一種速釋-緩釋藥物膜及其制備方法

一種速釋-緩釋藥物膜及其制備方法
【專利摘要】本發明涉及一種速釋?緩釋藥物膜，其特征在于包括膜支架和包埋在其中的藥物緩釋載體，膜支架及藥物緩釋載體中分別含有藥物，能夠同時實現藥物的速釋及緩釋。本發明還提供上述藥物膜的制備方法，步驟為：制備含有防粘連藥物的藥物緩釋載體；制備含有防粘連藥物的成膠溶液，并和上述藥物緩釋載體混合均勻；使用交聯劑交聯上述含有藥物緩釋載體的成膠溶液，在圖案化模板中制備水凝膠；水凝膠經過干燥工藝后即得。本發明設計的速釋?緩釋藥物膜生物相容性和粘附性好，可完全降解吸收，降解時間可控；同時該藥物膜兼具暫時屏障和藥物速釋?緩釋的雙重特性，可以改善體內受損部位微環境和維持足夠的局部藥物濃度，在防粘連等領域具有廣闊的應用前景。
【專利說明】
一種速釋-緩釋藥物膜及其制備方法
技術領域
[0001]本發明屬于生物醫學技術領域，尤其涉及一種速釋-緩釋藥物防粘連膜及其制備方法。
【背景技術】
[0002]組織粘連是外科手術中常見的并發癥，腹部手術后粘連發生率為67-93%，婦科盆腔手術后發生率為97%，發病率高且難以治療，因此組織粘連是臨床治療中的一大難題。粘連一旦發生，將會給患者的身心健康帶來損害，如再入院率上升、二次手術可能性增加、診療難度加大等，同時醫療成本提高，經濟損失巨大。鑒于組織粘連的高發性及危害性，超過50%的患者在手術中需要采取一定的防粘連措施。
[0003]目前減少組織粘連的措施有兩種:I)直接使用具有防粘連作用的水溶性藥物，如抗凝劑(肝素、水蛭素)、抗炎劑(抗組胺藥，如異丙嗪;激素，如地塞米松;非留體抗炎藥，如羥基保泰松)、鈣通道阻滯劑(鹽酸地爾硫卓、硝苯地平、鹽酸維拉帕米)、細胞生長抑制劑(氟尿嘧啶)、水解劑(透明質酸酶、鏈激酶、尿激酶、胃蛋白酶、tPA)、膠原合成酶的抑制劑(曲尼斯特)、氧化還原劑(亞甲藍)、抗生素等。這些藥物可以抑制纖維結締組織生成，但是由于缺乏有效的藥物載體，全身給藥不能保證藥物到達粘連部位，并且藥物吸收過快，不能在粘連部位保持足夠的、穩定的藥物濃度，尚未獲得臨床的普遍認可。2)在粘連易發部位使用隔離材料，這可以在受損組織和周圍組織之間形成暫時的物理屏障。目前在臨床上使用的隔離材料是在體內可生物降解吸收的材料，主要有透明質酸鈉、聚乳酸、殼聚糖等。
[0004]透明質酸鈉是體內結締組織及滑液的組成成分，它的防粘連原理是基于其高分子流變特性、粘彈性及特殊的生物作用。透明質酸鈉凝膠(如上海康優錸醫療器械有限公司的欣可聆Singclean，廣州邦之桀醫療器械有限公司的施沛克等)已經應用于臨床治療，然而天然透明質酸鈉在植入部位降解過快，存留時間過短，因此僅在早期有防粘連作用，晚期則不明顯。盡管透明質酸膜(如科恩外科產品公司的seprafilm)通過交聯能夠延長體內存留時間，但是seprafilm降解調控困難，難以適應不同的手術部位，另外膜強度不足，并且存在嚴重的發炎情況，這些缺陷限制了其廣泛應用。
[0005]聚乳酸是一種合成高分子材料，具有良好的生物可降解性，能被體內完全降解，最終生成二氧化碳和水。聚乳酸防粘連膜(如廣州市弘健生物醫用制品科技有限公司的弘健可吸收屏障膜，無錫健普生物科技有限公司的健普防粘連膜，上海典范醫療科技有限公司的粘克粘連膜，迪康中科生物醫學材料有限公司的迪康可吸收醫用膜等)的原理是在手術創面形成暫時屏障，在手術粘連形成期過后自行降解。然而，聚乳酸膜粘附性差，不易貼附在組織部位，難于操作，并且其體內降解產物為酸性，積累后可引發顯著的炎癥反應，因此應用效果不理想。
[0006]殼聚糖是一種天然多糖材料，殼聚糖膜(北京百利康生化有限公司的百菲米防粘連膜，煙臺萬利醫用品有限公司的粘停寧防粘連膜等)在體內吸收時間較長，可形成物理屏障，從而減少粘連的發生。然而，殼聚糖膜粘附性和柔韌性差，這提高了手術的難度。另外，殼聚糖膜對降解速率要求很高，過度殘留會引發一定的排斥和毒性反應。
[0007]從上述現有技術可知，已有防粘膜產品還存在著以下技術難題需要解決:
I.防粘連膜需要兼具暫時屏障和藥物速釋-緩釋的雙重特性。防粘連膜在發揮其屏障作用的同時，還需要具有作為藥物載體釋放防粘連藥物的能力，即在最容易產生粘連的早期實現藥物速釋，在局部保證足夠高的藥物濃度，而在后期能夠局部緩釋藥物以保持易粘連部位具有較低的、持續穩定的藥物濃度。
