一種小檗堿納米復合物及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于醫藥衛生領域，涉及小檗堿的新劑型，具體涉及一種小檗堿納米復合物及其制備方法。
【背景技術】
[0002]小檗堿卬6外641^381?，864)，是多種中草藥如黃連、黃芩等有效成份之一。臨床上用來治療急慢性胃腸炎等胃腸疾病，歷史悠久，療效確切。近年來研究表明，小檗堿具有抗腫瘤、抗心律失常、降血脂、降血糖、改善胰島素抵抗、預防血管狹窄、治療阿爾茨海默病等作用，適用范圍廣，而且小檗堿是目前中藥中為數不多的可以人工合成的小分子化合物。
[0003]但是小檗堿目前仍未廣泛運用于臨床，目前研究表明，小檗堿屬于季銨型異喹啉類生物堿，呈強堿性，荷正電，由于其溶解度低，生物膜透過性差，口服吸收不佳，且易被胃腸道中的蛋白吸附而影響吸收，造成難于達到發揮藥理作用的有效濃度，生物利用度極低，嚴重限制了小檗堿在臨床重大疾病中的運用。
【發明內容】
[0004]本發明的目的在于克服現有技術的不足之處，提供了一種小檗堿納米復合物及其制備方法，通過將小檗堿與聚苯乙烯馬來酸酐形成高分子納米復合物，增加小檗堿的生物膜透過能力，提高小檗堿的生物利用度，具有廣泛的應用前景。
[0005]本發明解決其技術問題所采用的技術方案之一是:
[0006]—種小檗堿納米復合物的制備方法，室溫下，將分子量為10000?25000的苯乙烯-馬來酸酐交替共聚物溶于N，N_ 二甲基甲酰胺和三乙胺中，再加入小檗堿，攪拌過夜;加入碳酸氫鈉的飽和水溶液，再次攪拌0.5?1.5h后；除去分子量在4000kD以下的物質，冷凍干燥或真空干燥，將干燥后的固體溶于水中制成9?I lmg/ml的溶液，超聲處理35?45min，即得所述之小檗堿納米復合物;所述苯乙烯-馬來酸酐交替共聚物、N，N-二甲基甲酰胺、三乙胺、小檗堿、碳酸氫鈉的飽和水溶液的配方比例為1.8?2.2g: 9?I Iml:0.9?1.1ml:480?520mg:4.8?5.2m10
[0007]—實施例中:所述苯乙烯-馬來酸酐交替共聚物、N，N_ 二甲基甲酰胺、三乙胺、小檗堿、碳酸氫鈉的飽和水溶液的配方比例為2g:1Oml: Iml:500mg:5mlo
[0008]—實施例中:所述苯乙烯-馬來酸酐交替共聚物的分子量為20000。
[0009]一實施例中:采用透析袋除去分子量在3500kD以下的物質。
[0010]一實施例中:所述小檗堿納米復合物為微束結構。
[0011 ] —實施例中:所述小檗堿納米復合物可進入細胞，定位于細胞內溶酶體。
[0012]本發明解決其技術問題所采用的技術方案之二是:
[0013]上述的小檗堿納米復合物的制備方法的制藥用途。
[0014]本發明解決其技術問題所采用的技術方案之三是:
[0015]—種小檗堿納米復合物，所述小檗堿納米復合物為微束結構，可定位于細胞內溶酶體，該小檗堿納米復合物由聚苯乙烯馬來酸酐與小檗堿在N，N-二甲基甲酰胺和三乙胺中反應形成，且小檗堿包埋于苯乙烯-馬來酸酐交替共聚物中。
[0016]本發明解決其技術問題所采用的技術方案之四是:
[0017]上述的小檗堿納米復合物的制藥用途。
[0018]本技術方案與【背景技術】相比，它具有如下優點:
[0019]本發明的要點在于各組分的摩爾比及制備方法，小檗堿屬于異喹啉類生物堿，荷正電，聚苯乙烯馬來酸酐的親水部分荷負電，在結合中正負電荷因靜電引力而相互結合；同時小檗堿和聚苯乙烯馬來酸酐各自的親水部分被疏水的基團取代，致使納米復合的化合物的水溶性降低而析出沉淀，從而促使反應向生成復合物的方向進行，增加了反應轉化率，且大量沉淀析出，易于清洗收集，干燥后即可得到小檗堿納米復合物。該小檗堿納米復合物可以增加小檗堿的生物膜透過能力，可提高小檗堿的生物利用度，擴展了小檗堿的臨床應用范圍，有望用于多種腫瘤、消化道、內分泌、心腦血管系統的急慢性疾病的治療。
