組合物及其在抗腫瘤藥物中的應用
【技術領域】
[0001] 本發明設及有機合成和藥物化學領域，具體設及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術】
[0002] 癌癥是對人類生命健康危害最大的疾病之一，每年都有大量的人死于癌癥。抗癌 藥物的研發一直是藥學研究的熱點。抗腫瘤藥物中有74%是天然產物或其衍生物，如紫杉 醇及其衍生物就是目前臨床上應用效果比較好的抗腫瘤藥物。因此，從天然產物中尋找化 合物或先導化合物并進行結構修飾獲得其衍生物，從而得到高效低毒的潛在藥物最有重要 價值。
[0003] 本發明設及的化合物I是一個2011年發表（AntonellaMaggioetal. , 2011. Artalbicacid,asesquiterpenewithanunusualskeletonfromArtemisia a化a(Asteraceae)f;romSicily.Tetr址e化onLetters, 52(2011)4543 - 4545)的化合物， 我們對化合物I進行了結構修飾，獲得了兩個新的衍生物即化合物HI和化合物IV，并用化 合物HI和化合物IV制備了組合物并對該組合物抗腫瘤活性進行了評價，其具有抗腫瘤活 性。
【發明內容】
[0004] 本發明公開了一個新的組合物，該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合 物中化合物III和化合物IV的質量百分數分別為50%和50%。 陽0化]
[0006]
[0007] 藥效學實驗表明，本發明的組合物具有較好的抗腫瘤作用。
[0008] W下通過實施例對本發明作進一步詳細的說明，但本發明的保護范圍不受具體實 施例的任何限制，而是由權利要求加W限定。
【具體實施方式】
[0009] 實施例1化合物Arta化icacid的制備
[0010] 化合物Arta化icacid(I)的制備方法參照AntonellaMaggio等人發表的 文南犬(AntonellaMaggioetal. , 2011.Artalbicacid,asesquiterpenewithan unusualskeletonfromArtemisiaalba(Asteraceae)fromSicily.Tetrahedron Letters, 52 (2011)4543 - 4545)的方法。
[0011]
陽〇1引實施例2Arta化icacid的0-漠乙基衍生物（II)的合成陽01引將化合物I(266mg，1.OOmmol)溶于10血苯，向溶液中加入四下基漠化錠燈BAB) (0.08旨)，1，2-二漠乙燒化760旨，20.00臟〇1)和6血的50%氨氧化鋼溶液。混合物在40 攝氏度攬拌16h。1化之后將反應液倒入冰水中，立即用二氯甲燒萃取兩次，合并有機相 溶液。然后對有機相溶液依次用水和飽和食鹽水洗涂5次，再用無水硫酸鋼干燥，最后減 壓濃縮去除溶劑得到產物粗品。產物粗品用硅膠柱層析純化（流動相為：石油酸/丙酬 =100:1.0,v/v)，收集棟色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棟色粉末（272mg， 73%)。
[0014]電NMR巧00MHz，DMS0-de) 5 11.41(s, 1H)，6. 06(s, 1H)，5. 76(s, 1H)，4. 99(s, 1H)，4 .71 (s, IH), 4. 56 (s, IH), 3. 86 (s, 2H), 3. 54 (s, 2H), 2. 65 (s, IH), 2. 43 (s, 2H), 2. 33 (s, 2H), 2 .10 (s, IH),1. 64 (s, 3H),1. 54 (s, IH),1. 44 (s, 2H),0. 95 (s, 3H).
[0015] "cNMR(i25MHz，DMS0-d6) 5 201. 95(s), 175. 93(s), 149. 13(s), 148. 15(s), 117. 0 5 (s)，109. 43 (s)，81. 86 (s)，70. 27 (s)，57. 68 (s)，41. 26 (s)，39. 07 (s)，38. 86 (s)，35. 69 (s) ,33. 36 (s), 30. 72 (s), 20. 44 (s), 18. 42 (s).
[0016] HRMS(ESUm/z[M+田+calcd for 化04:37 3. 10 1 4 ;found 373. 1017.