[0008]2.提高防粘連膜的粘附性。受損組織部位通常處于不斷的運動中，防粘連膜粘附性不好的話容易移位，治療效果差，手術難度增高。通過選擇理想的隔離材料以及優化膜制備方法，可使得防粘連膜具有良好的細胞粘附性，以方便地貼附于受損組織表面，提高防粘連效果，同時降低手術難度。
[0009]3.實現防粘連膜降解時間的精細調控。通過改變制備條件實現對防粘連膜降解時間的精細調控，可制備出具有不同降解時間的防粘連膜，以適應不同創傷組織部位的需要。

【發明內容】

[0010]本發明設計了一種速釋-緩釋藥物膜及其制備方法，目的在于克服現有防粘膜產品的缺陷，提供一種粘附性好、降解時間精細可控、能夠速釋、緩釋防粘連藥物的速釋-緩釋藥物膜及其制備方法。
[0011 ] —種速釋-緩釋藥物膜，其特征在于:包括膜支架和包埋在所述膜支架中的藥物緩釋載體;所述膜支架中含有一種或多種藥物，所述膜支架能夠實現膜支架中含有藥物的速釋;所述藥物緩釋載體中含有一種或多種藥物，所述藥物緩釋載體能夠實現包含在所述藥物緩釋載體中的藥物的緩釋。
[0012]進一步的，所述的膜支架中的藥物以及所述的藥物緩釋載體中的藥物均為水溶性防粘連藥物。
[0013]進一步的，所述膜支架由成膠溶液和加入所述成膠溶液中的藥物經交聯劑交聯和干燥工藝制備而成；
所述成膠溶液是由明膠、羧甲基纖維素鈉、甘油和聚乙二醇混合制備而成;所述明膠為酸性明膠(A型明膠)或者堿性明膠(B型明膠)中的一種，所述明膠的分子量為10-300kDa，所述明膠的濃度為2-15%(W/V);所述羧甲基纖維素鈉濃度為0.05-1.5%(ff/V);所述甘油濃度為1-10%(V/V);所述聚乙二醇分子量為200-20000，所述聚乙二醇濃度為0.5-10%(W/V)。
[0014]進一步的，所述藥物緩釋載體為納米乳乳液，所述的納米乳乳液的制備方法包括如下步驟:
1)將預放置在藥物緩釋載體中的藥物在水中充分溶解，得到水相混合溶液a，所述的藥物濃度為1-10%(W/W);
2)將乳化劑、助乳化劑溶于油相混合混勻，得到油相混合溶液b；按質量比計，油相45-80份，乳化劑5-20份，助乳化劑3-10份；
3)室溫攪拌條件下，將a、b兩相溶液混合，于10000-15000r/min高速攪拌10_20min既得納米乳乳液;混合時，油相混合溶液b為40-80重量份，水相混合溶液a的用量為15-45重量份。
[0015]進一步的，所述乳化劑為藥劑學中親水親油平衡值HLB在3-6的表面活性劑，所述乳化劑為下述成分中的一種或二種復配:司盤80(span80)、大豆磷脂(SP)、卵磷脂、聚乙二醇辛癸酸甘油酯、脫水山梨醇倍半油酸酯(SQ0)、聚氧乙烯(40)氫化蓖麻油(RH40)、泊洛沙姆401、泊洛沙姆402;
所述助乳化劑為藥劑學中可接受的助表面活性劑，所述助乳化劑為無水乙醇、I，2-丙二醇、聚乙二醇400中的一種或二種復配;其中，所選用的乳化劑或者助乳化劑為二種組分復配時，兩種組分的濃度比為I: 10-10:1;
所述油相為油酸乙酯、蓖麻油、大豆油、玉米油、橄欖油、肉豆蔻酸異丙酯(IPM)、癸二酸丁二酯中的一種。
[0016]進一步的，所述的水溶性防粘連藥物為抗凝劑、抗炎劑、鈣通道阻滯劑、細胞生長抑制劑、水解劑、膠原合成酶的抑制劑、氧化還原劑和抗生素中的一種或幾種的復配;其中，所選用的防粘連水溶性藥物為二種藥物復配時，兩種藥物的濃度比為I: 100-100:1 ；
所述抗凝劑為肝素或水蛭素；
所述抗炎劑為抗組胺藥或者激素類藥物或者非留體抗炎藥;所述抗組胺藥為異丙嗪，所述激素類藥物為地塞米松，所述非留體抗炎藥為羥基保泰松；
所述鈣通道阻滯劑為鹽酸地爾硫卓、硝苯地平和鹽酸維拉帕米中的一種；
所述細胞生長抑制劑為氟尿嘧啶；
所述水解劑為透明質酸酶、鏈激酶、尿激酶、胃蛋白酶和tPA中的一種；
所述膠原合成酶的抑制劑為曲尼斯特；
所述氧化還原劑為亞甲藍；
所述抗生素為水溶性抗生素。
[0017]進一步的，所述膜支架中的水溶性防粘連藥物在成膠溶液中的含量為1-10%(W/V)，所述含有水溶性防粘連藥物的成膠溶液與含有防粘連藥物的藥物緩釋載體的體積比為5-20 ο
[0018]一種速釋-緩釋藥物膜的制備方法，其特征在于包含如下的步驟:
步驟一:制備含有防粘連藥物的藥物緩釋載體；
步驟二:制備含有防粘連藥物的成膠溶液;并將所述含有防粘連藥物的成膠溶液和步驟一中所述的含有防粘連藥物的藥物緩釋載體混合均勻；其中，所述含有防粘連藥物的成膠溶液依次經過交聯劑交聯以及干燥工藝處理后即為膜支架；