【附圖說明】
[0020]下面結合附圖和實施例對本發明作進一步說明。
[0021]圖1為dRB的分子結構式。
[0022]圖2為小檗堿的分子結構式。
[0023]圖3為本發明實驗例2的小檗堿納米復合物dRBOP-Berb的合成反應式示意圖，其中五角星代表dRB，三角形代表小檗堿。
[0024]圖4為實驗例2的小檗堿納米復合物dRBOP-Berb的紫外表征結果示意圖，橫坐標為波長，縱坐標為吸收度。
[0025]圖5為實驗例2的小檗堿納米復合物dRB@P-Berb在pH值為7時的平均粒徑示意圖。
[0026]圖6為實驗例2的小檗堿納米復合物dRB@P-Berb在pH值為7時的Zeta電勢示意圖。
[0027]圖7為實驗例2的小檗堿納米復合物dRB@P-Berb在pH值為4時的平均粒徑示意圖。
[0028]圖8為實驗例2的小檗堿納米復合物dRB@P-Berb在pH值為4時的Zeta電勢示意圖。
[0029]圖9為對比例I的dRBOP在pH值為7時的平均粒徑示意圖。
[0030]圖1O為對比例I的dRBOP在pH值為7時的Zeta電勢示意圖。
[0031 ] 圖11為對比例I的dRBOP在pH值為4時的平均粒徑示意圖。
[0032]圖12為對比例I的dRBOP在pH值為4時的Zeta電勢示意圖。
[0033]圖13為實驗例2的小檗堿納米復合物dRBOP-Berb對B16F10細胞作用的熒光照片，圖中第一行為dRBOP-Berb組，第二行為對照組；第一列為dRB顯色照片，第二列為Lysotracker green顯色照片，第三列為第一列與第二列的合成照，第四列為細胞的白光照片。其中，第一行左一圖為dRBOP-Berb組的dRB顯色照片，細胞內散在分布有紅色熒光點，為羅丹明dRB顯色，說明小檗堿納米復合物dRB@P-Berb已進入B16F10細胞;第一行左二為dRB@P-Berb組的Lysotracker green顯色照片，Lysotracker green為溶酶體特異性染料，細胞內綠色焚光即表不溶酶體;第一行右二為第一行左一與第一行左二的合成圖，第一行左一的紅色熒光與第一行左二的綠色熒光有部分疊加，顯示出黃色熒光，表明小檗堿納米復合物dRB@P-Berb可進入B16F10細胞，且可定位于溶酶體。第二行左一為對照組的dRB顯色照片，未發現紅色熒光點的存在。
[0034]圖14為實驗例2的小檗堿納米復合物dRBOP-Berb對U87細胞作用的熒光照片，圖中第一行為dRBOP-Berb組，第二行為對照組;第一列為dRB顯色照片，第二列為Lysotrackergreen顯色照片，第三列為第一列與第二列的合成照，第四列為細胞的白光照片。其中，第一行左一圖SdRBOP-Berl^l的dRB顯色照片，細胞內散在分布有紅色熒光點，為羅丹明dRB顯色，說明小檗堿納米復合物dRBOP-Berb已進入U87細胞；第一行左二為dRBOP-Berb組的Lysotracker green顯色照片，Lysotracker green為溶酶體特異性染料，細胞內綠色焚光即表示溶酶體;第一行右二為第一行左一與第一行左二的合成圖，第一行左一的紅色熒光與第一行左二的綠色熒光有部分疊加，顯示出黃色熒光，表明小檗堿納米復合物dRBOP-Berb可進入U87細胞，且可定位于