具有抗菌作用的中草藥提取物及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于抗菌藥物技術領域，尤其涉及一種具有抗菌作用的中草藥提取物及其 制備方法。
【背景技術】
[0002] 隨著養殖業的快速發展，抗生素應用越來越廣泛，其在動物疾病預防、治療等方面 起到了一定的積極作用。但是，近些年來，抗生素在養殖業中的濫用所引起的耐藥性問題已 經不容忽視。而且，長期大量不科學使用抗生素還會使動物糞便含重金屬殘留，導致環境污 染，給人類健康帶來嚴重危害，而養殖業的飛速發展不僅增加了動物產品的供應，同時也帶 來了食品安全的問題。廣譜、低毒、無殘留的中藥復方在獸醫臨床的應用越來越廣泛，其增 強免疫力、廣譜抗菌、促進生長的特點越來越得到養殖業的青睞。因此，研發一種具有抗菌 作用、無毒無殘留、可替代抗生素的中草藥產品是現代養殖業和社會發展的必然趨勢，具有 重要意義和應用價值。
【發明內容】
[0003] 本發明要解決的技術問題是提供一種抗菌譜廣、無毒無殘留的具有抗菌作用的中 草藥提取物及其制備方法。
[0004] 為解決上述技術問題，本發明采用以下技術方案：具有抗菌作用的中草藥提取物， 由以下重量份的原料藥材經水煎醇提制成：辣寥120~180份，廣藿香120~180份，女貞 子120~180份，黃芪80~120份。
[0005] 上述具有抗菌作用的中草藥提取物的制備方法，將各原料藥材混合后經水煎醇提 制成。
[0006] 水煎醇提按以下操作進行：按重量份稱取各原料藥材共20g，粉碎，混合，加10倍 水煎煮3次，水溫100°C，每次1. 5小時；過濾，合并3次濾液后3000r/min離心30min收集 上清液；將上清液用旋轉蒸發儀濃縮至小體積后加入95%乙醇使得乙醇含量為80%，靜置 24h后過濾去除沉淀；濾液以3000r/min離心30min后收集上清液，用旋轉蒸發儀回收乙 醇，將所得藥液定容至20mL后4°C保存備用。
[0007] 針對目前養殖業中藥物濫用的問題，發明人以傳統中獸醫理論為指導，組方配制 了一種復方辣寥散，包括以下重量份的原料藥材：辣寥120~180份，廣藿香120~180份， 女貞子120~180份，黃芪80~120份，由以上重量份的原料藥材經水煎醇提制成了一種具 有抗菌作用的中草藥提取物。體外抑菌試驗結果表明，本發明的中草藥提取物具有良好的 抗菌效果，具有廣譜性，而且與水提物、微波提取物、乙醇分級提取物相比其抗菌效果更好。 將本發明作為禽類替代抗生素和化學藥物的抗菌藥物，可有效避免抗藥性和藥物殘留對禽 畜產品的污染，減少禽畜有害排泄物、蛋白質用量和氮污染，具有廣闊的市場前景。
【具體實施方式】
[0008] 實施例1具有抗菌作用的中草藥提取物的制備
[0009] 配方：辣寥120~180份，廣藿香120~180份，女貞子120~180份，黃芪80~ 120份。各樣品具體配方見表1。
[0010] 表1具有抗菌作用的中草藥提取物的配方表
[0011]
[0012]制法：將各原料藥材混合后經水煎醇提制成，水煎醇提按以下操作進行：按重量 份稱取各原料藥材共20g，粉碎，混合，加10倍水煎煮3次，水溫KKTC，每次1. 5小時；過 濾，合并3次濾液后3000r/min離心30min收集上清液；將上清液用旋轉蒸發儀濃縮至小體 積后加入95%乙醇使得乙醇含量為80%，靜置24h后過濾去除沉淀；濾液以3000r/min離 心30min后收集上清液，用旋轉蒸發儀回收乙醇，將所得藥液定容至20mL后4°C保存備用。
[0013] 實施例2對照樣品的制備
[0014] 水提物對照
[0015] 按配方4稱取各原料共20g，粉碎，混合，加10倍水煎煮3次，水溫100°C，每次1. 5 小時；過濾，合并3次濾液后，3000r/min離心30min收集上清液，將上清液用旋轉蒸發儀濃 縮并定容至20ml后4°C保存備用。
[0016] 微波提取物對照
[0017] 按配方4稱取各原料共20g，粉碎，混合，加10倍水充分混合后，置于微波樣品處理 系統100°C處理15min。
[0018] 乙醇分級提取物對照
[0019] 按配方4稱取各原料共20g，粉碎，混合，分別加入10倍體積的95%、70%、45%乙 醇浸提3次，浸提時間為48h、24h、24h。
[0020] 實施例3具有抗菌作用的中草藥提取物的應用試壓
[0021] 1 ?試驗材料
[0022] 取實施例1中配方4的樣品（以下簡稱復方辣寥水煎醇提物或水煎醇提物）和實 施例2中的對照樣品用于以下試驗。
[0023] 2.體外抑菌效果測定
