一種防治仔豬腹瀉的微生態制劑及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及防治仔豬腹瀉的生物制劑，具體地指一種防治仔豬腹瀉的微生態制劑及其制備方法。
【背景技術】
[0002]仔豬由于免疫系統發育不完善，在受到外界刺激時易發生腹瀉。尤其是仔豬的早期斷奶措施會從營養、心理和環境等方面刺激仔豬，導致仔豬發生早期斷奶應激，嚴重時引起仔豬發生腹瀉甚至死亡。生產實踐中廣泛使用抗生素來緩解仔豬腹瀉，但隨著抗生素的耐藥性和食品安全等問題的日益突出，禁用抗生素已經成為一種必然趨勢。
[〇〇〇3]目前常用由益生菌組成的微生態制劑來部分替代豬用抗生素的使用。但這類微生態制劑存在生產程序復雜、生產成本高于抗生素、菌株在運輸和儲存階段易失活等不利因素，從而在一定程度上限制了此類微生態制劑的推廣與應用。
【發明內容】
[0004]本發明的目的是提供一種防治仔豬腹瀉的微生態制劑及其制備方法。該微生態制劑以豬糞便為原料制備而成，用于防治仔豬腹瀉，具有顯著的效果，從而可以在防治仔豬腹瀉過程中減少豬用抗生素的使用量。
[0005]為實現上述目的，本發明提供一種防治仔豬腹瀉的微生態制劑，所述微生態制劑由豬的糞便菌液和菌株保護劑組成。其中，每毫升微生態制劑中活菌數量為1〇3?101(]個。
[0006]進一步地，所述豬為生長健康的貴州從江香豬（一種極少發生腹瀉的中國地方品種豬）。
[0007]再進一步地，所述豬的糞便菌液制備方法為：收集生長健康的貴州從江香豬糞便，加入到無菌生理鹽水中制成懸液，用不銹鋼茶漏和細胞篩（孔徑為0.224毫米）依次過濾懸液，得到豬的糞便菌液。采用活菌計數法對豬糞便菌液中的活菌計數，并根據計數結果將豬糞便菌液中的活菌含量調整為1〇3?10個/毫升。
[0008]再進一步地，所述豬的糞便菌液中至少含有以下一種或幾種門類的細菌和真菌。這些細菌門類包括擬桿菌門、厚壁菌門、螺旋體門、變形菌門、放線菌門、互養菌門、疣微菌門、廣古菌門、梭桿菌門、纖維桿菌門、軟壁菌門、衣原體門、脫鐵桿菌門、迷蹤菌門；真菌門類包括子囊菌門、擔子菌門、接合菌門。
[0009]進一步鑒定發現，所述豬的糞便菌液中至少含有以下一種或幾種屬類的細菌和真菌。這些細菌屬類包括擬桿菌屬、彎曲菌屬、梭菌屬、脫硫弧菌屬、乳桿菌屬、顫桿菌克屬、普氏菌屬、瘤胃球菌屬、鏈球菌屬、琥珀酸弧菌屬、密螺旋體屬；真菌屬類包括鏈格孢屬、曲霉菌屬、假絲酵母屬、枝孢屬、德巴利氏酵母屬、漢遜酵母屬、炭團菌屬、青霉屬、隔孢伏革菌屬、莖點霉屬、擬青霉屬、踝節菌屬、孢圓酵母屬、木霉菌屬、絲孢酵母屬。
[0010]再進一步地，所述菌株保護劑是質量分數為〇. 5%?5%的碳酸氫鈉溶液。
[0011]本發明還提供了一種防治仔豬腹瀉的微生態制劑的制備方法，包括以下步驟：
[0012]1)收集生長健康的貴州從江香豬糞便，加入到無菌生理鹽水中制成懸液，用不銹鋼茶漏和細胞篩（孔徑為0.224毫米）依次過濾懸液，得到豬的糞便菌液。采用活菌計數法對豬糞便菌液中的活菌計數，并根據計數結果將豬糞便菌液中的活菌含量調整為1〇3?101°個/暈升。
[0013]2)將步驟1)中制得的豬糞便菌液與菌株保護劑按體積比（1:1?5:1)混合均勻，得到微生態制劑。其中，每毫升微生態制劑中活菌數量為1〇3?10 個。
[0014]如需長途運輸或者長期存放，為了保持豬糞便和豬糞便菌液中菌的活性，可以使用以下兩種方法：
[0015]1)收集生長健康的貴州從江香豬糞便，置于液氮中低溫保存。使用前通過37°C水浴快速解凍豬糞便，然后用于制備微生態制劑。