[0017]
陽0化]實施例3 Arta化ic acid的0-(二乙胺基）乙基衍生物（III)的合成陽019]將化合物II (187mg，0. 5mmol)溶于15血乙臘當中，向其中加入無水碳酸鐘 (345mg，2. 5mmol)，艦化鐘（84mg，0. 5mmol)和二乙胺（1460mg，20mmol)，混合物加熱回流 12h。反應結束后將反應液倒入冰水中，用等量二氯甲燒萃取4次，合并有機相。依次用水 和飽和食鹽水洗涂合并之后的有機相，再用無水硫酸鋼干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產物 粗品。產物粗品用硅膠柱層析純化（流動相為：石油酸/丙酬=100:0.5, v/v)，收集棟色 集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物III的棟色粉末（111. 3mg，61% )。
[0020]電NMR巧00MHz，DMS0-d6) 5 11.52(s, 1H), 5 6. 13(s, 1H)，5. 81(s, 1H)，4. 73(s, 1H) ，4. 62 (d, J = 10. 9Hz, 2H)，3. 59 (s, 2H)，2. 92 (s, 4H)，2. 68 (d, J = 10. 5Hz, 3H)，2. 56 (s, 2H)，2. 48 (s, 2H)，2. 22 (s, IH)，1. 70 (s, 3H)，1. 54 (d, J = 10. 2Hz, 3H)，1. 16 (s, 6H)，1. 00 (s, 3H).
[0021] "c NMR(i25MHz，DMS0-d6) 5 201. 95(s), 175. 93(s), 149. 13(s), 148. 15(s), 117. 0 5 (s)，109. 43 (s)，81. 86 (s)，67. 06 (s)，57. 68 (s)，52. 53 (s)，47. 72 (s)，41. 30 (s)，39. 06 (s) ,38. 85 (s), 35. 68 (s), 30. 72 (s), 20. 44 (s), 18. 42 (s), 12. 35 (s).
[0022] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcd for C2化sN〇4:366. 2644 ;found:366. 2640。
[0023]
[0024]實施例4Arta化icacid的0-(四氨化咯基）乙基衍生物（IV)的合成
[002引將化合物II(187mg，0. 5mmol)溶于15血乙臘當中，向其中加入無水碳酸鐘 (345111邑，2.51111]1〇1)，艦化鐘（84111邑，0.51111]1〇1)和11比咯燒（142〇111邑，2〇1111]1〇1)，混合物加熱回流 8h。反應結束后將反應液倒入冰水中，用等量二氯甲燒萃取3次，合并有機相。依次用水和 飽和食鹽水洗涂合并之后的有機相，再用無水硫酸鋼干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產物粗 品。產物粗品用硅膠柱層析純化（流動相為：石油酸/丙酬=100:1. 0,v/v)，收集棟色集 中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物IV的棟色粉末（107.Img，59% )。 W26]iHNMR巧OOMHz,DMS0-d6) 5 14. 01(S,1H), 6. 15(s, 1H), 5. 83(s, 1H), 4. 7 5 (s,IH),4. 63 (s,IH),3. 96 (s,IH),3. 58 (s, 2H),2. 70 (d,J= 6.IHz, 3H),2. 56 -2. 49 (m, 8H)，2. 09 (s,IH)，1. 68 (d,J= 10.OHz, 7H)，1. 58 (s, 2H)，1. 44 (s,IH)，1. 02 (s, 3H).
[0027] "c NMR(i25MHz，DMS0-d6) 5 201. 85(s), 175. 85(s), 149. 07(s), 148. ll(s), 117. 0 3 (s)，109. 33 (s)，81. 78 (s)，67. 00 (s)，57. 64 (s)，54. 44 (d,J=17. IHz)，41. 20 (s)，38. 98( s),38. 79 (s),35. 64 (s),30. 70 (s),25. 21 (s),20. 35 (s),18. 36 (s).
