一種組合物及其在升高白細胞的藥物中的應用
【技術領域】
[0001] 本發明設及有機合成和藥物化學領域，具體設及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術】
[0002] 白細胞減少癥是由于原因不明和繼發于其他疾病之后而引起的疾病，分為原發性 和繼發性兩大類。原發性者原因不明；繼發性者認為其病因可由急性感染，物理、化學因素， 血液系統疾病，伴脾腫大的疾病，結締組織疾病，過敏性疾病，遺傳性疾病等，獲得性或原因 不明性粒細胞減少等。
[0003] 白細胞減少的治療目前已有的藥物存在毒性大、安全性低的問題，從天然產物中 尋找化合物或先導化合物并進行結構修飾獲得其衍生物，從而得到高效低毒的潛在藥物有 重要價值。 W04] 本發明設及的化合物I是一個2011年發表（AyumiOhsakietal.，2011.SalviskinoneA,aditerpenewithanewskeletonfromSalviaprzewalskii. Tetr址e化onLetters52(2011) 1375 - 1377)的化合物，我們對化合物I進行了結構修飾， 獲得了兩個新的衍生物即化合物HI和化合物IV，并用化合物HI和化合物IV制備了組合 物并對該組合物升高白細胞活性進行了評價，其具有升高白細胞活性。
【發明內容】
陽0化]本發明公開了一個新的組合物，該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合 物中化合物III和化合物IV的質量百分數分別為40%和60%。
[0006]
[0007] 本發明公開的組合物可W制成藥學上可接受的鹽或藥學上可接受的載體。
[0008] 本發明的目的是提供組合物在制備升高白細胞藥物中的應用。本發明組合物可W 顯著升高失血和化學物品引起的白細胞降低。
[0009] W下通過實施例對本發明作進一步詳細的說明，但本發明的保護范圍不受具體實 施例的任何限制，而是由權利要求加W限定。
【具體實施方式】
[0010] 實施例1化合物SalviskinoneA的制備
[0011] 化合物SalviskinoneA(I)的制備方法參照Ayumi化saki等人發表的文獻 (AyumiOhsakietal. , 2011.SalviskinoneA,aditerpenewithanewskeletonfrom Salviaprzewalskii.TetrahedronLetters52 (2011) 1375 - 1377)的方法。
[0012]
[0013] 實施例2SalviskinoneA的0-漠乙基衍生物（II)的合成
[0014] 將化合物I(312mg，1.OOmmol)溶于15血苯，向溶液中加入四下基漠化錠燈BAB) (0. 08g)，1，2-二漠乙燒化760g，20.OOmmol)和6血的50 %氨氧化鋼溶液。混合物在35 攝氏度攬拌12h。1化之后將反應液倒入冰水中，立即用二氯甲燒萃取兩次，合并有機相 溶液。然后對有機相溶液依次用水和飽和食鹽水洗涂4次，再用無水硫酸鋼干燥，最后減 壓濃縮去除溶劑得到產物粗品。產物粗品用硅膠柱層析純化（流動相為：石油酸/丙酬 =100:1.5,v/v)，收集棟色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棟色粉末（327mg， 78% )O
[0015] 咱NMR巧00MHz，DMS0-de) 56. 63(s, 1H)，6. 3^s, 1H)，5. 81(s, 1H)，4. 51(s，2H)，3. 84 (s,IH), 3. 79 (s, 2H), 2. 15 (s,IH), 2. 04 (s,IH) ,1-91 (s,IH),I. 65 (s,IH),I. 39 (s, 3H),I. 08(s，6H)，0. 99(s，6H). 陽016]"cNMR(125MHz,DMS0-d6) 5 188. 07 (S)，183. 70 (S)，154. 38 (S)，147. 57 (S)，140. 2I(S)，136. 40 (S)，134. 71 (S)，131. 25 (S)，128. 40 (S)，118. 83 (S)，72. 12 (S)，45. 49 (S)，37. 5 4 (S)，33. 58 (S)，31. 78 (S)，26. 17 (S)，25. 12 (S)，24. 66 (S)，23. 51 (S)，23. 17 (S)，22. 65 (S).
[0017] HRMS(ESI)m/z[M+H]+calcdforCzzHzsBrCV419. 1222;found419. 1220.
