一種果膠-多臂聚乙二醇自組裝制備納米藥物的方法
【專利摘要】本發明公開了一種果膠?多臂聚乙二醇自組裝制備納米藥物的方法，它是由果膠（PET）羥基與載藥的八臂聚乙二醇的羧基的酯化作用自組裝形成的納米粒子。八臂聚乙二醇負載藥物，制備載藥的納米粒子，并在自組裝過程中包裹10?羥基喜樹堿（HCPT）。本發明的果膠?多臂聚乙二醇自組裝制備納米藥物的載藥量可調，八臂聚乙二醇可負載多種水溶性的或疏水型藥物，靶向性，穩定性好，生物降解性好，毒性低，具有緩釋功能的納米藥物。本發明屬于生物制藥和納米技術領域，制備技術工藝簡單，周期短。
【專利說明】
-種果膠-多臂聚乙二醇自組裝制備納米藥物的方法
技術領域
[0001] 本發明屬于生物制藥和納米技術領域，設及藥物遞送系統，具體設及一種果膠-多 臂聚乙二醇自組裝制備納米藥物的方法。
【背景技術】
[0002] 果膠(Pectin)是存在于植物細胞壁中的多糖類大分子物質，它與聚乙二醇同為食 品級高分子營養物質，疏水藥物用高分子八臂聚乙二醇和果膠納米載體共同包載，遞送到 祀細胞，可W達到緩慢釋放藥物的目的，自組裝過程包裹另一種藥物，達到互相促進的作 用，可W實現兩種藥物的協同作用，從而增加療效。
[0003] 熊果酸(Ursolic acid,簡稱UA)又名烏索酸、烏蘇酸，是一種五環Ξ祗類化合物， 廣泛存在于熊果、女貞、白花蛇舌草等天然藥用植物和果實中，具有抑制腫瘤細胞增殖、誘 導細胞調亡、抗突變、保肝、調節機體免疫等多種生物活性，然而UA難溶于水，口服給藥體內 吸收差，體外釋放度小，難于透皮吸收，生物利用度較差，運些都限制了 UA在藥學領域的廣 泛應用，因此，解決其水溶性的問題、增加藥物穩定性、提高對癌細胞的緩釋殺傷能力是UA 臨床應用的關鍵。
【發明內容】
[0004] 本發明的目的是針對現有技術中的不足，提供一種果膠-多臂聚乙二醇自組裝制 備納米藥物的方法，果膠與載藥多臂聚乙二醇在水介質中可自組裝形成納米粒子，解決UA 的水溶相差，生物利用度低等問題，使用果膠和八臂聚乙二醇為藥物載體，祀向性好，載藥 量高，避免藥物的不完全釋放和突釋情況對患者帶來的毒副作用。
[0005] -種果膠-多臂聚乙二醇自組裝制備納米藥物的方法的技術方案如下： 所述一種果膠-多臂聚乙二醇自組裝制備納米藥物的方法，載有熊果酸(UA)的八臂聚 乙二醇與果膠通過醋鍵相連，所述的自組裝果膠-多臂聚乙二醇納米藥物具有如式I所示的 結構：
式中，所述果膠醋化度50~75%，八臂聚乙二醇分子量20000。
[0006] 所述的一種果膠-多臂聚乙二醇自組裝制備納米藥物的方法，其納米粒子中UA的 載藥量為1%-40%，納米粒子半徑10-200nm。
[0007]本發明所述的一種果膠-多臂聚乙二醇自組裝制備納米藥物的方法，包括W下步 驟： (1) 用10ml四氨巧喃溶解0.5g的八臂聚乙二醇，加入0.5g激活劑1-(3-二甲氨基丙 基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)，0.06g催化劑4-二甲氨基化晚(DMAP)，攬拌，再加入0.1 ~lOmol熊果酸反應36~4她，反應物混合物旋蒸，透析過夜，透析液冷凍干燥，得到粉末A; (2) 取0.2g步驟(1)中的粉末A溶于DMS0，加入0.2g EDC和0.02g DMAP，反應30min，然后 加入一定量的果膠，反應30~50h，得到反應混合液； (3) 將步驟(2)中得到的反應混合液加入乙酸，得到絮狀沉淀，離屯、洗涂多次，真空干 燥，得到果膠-載藥八臂聚乙二醇粉末B; (4) 取20mg步驟(3)中粉末B和5mg 10-徑基喜樹堿溶于5ml二甲基亞諷，溶解5min，然后 逐滴滴入去離子水中，所得溶液透析過夜，冷凍干燥，得到所述果膠-多臂聚乙二醇納米粒 子。
[000引優選地，步驟(1)步驟(2)所述的八臂聚乙二醇與熊果酸的摩爾比為1:0.5~1:10; 優選地，步驟(2)所述的果膠與載藥八臂聚乙二醇的摩爾比為0.1:0.01~0.1:1; 優選地，步驟(2)所述的果膠-多臂聚乙二醇自組裝納米粒子粒徑10-200nm; 優選地，步驟(2)所述的果膠-多臂聚乙二醇自組裝納米粒子的質量百分比0.01%-90%; 優選地，（1)-(4)所述的一種果膠-多臂聚乙二醇自組裝制備納米藥物的方法，具有緩 釋功能、癌祀向性及穩定的粒徑大小。
[0009] 本發明W果膠與八臂聚乙二醇為藥物載體，UA與親水線性聚合物八臂聚乙二醇鍵 接，所得的果膠-載藥八臂聚乙二醇的聚合物自組裝制備納米粒子，結構比較穩定，制作工 藝簡單，實現藥物的水溶性和緩釋功能，W及對癌細胞的祀向性，并具有較高載藥量，納米 藥物的粒徑為10-200nm。