步驟三:使用交聯劑溫度梯度交聯步驟二所得到的含有藥物緩釋載體的成膠溶液，并在圖案化模板中制備水凝膠；
步驟四:將步驟三所制得的水凝膠經過溫度梯度干燥工藝處理后即得到所述的速釋-緩釋藥物膜。
[0019]進一步的，步驟三所述交聯劑為甲醛、戊二醛、京尼平、碳二亞胺中的一種，所述的交聯劑濃度為0.01-3%(W/V)，所述交聯為溫度梯度交聯，依次為4°C交聯2-6小時、20°C交聯4-8小時、30 °C交聯4-8小時；
步驟三所述的圖案化模板中，在所述的模板底部表面具有由溝槽構成的圖案;所述溝槽寬度為10-100微米，深度為10-50微米。
[0020]進一步的，步驟四所述的干燥工藝為溫度梯度干燥;所述的干燥工藝溫度梯度依次為4 °C干燥24-48小時、20 °C干燥2_4小時、30 °C干燥2_4小時、40 °C干燥I _3小時;所述的干燥工藝的送風角度及送風量為:4°C下不送風，200C下平行于膜表面送風600-1000 m3/h，30°C下平行于膜表面送風2400-3000 m3/h，40 °C下膜表面對流送風4500-6000 m3/h。
[0021]本發明的速釋-緩釋藥物膜及其制備方法具有以下有益效果:
1、本發明設計的速釋-緩釋藥物膜的膜支架中含有明膠成分，明膠是膠原水解的產物，具有良好的生物相容性，可體內降解，能起到類似細胞外基質的功能，因此明膠是制備組織支架的優良原料。明膠制備的膜具有良好的機械特性，在體內預定時間內可保持膜形態，因此可在受損組織和周圍組織間形成暫時屏障。另外，明膠膜具有細密的三維網絡結構，可以阻止成纖維細胞的侵入。尤其是，明膠膜柔韌性好，具有良好的粘附性，容易粘附在受損組織表面，減小了手術的難度。因此，明膠膜具有很好的防組織粘連的特性。也就是說，明膠的使用、膜表面圖案化顯著提高了防粘連膜的粘附性，使得膜能夠良好地貼附在受損組織表面，不容易移位，從而大大降低了手術的難度。
[0022]2、本發明設計的速釋-緩釋藥物膜的制備方法中使用了圖案化模板，這使得所制備的防粘連膜的一個表面具有圖案，而另一表面沒有圖案。膜表面圖案化顯著增加了膜表面的粗糙度，進一步提高了膜對受損組織表面的粘附性，這使得防粘連膜不容易移位，進一步降低了手術難度。而不具有圖案的膜表面的粘附性相對較低，適用于隔離周圍組織。
[0023]3、本發明設計的速釋-緩釋藥物膜的制備方法中采用了溫度梯度干燥工藝，通過控制干燥溫度、送風角度和風量使得非圖案化表面的光滑程度顯著提高，大大降低了此表面的細胞粘附性，從而進一步減少了成纖維細胞在膜上的粘附以及減輕了周圍組織對膜的粘連。
[0024]4、本發明設計的速釋-緩釋藥物膜可以通過明膠分子量、濃度以及交聯劑濃度調節防粘連膜的體內降解時間，但是調控作用過于強烈和寬泛。因此，本發明在膜支架制備中又引入了聚乙二醇分子。聚乙二醇和明膠分子可形成分子間氫鍵，這對膜支架三維網絡起到了較弱的強化作用，從而實現了對防粘連膜降解時間的更加精細的調控。
[0025]5、本發明設計的速釋-緩釋藥物膜兼具暫時屏障和藥物速釋-緩釋的雙重特性。本發明的速釋-緩釋藥物膜的膜支架為親水性支架，親水性防粘連藥物在其中包埋能夠實現藥物在最容易產生粘連的早期的速釋。本發明通過改變藥物在膜支架中的濃度來調控速釋藥物的起始濃度和速釋時間。
[0026]6、本發明設計的速釋-緩釋藥物膜中還含有疏水性藥物緩釋載體一一納米乳乳液。疏水性藥物緩釋載體能夠持續釋放親水性藥物，從而在后期使得易粘連部位保持較低的、穩定持續的藥物緩釋。本發明通過改變藥物緩釋載體組分、濃度及制備條件來調控藥物的緩釋速率，通過改變藥物載體和成膠溶液的比例來調控緩釋藥物的起始濃度和緩釋時間。
[0027]7、本發明設計的速釋-緩釋藥物膜的膜支架能夠將藥物緩釋載體嚴格限制在其內部，這避免了藥物緩釋載體的泄露，從而保證藥物在易粘連部位局部緩釋。
[0028]8、本發明設計的速釋-緩釋藥物膜使用的制備工藝尤其適合含有藥物緩釋載體的非均質防粘連膜的制備。本發明采用了溫度梯度的交聯方法，控制交聯速率較為恒定，這使得膜支架交聯更加均勻，膜結構變化很小，能夠最小化交聯反應對藥物活性、藥物緩釋載體結構及緩釋特性等的不良影響。另外，溫度梯度干燥工藝保證了非均質膜在干燥過程中失水速率較低、平穩、均勻，較好地保持了膜的完整性、柔韌性，并且避免了過快失水對藥物緩釋載體造成的結構破壞和緩釋能力的降低。
