黃柏活性部位、制備方法及其應用
【技術領域】
[0001] 本發明屬于中藥及保健品技術領域，涉及中藥活性成分的分離和篩選，尤其涉及 一種黃柏活性部位、制備方法及其應用。
【背景技術】
[0002] 隨著人民生活水平的提高，飲食方式的轉變，高尿酸血癥的發病率在我國呈逐年 上升的趨勢。高尿酸血癥被證明與痛風、腎功能障礙、心血管疾病、高血壓、高血脂癥、胰島 素抵抗、糖尿病、代謝綜合征等密切相關。因此，開發預防和治療高尿酸血癥的藥物日益成 為醫藥領域研發人員的研究目標。由于西藥在治療高尿酸血癥存在的種種不良反應，而中 藥由于其相對安全性和有效性，在治療痛風和高尿酸血癥方面日益受到人們的關注。許多 學者開始從天然產物中篩選降尿酸藥物，并對藥物中的降尿酸活性成分和作用機制開展了 相關研究。中藥黃柏是中藥復方(二妙丸、三妙丸、四妙丸)治療高尿酸血癥和痛風的成分之 一。有研究表明中藥黃柏具有降尿酸活性。但是有效組分并不清楚。
【發明內容】
[0003] 為了克服現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種黃柏活性部位及其制備方 法，本發明的制備方法獲得了黃柏里的降尿酸的活性成分，動物實驗結果顯示，本發明的黃 柏活性部位具有降尿酸活性
[0004] 本發明技術方案具體介紹如下。
[0005] 本發明提供一種黃柏活性部位，其由下述步驟制備得到：
[0006] (1)用乙醇溶液對黃柏進行熱提取，得到黃柏的乙醇提取液；
[0007] (2)濃縮，脫除乙醇，得到脫醇后提取物；
[0008] (3)利用石油醚萃取脫醇后提取物，得到黃柏的石油醚部位；
[0009] (4)將黃柏的石油醚部位濃縮、烘干得到黃柏活性部位。
[0010] 上述步驟⑴中，乙醇溶液的濃度在60-80wt %之間，熱提取的溫度為65-75°C，熱 提取1-3次，每次乙醇溶液的用量為6-8L/kg黃柏，提取時間在1-3小時之間。
[0011] 上述步驟(3)中，用石油醚萃取2-5次，石油醚和脫醇后提取物的體積比在1:3~3: 1之間。
[0012] 本發明還提供一種黃柏活性部位的制備方法，具體步驟如下：
[0013] (1)用乙醇溶液對黃柏進行熱提取，得到黃柏的乙醇提取液；
[0014] (2)濃縮，脫除乙醇，得到脫醇后提取物；
[0015] (3)利用石油醚萃取脫醇后提取物，得到黃柏的石油醚部位；
[0016] (4)將黃柏的石油醚部位濃縮、烘干得到黃柏活性部位。
[0017] 上述制備方法的步驟（1)中，乙醇溶液的濃度在60_80wt%之間，熱提取的溫度為 65-75°C，熱提取1 _3次，每次乙醇溶液的用量為6-8L/kg黃柏，提取時間在1 -3小時之間。
[0018] 上述制備方法的步驟(3)中，用石油醚萃取2-5次，每次石油醚和脫醇后提取物的 體積比在1:3~3:1之間。
[0019] 本發明還提供上述制備方法得到的黃柏活性部位。
[0020] 本發明還進一步提供一種黃柏活性部位在制備降尿酸的中藥制劑中的應用。
[0021] 進一步的，本發明還提供一種黃柏活性部位在制備治療高尿酸血癥或痛風的中藥 復方制劑中的應用。
[0022] 本發明的有益效果在于，本發明通過石油醚萃取的方式獲得中藥黃柏的活性部 位，活性部位具有顯著的降尿酸活性，可以進一步用于篩選制備和開發降尿酸藥物及復方 制劑。
【具體實施方式】
[0023]下面結合實施例對本發明的技術方案進一步詳細闡述。
[0024]實施例1黃柏各提取組分的制備
[0025] (1)提取與濃縮:稱取2kg的黃柏藥材，分別用15L 70%乙醇70°C下熱提兩次。第一 次3小時，第二次2小時。合并提取液濃縮至無醇，濃縮液體積7L。
[0026] (2)萃取分離：用石油醚(60-90°C)，萃取溶劑為7L，萃取三次。合并濃縮、烘干。得 石油醚萃取物18.9g(提取率約1%)。
[0027] 實施例2石油醚提取部位的降尿酸活性評價
[0028] 1.材料:氧嗪酸鉀購自阿達瑪斯公司（上海）；別嘌醇片(上海信誼萬象藥業股份有 限公司）；苯溴馬隆膠囊(昆山龍燈瑞迪制藥有限公司）。尿酸檢測試劑盒購自南京建成生物 工程研究所
