一種菲立莫妥的制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于藥物化學領域，設及一種菲立莫妥的制備方法，具體而言，包括通過還 原、烷基化和共沉淀法制備得到菲立莫妥。
【背景技術】
[0002] 貧血是人體外周血紅細胞容量減少，低于正常范圍下限的一種臨床綜合癥。中國 人口中的貧血患病率約為20. 1 %，誘發原因較多，其中半數由缺鐵導致。臨床上的治療方法 包括輸血、藥物治療、脾切除術及造血干細胞移植等。
[0003] 在藥物治療中，補鐵劑對于缺鐵性貧血患者的治療作用是最為顯著的。目前臨床 上使用的補鐵劑主要包括靜脈注射補鐵劑與口服補鐵劑。口服鐵劑雖然使用較為方便，但 口服生物利用度低，安全有效性差。靜脈補鐵劑與口服補鐵劑相比，可W更好地改善患者的 缺鐵狀況，且不良反應發生率僅為3% (口服鐵劑為20%，主要為胃腸道副作用）。因此靜 脈補鐵劑為臨床上主要使用的補鐵藥物。
[0004] 目前世界上供臨床應用的靜脈鐵劑主要有6種，包括低分子右旋糖酢鐵、高分子 右旋糖酢鐵、葡萄糖酸鐵鋼、薦糖鐵、菲立莫妥（英文名：ferumoxytol，商品名：f釣勸aeme愈 )和簇基麥芽糖鐵（Injeaafer'i^ )。其中菲立莫妥是由聚葡萄糖山梨醇簇甲酸包裹超順磁 氧化鐵形成的納米顆粒，于2009年由FDA批準上市，用于治療慢性腎病（CKD)成人患者的 缺鐵性貧血。在6種靜脈鐵劑中，菲立莫妥的分子量最大（750kDa)，鐵含量最高（元素鐵 30mg/mL)，血液透析最難清除。在一個由700例CKD 1-5期患者參與的前瞻、雙盲、交叉試 驗中，菲立莫妥不良反應發生率與接受生理鹽水注射的患者相似。 陽0化]然而，發明人發現，作為一種經聚葡萄糖山梨醇簇甲酸（polyglucose sorbitol carboxymethylether，一種改性的葡聚糖）包裹修飾的超順磁性氧化鐵，現有技術中菲立 莫妥的制備存在諸多困難，例如反應過程不易控制、產品的穩定性不高、重現性差等（WO 00/61191A2)。本發明將致力于解決上述問題。
【發明內容】
[0006] 本發明提供了一種菲立莫妥的制備方法，包括如下步驟：
[0007] 1)右旋糖酢Tio經棚氨化鋼還原；
[0008] 2)堿性條件下，步驟1)制得的被還原的右旋糖酢TlO與面代乙酸進行烷基化反應 制得聚葡萄糖山梨醇簇甲酸；
[0009] 3)步驟2)制得的聚葡萄糖山梨醇簇甲酸、氯化亞鐵、氯化鐵于水中混合，調抑至 10-12,惰性氣體保護下進行反應；
[0010] 4)通入空氣或氧氣繼續反應。
[0011] 其中，步驟1)中右旋糖酢TlO與棚氨化鋼的摩爾比為1:10-50,優選1:20-40,更 優選1:25-35,最優選1:30。
[0012] 步驟I)中反應溫度為20-40°C，優選30°C。
[0013] 其中，步驟2)中，步驟1)制得的被還原的右旋糖酢TlO與面代乙酸的摩爾比為 1:20-60,優選1:50。面代乙酸優選為一面代乙酸，更優選為一氯代乙酸、一漠代乙酸，最優 選為一漠代乙酸。
[0014] 步驟2)中反應溫度為50-80°C，優選65-75°C，更優選70°C。
[0015] 步驟2)中堿性條件可通過加入堿例如氨氧化鋼或其水溶液實現，其他堿還包括 氨氧化鐘。面代乙酸與堿的摩爾比為1:2-10,優選1:4。
[0016] 步驟2)中制得的聚葡萄糖山梨醇簇甲酸可W是其鹽的形式，例如鋼鹽形式。
[0017] 其中，步驟3)中，氯化亞鐵與氯化鐵可W是其水合物形式，例如四水合氯化亞鐵、 六水合氯化鐵等，氯化亞鐵與氯化鐵的摩爾比為1:1.4-1. 6,優選為約1:1.5 ;步驟2)制得 的聚葡萄糖山梨醇簇甲酸與鐵（W氯化亞鐵和氯化鐵的總摩爾量計）的摩爾比為1:30-50， 優選 1:30-40。 陽018] 步驟3)中，可使用濃氨水、氨氧化鋼、氨氧化鐘、氨氧化裡、甲胺、四甲基氨氧化 錠、或其中一種或多種的混合物調節抑，優選采用濃氨水。