[0016]2)收集生長健康的貴州從江香豬糞便，加入到無菌生理鹽水中制成懸液，用不銹鋼茶漏和細胞篩（孔徑為0.224毫米）依次過濾懸液，得到豬的糞便菌液。采用活菌計數法對豬糞便菌液中的活菌計數，并根據計數結果將豬糞便菌液中的活菌含量調整為1〇4?1011個/毫升。然后向豬糞便菌液中加入甘油得到豬糞便菌液凍存液（甘油的體積分數為10% )，置于液氮中低溫保存。使用前通過37°C水浴快速復蘇豬糞便菌液中的菌，然后將復蘇后的豬糞便菌液中的活菌含量稀釋為1〇3?101°個/毫升，最后加入菌株保護劑，混合均勻，制成微生態制劑。
[0017]使用時，將微生態制劑灌服至仔豬胃中，灌服劑量為1?10毫升/次，日服一次。
[0018]本發明的微生態制劑與現有的豬用微生態制劑相比，有以下優點：
[0019]1)本發明的微生態制劑制作過程簡單，生產成本較低，具有顯著的防治仔豬腹瀉效果，且不影響仔豬的生長性能。
[0020]2)本發明的微生態制劑有助于豬糞便的循環再利用，實現變廢為寶，減少豬糞便對環境的污染。
【具體實施方式】
[0021]為了更好地解釋本發明，以下結合具體實施例進一步闡明本發明的主要內容，但本發明的內容不僅僅局限于以下實施例。
[0022]實施例1
[0023]微生態制劑的制備方法為：
[0024]1)收集生長健康且斷奶后第八天的貴州從江香豬仔豬糞便，置于液氮中低溫保存。制備豬糞便菌液時，通過37°C水浴快速解凍豬糞便，然后加入到無菌生理鹽水中制成懸液。用不銹鋼茶漏和細胞篩（孔徑為0.224毫米）依次過濾懸液，得到豬的糞便菌液。采用活菌計數法對豬糞便菌液中的活菌計數，并根據計數結果將豬糞便菌液中的活菌含量調整為104?10 11個/毫升，然后向豬糞便菌液中加入甘油得到豬糞便菌液凍存液（甘油的體積分數為10% )，置于液氮中低溫保存。
[0025]其中，所述豬的糞便菌液中至少含有以下一種或幾種屬類的細菌和真菌。這些細菌屬類包括擬桿菌屬、彎曲菌屬、梭菌屬、脫硫弧菌屬、乳桿菌屬、顫桿菌克屬、普氏菌屬、瘤胃球菌屬、鏈球菌屬、琥珀酸弧菌屬、密螺旋體屬；真菌屬類包括鏈格孢屬、曲霉菌屬、假絲酵母屬、枝孢屬、德巴利氏酵母屬、漢遜酵母屬、炭團菌屬、青霉屬、隔孢伏革菌屬、莖點霉屬、擬青霉屬、踝節菌屬、孢圓酵母屬、木霉菌屬、絲孢酵母屬。
[0026]2)使用前通過37°C水浴快速復蘇豬糞便菌液中的菌，然后將復蘇后的豬糞便菌液中的活菌含量稀釋為1〇3?10 個/毫升。將稀釋后的豬糞便菌液與菌株保護劑按體積比（1:1?5:1)混合均勾，得到微生態制劑。其中，每毫升微生態制劑中活菌含量為103?1010 個。
[0027] 在仔豬日齡第10、12、14、16、18天，將制備的微生態制劑灌服至長X大二元雜交仔豬胃中，灌服劑量為1?10毫升/次，日服一次。與未實施該微生態制劑灌服的長X大二元雜交仔豬組相比，該微生態制劑灌服組在斷奶（21日齡）后第1?11天階段的腹瀉率顯著降低了 60%，生長性能無顯著變化。
[0028]實施例2
[0029] 微生態制劑的制備方法為：
[0030]1)收集生長健康且斷奶后第八天的貴州從江香豬仔豬糞便，置于液氮中低溫保存。制備豬糞便菌液時，通過37°C水浴快速解凍豬糞便，然后加入到無菌生理鹽水中制成懸液。用不銹鋼茶漏和細胞篩（孔徑為0.224毫米）依次過濾懸液，得到豬的糞便菌液。采用活菌計數法對豬糞便菌液中的活菌計數，并根據計數結果將豬糞便菌液中的活菌含量調整為104?10 11個/毫升，然后向豬糞便菌液中加入甘油得到豬糞便菌液凍存液（甘油的體積分數為10% )，置于液氮中低溫保存。