【附圖說明】
[0029]
圖1:本發明速釋-緩釋藥物膜制備工藝流程圖；
圖2:本發明速釋-緩釋藥物膜結構示意圖；
圖3:本發明圖案化模板中第一種模板底部的圖案；
圖4:本發明圖案化模板中第二種模板底部的圖案；
圖5:本發明圖案化模板中第三種模板底部的圖案；
圖6:本發明圖案化模板中第四種模板底部的圖案；
圖7:本發明溫度梯度干燥工藝中的平行送風示意圖；
圖8:本發明溫度梯度干燥工藝中的對流送風示意圖。
[0030]
附圖標記說明:
I 一膜支架;2 一膜支架中防粘連藥物;3 一藥物緩釋載體;4 一藥物緩釋載體中的防粘連藥物。
[0031]
【具體實施方式】
下面結合具體實施例和附圖1-8，對本發明做進一步說明:
本發明公開了一種速釋-緩釋藥物膜及其制備方法，如圖1所示，圖中給出了本發明速釋-緩釋藥物膜制備工藝流程圖，以便于更直觀和簡明的說明本發明產品的制備過程。首先需要制備含有防粘連藥物的藥物緩釋載體，制備含有防粘連藥物的成膠溶液，再將含有防粘連藥物的成膠溶液和含有防粘連藥物的藥物緩釋載體混合均勻，然后使用交聯劑交聯上述含有藥物緩釋載體的成膠溶液并在圖案化模板中制備水凝膠，最后將水凝膠經溫度梯度干燥制備得到速釋-緩釋藥物膜。
[0032]同時，圖2中也給出了本發明速釋-緩釋藥物膜結構示意圖，從圖2中可以更清楚的看出本發明速釋-緩釋藥物膜包括膜支架和包埋在膜支架中的藥物緩釋載體的整體結構；圖中I為膜支架，2為膜支架中的防粘連藥物，3為包埋在膜支架I中的藥物緩釋載體，4為藥物緩釋載體中的防粘連藥物。
[0033]實施例1
(I)制備含有防粘連藥物的藥物緩釋載體:
稱取0.5g氟尿嘧啶置于50g水中，攪拌充分溶解得水相混合溶液a;將司盤80 20g，聚乙二醇400 12g溶于ISOg玉米油中混合均勻得油相混合溶液b;室溫下將45g的水相混合溶液a和120g的油相混合溶液b混合，于10000r/min高速攪拌1min后得透明/半透明W/0載藥緩釋微乳載體。
[0034](2)制備含有防粘連藥物的成膠溶液，并和步驟(I)的含有防粘連藥物的藥物緩釋載體混合均勻: 制備含2%(W/V)堿性明膠(分子量10 1^&)、0.05%(￥/^)羧甲基纖維素鈉、1%(￥八0甘油、0.5%(W/V)聚乙二醇(分子量200)的混合水溶液，即成膠溶液。將防粘連藥物異丙嗪和硝苯地平溶解在上述成膠溶液中，兩者濃度均為0.5%(W/V)。之后，將此溶液和含有緩釋藥物的藥物緩釋載體混合均勻，兩者體積比為5:1。
[0035](3)使用交聯劑交聯步驟(2)中混合均勻的成膠溶液，并在圖案化模板中制備水凝膠；
使用戊二醛交聯成膠溶液，戊二醛的濃度為0.01%(W/V)。使用帶有圖案(圖3)的模板(溝槽寬度為10微米，深度為10微米)進行交聯，交聯條件為溫度梯度交聯:依次為4°C交聯2小時、20 °C交聯4小時、30 °C交聯4小時。
[0036](4)將步驟(3)所制得的水凝膠經過溫度梯度干燥工藝后即得速釋-緩釋藥物膜。
[0037]進行溫度梯度干燥:依次為4 °C干燥24小時、20 °C干燥2小時、30 °C干燥2小時、40 °C干燥I小時。干燥時的送風角度及送風量為:4°C下不送風，20°C下平行于膜表面送風600m3/h(如圖7所示)，30 °C下平行于膜表面送風2400 m3/h(如圖7所示)，40 °C下膜表面對流送風4500 m3/h(如圖8所示)。
[0038]上述工藝制備得到的防粘連膜經20kGy輻照滅菌后，進行腹腔粘連動物模型實驗:取家兔21只，全身麻醉，沿中線解剖開腹部，取出子宮角，用砂紙造成子宮角漿膜嚴重擦傷，產生出血，造成嚴重創面。分組:7只使用制備的速釋-緩釋藥物防粘連膜作為實驗組；7只采用弘健可吸收屏障膜作為陽性對照組;7只作為空白對照組，然后縫合腹壁。20天后觀察，發現實驗組的動物腹腔內都沒有發生粘連，膜出現了明顯降解，沒有發生移位，優良率100%;陽性對照組三只出現傷口延期愈合現象，但未影響結果，膜出現降解和移位現象，優良率為57%;空白對照組腹腔內產生了嚴重的粘連，粘連范圍廣泛且粘連強度很高。
[0039]
實施例2
(I)制備含有防粘連藥物的藥物緩釋載體:
稱取5.5g鏈激酶置于55g水中，攪拌充分溶解得水相混合溶液a;將泊洛沙姆401 20g，無水乙醇1g溶于SOg癸二酸丁二酯中混合均勻得油相混合溶液b;室溫下將45g的水相混合溶液a和80g的油相混合溶液b混合，于15000r/min高速攪拌20min后得透明/半透明W/0載藥緩釋微乳載體。