[0019] 步驟3)中的反應溫度為50-90°C，優選60-80°C。
[0020] 本發明提供的聚葡萄糖山梨醇簇甲酸中平均每摩爾聚葡萄糖山梨醇簇甲酸約含 有14摩爾簇甲基（-CH2COOH)。本發明提供的菲立莫妥的制備方法，通過控制反應條件，使 得制備出的菲立莫妥粒徑更均一、包覆層厚度更均勻，菲立莫妥原料藥更穩定，反應重現性 高，也便于對進一步制備菲立莫妥靜脈制劑進行質量控制。
【具體實施方式】
[0021] 通過W下實施例進一步舉例描述本發明，并不W任何方式限制本發明。對本發明 所作的本領域普通技術人員容易實現的任何改動或改變都將落入本發明的范圍內。
[0022] MWCO(Mole州Iar Wei曲t Cut Off):截留分子量
[0023] 實施例一菲立莫妥的制備
[0024] 步驟1 :還原反應
[0025] 將右旋糖酢TlO(100g)溶解于水（300血）中，加入棚氨化鋼（11. 3g)，30°C下攬拌 24h后，滴加6M肥1水溶液澤滅反應，并調節抑為6. 5。將反應完畢的溶液轉移入MWCO SkDa的透析袋中，透析袋置于蒸饋水中透析2地，每隔化更換一次蒸饋水。透析液使用MWCO SkDa的超濾膜進行濃縮，濃縮液經過0. 22 y m濾膜過濾后加入無水乙醇于濾液中得到白色 乳濁液，真空濃縮后得到SOg白色固體物質即被還原的右旋糖酢T 10。
[0026] 步驟2 :烷基化反應
[0027] 將步驟1制得的被還原的右旋糖酢T IO(IOg)溶解于水巧0血）中，室溫下加入一 漠乙酸化95g)和50% (g/ml)化OH水溶液（16血）。70°C下攬拌24h后停止加熱。使用6M 鹽酸水溶液調節抑為7.5。將反應完畢的溶液轉移入MWCO SkDa的透析袋中，透析袋置于 蒸饋水中透析2地，每隔化更換一次蒸饋水。透析液使用MWCO SkDa的超濾膜進行濃縮，濃 縮液經過0. 22 y m濾膜過濾后加入無水乙醇于濾液中得到白色乳濁液，真空濃縮得到9g白 色固體物質即聚葡萄糖山梨醇簇甲酸鋼鹽。 陽0測步驟3 :共沉淀法
[0029] 將聚葡萄糖山梨醇簇甲酸鋼鹽（IOg)溶解于IOOmL水中得到溶液X，將六水合氯化 鐵化g)和四水合氯化亞鐵（3g)分別溶解于30mL的蒸饋水中形成溶液Y和溶液Z。在氮氣 流持續通入下，依次將溶液Y和溶液Z加入溶液X中，充分混合后，攬拌30min。低溫下滴加 28%的濃氨水于反應溶液中，調抑至11，升溫至78°C攬拌比，得到棟黑色溶液。撤去氮氣 流，用空氣置換，保持溫度繼續攬拌化，得到棟紅色溶液。停止加熱與攬拌，待反應液降至室 溫，先后使用0. 8 y m和0. 45 y m的濾膜過濾除去大顆粒，轉移入MWCO IOkDa的透析袋中進 行透析（每隔化更換一次透析使用的注射用水），4化后使用MWCO IOkDa的超濾膜對透析 液進行離屯、濃縮，濃縮液經過0. 22 y m濾膜過濾兩次即得到菲立莫妥的原料藥28ml。
[0030] 實施例二菲立莫妥的制備
[0031] 步驟1 :還原反應
[0032] 將右旋糖酢TlO(100g)溶解于水（300mL)中，加入棚氨化鋼（3. 77g)，30°C下攬拌 24h后，滴加6M肥1水溶液澤滅反應，并調節抑為6. 5。將反應完畢的溶液轉移入MWCO SkDa的透析袋中，透析袋置于蒸饋水中透析2地，每隔化更換一次蒸饋水。透析液使用MWCO SkDa的超濾膜進行濃縮，濃縮液經過0. 22 y m濾膜過濾后加入無水乙醇于濾液中得到白色 乳濁液，真空濃縮后得到SOg白色固體物質即被還原的右旋糖酢T 10。
[0033] 步驟2 :烷基化反應
