酸醋、月桂酸醋、亞麻酸醋和/或亞油酸醋殘基。合適的甘 油醋的例子有甘油單亞油酸醋，如Maisine? 35-1;辛癸酸甘油醋，如imwitor@742;單癸酸 甘油醋，如Capmul?MCM C10EP;甘油單辛酷基癸酸醋，如CapmufMCM EP;甘油單辛酸醋， 如Capmul?MCM C8EP;甘油立辛酸醋，如Cap蚊x?8〇〇〇;甘油立癸酸醋，如Cap巧X? 1000;甘 油；辛酷基癸酸醋，如Migiyol?812;辛酷基癸酸醋聚乙二醇-6甘油醋，如Acconon^^CC- 6;辛酷基癸酸醋聚乙二醇-8甘油醋，如Acc〇non"|MC-8EP/NF;亞油酷基聚乙二醇-6甘油 醋，如Lab拘貸1?M2125CS;和油酷基聚乙二醇-6甘油醋，如Labra紐?Ml 944CS。
[0033] 在進一步的實施方案中，甘油醋可W選自聚甘油醋（即，聚合物，其中甘油與其他 甘油基團相連，并且其中最遠的甘油可W與有機酸形成醋，或者被其他殘基取代，如聚氧化 乙締殘基取代）。作為形成醋的有機酸和聚氧化乙締殘基，那些上述關于甘油單醋、甘油二 醋和甘油Ξ醋的是優選的。
[0034] 合適聚甘油醋例如是聚甘油-3二油酸醋（如Plurol Oleique CC 497)、聚甘油-6 油酸醋、聚甘油-10二硬脂酸醋、聚甘油-10異硬脂酸醋和聚甘油-10月桂酸醋。
[0035] 已發現，聚乙二醇化的甘油醋衍生物(尤其是聚乙二醇-6-甘油醋）在液體非水性 組合物中的存在，令人驚奇地，相比于通過使用含有甘油醋而不含聚氧化乙締殘基的液體 非水性組合物制備的微凝膠顆粒，在制備微凝膠顆粒的過程中增加了包封率，W及增加了 在儲存條件下的微凝膠顆粒的穩定性(就包含在微凝膠顆粒中的蛋白質的穩定性而言）。
[0036] 本發明人已經驚奇地發現，用于在微凝膠顆粒的制造中凝膠化該凝膠形成聚合物 的硬化浴可用做非水性液體，尤其是脂質組合物，用于分散微凝膠顆粒。運一發現使得可W 第一次在口服劑型的制備中使用微凝膠顆粒而無需微凝膠顆粒被從硬化浴中中間分離并 干燥由此獲得的微凝膠顆粒。然而，取決于非水性液體(特別是脂質組合物），且特別是取決 于在運樣的組合物中使用的甘油醋，用于凝膠化該凝膠形成聚合物的二價或Ξ價金屬離子 的鹽可W是幾乎不溶于或甚至不溶于該組合物的。本發明人發現，在運種情況下，在非水性 液體(特別是脂質組合物）中的鹽的溶解度可通過加入共溶劑被充分地增加，共溶劑用于溶 解二價和/或Ξ價金屬離子鹽于組合物中。作為共溶劑，二甘醇單乙酸、乙醇、2-化咯燒酬、 辛酸、丙二醇和N-甲基-2-化咯燒酬可W作為示例。二甘醇單乙酸(Τι.anscut〇r HP)和乙醇 是優選的，二甘醇單乙酸是最優選的。
[0037] 發現相比于乙醇作為共溶劑存在的情況，作為共溶劑的存在的二甘醇單乙酸增加 了包封率，并增加在儲存過程中含在微凝膠顆粒中的蛋白質的穩定性。
[0038] 非水性組合物，特別是脂質組合物可進一步包括填充劑。合適的填充劑是例如聚 乙二醇(例如PEG600)、碳酸丙締醋和天然油(如薄荷油）。
[0039] 已發現，相比天然油作為填充劑存在于非水性組合物中，聚乙二醇（如PEG 600)和 碳酸丙締醋的存在使得在微凝膠顆粒的制備中包封率顯著增加。
[0040] 非水性組合物，特別是脂質組合物可W包含其它成分，例如甘油或已知的滲透增 強劑。
[0041] 非水性組合物(特別是脂質組合物)的成分的量，可在很寬的范圍內變化。例如，組 合物可含有共溶劑:甘油醋:填充劑的重量比在1.5 :8.5:0至1.5 :0.1:8.4的范圍內。優選 地，共溶劑的量為足W增加二價或Ξ價金屬離子鹽(例如CaCl2)在組合物中的溶解度至W 下的程度，即1至10重量％、優選2至7重量％的鹽(基于所述組合物的總重量)可W溶解于該 組合物中。基于所述非水性組合物(特別是脂質組合物）的總重量，非水性組合物，特別是脂 質組合物，可W適當地含有至少15重量％，優選至少為20重量％的共溶劑。
