雙異戊烯化查爾酮類衍生物作為α-糖苷酶抑制劑的應用
【技術領域】
[0001] 本發明屬于查爾酮類衍生物生物活性檢測領域，尤其是一種雙異戊烯化查爾酮類 衍生物作為a-糖苷酶抑制劑的應用。 技術背景
[0002] a-葡萄糖苷酶抑制劑可以競爭性抑制位于小腸的各種a-葡萄糖苷酶，使淀粉 類分解為葡萄糖的速度減慢，從而減緩腸道內葡萄糖的吸收，降低餐后高血糖。目前研究發 現，a-葡萄糖苷酶與多種疾病有關，如糖尿病、癌癥、病毒感染、肥胖、龐貝氏病等。因此， a_葡萄糖苷酶作為功能性食品和藥品越來越受到人們重視。異戊烯基查爾酮是具有異戊 烯基側鏈（如異戊烯基、香葉基等）的一類特殊的查爾酮。
[0003] 目前，已有文獻報道單取代查爾酮類化合物如BroussochalconeA和 BroussochalconeB能夠以可逆性或非競爭性的方式和a-葡萄糖苷酶結合并引發 其構象變化，對于a_糖苷酶的抑制活性BroussochalconeA的IC5。為5. 3±0. 3yM， BroussochalconeB的IC5。為11. 1±0. 5yM，這說明異戊稀化查爾酮具有成為抑制a-葡 萄糖苷酶的藥物的潛力，為后續雙異戊烯化查爾酮作為a-葡萄糖苷酶抑制劑的研究奠定 了基礎。
[0004]
【發明內容】
[0005] 本發明的目的在于提供一種雙異戊烯化查爾酮類衍生物作為a_糖苷酶抑制劑 的應用。本申請進行了體外a-糖苷酶抑制活性的測定，結果顯示這類衍生物部分具有較 好的a-糖苷酶抑制活性（見表1)。
[0006] 本發明的目的是通過以下技術方案實現的：
[0007] 雙異戊烯化查爾酮類衍生物作為a_糖苷酶抑制劑的應用，所述衍生物的結構通 式如下：
[0008]
[0009] 其中R1為異戊烯基或香葉基，R2為異戊烯基或香葉基，R3為氫、甲基、甲氧甲基或 乙酰基，R4為氫、甲基、甲氧甲基或乙酰基，R5為氫、甲基、甲氧甲基或乙酰基。
[0010] 而且，R1為異戊烯基或香葉基，R2為異戊烯基或香葉基，R3為氫、甲基、甲氧甲基或 乙酰基，R4為氫、甲基、甲氧甲基或乙酰基，R5為氫、甲基、甲氧甲基或乙酰基。
[0011] 而且，所述異戊烯化查爾酮類衍生物具體包括如下化合物：
[0012] 3, 5-二異戊烯基2, 4, 4'-三羥基查爾酮
[0013] 3,異戊烯基，5-香葉基-2, 4, 4' -三羥基基查爾酮
[0014] 3-香葉基-5-異戊烯基-2, 4, 4' -三羥基查爾酮
[0015] 3, 5-二香葉基-2, 4, 4'-三羥基查爾酮
[0016] 5-香葉基-2, 4, 4'-三甲氧基查爾酮
[0017] 5-異戊烯基-2, 4, 4' -三羥基查爾酮
[0018] 3-香葉基-2, 4, 4'-三羥基查爾酮
[0019] 3-異戊烯基-2, 4, 4'-三羥基查爾酮
[0020] 3-異戊烯基-2, 4' -二甲氧甲氧基-4-羥基查爾酮
[0021] 3-異戊烯基-2, 4' -二甲氧甲氧基-4-羥基查爾酮
[0022] 5-香葉基-2, 4' -二甲氧甲氧基-4-羥基查爾酮
[0023] 3-香葉基-2-甲氧甲氧基-4, 4' -二羥基查爾酮
[0024] 5-香葉基-2, 4' -二羥基-4-甲氧甲氧基查爾酮
[0025] 5-異戊烯基-4-甲氧甲氧基-2, 4' -二羥基查爾酮
[0026] 5-香葉基-2-甲氧甲氧基-4, 4' -二羥基查爾酮
[0027] 5-香葉基-2, 4'-二羥基-4-甲氧甲氧基查爾酮
[0028] 5-香葉基-4-羥基-2, 4' -二乙酰氧基查爾酮。
[0029] 雙異戊烯化查爾酮類衍生物作為制備治療與a-葡萄糖苷酶相關的疾病的藥物 中的應用，所述衍生物的結構通式如下：
[0030]
[0031] 其中R1為異戊烯基或香葉基，R2為異戊烯基或香葉基，R3為氫、甲基、甲氧甲基或 乙酰基，R4為氫、甲基、甲氧甲基或乙酰基，R5為氫、甲基、甲氧甲基或乙酰基。