[0034] 將步驟1制得的被還原的右旋糖酢TlO(IOg)溶解于水巧0血）中，室溫下加入漠 乙酸化79g)和50% (g/ml)化OH水溶液（7血）。70°C下攬拌24h后停止加熱。使用6M鹽 酸水溶液調節抑為7.5。將反應完畢的溶液轉移入MWCO SkDa的透析袋中，透析袋置于蒸 饋水中透析2地，每隔化更換一次蒸饋水。透析液使用MWCO SkDa的超濾膜進行濃縮，濃縮 液經過0. 22 y m濾膜過濾后加入無水乙醇于濾液中得到白色乳濁液，真空濃縮得到9g白色 固體物質即聚葡萄糖山梨醇簇甲酸鋼鹽。 陽0對步驟3 :共沉淀法
[0036] 將聚葡萄糖山梨醇簇甲酸鋼鹽（Sg)溶解于IOOmL水中得到溶液X，將六水合氯化 鐵化g)和四水合氯化亞鐵（3g)分別溶解于30mL的蒸饋水中形成溶液Y和溶液Z。在氮氣 流持續通入下，依次將溶液Y和溶液Z加入溶液X中，充分混合后，攬拌30min。低溫下滴加 28%的濃氨水于反應溶液中，調抑至11，升溫至78°C攬拌比，得到棟黑色溶液。撤去氮氣 流，用空氣置換，保持溫度繼續攬拌化，得到棟紅色溶液。停止加熱與攬拌，待反應液降至室 溫，先后使用0. 8 y m和0. 45 y m的濾膜過濾除去大顆粒，轉移入MWCO IOkDa的透析袋中進 行透析（每隔化更換一次透析使用的注射用水），4化后使用MWCO IOkDa的超濾膜對透析 液進行離屯、濃縮，濃縮液經過0. 22 y m濾膜過濾兩次即得到菲立莫妥的原料藥24ml。
[0037] 實施例=所得產品（整個膠粒）平均粒徑（直徑）與粒徑多分散性系數的測定 (儀器為Malvern Nano ZS90粒度電位分析儀，產品稀釋至相同濃度后測定）
[0038] 實驗過程：首先準備樣品，將待測產品分別加水稀釋得到濃度為Img/血和0.1 mg/ mL的兩種樣品，并加入ImL樣品于樣品池中。其次運行設備與檢測軟件，分別檢測兩種不同 濃度下的產品粒徑，后對兩種樣品粒徑數據取平均值，其中兩種濃度的樣品的粒徑應比較 接近，應不依賴于樣品濃度。
[0039]
【主權項】
1. 一種菲立莫妥的制備方法，其特征在于包括以下步驟： 1) 右旋糖酐T10經硼氫化鈉還原； 2) 堿性條件下，步驟1)制得的被還原的右旋糖酐T10與鹵代乙酸進行烷基化反應制得 聚葡萄糖山梨醇羧甲醚； 3) 步驟2)制得的聚葡萄糖山梨醇羧甲醚、氯化亞鐵、氯化鐵于水中混合，調pH至 10-12,惰性氣體保護下進行反應； 4) 通入空氣或氧氣繼續反應。2. 權利要求1所述的制備方法，其中步驟1)中右旋糖酐T10與硼氫化鈉的摩爾比為 1:10-50,優選 1:20-40,更優選 1:25-35,最優選 1:30。3. 權利要求1所述的制備方法，其中步驟2)中，步驟1)制得的被還原的右旋糖酐T10 與鹵代乙酸的摩爾比為1:20-60,優選為1:50。4. 權利要求1或3所述的制備方法，其中所述的鹵代乙酸選自一氯代乙酸、一溴代乙 酸。5. 權利要求4所述的制備方法，其中所述的鹵代乙酸為一溴代乙酸。6. 權利要求1所述的制備方法，其中步驟2)中所述的堿性條件通過加入氫氧化鈉或其 水溶液實現。7. 權利要求6所述的制備方法，其中步驟2)中鹵代乙酸與氫氧化鈉的摩爾比為 1:2-10〇8. 權利要求1所述的制備方法，其中步驟3)中氯化亞鐵與氯化鐵的摩爾比為 1:1. 4-1. 6〇9. 權利要求8所述的制備方法，其中步驟3)中氯化亞鐵與氯化鐵的摩爾比為1:1. 5。10. 權利要求1所述的制備方法，其中步驟3)中，步驟2)制得的聚葡萄糖山梨醇羧甲 醚與鐵（以氯化亞鐵和氯化鐵的總摩爾量計）的摩爾比為1:30-50。
【專利摘要】本發明涉及一種菲立莫妥的制備方法，具體包括通過還原反應、烷基化反應和共沉淀法制備得到菲立莫妥。本發明提供的制備方法，使得制備出的菲立莫妥粒徑更均一，包覆層厚度更均勻，菲立莫妥原料藥更穩定，反應重現性高。
【IPC分類】A61P3/02, A61K47/48, A61P7/06, A61K33/26
【公開號】CN105597105
【申請號】CN201410665353
【發明人】顧寧, 劉飛, 陳博, 劉彥龍, 吉民
【申請人】連云港潤眾制藥有限公司, 東南大學
【公開日】2016年5月25日
【申請日】2014年11月19日