[0042] 本發明進一步設及制備上述多顆粒藥物遞送系統的方法。該方法包括W下步驟：
[0043] a)提供凝膠形成聚合物和活性藥物成分的混合物，
[0044] b)將步驟a)中獲得的混合物形成微滴，
[0045] C)使步驟b)中獲得的微滴于液體非水性組合物中凝膠化W形成分散于液體非水 性組合物中的微凝膠顆粒。
[0046] 在上述方法的步驟a)中，將凝膠形成聚合物和活性藥物成分混合。一般來說，運種 混合是在水的存在下進行，W形成凝膠形成聚合物的溶液。凝膠形成聚合物的量沒有特別 的限制，運取決于所得到的溶液的粘度。如果粘度變高，將很難將混合物形成微滴。因此，低 粘度溶液是優選的。例如，當簇甲基殼聚糖被用作凝膠形成聚合物時，該溶液可W有利地含 有1至8重量％，優選2至6重量％，最優選約5重量％的凝膠形成聚合物(基于所得到的混合 物的總重量）。該溶液也可含有兩種或更多種凝膠形成聚合物的混合物。
[0047] 該混合物可W包含其它成分，例如甘油。甘油的量可W是例如在1至70重量％的范 圍內，優選在20至70重量％的范圍內，更優選在30至60重量％的范圍內，且最優選在40至55 重量％的范圍內（基于混合物的總重量）。
[004引在進一步優選的實施方案中，混合物還含有一種或多種緩沖劑，如立(立(徑甲基） 氨基甲燒），或PBS(憐酸鹽緩沖液）。
[0049] 在上述方法的步驟b)中，使在步驟a)中得到的混合物形成微滴。微滴的形成可W 通過本領域技術人員已知的任何方法來進行。例如于Μ .Whelehan等，Journal of Microencapsulation，2011;28(8) :669-688中描述了多種方法。機械技術是最常見的用于 生產用于醫學應用的微粒的機制的類型。它們是基于通過噴嘴擠出從聚合物生成液滴的原 理，并使用機械方法（即切割或振動力)操作W增加在孔口正常滴落的過程，或它們在聚合 物通過噴嘴傳遞時破壞由聚合物產生的擠出的液體流。一些使流體分散體形成液滴并隨后 轉化成凝膠顆粒的主要的機械技術是：同軸氣流、靜電擠出、旋轉盤、噴射切割、噴霧干燥、 振動噴嘴和造粒。所有運些方法對本領域的技術人員都是是已知的，且合適的裝置是市售 的。在本發明的方法中，步驟b)優選是通過使用振動噴嘴技術或造粒進行。
[0050] 在上述方法的步驟C)中，步驟b)中獲得的微滴被凝膠化，W形成微凝膠顆粒。通 常，在生產后，液滴會立即固化為微凝膠顆粒(球或膠囊），運通過使用膠凝劑的化學手段， 如化學交聯(例如殼聚糖與戊二醒交聯）、凝聚/沉淀(如殼聚糖、膠凝糖、角叉藻聚糖的混合 物，使用如轉變溫度或抑的理化性質)或離子凝膠化(如殼聚糖或藻酸鹽和二價或Ξ價金屬 離子）。離子凝膠化在本發明的方法中是優選的。
[0051] 在步驟C)中，凝膠化在非水性液體中（優選脂質組合物)進行。本發明人發現，可W 于液體非水性組合物中溶解足夠量的二價和Ξ價金屬離子，W用于直接在最終水性組合物 (優選脂質組合物）中進行微粒的離子凝膠化，或在能轉化為最終水性組合物(優選脂質組 合物）的組合物中進行微粒的離子凝膠化，而無需從硬化浴中分離微凝膠顆粒。例如，硬化 浴可W僅由共溶劑組成，或由共溶劑和甘油醋組成，且在形成微凝膠顆粒之后，將甘油醋和 填充劑，或僅僅將填充劑加入其中。優選地，液體脂質組合物被用作硬化浴。
[0052] 術語"非水"定義為液體組合物，其中含有的水少于20重量％，優選小于10重量％， 更優選小于5重量％，甚至更優選小于3重量％，仍然更優選小于2重量％，如小于1重量％， 各自基于該液體組合物的總重量。最優選地，所述液體組合物基本上不含水，尤其是無水 的。