[0032] 而且，R1為異戊烯基或香葉基，R2為異戊烯基或香葉基，R3為氫、甲基、甲氧甲基或 乙酰基，R4為氫、甲基、甲氧甲基或乙酰基，R5為氫、甲基、甲氧甲基或乙酰基。
[0033] 本發明的優點和積極效果：
[0034] 1、本發明使用大量不同位置、不同取代基的異戊烯化查爾酮類衍生物，進行了體 外a-糖苷酶抑制活性測定，結果顯示這類衍生物部分具有較好的a-糖苷酶抑制活性。
[0035] 2、本發明中a_糖苷酶抑制活性測定結果會對異戊烯化查爾酮衍生物構效關系 和a-糖苷酶抑制劑的研究提供基礎。
[0036] 具體的實施方式
[0037] 為了理解本發明，下面結合實施例對本發明作進一步說明：下述實施例是說明性 的，不是限定性的，不能以下述實施例來限定本發明的保護范圍。
[0038] 本發明涉及的異戊烯化查爾酮類衍生物的結構通式如下：
[0039]
[0040] 其中札為異戊烯基或香葉基，R2為異戊烯基或香葉基，R3為氫或甲氧基或甲氧甲 氧基，R4為氫或甲氧基或甲氧甲基，R5為氫或甲基或甲氧甲基。
[0041] 所述異戊烯化查爾酮類衍生物具體包括如下化合物
[0042] 3, 5-二異戊烯基2, 4, 4'-三羥基查爾酮。
[0043] 3,異戊烯基，5-香葉基-2, 4, 4' -三羥基基查爾酮。
[0044] 3-香葉基-5-異戊烯基-2, 4, 4' -三羥基查爾酮。
[0045] 3, 5-二香葉基-2, 4, 4' -三羥基查爾酮。
[0046] 5-香葉基-2, 4, 4'-三甲氧基查爾酮。
[0047] 5-異戊烯基-2, 4, 4'-三羥基查爾酮。
[0048] 3-香葉基-2, 4, 4'-三羥基查爾酮。
[0049] 3-異戊烯基-2, 4, 4'-三羥基查爾酮。
[0050] 3-異戊烯基-2, 4' -二甲氧甲氧基-4-羥基查爾酮。
[0051] 3-異戊烯基-2, 4' -二甲氧甲氧基-4-羥基查爾酮。
[0052] 5-香葉基-2, 4' -二甲氧甲氧基-4-羥基查爾酮。
[0053] 3-香葉基-2-甲氧甲氧基-4, 4' -二羥基查爾酮。
[0054] 5-香葉基-2, 4' -二羥基-4-甲氧甲氧基查爾酮。
[0055] 5-異戊烯基-4-甲氧甲氧基-2, 4' -二羥基查爾酮。
[0056] 5-香葉基-2-甲氧甲氧基-4, 4' -二羥基查爾酮。
[0057] 5-香葉基-2, 4' -二羥基-4-甲氧甲氧基查爾酮。
[0058] 5-香葉基-4-羥基-2, 4' -二乙酰氧基查爾酮。
[0059] 具體驗證實施例
[0060] 采用微孔板篩選模型，以對硝基苯基_a-D-吡喃葡萄糖為底物，測試化合物不同 濃度梯度下的a-葡萄糖苷酶的抑制活性，并計算IC5。值。實驗分為空白組、不加抑制劑的 對照組和待測樣品組。臨床使用的a-葡萄糖苷酶抑制劑阿卡波糖作為陽性對照藥物。抑 制劑和阿卡波糖溶于DMSO,DMSO在酶測試體系中含量為5 %;緩沖液為磷酸鹽緩沖液（pH =6. 8,0. 05M)，對硝基苯基-a-D-吡喃葡萄糖溶于磷酸鹽緩沖液。
[0061] ⑴空白組：加緩沖液和不同濃度的抑制劑，總體積200yL。
[0062]⑵對照組：加緩沖液（180yL)和a-葡萄糖苷酶（〇. 〇4U/mL，20yL)，不加抑制 劑。
[0063]⑶陽性對照組：加入緩沖液（150yL)、a-葡萄糖苷酶（〇. 04U，20yL)，抑制劑阿 卡波糖的DMSO溶液和底物對硝基苯基-a-D-吡喃葡萄糖（0. 5M，30yL)的水溶液。
[0064]⑷待測樣品組：加入緩沖液（140yL)、a-葡萄糖苷酶（〇. 〇4U/mL，20yL)，待測樣 品的DMSO溶液（10yL)和底物對硝基苯基-a-D-吡喃葡萄糖（0. 5M，30yL)。