[0028]HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcdforC2化4N04:364. 24 88 ;found:364. 2491。
[0029]
[0030] 實施例5體外抗腫瘤活性篩選
[0031] 篩選細胞株為化pG2 (人肝癌細胞），PANC-1 (人膜腺癌），MCF-7 (人乳腺癌細胞）， SW620 (人結腸癌細胞），A549 (人肺癌細胞），HGC-27 (人胃癌細胞），L02 (人正常肝實質細 胞）。
[0032] 組合物的制備：將50mg化合物III的粉末和50mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小 管中并用滿輪攬拌儀混合即得到lOOmg組合物。
[0033] 實驗方法：
[0034] 取對數生長期狀態良好的細胞，膜蛋白酶消化，制成5X104細胞/血的懸液。將 細胞懸液移入96孔培養板，每孔100y以置37°C、5%C〇2條件下培養2地。
[0035] 將受試化合物III、化合物IV和組合物分別用DMS0配制成一定濃度的母液，再用 RPMI1640培養基將衍生物母液稀釋成不同作用濃度的稀釋液。移去舊培養基，加入不同濃 度的含藥培養基，每孔lOOyL。另設空白對照組。藥物作用4化后，吸棄含藥培養基，于每 孔加入無血清、無酪紅1640培養基100yL再加入M1T溶液巧mg/mL) 10yL繼續溫育地。
[0036] 吸去各孔內上清液，每孔加入DMS0 150yL，暗處振蕩lOmin，使結晶物充分溶解， 酶標儀測定490nm處各孔的光吸收值（0D值），計算細胞的增殖抑制率：抑制率（％)= (1-用藥組平均0D值/空白對照組平均0D值）X100 %。應用SPSS16. 0軟件進行數據處 理并計算癌細胞增殖的半數抑制濃度（1CJ，結果見表1。
[0037] 表1化合物或組合物對7種癌細胞的體外增殖抑制作用
[0038]
[0039] 如表1結果所示，組合物對不同的腫瘤細胞均具有一定的增殖抑制作用；而對于 正常的肝實質細胞L02的ICw非常大（M0iiM)、沒有增殖抑制作用，說明安全性非常高。化 合物III和化合物IV對于所有腫瘤細胞沒有增殖抑制作用。組合物表現出較好的抗癌活 性，具有開發抗癌藥物的潛力。
[0040] 實施例6本發明所設及組合物片劑的制備
[0041] 取2克組合物，加入制備片劑的常規輔料18克，混勻，常規壓片機制成100片。
[0042] 實施例7本發明所設及組合物膠囊的制備
[0043] 取2克組合物，加入制備膠囊劑的常規輔料如淀粉18克，混勻，裝膠囊制成100 粒。
【主權項】
1. 一種組合物，其特征為該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物中化合物 III和化合物IV的質量百分數分別為50%和50%，2. 如權利要求1所述的組合物的制備方法，其特征為：將化合物III的粉末和化合物 IV的粉末按照質量百分數分別為50 %和50 %充分混合。3. 如權利要求1所述的組合物在抗腫瘤藥物中的應用。4. 如權利要求3所述的組合物在抗腫瘤藥物中的應用，其特征為：所述腫瘤為消化系 統腫瘤。5. 如權利要求4所述的組合物在抗腫瘤藥物中的應用，其特征為：所述消化系統腫瘤 為肝癌、胰腺癌、結腸癌或者胃癌。6. 如權利要求3所述的組合物在抗腫瘤藥物中的應用，其特征為：所述腫瘤為乳腺癌 或者肺癌。
【專利摘要】本發明涉及有機合成和藥物化學領域，具體涉及組合物及其在抗腫瘤藥物中的應用。本發明公開了一種組合物及其制備方法。藥理學實驗表明，本發明的組合物具有抗腫瘤的作用，具有開發抗腫瘤藥物的價值。
【IPC分類】A61K31/195, A61K31/40, A61P35/00
【公開號】CN105213373
【申請號】CN201510418264
【發明人】丁秋菊
【申請人】南京海澳斯生物醫藥科技有限公司
【公開日】2016年1月6日
【申請日】2015年7月16日