[0029] 2.藥品的配制:模型藥氧嗪酸鉀及各治療藥物均用0.5%羧甲基纖維素鈉混懸。別 嘌醇片、苯溴馬隆先將藥品壓成粉末后分別用羧甲基纖維素鈉配置成40mg/kg、20mg/kg混 懸液。根據2010版中國藥典，黃柏的用量為12g，小鼠劑量換算后準確稱取石油醚組分用羧 甲基纖維素鈉配置成15.6mg/kg混懸液。
[0030] 3.實驗分組和給藥：SPF級雄性昆明小鼠30只，體重（20 ± 2)g，購自上海斯萊克斯 實驗動物有限公司，實驗動物合格證號SCffi(滬)2012-0002。在整個實驗過程中自由飲水和 取食。適應性飼養一周后，隨機分為5組。分別為對照組、模型組、石油醚組、別嘌醇組、苯溴 馬隆組。采用灌胃尿酸酶抑制劑氧嗪酸鉀誘導產生高尿酸血癥動物模型。給藥前1小時禁 食，不禁水。對照組灌胃0.5 %的羧甲基纖維素鈉，模型組灌胃250mg/kg氧嗪酸鉀混懸液，連 續給藥一周。石油醚組、別嘌醇組、苯溴馬隆組在每天造模給藥1小時后分別灌胃給藥石油 醚提取組分混懸液、別噪醇混懸液、苯溴馬隆混懸液。給藥體積15 m I / k g。最后一天給藥1小 時后，小鼠摘眼球取血，室溫靜置1小時后使用離心機4°C下離心，獲得血清。血清里的尿酸 含量使用尿酸試劑盒檢測。
[0031 ] 4.實驗結果:實驗結果見表1。
[0032]表 1
[0034] 林P〈〇 · 01 林P〈〇 · 001與模型組比
[0035] 由表1中可以看出石油醚組分具有降尿酸活性，是黃柏里的降尿酸活性的有效成 分。也即本發明的黃柏活性部位具有降尿酸活細胞活性，可應用于制備降尿酸的中藥制劑， 以及用于制備治療高尿酸血癥或痛風的中藥復方制劑。
【主權項】
1. 一種黃柏活性部位，其特征在于，其由下述步驟制備得到： (1) 用乙醇溶液對黃柏進行熱提取，得到黃柏的乙醇提取液； (2) 濃縮，脫除乙醇，得到脫醇后提取物； (3) 利用石油醚萃取脫醇后提取物，得到黃柏的石油醚部位； (4) 將黃柏的石油醚部位濃縮、烘干得到黃柏活性部位。2. 如權利要求1所述的黃柏活性部位，其特征在于，步驟（1)中，乙醇溶液的濃度在60-80wt%之間，熱提取的溫度為65-75°C，熱提取1-3次，每次乙醇溶液的用量為6-8L/kg黃柏， 提取時間在1_3小時之間。3. 如權利要求1所述的黃柏活性部位，其特征在于，步驟⑶中，用石油醚萃取2-5次，石 油醚和脫醇后提取物的體積比在1:3~3:1之間。4. 一種黃柏活性部位的制備方法，其特征在于，具體步驟如下： (1) 用乙醇溶液對黃柏進行熱提取，得到黃柏的乙醇提取液； (2) 濃縮，脫除乙醇，得到脫醇后提取物； (3) 利用石油醚萃取脫醇后提取物，得到黃柏的石油醚部位； (4) 將黃柏的石油醚部位濃縮、烘干得到黃柏活性部位。5. 根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟（1)中，乙醇溶液的濃度在60-80wt%之間，熱提取的溫度為65-75°C，熱提取1-3次，每次乙醇溶液的用量為6-8L/kg黃柏， 提取時間在1_3小時之間。6. 根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，用石油醚萃取2-5次，石油 醚和脫醇后提取物的體積比在1:3~3:1之間。7. -種黃柏活性部位在制備降尿酸的中藥制劑中的應用。8. -種黃柏活性部位在制備治療高尿酸血癥或痛風的中藥復方制劑中的應用。
【專利摘要】本發明屬于中藥及保健品技術領域，具體為一種黃柏活性部位、制備方法及其應用。本發明先用乙醇溶液對黃柏進行提取，得到黃柏的乙醇提取液；接著濃縮乙醇提取液，得到無醇的黃柏提取液；然后利用石油醚溶劑萃取，得到黃柏的石油醚部位；最后濃縮，得到黃柏活性部位。動物實驗結果顯示，本發明的石油醚部位具有降尿酸活性，可應用于篩選制備降尿酸的中藥組分和研制低毒高效的治療高尿酸血癥或痛風的中藥復方制劑。
【IPC分類】A61P19/06, A61K36/756
【公開號】CN105434629
【申請號】CN201610040174
【發明人】王凱, 許旭, 婁子洋, 董昕, 夏德萌, 杜紅麗, 趙紅霞, 謝沁媚
【申請人】上海應用技術學院
【公開日】2016年3月30日
【申請日】2016年1月21日