[0018]
[0019] 實施例3SalviskinoneA的0-(贓嗦基）乙基衍生物（III)的合成
[0020] 將化合物II(209mg，0. 5mmol)溶于25血乙臘當中，向其中加入無水碳酸鐘 (690mg，5.Ommol),艦化鐘（168mg，l.Ommol)和無水贓嗦（3446mg，40mmol)，混合物加熱回 流化。反應結束后將反應液倒入冰水中，用等量二氯甲燒萃取3次，合并有機相。依次用水 和飽和食鹽水洗涂合并之后的有機相，再用無水硫酸鋼干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產物 粗品。產物粗品用硅膠柱層析純化（流動相為：石油酸/丙酬=100:1. 5,v/v)，收集棟色 集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物III的淡棟色固體（154. 8mg，73% )。
[0021] 電NMR巧00MHz，DMS0-d6) 56. 57(s, 1H)，6. 37(s, 1H)，5. 81(s, 1H)，4. 27(s，2H)，3. 84 (s,IH), 3. 12 (s, 2H), 2. 69 (s, 4H), 2. 36 (s, 4H), 2. 14 (s,IH), 2. 05 (s,IH),I. 94 (s,IH),I. 70 (s,IH)，I. 35 (s, 3H)，I. 15 (s,IH)，I. 07 (s,6H)，I. 00 (s,6H).
[0022]"cNMR(125MHz,DMS0-d6) 5 188. 23 (S)，183. 96 (S)，154. 74 (S)，148. 03 (S)，140. 7 7 (S)，136. 56 (S)，134. 97 (S)，131. 61 (S)，128. 86 (S)，119. 35 (S)，69. 37 (S)，54. 95 (S)，54. 5 2 (S)，45. 97 (S)，45. 84 (S)，37. 68 (S)，33. 82 (S)，26. 51 (S)，25. 61 (S)，25. 25 (S)，23. 65 (S)， 23. 41 (S)，22. 99 (S).
[0023] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcdfor[26?術203:425. 2804 ;found:425. 2801。
[0024]
[0025] 實施例4SalviskinoneA的0-(lH-四氮挫基）乙基衍生物（IV)的合成
[0026] 將化合物II(209mg，0. 5mmol)溶于20血乙臘當中，向其中加入無水碳酸鐘 (345mg，2.Smmol)，艦化鐘（84mg，0.Smmo1)和IH-四氮挫（1401mg，20mmol)，混合物加熱 回流lOh。反應結束后將反應液倒入25mL冰水中，用等量二氯甲燒萃取2次，合并有機 相。依次用水和飽和食鹽水洗涂合并之后的有機相，再用無水硫酸鋼干燥，減壓濃縮去除 溶劑得到產物粗品。因為互變異構作用，在反應條件下會生成IH-四氮挫基和甜-四氮挫 基兩種取代產物。產物粗品用硅膠柱層析純化（流動相為：石油酸/丙酬=100:1，v/v)， 收集黃色集中洗脫帶，再將洗脫帶濃縮，用硅膠柱層析純化（流動相為：石油酸/丙酬= 100:0. 5,v/v)，依次收集兩個淡黃色的洗脫帶，濃縮前1個洗脫帶即得到化合物IV的黃色 粉末（85. 7mg，42% )。
[0027] 咱NMR巧00MHz，Chloroform-dl) 5 10. 21(s, 1H)，6. 53化J= 95. 4Hz, 1H)，6. 31(s ，IH)，5. 73 (s,IH)，4. 41 (t,J= 7.8Hz, 4H)，4. 04 (s,IH)，2. 09 (s,IH)，I. 98 (s,IH)，I. 85 (s, IH)，I. 59 (s,IH)，I. 33 (s, 3H)，I. 02 (s,6H)，0. 93 (s,6H).
[0028] "cNMR(125MHz,DMS0-d6) 5 188.Ol(S)，183. 52 (S)，154. 09 (S)，147. 15 (S)，144.6 O(S), 140.Il(S), 136. 23 (S)，134. 42 (S)，130. 84 (S)，127.86(S)，118. 73 (S) ,66. 79 (S) ,46. 45 (S)，45. 42 (S)，37. 35 (S)，33. 27 (S)，25. 74 (S)，24. 62 (S)，24. 60 (S)，23. 32 (S)，22.86(S) ，22. 22 (S).