[0040](2)制備含有防粘連藥物的成膠溶液，并和步驟(I)的含有防粘連藥物的藥物緩釋載體混合均勻:
制備含15%(W/V)酸性明膠(分子量300kDa)、1.5%(W/V)羧甲基纖維素鈉、10%(V/V)甘油、10%(W/V)聚乙二醇(分子量20000 )的混合水溶液，即成膠溶液。將防粘連藥物地塞米松和亞甲藍溶解在上述成膠溶液中，兩者濃度均為5%(W/V)。之后，將此溶液和含有緩釋藥物的藥物緩釋載體混合均勻，兩者體積比為20:1。
[0041](3)使用交聯劑交聯步驟(2)中混合均勻的成膠溶液，并在圖案化模板中制備水凝膠；
使用京尼平交聯成膠溶液，京尼平的濃度為3%(W/V)。使用帶有圖案(圖4)的模板(溝槽寬度為100微米，深度為50微米)進行交聯，交聯條件為溫度梯度交聯:依次為4°C交聯6小時、20 °C交聯8小時、30 °C交聯8小時。
[0042](4)將步驟(3)所制得的水凝膠經過溫度梯度干燥工藝后即得速釋-緩釋藥物膜。
[0043]進行溫度梯度干燥:依次為4°C干燥48小時、20°C干燥4小時、30°C干燥4小時、40°C干燥3小時。干燥時的送風角度及送風量為:4°C下不送風，20 °C下平行于膜表面送風1000m3/h(如圖7所示)，30 °C下平行于膜表面送風3000 m3/h(如圖7所示)，40 °C下膜表面對流送風6000 m3/h(如圖8所示)。
[0044]上述工藝制備得到的防粘連膜經20kGy輻照滅菌后，進行腹腔粘連動物模型實驗，具體操作步驟同實施例1。
[0045]20天后觀察，發現實驗組的動物腹腔內都沒有發生粘連，膜出現了明顯降解，沒有發生移位，優良率100%;陽性對照組兩只出現傷口延期愈合現象，但未影響結果，膜出現降解和移位現象，優良率為71%;空白對照組腹腔內產生了嚴重的粘連，粘連范圍廣泛且粘連強度很高。
[0046]實施例3
(I)制備含有防粘連藥物的藥物緩釋載體:
稱取0.2g曲尼斯特置于20g水中，攪拌充分溶解得水相混合溶液a;將脫水山梨醇倍半油酸酯20g，I，2-丙二醇1g溶于80g橄欖油中混合均勻得油相混合溶液b;室溫下將15g的水相混合溶液a和80g的油相混合溶液b混合，于15000r/min高速攪拌1min后得透明/半透明W/0載藥緩釋微乳載體。
[0047](2)制備含有防粘連藥物的成膠溶液，并和步驟(I)的含有防粘連藥物的藥物緩釋載體混合均勻；
制備含2%(W/V)堿性明膠(分子量300kDa)、1.5%(W/V)羧甲基纖維素鈉、1%(V/V)甘油、10%(W/V)聚乙二醇(分子量200)的混合水溶液，即成膠溶液。將防粘連藥物肝素和亞甲藍溶解在上述成膠溶液中，兩者濃度均為5%(W/V)。之后，將此溶液和含有緩釋藥物的藥物緩釋載體混合均勻，兩者體積比為5:1。
[0048](3)使用交聯劑交聯步驟(2)中混合均勻的成膠溶液，并在圖案化模板中制備水凝膠；
使用甲醛交聯成膠溶液，甲醛的濃度為0.01%( W/V ) O使用帶有圖案(圖3 )的模板(溝槽寬度為100微米，深度為10微米)進行交聯，交聯條件為溫度梯度交聯:依次為4°C交聯2小時、20 °C交聯8小時、30 °C交聯4小時。
[0049](4)將步驟(3)所制得的水凝膠經過溫度梯度干燥工藝后即得速釋-緩釋藥物膜。
[0050]進行溫度梯度干燥:依次為4 0C干燥24小時、20 °C干燥4小時、30 °C干燥2小時、40 °C干燥3小時。干燥時的送風角度及送風量為:4°C下不送風，20°C下平行于膜表面送風600m3/h(如圖7所示)，30 °C下平行于膜表面送風3000 m3/h(如圖7所示)，40 °C下膜表面對流送風4500 m3/h(如圖8所示)。
[0051]上述工藝制備得到的防粘連膜經20kGy輻照滅菌后，進行腹腔粘連動物模型實驗，具體操作步驟同實施例1。
[0052]20天后觀察，發現實驗組的動物腹腔內都沒有發生粘連，膜出現了明顯降解，沒有發生移位，優良率100%;陽性對照組三只出現傷口延期愈合現象，但未影響結果，膜出現降解和移位現象，優良率為57%;空白對照組腹腔內產生了嚴重的粘連，粘連范圍廣泛且粘連強度很高。
[0053]實施例4
(I)制備含有防粘連藥物的藥物緩釋載體:
稱取2g異丙嗪置于25g水中，攪拌充分溶解得水相混合溶液a;將豆磷脂15g，I，2-丙二醇15g溶于45g油酸乙酯中混合均勻得油相混合溶液b;室溫下將a，b兩相混合，于1000r/min高速攪拌20min后得透明/半透明W/0載藥緩釋微乳載體。
[0054](2)制備含有防粘連藥物的成膠溶液，并和步驟(I)的含有防粘連藥物的藥物緩釋載體混合均勻:
制備含5%(W/V)堿性明膠(分子量200 1^&)、0.2%(￥/^)羧甲基纖維素鈉、3%(￥八0甘油、5%(W/V)聚乙二醇(分子量4000)的混合水溶液，即成膠溶液。將防粘連藥物肝素和羥基保泰松溶解在上述成膠溶液中，兩者濃度均為0.8mg/ml。之后，將此溶液和含有緩釋藥物的藥物緩釋載體混合均勻，兩者體積比為15:1。
[0055](3)使用交聯劑交聯步驟(2)中混合均勻的成膠溶液，并在圖案化模板中制備水凝膠；
使用戊二醛交聯成膠溶液，戊二醛的濃度為0.2%(V/V)。使用帶有圖案(圖4)的模板(溝槽寬度為30微米，深度為25微米)進行交聯，交聯條件為溫度梯度交聯:依次為4°C交聯3小時、20 °C交聯4小時、30 °C交聯5小時。
[0056](4)將步驟(3)所制得的水凝膠經過溫度梯度干燥工藝后即得速釋-緩釋藥物膜。
[0057]進行溫度梯度干燥:依次為4°C干燥24小時、20°C干燥2小時、30°C干燥3小時、40°C干燥I小時。干燥時的送風角度及送風量為:4°C下不送風，20°C下平行于膜表面送風800m3/h(如圖7所示)，30 °C下平行于膜表面送風2700 m3/h(如圖7所示)，40 °C下膜表面對流送風5000 m3/h(如圖8所示)。
[0058]上述工藝制備得到的防粘連膜經20kGy輻照滅菌后，進行腹腔粘連動物模型實驗，具體操作步驟同實施例1。
[0059]20天后觀察，發現實驗組的動物腹腔內都沒有發生粘連，膜出現了明顯降解，沒有發生移位，優良率100%;陽性對照組兩只出現傷口延期愈合現象，但未影響結果，膜出現降解和移位現象，優良率為71%;空白對照組腹腔內產生了嚴重的粘連，粘連范圍廣泛且粘連強度很高。
[0060]實施例5
(I)制備含有防粘連藥物的藥物緩釋載體:
稱取Ig鹽酸地爾硫卓置于20g水中，攪拌充分溶解得水相混合溶液a;將23g聚氧乙烯
(60)氫化蓖麻油，9g聚乙二醇400溶于60g肉豆蔻酸異丙酯中混合均勻得油相混合溶液b;室溫下將a，b兩相混合，于15000r/min高速攪拌15min后得透明/半透明W/0載藥緩釋微乳載體。
[0061](2)制備含有防粘連藥物的成膠溶液，并和步驟(I)的含有防粘連藥物的藥物緩釋載體混合均勻:
制備含8%(W/V)酸性明膠(分子量50 kDa)、0.6%(W/V)羧甲基纖維素鈉、5%(V/V)甘油、3%(W/V)聚乙二醇(分子量10000)的混合水溶液，即成膠溶液。將防粘連藥物鹽酸維拉帕米和曲尼斯特溶解在上述成膠溶液中，兩者濃度分別為2mg/ml和0.5mg/ml。之后，將此溶液和含有緩釋藥物的藥物載體混合均勻，兩者體積比為8:1。
[0062](3)使用交聯劑交聯步驟(2)中混合均勻的成膠溶液，并在圖案化模板中制備水凝膠；
使用京尼平交聯成膠溶液，京尼平的濃度為0.4%(V/V)。使用帶有圖案(圖6)的模板(溝槽寬度為50微米，深度為40微米)進行交聯，交聯條件為溫度梯度交聯:依次為4 0C交聯5小時、20 °C交聯6小時、30 °C交聯6小時。
[0063](4)將步驟(3)所制得的水凝膠經過溫度梯度干燥工藝后即得速釋-緩釋藥物膜。
[0064]進行溫度梯度干燥:依次為4°C干燥36小時、20°C干燥3小時、30°C干燥2小時、40°C干燥2小時。干燥時的送風角度及送風量為:4°C下不送風，20°C下平行于膜表面送風1000m3/h(如圖7所示)，30 °C下平行于膜表面送風2900 m3/h(如圖7所示)，40 °C下膜表面對流送風5500 m3/h(如圖8所示)。
[0065]上述工藝制備得到的防粘連膜經20kGy輻照滅菌后，進行腹腔粘連動物模型實驗，具體操作步驟同實施例1。
[0066]20天后觀察，發現實驗組的動物腹腔內都沒有發生粘連，膜出現了明顯降解，沒有發生移位，優良率100%;陽性對照組三只出現傷口延期愈合現象，但未影響結果，膜出現降解和移位現象，優良率為57%;空白對照組腹腔內產生了嚴重的粘連，粘連范圍廣泛且粘連強度很高。
[0067]實施例6
(I)制備含有防粘連藥物的藥物緩釋載體:
稱取0.5g水蛭素置于16g水中，攪拌充分溶解得水相混合溶液a;將18g三蓖麻油酸聚甘油，1g丙三醇溶于45g癸二酸丁二酯中混合均勻得油相混合溶液b;室溫下將a，b兩相混合，于12000r/min高速攪拌20min后得透明/半透明W/0載藥緩釋微乳載體。
[0068](2)制備含有防粘連藥物的成膠溶液，并和步驟(I)的含有防粘連藥物的藥物緩釋載體混合均勻:
制備含10%(w/v)堿性明膠(分子量300 kDa)、l%(W/V)羧甲基纖維素鈉、8%(V/V)甘油、1%(W/V)聚乙二醇(分子量20000)的混合水溶液，即成膠溶液。將防粘連藥物氟尿嘧啶、鏈激酶和亞甲藍溶解在上述成膠溶液中，兩者濃度分別為0.7mg/ml、lmg/ml和0.5mg/ml。之后，將此溶液和含有緩釋藥物的藥物載體混合均勻，兩者體積比為12:1。
[0069](3)使用交聯劑交聯步驟(2)中混合均勻的成膠溶液，并在圖案化模板中制備水凝膠；
使用甲醛交聯成膠溶液，甲醛的濃度為1%( V/V)。使用帶有圖案(圖5 )的模板(溝槽寬度為70微米，深度為50微米)進行交聯，交聯條件為溫度梯度交聯:依次為4 °C交聯6小時、20°C交聯8小時、30 °C交聯7小時。
[0070](4)將步驟(3)所制得的水凝膠經過溫度梯度干燥工藝后即得速釋-緩釋藥物膜。[0071 ] 進行溫度梯度干燥:依次為4 0C干燥48小時、20 °C干燥4小時、30 °C干燥4小時、40 °C干燥3小時。干燥時的送風角度及送風量為:4°C下不送風，20°C下平行于膜表面送風900m3/h(如圖7所示)，30 °C下平行于膜表面送風2800 m3/h(如圖7所示)，40 °C下膜表面對流送風5800 m3/h(如圖8所示)。
[0072]上述工藝制備得到的防粘連膜經20kGy輻照滅菌后，進行腹腔粘連動物模型實驗，具體操作步驟同實施例1。
[0073]30天后觀察，發現實驗組的動物腹腔內都沒有發生粘連，膜出現了明顯降解，沒有發生移位，優良率100%;陽性對照組四只出現傷口延期愈合現象，但未影響結果，膜出現降解和移位現象，優良率為43%;空白對照組腹腔內產生了嚴重的粘連，粘連范圍廣泛且粘連強度很高。
[0074]本發明設計的速釋-緩釋藥物防粘連膜兼具暫時屏障和藥物速釋-緩釋的雙重特性。本發明設計的速釋-緩釋藥物膜中的膜支架為親水性支架，親水性防粘連藥物在其中包埋能夠實現藥物在最容易產生粘連的早期的速釋。本發明通過改變藥物在膜支架中的濃度來調控速釋藥物的起始濃度和速釋時間。此外，本發明設計的速釋-緩釋藥物膜中還含有疏水性藥物緩釋載體一一納米乳乳液。疏水性藥物緩釋載體能夠持續釋放親水性藥物，從而在后期使得易粘連部位保持較低的、穩定持續的藥物緩釋。本發明通過改變藥物緩釋載體組分、濃度及制備條件來調控藥物的緩釋速率，通過改變藥物載體和成膠溶液的比例來調控緩釋藥物的起始濃度和緩釋時間。
[0075]本發明的速釋-緩釋藥物膜生物相容性和粘附性好，可完全降解吸收、降解時間可控，具有暫時屏障及速釋-緩釋防粘連藥物的雙重防粘連作用，克服了已有技術的缺陷。
[0076]上面結合附圖對本發明進行了示例性的描述，顯然本發明的實現并不受上述方式的限制，只要采用了本發明的方法構思和技術方案進行的各種改進，或未經改進將本發明的構思和技術方案直接應用于其它場合的，均在本發明的保護范圍內。
【主權項】
1.一種速釋-緩釋藥物膜，其特征在于:包括膜支架和包埋在所述膜支架中的藥物緩釋載體;所述膜支架中含有一種或多種藥物，所述膜支架能夠實現膜支架中含有藥物的速釋；所述藥物緩釋載體中含有一種或多種藥物，所述藥物緩釋載體能夠實現包含在所述藥物緩釋載體中的藥物的緩釋。2.根據權利要求1所述的速釋-緩釋藥物膜，其特征在于: 所述的膜支架中的藥物以及所述的藥物緩釋載體中的藥物均為水溶性防粘連藥物。3.根據權利要求1或2所述的速釋-緩釋藥物膜，其特征在于: 所述膜支架由成膠溶液和加入所述成膠溶液中的藥物經交聯劑交聯和干燥工藝制備而成； 所述成膠溶液是由明膠、羧甲基纖維素鈉、甘油和聚乙二醇混合制備而成;所述明膠為酸性明膠(A型明膠)或者堿性明膠(B型明膠)中的一種，所述明膠的分子量為10-300kDa，所述明膠的濃度為2-15%(W/V);所述羧甲基纖維素鈉濃度為0.05-1.5%(ff/V);所述甘油濃度為1-10%(V/V);所述聚乙二醇分子量為200-20000，所述聚乙二醇濃度為0.5-10%(W/V)。4.