太子參須根在制備用于抑制酪氨酸酶和黑色素的產(chǎn)生藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及太子參須根在制備用于抑制酪氨酸酶和黑色素的產(chǎn)生藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 太子參為常用中藥材，為石竹科植物孩兒參Pseudostellaria heterophylla(Miq)PaxexPaxethoffm.的干燥塊根。具有益氣健脾、生津潤肺的功效， 臨床常用于心悸自汗，體倦乏力，脾虛食少，病后虛弱，氣陰不足，肺燥干咳等癥。主產(chǎn)于江 蘇、安徽、山東、福建等地，全國其他大部分地區(qū)也有栽培種植。太子參藥材中含有太子參環(huán) 肽A、太子參環(huán)肽B、太子參環(huán)肽C、太子參環(huán)肽D等多種環(huán)肽類化學(xué)成分，研究發(fā)現(xiàn)，太子參 環(huán)肽B具有抑制酪氨酸酶和黑色素產(chǎn)生的活性為太子參藥材有效成分。據(jù)文獻(xiàn)，產(chǎn)地加工 傳統(tǒng)習(xí)慣上主要有生曬法和燙制法，《中國藥典》收載的產(chǎn)地加工方法也包括"洗凈，除去須 根，置沸水中略燙后曬干或直接曬干"兩種。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003] 本發(fā)明的目的在于提供一種太子參須根在制備用于抑制酪氨酸酶和黑色素的產(chǎn) 生藥物中的應(yīng)用，其中，太子參須根中有效成分太子參環(huán)肽B含量不低于490yg?gi。
[0004] 上述所述太子參須根的加工方法為：取太子參新鮮須根，洗凈，略晾干多余水分， 置于電熱恒溫干燥箱，于25~35°C條件下經(jīng)48~72小時(shí)干燥至藥材不再減失重量，得到 干燥的太子參須根。
[0005] 上述所述略晾干多余水分是指在室溫晾干至無明顯水跡。
[0006] 本發(fā)明以太子參環(huán)肽B為考察指標(biāo)，以HPLC為檢測手段，經(jīng)本發(fā)明太子參須根的 加工方法以及實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，太子參須根中藥用有效成分太子參環(huán)肽B含量較高，而傳統(tǒng)加工 中去掉須根實(shí)際是將質(zhì)優(yōu)部分作為非藥用部分除去，造成了浪費(fèi)和藥材內(nèi)在質(zhì)量下降，可 見太子參加工以直接干燥為好，無需煮制，無需去須根。本發(fā)明中使用干燥設(shè)備在25~ 35°C條件下干燥產(chǎn)品其含水量與傳統(tǒng)方法加工品一致，能較好保持須根，縮短總體干燥時(shí) 間，方法不受氣候、環(huán)境條件等的影響，值得推廣。
【具體實(shí)施方式】[0007] 實(shí)施例1
[0008] 太子參須根的加工方法：取太子參新鮮須根，洗凈，略晾干多余水分，置于電熱恒 溫干燥箱，于25~35°C條件下經(jīng)48~72小時(shí)干燥至藥材不再減失重量，得到干燥的太子 參須根（XI)。
[0009]采用HPLC進(jìn)行檢測：色譜條件AgilentHC-C1S (2) (4.6mmX250mm，5ym);流動(dòng)相A 為水，B為乙腈，流速為1. 0ml?minS梯度洗脫條件為：0min，2%B;10min，10%B;30min， 45%B;35min，45%B;檢測波長為203nm;柱溫為30°C;自動(dòng)進(jìn)樣，進(jìn)樣量20y1。精密稱取 太子參環(huán)肽B(PseudostellarinB)對照品（武漢天植生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：CFN90627， 純度：彡98% )適量，加甲醇溶解配制成lmgml1的對照品溶液。