[0029] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcdforC23H29N403:409. 2 2 40 ;found:409. 2245。
[0030]
[0031] 實施例5組合物升高白細胞活性
[0032] 一、組合物對失血小鼠的治療作用 陽03引對失血小鼠的影響ICR小鼠50只，畢S各半，均分成5組（n= 10)。除生理鹽水 組外，其它組每只小鼠從眼眶靜脈放血0. 5ml，2地后再取血測全部各組白細胞指標，然后 連續灌胃給藥1周，末次給藥Ih后，從眼眶靜脈叢取血用F-800全血小板分析儀測白細胞 指標。
[0034] 組合物的制備：將研磨之后過200目網的40mg化合物III的粉末和研磨之后過 200目網的60mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用滿輪攬拌儀混合即得到IOOmg組 合物，使用時用水溶解運IOOmg的組合物即得到組合物的溶液。
[003引表1組合物對因失血所致白細胞減少的治療作用（i07l)
[0037] 與模型組比較：卸<0. 05
[0038] 結果表明，放血小鼠經服用組合物治療7天后，組合物給藥組與模型組比較，白細 胞顯著高于模型組，接近生理鹽水組。而化合物III和化合物IV不具有此活性。
[0039] 二、組合物對環憐酷胺致白細胞減少的治療作用
[0040] 對小鼠骨髓造血功能損傷的防治作用ICR小鼠50只，畢S兼用，均分成5組（n =10)，即生理鹽水組、造模組、組合物1. 2mg/kg組、化合物III1. 2mg/kg組和化合物IV I. 2mg/kg組，口服給藥，每天I次。第0、5、10日除生理鹽水組外，其它各組小鼠分別腹腔注 射環憐酸胺80mg/kg，然后繼續給藥3天。于末次給藥后比，從眼眶靜脈叢取血，測白細胞。
[0041] 表2組合物對環憐酷胺所致白細胞減少的治療作用（i〇7l)
[0043] 與模型組比較：卸<0. 05
[0044] 結果表明，與生理鹽水組比較，環憐酸胺能使小鼠骨髓損傷，造成外周血細胞下 降，組合物組與模型組比較，均可明顯對抗環憐酸胺所致小鼠白細胞下降。而化合物HI和 化合物IV不具有此活性。
[0045] =、組合物對苯所致白細胞減少的治療作用
[0046] 對再生障礙性貧血小鼠的影響：昆明種小鼠50只，畢S兼用，均分成5組（n= 10)，除生理鹽水組外，其它組小鼠皮下注射苯0. 5ml/kg，連續12天，造模的當日，同時口服 給藥，每天1次，共18天，末次給藥后比，眼眶靜脈叢取血，測白細胞。
[0047] 表3組合物對苯所致血細胞減少的治療作用（107L)
[0049] 與模型組比較：卸<0. 05
[0050] 結果表明，組合物組與模型組比較，可明顯對抗苯所致再生障礙性貧血小鼠白細 胞的下降。而化合物III和化合物IV不具有此活性。
[0051] 結論：組合物能夠顯著升高白細胞，可W用來制備抗白細胞降低藥物。而化合物 III和化合物IV不具有顯著升高白細胞的活性，不可W用來制備抗白細胞降低藥物。
[0052] 實施例6本發明所設及組合物片劑的制備
[0053] 取2克組合物，加入制備片劑的常規輔料18克，混勻，常規壓片機制成100片。
[0054] 實施例7本發明所設及組合物膠囊的制備 陽化5] 取2克組合物，加入制備膠囊劑的常規輔料如淀粉18克，混勻，裝膠囊制成100 粒。
【主權項】
1. 一種組合物，其特征為該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物中化合物 III和化合物IV的質量百分數分別為40%和60%，2. 如權利要求1所述的組合物的制備方法，其特征為：將化合物III的粉末和化合物 IV的粉末按照質量百分數分別為40%和60%充分混合。3. -種如權利要求1所述的組合物在升高白細胞藥物中的應用。4. 如權利要求3所述的組合物在升高白細胞藥物中的應用，其特征在于所述組合物升 高失血所致白細胞的降低。5. 如權利要求3所述的組合物在升高白細胞藥物中的應用，其特征在于所述組合物升 高化學品所致白細胞的降低。6. 如權利要求5所述的組合物在升高白細胞藥物中的應用，其特征在于所述化學品為 環磷酰胺。7. 如權利要求5所述的組合物在升高白細胞藥物中的應用，其特征在于所述化學品為 苯D
【專利摘要】本發明涉及有機合成和藥物化學領域，具體涉及組合物、制備方法及其在制備升高白細胞藥物上的用途。本發明公開了一種組合物及其制備方法。藥理學實驗表明，本發明的組合物具有升高白細胞的作用，具有開發升高白細胞藥物的價值。
【IPC分類】C07D257/04, A61P7/00, A61K31/41, C07D295/088, A61K31/495
【公開號】CN105343075
【申請號】CN201510742134
【發明人】王卓婷
【申請人】南京賦海澳賽醫藥科技有限公司
【公開日】2016年2月24日
【申請日】2015年11月4日