[0024] 菌液的制備：將雞白痢沙門氏菌、雞大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌以及 綠膿桿菌等受試細菌充分復蘇后接種于營養瓊脂平板，37°C下培養24h，挑取典型菌落接種 于營養肉湯培養基中，37°C下培養18h，將細菌濃度調成3 X 10s個/mL備用。
[0025] 測定方法：用紙片法測定各提取物的體外抑菌效果，以青霉素、鏈霉素作為對照。 將受試菌液均勻涂布于分好區的營養瓊脂平板上，稍置片刻，將充分吸取各受試藥液的紙 片貼于區域中央，倒扣平皿，于37°C下培養12h~18h后量取抑菌圈直徑并記錄（結果見表2) 〇
[0026] 抑菌強度判定標準：無抑菌圈判為不敏感；抑菌圈直徑小于10mm者判為低度敏 感；在10~15mm之間者判為中度敏感；16~20mm之間者判為高度敏感；20mm以上者判為 極敏感。
[0027] 表2各提取物體外抑菌圈測定結果
[0028]
[0029] 由上表可知，雞白痢沙門氏菌對復方辣寥水煎醇提物高度敏感；雞大腸桿菌對復 方辣寥水煎醇提物高度敏感；金黃色葡萄球菌對復方辣寥水煎醇提物高度敏感；白色念珠 菌對復方辣寥水煎醇提物低度敏感；綠膿桿菌對復方辣寥水煎醇提物低度敏感。
[0030] 3.最小抑菌濃度的測定
[0031] 用試管二分法測定上述各提取物對雞白痢沙門氏菌、雞大腸桿菌、金黃色葡萄球 菌、白色念珠菌及綠膿桿菌的最小抑菌濃度MIC。無菌操作向1至10號EP管中加入0. 5mL 營養肉湯，吸取〇. 5mL各提取物加入1號管，充分混勻，從1號管中吸取0. 5mL液體加入2 號管，充分混勻后吸取〇. 5mL加入3號，依次類推直至稀釋至9號管。10號作為對照不加提 取物。各管加入〇.5mL備用菌液后放入培養箱37°C下培養24h，觀察并記錄結果（結果見 表3)。
[0032] 表3各提取物最小抑菌濃度測定結果
[0033]
[0034] 由上表可知，復方辣寥水煎醇提物對雞白痢沙門氏菌、雞大腸桿菌以及金黃色葡 萄球菌均有較好的抑菌效果，MIC均為15. 625mg/mL，此外復方辣寥水煎醇提物相較于其他 提取物，對于白色念珠菌與綠膿桿菌也有較高的抑菌表現，MIC均為31. 25mg/mL。
[0035] 試驗結果表明：復方辣寥水煎醇提物對雞白痢沙門氏菌與雞大腸桿菌均有較強的 體外抑制效果，而青霉素這類臨床常用的抗生素可能因為耐藥性的產生已經不能起到抑菌 效果。并且，復方辣寥水煎醇提物對金黃色葡萄球菌與綠膿桿菌均表現不同程度的體外抑 菌效果。此外，白色念珠菌這一養雞業常見致病性真菌對復方辣寥水煎醇提物也呈現敏感。
[0036] 取實施例1中其他配方重復上述試驗，結果類似，在此不再贅述。
[0037] 綜上可見，本發明的具有抗菌作用的中草藥提取物對養雞業常見5種致瀉菌都表 現良好的體外抑菌活性，具有廣譜性。
【主權項】
1. 一種具有抗菌作用的中草藥提取物，其特征在于由以下重量份的原料藥材經水煎醇 提制成：辣寥120~180份，廣藿香120~180份，女貞子120~180份，黃芪80~120份。2. 權利要求1所述具有抗菌作用的中草藥提取物的制備方法，其特征在于將各原料藥 材混合后經水煎醇提制成。3. 根據權利要求2所述的具有抗菌作用的中草藥提取物的制備方法，其特征在于所述 水煎醇提按以下操作進行：按重量份稱取各原料藥材共20g，粉碎，混合，加10倍水煎煮3 次，水溫l〇〇°C，每次1. 5小時；過濾，合并3次濾液后3000r/min離心30min收集上清液； 將上清液用旋轉蒸發儀濃縮后加入95%乙醇使得乙醇含量為80%，靜置24h后過濾去除沉 淀；濾液以3000r/min離心30min后收集上清液，用旋轉蒸發儀回收乙醇。
【專利摘要】本發明公開了一種具有抗菌作用的中草藥提取物，由以下重量份的原料藥材經水煎醇提制成：辣蓼120～180份，廣藿香120～180份，女貞子120～180份，黃芪80～120份。體外抑菌試驗結果表明，本發明的中草藥提取物具有良好的抗菌效果，具有廣譜性，而且與水提物、微波提取物、乙醇分級提取物相比其抗菌效果更好。將本發明作為禽類替代抗生素和化學藥物的抗菌藥物，可有效避免抗藥性和藥物殘留對禽畜產品的污染，減少禽畜有害排泄物、蛋白質用量和氮污染，具有廣闊的市場前景。
【IPC分類】A61K36/704, A61P31/04
【公開號】CN105055539
【申請號】CN201510573480
【發明人】胡庭俊, 陶俊宇, 譚紅連, 李璐, 韋英益, 曾蕓
【申請人】廣西大學
【公開日】2015年11月18日
【申請日】2015年9月10日