取樣品粉末（過60目篩） 約2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，搖勻，稱定重量，超聲處理（功 率250W，頻率50HZ) 45min，取出，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精 密量取續(xù)濾液25ml，置蒸發(fā)皿中，40°C水浴揮干甲醇，再加甲醇溶解定容至10ml量瓶中，用 0. 45ym的微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。線性關(guān)系考察：取Pseudostellarin B對照品溶液，按色譜條件，依次進(jìn)樣0. 2、0. 5、1. 0、2. 0、4. 0、6. 0y1，測定對照品吸收峰峰 面積，以進(jìn)樣量（X，yg)為橫坐標(biāo)，以峰面積（Y)為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，回歸方程為Y= 295. 645485X+93. 671725,r= 0? 9999,表明PseudostellarinB在 0.20 ~6.0yg范圍內(nèi) 線性關(guān)系良好；精密度試驗(yàn)：精密吸取對照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣5次，峰面積RSD為1. 35 %，表 明儀器精密度良好；重復(fù)性試驗(yàn)：取同一份樣品粉末5份，按照供試品溶液制備方法制備， 進(jìn)樣測定，以PseudostellarinB含量計(jì)算，RSD為1. 84%，表明重復(fù)性良好；穩(wěn)定性試驗(yàn)： 取同一份供試品溶液，在2、8、16、24h、36h進(jìn)樣測定，峰面積RSD為1. 59 %，表明供試品溶液 在36h內(nèi)穩(wěn)定；樣品的測定：分別取不同樣品按供試品溶液制備方法制備并進(jìn)行測定，檢測 結(jié)果如表1 :
[0010] 表1太子參藥材中PseudostellarinB的含量檢測（以干燥品計(jì)）
[0011]
[0013] 表1中樣品制備：
[0014] 去須根的鮮藥材曬干品（Ml):鮮藥材淘洗，凈選，略晾干多余水分，之后再曬一日 (白天曬，晚上收回），揉搓去須根（備用），繼續(xù)曬至干。
[0015] 去須根的鮮藥材煮曬品（M2):鮮藥材淘洗，凈選，略晾干多余水分，之后在沸水中 煮2min，取出，曬一日（白天曬，晚上收回），揉搓去須根（備用），繼續(xù)曬至干。
[0016] 不去須根的鮮藥材干品（M3):鮮藥材淘洗，凈選，略晾干多余水分，不去須，置于 電熱恒溫干燥箱，于25~35°C條件下經(jīng)48~72小時(shí)干燥至藥材不再減失質(zhì)量（此條件下 須根不易斷）。
[0017] 曬或恒溫干燥至藥材不再減失質(zhì)量，判斷為藥材已干。經(jīng)檢測含水量均在9. 5~ 10. 5%之間，符合安全水分范圍。干燥的成品Ml、M2呈紡錘形或細(xì)長條形，稍彎曲，表面黃 白色，具有不規(guī)則微細(xì)縱皺紋。M3呈細(xì)長紡錘形或細(xì)長條形，稍彎曲，具長短不等的須，表面 黃白色，具有不規(guī)則微細(xì)縱皺紋。XI呈細(xì)長絲條狀，彎曲，表面黃白色。
[0018] 上述太子參鮮藥材分別采自安徽省蕪湖、江蘇省溧陽、句容等產(chǎn)區(qū)（表1中分別 以a、b、c表示三個(gè)產(chǎn)區(qū)），同一產(chǎn)地樣品均采自同一塊藥田。經(jīng)鑒定為石竹科植物孩兒參 Pseudostellariaheterophylla(Miq)PaxexPaxethoffm.的根。
[0019]《中國藥典》收載的太子參產(chǎn)地加工方法有洗凈，除去須根，燙（即短時(shí)間煮）后曬 干與直接曬干，為考察不同加工方法對太子參藥材內(nèi)在質(zhì)量的影響，以太子參環(huán)肽B為考 察指標(biāo)，對來自不同產(chǎn)地的太子參不同加工方法進(jìn)行了比較研究。結(jié)果表明，樣品不論來源 于何產(chǎn)地，不同加工法藥材中太子參環(huán)肽B含量均呈現(xiàn)規(guī)律性差異，即鮮干品（不去須）> 生曬品（去須）>煮曬品（去須），而太子參須根中太子參環(huán)肽B含量不低于490yg^g1， 更高達(dá) 922. 55yg?gi。