[0010] 相對現有技術，本發明具有W下有益效果： 本發明的一種果膠-多臂聚乙二醇自組裝制備納米藥物具有癌祀向性，生物相容性好， 毒副作用低，具有緩釋功能，果膠-載藥八臂聚乙二醇的聚合物在自組裝的同時還包裹 HCPT，增大了載藥量，聯合UA和HCPT祀向作用于腫瘤部位，W達到誘導腫瘤調亡的目的。本 發明的藥物合成及自組裝成納米藥物過程操作簡單，只需在水介質中形成納米粒子，納米 粒子穩定。
【附圖說明】
[0011] 圖1為合成高分子化合物陽T-8ARM-PEG-UA的核磁圖 圖2為納米粒子的透射電鏡形貌圖。
【具體實施方式】
[0012] 下面結合【具體實施方式】，對本發明作進一步說明。
[0013] 實施例1、一種果膠-多臂聚乙二醇自組裝制備納米藥物的方法： (l)PET的乙酷化 取一定量的PET(醋化度50%~75%)，緩慢加入冰醋酸、乙酸酢和硫酸，冰浴下反應一段 時間，然后升溫至50°C，攬拌至溶液澄清，混合物旋蒸，乙醇洗至中性，冷凍干燥，得到乙酷 化果膠粉末A。
[0014] (2)8ARM-PEG-UA 的合成 用10ml四氨巧喃溶解0.5g的八臂聚乙二醇，加入0.5g激活劑1-(3-二甲氨基丙基)-3- 乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)，0.06g催化劑4-二甲氨基化晚(DMAP)，攬拌，再加入Imol熊果酸 反應36~4她，反應物混合物旋蒸，透析過夜，透析液冷凍干燥，得到粉末B; (3) 陽 T-8ARM-PEG-UA 的合成 取0.2g步驟(2)中的粉末B溶于DMS0，加入0.2g EDC和0.02g DMAP，反應30min，然后加 入0.1 g果膠，反應30~50h，得到反應混合液； (4) 陽T-8ARM-PEG-UA的純化 將步驟(3)中得到的反應混合液加入乙酸，得到絮狀沉淀，離心洗涂多次，真空干燥，得 到果膠-載藥八臂聚乙二醇粉末C; (5) 陽T-8ARM-PEG-UA和肥PT的自組裝 取30mg步驟(4)中粉末B和8mg 10-徑基喜樹堿溶于5ml二甲基亞諷，攬拌溶解5min，然 后逐滴滴入去離子水中，納米粒子溶液在PBS溶液中透析12h，每化換一次透析液，所得溶液 透析過夜，冷凍干燥，得到所述果膠-八臂聚乙二醇納米粒子，粒徑大小為20~80nm。
[0〇1引實施例2、一種果膠-多臂聚乙二醇自組裝制備納米藥物的方法： 在本實例中，通過與實施例1相同的合成方法及步驟，八臂聚乙二醇與熊果酸的摩爾比 為1:4,所述的果膠與載藥八臂聚乙二醇的摩爾比為1:4測得粒徑大小為20~lOOnm。
【主權項】
1. 一種果膠-多臂聚乙二醇自組裝制備納米藥物的方法，其特征在于，載有熊果酸(UA) 的八臂聚乙二醇(8ARM-PEG-C00H)與果膠(PET)通過酯鍵相連，所述的自組裝果膠-多臂聚 乙二醇納米藥物具有如式I所示的結構：式中，所述果膠酯化度50~75%，八臂聚乙二醇分子量20000。2. 如權利要求1所述的一種果膠-多臂聚乙二醇自組裝制備納米藥物的方法，其特征在 于，步驟如下： (1) 用四氫呋喃溶解一定量的八臂聚乙二醇，加入激活劑1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙 基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)，催化劑4-二甲氨基吡啶(DMAP)，攪拌，再加入一定摩爾質量的熊 果酸反應36~48h，反應物混合物旋蒸，透析過夜，透析液冷凍干燥，得到粉末A; (2) 取一定量的步驟（1)中的粉末A溶于DMSO，加入EDC和DMAP，反應30min，然后加入一 定量的果膠，反應30~50h，得到反應混合液； (3) 將步驟(2)中得到的反應混合液乙醚沉淀，離心洗滌多次，真空干燥，得到粉末B; (4) 將步驟(3)中粉末B和10-羥基喜樹堿溶于二甲基亞砜，并滴入去離子水中，所得溶 液透析，每4h換一次透析液，冷凍干燥，得到所述果膠-多臂聚乙二醇納米粒子。3. 如權利要求1、2所述的一種果膠-多臂聚乙二醇自組裝制備納米藥物的方法，其特征 在于，所述的八臂聚乙二醇與熊果酸的摩爾比為1:0.5~1:10,果膠與載藥八臂聚乙二醇的 摩爾比為0.1:0.01~0.1:1。4. 如權利要求1、2、3所述的一種果膠-多臂聚乙二醇自組裝制備納米藥物的方法，其特 征在于，其納米粒子中UA的載藥量為1%-40%，納米粒子的質量百分比0.01%-90%，納米粒徑 10-200nm〇5. 如權利要求1、2、3、4所述的一種果膠-多臂聚乙二醇自組裝制備納米藥物的方法，具 有癌靶向性及緩釋功能。
【文檔編號】A61K31/56GK105879052SQ201610389233
【公開日】2016年8月24日
【申請日】2016年6月6日
【發明人】雷建都, 劉彥雪, 陳琳琳, 王璐瑩, 劉靜, 何靜
【申請人】北京林業大學