[0053] 其具有的優點是，可省略現有技術的凝膠化步驟(其總是在鹽的水溶液中進行）， 由此能夠節省了時間和費用。其結果是，得到的微凝膠顆粒和液體組合物的混合物可立即 用于進一步處理，而無需任何純化或干燥步驟。
[0054] 例如，形成的微滴落入凝膠浴或硬化浴中，所述凝膠浴或硬化浴由液體非水性組 合物組成。一旦微滴浸潰在液體組合物中，凝膠形成聚合物在二價或Ξ價金屬離子的存在 下凝膠化，從而形成微凝膠顆粒，其同時分散于液體組合物中。
[0055] 如果微滴在液體非水性組合物中凝膠化，得到的分散體可W被加工成藥物劑型， 而無需從液體組合物中分離該微凝膠顆粒。例如，該分散體可W，在制備后立即填充到膠囊 中，或在添加其它成分之后填充到膠囊中，或分散劑可W膽存一段時間，然后可W進一步處 理，例如填充到膠囊中。在任何情況下，昂貴的和耗時的分離、洗涂和干燥步驟可被避免。
[0056] 此外，已令人驚奇地發現本發明的方法的進一步優點，特別是當微凝膠顆粒是通 過在液體非水性組合物中凝膠化凝膠形成聚合物的微滴而形成時，相比于通過在水性硬化 浴中凝膠化制備的微凝膠顆粒，微凝膠顆粒具有更高的機械穩定性、增加的包封率和增加 的儲存穩定性。因此，本發明的方法獲得的微凝膠顆粒和多顆粒藥物遞送系統在物理性質 上也與對照藥物遞送系統不同，所述對照藥物遞送系統中的微凝膠顆粒根據現有技術方法 制備，在進一步處理之前進行分離、洗涂、和烘干。
[0057] 本發明的多顆粒藥物遞送系統可W用作口服給藥的藥物組合物，例如W糖漿的形 式，而無需進一步處理。然而，優選地，多顆粒藥物遞送系統被進一步加工W獲得合適的單 位劑型，例如膠囊。合適的藥物膠囊是例如硬殼膠囊或軟殼膠囊。合適的膠囊材料是例如明 膠、徑丙基甲基纖維素和淀粉。
[0058] 圖1示出了根據本發明獲得的微凝膠顆粒。
[0059] 圖2示出了使用不同的硬化浴的包封率。
[0060] 圖3示出了不同的硬化浴獲得的微凝膠顆粒的漏失量。
[0061] 圖4示出了從不同的硬化浴獲得的微凝膠顆粒的BSA的釋放。
[0062] 本發明現在將通過實施例進一步說明，其不旨在被理解為限制性的。
[0063] 實施例1
[0064] 制備兩種含有W下成分的聚合物溶液：
[00 化]
[0067] 在運兩種情況下，將簇甲基殼聚糖和牛血清白蛋白稱重，并在30化pm到70化pm攬 拌混合在一起。然后將該共混物在真空下在孔徑1WI1至扣m的玻璃微纖維過濾器上過濾。將 最終組合物靜置過夜(至少8小時），W除去制劑中的任何氣泡。然后將溶液與振動噴嘴單元 一起使用。
[0068] 由運些聚合物溶液使用lincapsulator BIOTECH(來自EncapBioSysterns)制備微 滴，設置如下：
[0069]
[0072]
[0073] 將Transcutol HP、Capmul MCM-C8EP和碳酸丙締醋稱重并在500巧m至900巧m攬拌 混合在一起。將二水氯化巧稱重并在80化pm至1100巧m攬拌下，將其加入共混物中，直至粉 末完全溶解。然后該共混物被用作硬化浴。
[0074]
[0075] 硬化浴2通過使用與硬化浴1基本上相同的方式制備，除了化pmul MCM EP在使用 前被加熱至40 °C。
[0076] 使用聚合物溶液1，得到具有W下參數的微凝膠顆粒：
[0077] _
[007引實施例2
[0079] 通過溶解4.76% (干物質;w/v)的簇甲基殼聚糖在軟化水中的溶液而制備聚合物 溶液。加入適當量的牛血清白蛋白（BSA)得到2.5% (w/v)溶液。然后，在+4°C將溶液保存在 玻璃棟色瓶中，且其被允許在每次使用前達到室溫。
[0080] 制備屯種硬化浴，每種含有4.76% (w/w)的氯化巧。它們的組合物列于下表：
[0081]
[0082] *在加入氯化巧至達到4.76%的總濃度之后
[0083] 使用硬化浴HBW作為比較。