[0065] 在96孔板中，依次加入上述的各種試劑，于37°C溫敷5min，再加入底物對硝基苯 基-a-D-吡喃葡萄糖，溫敷30min，在酶標儀405nm波長處測定吸光度，根據下列公式計算 該抑制劑對a-葡萄糖苷酶的抑制率，當抑制率為50%時，所得抑制劑的濃度，即為該抑制 劑對底物的IC5。值。實驗結果見表1。
[0069] 注：IC5。表示半數抑制濃度（yM)
[0070] 從表1可以看出異戊烯化查爾酮具有很好的a_葡萄糖苷酶抑制活性，尤其是雙 異戊烯基查爾酮。羥基保護的異戊烯化查爾酮的a-葡萄糖苷酶抑制活性較差，說明羥基 是活性必須基團。
【主權項】
1. 雙異戊烯化查爾酮類衍生物作為a-糖苷酶抑制劑的應用，所述衍生物的結構通式 如下：其中R1為異戊烯基或香葉基，R2為異戊烯基或香葉基，R3為氫、甲基、甲氧甲基或乙酰 基，R4為氫、甲基、甲氧甲基或乙酰基，R5為氫、甲基、甲氧甲基或乙酰基。2. 根據權利1所述的應用，其特征在于=R1為異戊烯基或香葉基，R2為異戊烯基或香葉 基，R3為氫、甲基、甲氧甲基或乙酰基，R4為氫、甲基、甲氧甲基或乙酰基，R5為氫、甲基、甲氧 甲基或乙酰基。3. 根據權利1所述的應用，其特征在于：所述異戊烯化查爾酮類衍生物具體包括如下 化合物： 3,5-二異戊烯基2, 4, 4' -三羥基查爾酮 3,異戊烯基，5-香葉基-2, 4, 4' -三羥基基查爾酮 3-香葉基-5-異戊烯基-2, 4, 4' -三羥基查爾酮 3. 5-二香葉基-2, 4, 4' -三羥基查爾酮 5-香葉基-2, 4, 4' -三甲氧基查爾酮 5_異戊烯基_2, 4, 4' -三羥基查爾酮 3-香葉基-2, 4, 4' -三羥基查爾酮 3_異戊烯基_2, 4, 4' -三羥基查爾酮 3_異戊烯基_2, 4' -二甲氧甲氧基-4-羥基查爾酮 3_異戊烯基_2, 4' -二甲氧甲氧基-4-羥基查爾酮 5-香葉基-2, 4' -二甲氧甲氧基-4-羥基查爾酮 3-香葉基-2-甲氧甲氧基-4, 4' -二羥基查爾酮 5-香葉基-2, 4' -二羥基-4-甲氧甲氧基查爾酮 5_異戊烯基-4-甲氧甲氧基-2, 4' -二羥基查爾酮 5-香葉基-2-甲氧甲氧基-4, 4' -二羥基查爾酮 5-香葉基-2, 4' -二羥基-4-甲氧甲氧基查爾酮 5-香葉基-4-羥基-2, 4' -二乙酰氧基查爾酮。4. 雙異戊烯化查爾酮類衍生物作為制備治療與a-葡萄糖苷酶相關的疾病的藥物中 的應用，所述衍生物的結構通式如下：其中R1為異戊烯基或香葉基，R2為異戊烯基或香葉基，R3為氫、甲基、甲氧甲基或乙酰 基，R4為氫、甲基、甲氧甲基或乙酰基，R5為氫、甲基、甲氧甲基或乙酰基。5. 根據權利4所述的應用，其特征在于：Ri為異戊烯基或香葉基，R2為異戊烯基或香葉 基，R3為氫、甲基、甲氧甲基或乙酰基，R4為氫、甲基、甲氧甲基或乙酰基，R5為氫、甲基、甲氧 甲基或乙酰基。
【專利摘要】本發明屬于雙異戊烯基查爾酮及其衍生物作為α-糖苷酶抑制劑的應用，具體是一類雙異戊烯化查爾酮類衍生物的α-糖苷酶抑制活性評價，衍生物結構式如下，其中R1為異戊烯基或香葉基，R2為異戊烯基或香葉基，R3為氫、甲基、甲氧甲基或乙酰基，R4為氫、甲基、甲氧甲基或乙酰基，R5為氫、甲基、甲氧甲基或乙酰基。本申請對天然的異戊烯基查爾酮以及合成的衍生物進行了體外細胞α-糖苷酶抑制活性的測定，結果顯示此類化合物以及衍生物對α-糖苷酶有良好的抑制活性，具有潛在的成為抑制α-糖苷酶藥物的基礎。
【IPC分類】A61K31/12, A61P3/10
【公開號】CN105030742
【申請號】CN201510290684
【發明人】郁彭, 孫華, 姜磊, 李雅姍, 丁微娜, 趙雪, 王浩猛
【申請人】天津科技大學
【公開日】2015年11月11日
【申請日】2015年6月1日