[0031]其中，所述豬的糞便菌液中至少含有以下一種或幾種屬類的細菌和真菌。這些細菌屬類包括擬桿菌屬、彎曲菌屬、梭菌屬、脫硫弧菌屬、乳桿菌屬、顫桿菌克屬、普氏菌屬、瘤胃球菌屬、鏈球菌屬、琥珀酸弧菌屬、密螺旋體屬；真菌屬類包括鏈格孢屬、曲霉菌屬、假絲酵母屬、枝孢屬、德巴利氏酵母屬、漢遜酵母屬、炭團菌屬、青霉屬、隔孢伏革菌屬、莖點霉屬、擬青霉屬、踝節菌屬、孢圓酵母屬、木霉菌屬、絲孢酵母屬。
[0032]2)使用前通過37°C水浴快速復蘇豬糞便菌液中的菌，然后將復蘇后的豬糞便菌液中的活菌含量稀釋為1〇3?10 個/毫升。將稀釋后的豬糞便菌液與菌株保護劑按體積比（1:1?5:1)混合均勾，得到微生態制劑。其中，每毫升微生態制劑中活菌含量為103?1010 個。
[0033] 將制備的微生態制劑分別灌服至15頭斷奶前發生嚴重腹瀉的仔豬胃中，灌服劑量為1?10毫升/次，日服一次。次日，仔豬的腹瀉率降低了 50%。第三日，所有腹瀉仔豬的腹瀉癥狀基本消失。
[0034]其它未詳細說明的部分均為現有技術。盡管上述實施例對本發明做出了詳盡的描述，但它僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部實施例，人們還可以根據本實施例在不經創造性前提下獲得其他實施例，這些實施例都屬于本發明保護范圍。
【主權項】
1.一種防治仔豬腹瀉的微生態制劑，其特征在于:所述微生態制劑由豬的糞便菌液和菌株保護劑組成；其中，每毫升微生態制劑中活菌含量為103?10 w個。2.根據權利要求1所述防治仔豬腹瀉的微生態制劑，其特征在于:所述豬為生長健康的貴州從江香豬。3.根據權利要求1或2所述防治仔豬腹瀉的微生態制劑，其特征在于:所述豬的糞便菌液制備方法為:收集生長健康的貴州從江香豬糞便，加入到無菌生理鹽水中制成懸液，用不銹鋼茶漏和細胞篩依次過濾懸液，得到豬的糞便菌液，對豬糞便菌液中的活菌計數，并根據計數結果將豬糞便菌液中的活菌含量調整為103?10 個/毫升。4.根據權利要求1或2所述防治仔豬腹瀉的微生態制劑，其特征在于:所述菌株保護劑是質量分數為0.5%?5%的碳酸氫鈉溶液。5.一種權利要求1所述防治仔豬腹瀉的微生態制劑制備方法，其特征在于:包括以下步驟: 1)收集生長健康的貴州從江香豬糞便，加入到無菌生理鹽水中制成懸液，用不銹鋼茶漏和細胞篩依次過濾懸液，得到豬的糞便菌液，對豬糞便菌液中的活菌計數，并根據計數結果將豬糞便菌液中的活菌含量調整為103?10 個/毫升； 2)將步驟1)中制得的豬糞便菌液與菌株保護劑按體積比1?5: 1混合均勻，得到微生態制劑；其中，每毫升微生態制劑中活菌含量為103?10 w個。
【專利摘要】本發明公開了一種防治仔豬腹瀉的微生態制劑及其制備方法。該微生態制劑以豬糞便為原料制備而成，用于防治仔豬腹瀉，具有顯著的效果，從而可以在防治仔豬腹瀉過程中減少豬用抗生素的使用量。該方法首先收集生長健康的貴州從江香豬糞便，加入到無菌生理鹽水中制成懸液，用不銹鋼茶漏和細胞篩(孔徑為0.224毫米)依次過濾懸液，得到豬的糞便菌液。再向豬的糞便菌液中加入菌株保護劑，混合均勻，得到微生態制劑，其中，每毫升微生態制劑中活菌數量為103～1010個。使用時，將微生態制劑灌服至仔豬胃中，灌服劑量為1～10毫升/次，日服一次。本發明的微生態制劑制作過程簡單，生產成本較低，具有顯著的防治仔豬腹瀉的效果，且不影響仔豬的生長性能。
【IPC分類】A61K35/74, A61P1/12, A61K35/24, A61K36/06
【公開號】CN105343125
【申請號】CN201510740876
【發明人】晏向華, 胡軍, 聶楊帆
【申請人】華中農業大學
【公開日】2016年2月24日
【申請日】2015年11月3日