[0084] 微凝膠通過振動噴嘴技術的方法在Encapsulator Bio tech化ncapBioSys terns Inc.，Greifensee，瑞:t;該產品現在通過Biichi Labortechnik AG，Flawil，瑞:t市售）審ij 備。將聚合物溶液裝入20血Omnifix"塑料注射器(B.Braun Melsungen AG，Melsungen，德 國）中。然后，通過施加1240化的頻率，并通過設置電極環為1500V，將聚合物溶液通過150皿 的不誘鋼噴嘴累送，標稱流速為3.1〇11117111111(3.79邑/111111的聚合物溶液）。落高^曰11 di S化nee)為進入lOOmL硬化浴中~13cm，將其在40化pm攬拌。然后在進一步分析前，將微凝 膠靜置在硬化浴20分鐘。
[0085] 微凝膠顆粒的尺寸和形式如上文所述。結果總結在下表中：
[0086]
[0087]對于BSA的量化和分析，5g等分試樣的微凝膠穿過125WI1的開口的不誘鋼篩，然后 用水、乙醇洗涂，并再用水洗涂。將該微凝膠用抑6.8的憐酸鹽緩沖液于量瓶中稀釋至50ml (標稱BSA濃度為2.5mg/mL)，并在室溫，在恒定攬拌下，在72小時期間使其釋放所有內容物。 樣品隨后被存儲在+4°C。每次使用之前，將所需量的溶液在5415C離屯、機中在10 0(K)rpm離 屯、10分鐘化ppendo;rf GmbH,萊比錫城，德國），然后通過0.45皿的Titan3尼龍濾膜（SMI- LabHut LtcUMaisemore，英國）過濾。
[008引在微凝膠中的BSA的包封率化E)
[0089] 將BSA溶液的等分試樣用更多的緩沖液稀釋至1.5mg/mL的最終標稱BSA濃度。蛋白 質含量通過DC?蛋白質測定的方法測定，其基于Lowry蛋白測定化owy等，1951;化terson， 1979)，根據該公司提供的規程進行。蛋白質含量測定通過化SCO V-630紫外-可見分光光度 計（Jasco Inc.，Easton，美國）在750nm使用1cm光程Plastibranci"的一次性半微量的PMMA 比色杯（Brand Gm地+C0 KG，Werthe im，德國）測定。包封率W百分比表示為包封的BSA和聚 合物溶液中存在的BSA的量之間的比值。結果示于圖2。
[0090] 在硬化浴中時，從聚合物基質中的BSA漏失量也通過隨時間測定EE而進行測試。將 懸浮的微凝膠在25°C在班巧色瓶中保持一個月；測定在1、2、3和4周的EE。漏失量表示為百 分數，其為在給定時間點的EE相比于零時間點的EE。結果示于圖3。
[0091] BSA從微凝膠的體外釋放
[0092] 如歐洲藥典（2007)中所述，于裝有攬拌器的Erweka DT 60(KErweka GmbH, 化usenstamm，德國）上進行微凝膠的體外釋放測試。每個溶出槽(n = 3)中裝有500mL的pH 6.8的憐酸鹽緩沖液，將其在37 ± 0.5°C下加熱并在50rpm攬拌。然后，加入洗涂的裝載BSA的 微凝膠至每個容器中達到15mg的BSA的標稱總含量。在不同時間點巧、10、15、20、30、45、60、 90和120分鐘），將ImL樣品從釋放介質中抽出，并通過0.45WI1的尼龍過濾器過濾;然后將抽 出的釋放介質的相應體積用新鮮的緩沖液進行補償。在lOOrpm在12小時后取得最后的等分 試樣，W獲得在平衡時從微凝膠釋放的BSA。運些樣品中的蛋白質含量通過W下方法測量： Micro BCA?蛋白測定試劑盒（Thermo Fisher Scientific Inc.，Rockford，美國），其是基 于 BCA 蛋白質測定（Brown 等，1989 Jessler 和 hnestil 1986; Smith 等，1985 ;Wiechelman 等，1988)，根據由該公司提供的規程進行。將制備的樣品裝載于96孔透明BRANDplates"3pureGrade(Brand GmbH+CO KG，Wertheim，德國）中并在SpectraMax 12?中在λ二562nm測 定。所獲得的值表示為在平衡值的釋放的百分比。結果示于圖4中。