根據權利要求3所述的速釋-緩釋藥物膜，其特征在于: 所述藥物緩釋載體為納米乳乳液，所述的納米乳乳液的制備方法包括如下步驟: 1)將預放置在藥物緩釋載體中的藥物在水中充分溶解，得到水相混合溶液a，所述的藥物濃度為1_10%(W/W); 2)將乳化劑、助乳化劑溶于油相混合混勻，得到油相混合溶液b;按質量比計，油相45-80份，乳化劑5-20份，助乳化劑3-10份； 3)室溫攪拌條件下，將a、b兩相溶液混合，于10000-15000r/min高速攪拌10-20min既得納米乳乳液；混合時，油相混合溶液b為40-80重量份，水相混合溶液a的用量為15-45重量份。5.根據權利要求1或2或4所述的速釋-緩釋藥物膜，其特征在于: 所述乳化劑為藥劑學中親水親油平衡值HLB在3-6的表面活性劑，所述乳化劑為下述成分中的一種或二種復配:司盤80(span80)、大豆磷脂(SP)、卵磷脂、聚乙二醇辛癸酸甘油酯、脫水山梨醇倍半油酸酯(SQO)、聚氧乙烯(40)氫化蓖麻油(RH40)、泊洛沙姆401、泊洛沙姆402； 所述助乳化劑為藥劑學中可接受的助表面活性劑，所述助乳化劑為無水乙醇、I，2-丙二醇、聚乙二醇400中的一種或二種復配;其中，所選用的乳化劑或者助乳化劑為二種組分復配時，兩種組分的濃度比為I: 10-10:1; 所述油相為油酸乙酯、蓖麻油、大豆油、玉米油、橄欖油、肉豆蔻酸異丙酯(IPM)、癸二酸丁二酯中的一種。6.根據權利要求5所述的速釋-緩釋藥物膜，其特征在于: 所述的水溶性防粘連藥物為抗凝劑、抗炎劑、鈣通道阻滯劑、細胞生長抑制劑、水解劑、膠原合成酶的抑制劑、氧化還原劑和抗生素中的一種或幾種的復配;其中，所選用的防粘連水溶性藥物為二種藥物復配時，兩種藥物的濃度比為I: 100-100:1 ； 所述抗凝劑為肝素或水蛭素； 所述抗炎劑為抗組胺藥或者激素類藥物或者非留體抗炎藥;所述抗組胺藥為異丙嗪，所述激素類藥物為地塞米松，所述非留體抗炎藥為羥基保泰松； 所述鈣通道阻滯劑為鹽酸地爾硫卓、硝苯地平和鹽酸維拉帕米中的一種； 所述細胞生長抑制劑為氟尿嘧啶； 所述水解劑為透明質酸酶、鏈激酶、尿激酶、胃蛋白酶和tPA中的一種； 所述膠原合成酶的抑制劑為曲尼斯特； 所述氧化還原劑為亞甲藍； 所述抗生素為水溶性抗生素。7.根據權利要求2或4或6所述的速釋-緩釋藥物膜，其特征在于: 所述膜支架中的水溶性防粘連藥物在成膠溶液中的含量為1-10%( W/V)，所述含有水溶性防粘連藥物的成膠溶液與含有防粘連藥物的藥物緩釋載體的體積比為5-20。8.—種根據權利要求1-7所述的速釋-緩釋藥物膜的制備方法，其特征在于包含如下的步驟: 步驟一:制備含有防粘連藥物的藥物緩釋載體； 步驟二:制備含有防粘連藥物的成膠溶液;并將所述含有防粘連藥物的成膠溶液和步驟一中所述的含有防粘連藥物的藥物緩釋載體混合均勻；其中，所述含有防粘連藥物的成膠溶液依次經過交聯劑交聯以及干燥工藝處理后即為膜支架； 步驟三:使用交聯劑溫度梯度交聯步驟二所得到的含有藥物緩釋載體的成膠溶液，并在圖案化模板中制備水凝膠； 步驟四:將步驟三所制得的水凝膠經過溫度梯度干燥工藝處理后即得到所述的速釋-緩釋藥物膜。9.根據權利要求8所述的速釋-緩釋藥物膜的制備方法，其特征在于: 步驟三所述交聯劑為甲醛、戊二醛、京尼平、碳二亞胺中的一種，所述的交聯劑濃度為0.(n-3%(W/V)，所述交聯為溫度梯度交聯，依次為4°C交聯2-6小時、20°C交聯4-8小時、30°C交聯4-8小時； 步驟三所述的圖案化模板中，在所述的模板底部表面具有由溝槽構成的圖案;所述溝槽寬度為10-100微米，深度為10-50微米。10.根據權利要求9所述的速釋-緩釋藥物膜的制備方法，其特征在于: 步驟四所述的干燥工藝為溫度梯度干燥;所述的干燥工藝溫度梯度依次為4°C干燥24-48小時、20 °C干燥2-4小時、30 °C干燥2_4小時、40 °C干燥1_3小時;所述的干燥工藝的送風角度及送風量為:4°C下不送風，200C下平行于膜表面送風600-1000 m3/h，30°C下平行于膜表面送風2400-3000 m3/h，40°C下膜表面對流送風4500-6000 m3/h。
【文檔編號】A61L31/06GK105854090SQ201610219516
【公開日】2016年8月17日
【申請日】2016年4月11日
【發明人】劉玉石, 孫韶潔
【申請人】大連諾伊生物技術有限責任公司