[0020] 實(shí)施例2
[0021] 取實(shí)施例1所述不同地區(qū)的太子參須根樣品各100g，分別進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)：
[0022] 粉碎成粗粉，用10倍量的甲醇-水（體積比1 :1)作為提取溶劑分別回流提取lh、 2h、3h，濾過合并減壓回收至無甲醇，上D101樹脂，以甲醇-水（體積比1 :1)洗脫，收集洗 脫液，減壓回收至流浸膏，于60°C水浴條件下干燥。臨用時(shí)使用pH6. 8的PBS緩沖液溶解稀 釋，參考"中國藥學(xué)雜志2005年3月第40卷第5期，美白中藥之水及乙醇提取物對酪氨酸 酶抑制功效之比較"一文中的酪氨酸酶抑制測試方法，以太子參須根藥材為中藥樣本，測得 太子參須根藥材對酪氨酸酶的IC5。結(jié)果如下表2 :
[0023] 表2太子參須根藥材對酪氨酸酶的1(：5。測試結(jié)果
[0024]
[0025] 上述實(shí)驗(yàn)表明，太子參須根藥材具有抑制酪氨酸酶活性的功能，進(jìn)而可阻斷黑色 素的形成，從而使本發(fā)明的太子參須根藥材可應(yīng)用于抑制酪氨酸酶和黑色素的產(chǎn)生。同時(shí)， 因大部分樣品中須根所占總根的比例高達(dá)10%以上，因此，傳統(tǒng)加工中去掉須根實(shí)際是將 質(zhì)優(yōu)部分作為非藥用部分除去，造成了浪費(fèi)和藥材內(nèi)在質(zhì)量下降，可見太子參加工以直接 干燥為好，無需煮制，也無需去須。本發(fā)明中使用干燥設(shè)備在25~35°C條件下干燥產(chǎn)品其 含水量（含水量在9. 5~10. 5%之間，符合安全水分范圍）與傳統(tǒng)方法加工品一致，能較好 保持須根，縮短總體干燥時(shí)間，方法不受氣候、環(huán)境條件等的影響，值得推廣。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 太子參須根在制備用于抑制酪氨酸酶和黑色素的產(chǎn)生藥物中的應(yīng)用，其中，太子參 須根中有效成分太子參環(huán)肽B含量不低于490 y g ? g i。2. 如權(quán)利要求1所述應(yīng)用，其特征在于，所述太子參須根的加工方法為：取太子參新鮮 須根，洗凈，略晾干多余水分，置于電熱恒溫干燥箱，于25~35°C條件下經(jīng)48~72小時(shí)干 燥至藥材不再減失重量，得到干燥的太子參須根。3. 如權(quán)利要求2所述應(yīng)用，其特征在于，所述略晾干多余水分是指在室溫晾干至無明 顯水跡。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種太子參須根在制備用于抑制酪氨酸酶和黑色素的產(chǎn)生藥物中的應(yīng)用，其中，太子參須根中有效成分太子參環(huán)肽B含量不低于490μg·g-1。本發(fā)明以太子參環(huán)肽B為考察指標(biāo)，以HPLC為檢測手段，經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，太子參須根中藥用有效成分太子參環(huán)肽B含量較高，而傳統(tǒng)加工中去掉須根實(shí)際是將質(zhì)優(yōu)部分作為非藥用部分除去，造成了浪費(fèi)和藥材內(nèi)在質(zhì)量下降，可見太子參加工以直接干燥為好，無需煮制，無需去須根。本發(fā)明中使用干燥設(shè)備在25～35℃條件下干燥產(chǎn)品其含水量與傳統(tǒng)方法加工品一致，能較好保持須根，縮短總體干燥時(shí)間，方法不受氣候、環(huán)境條件等的影響，值得推廣。
【IPC分類】A61K36/36, A61P17/00
【公開號(hào)】CN105106280
【申請?zhí)枴緾N201510532077
【發(fā)明人】龍全江, 徐雪琴, 王曉閣
【申請人】安徽中醫(yī)藥高等專科學(xué)校
【公開日】2015年12月2日
【申請日】2015年8月24日