【主權項】
1. 多顆粒藥物遞送系統，其包含含有活性藥物成分的微凝膠顆粒，所述微凝膠顆粒分 散在液體非水性組合物中。2. 權利要求1的多顆粒藥物遞送系統，其中所述微凝膠顆粒含有至少一種凝膠形成聚 合物，其選自殼聚糖、殼聚糖衍生物、聚丙烯酸、藻酸鹽、角叉藻聚糖、阿拉伯樹膠、結冷膠、 黃原膠、蛋白質、明膠、瓊脂、果膠、透明質酸及其鹽。3. 權利要求2的多顆粒藥物遞送系統，其中所述微凝膠顆粒通過在二價和/或三價金屬 離子的存在下使該凝膠形成聚合物凝膠化而獲得。4. 上述權利要求中任一項的多顆粒藥物遞送系統，其中所述非水性組合物為脂質組合 物。5. 權利要求4的多顆粒藥物遞送系統，其中所述脂質組合物包含至少一種甘油酯。6. 權利要求5的多顆粒藥物遞送系統，其中所述甘油酯選自飽和的和/或不飽和的C2-28 羧酸的甘油單酯、甘油二酯和甘油三酯，其中所述甘油單酯可另外包含一個或兩個聚氧化 乙烯殘基且所述甘油二酯可另外包含一個聚氧化乙烯殘基。7. 權利要求5或6的多顆粒藥物遞送系統，其中所述甘油酯選自飽和的CV12羧酸或不飽 和的C16- 2Q羧酸的甘油單酯和甘油二酯，其中所述甘油單酯可另外包含一個或兩個聚氧化乙 烯殘基且所述甘油二酯可另外包含一個聚氧化乙烯殘基。8. 上述權利要求中任一項的多顆粒藥物遞送系統，其中所述非水性組合物進一步包含 共溶劑，其用于將二價和/或三價金屬離子鹽溶解于非水性組合物中。9. 權利要求8的多顆粒藥物遞送系統，其中所述共溶劑選自二甘醇單乙醚、乙醇、2-吡 咯烷酮、辛酸、丙二醇和N-甲基-2-吡咯烷酮。10. 上述權利要求中任一項的多顆粒藥物遞送系統，其中所述非水性組合物進一步包 含填充劑，其選自聚乙二醇、碳酸丙烯酯和天然油。11. 上述權利要求中任一項的多顆粒藥物遞送系統，其中所述微凝膠顆粒的粒度分布 Dgo 低于 lOOOym。12. 上述權利要求中任一項的多顆粒藥物遞送系統，其中所述微凝膠顆粒的延伸系數 的在1.27至2.60的范圍內。13. 制備權利要求1-12中任一項的多顆粒藥物遞送系統的方法，包括如下步驟： a) 提供凝膠形成聚合物和活性藥物成分的混合物， b) 將步驟a)中獲得的混合物成型成微滴， c) 于液體非水性組合物中使步驟b)中獲得的微滴凝膠化以形成分散于液體非水性組 合物的微凝膠顆粒。14. 權利要求13的方法，其中步驟b)通過使用振動噴嘴技術或造粒實行。15. 權利要求13或14的方法，其中所述在步驟c)中的凝膠化在液體脂質組合物中進行。16. 權利要求13-15中任一項的方法，其還包括將步驟c)中得到的分散體填充到膠囊 中，而不將微凝膠顆粒從液體組合物中分離。17. 通過權利要求13-16中任一項的方法獲得的微凝膠顆粒。18. 通過權利要求13-16中任一項的方法獲得的多顆粒藥物遞送系統。19. 含有權利要求1-12或18中任一項的多顆粒藥物遞送系統的膠囊，或含有權利要求 17的微凝膠顆粒的膠囊。20. 微凝膠顆粒，其包含至少一種凝膠形成聚合物并具有低于1000 wii的粒度分布D90和 在1.27至2.60的范圍內的延伸系數。21. 權利要求20的微凝膠顆粒，其中所述凝膠形成聚合物選自殼聚糖、殼聚糖衍生物、 聚丙烯酸、藻酸鹽、角叉藻聚糖、阿拉伯樹膠、結冷膠、黃原膠、蛋白質、明膠、瓊脂、果膠、透 明質酸及其鹽。
【文檔編號】A61K9/16GK105899197SQ201480070156
【公開日】2016年8月24日
【申請日】2014年11月13日
【發明人】R.C.布拉沃岡薩雷斯, F.J.O.瓦拉姆, J.K.德克魯伊夫, M.庫恩茲
【申請人】蒂洛特斯制藥股份有限公司