基于醇提法提取金銀花提取物的酶法加工的制作方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于藥物制備技術領域，具體涉及中藥材金銀花提取物的一種新型加工方法。
【背景技術】
[0002]金銀花提取物的主要指標性成分是綠原酸，即由咖啡酸與奎尼酸組成縮酚酸，異名為咖啡糅酸，化學名為3-0-咖啡酰奎尼酸，是植物體在有氧呼吸過程中經莽草酸途徑產生一種苯丙素類化合物。
[0003]綠原酸具有清除自由基、抗菌消炎、抗病毒、降糖、降脂、保肝利膽等多種功效，近年來發現綠原酸類物質有抗癌、抗艾滋病的作用，可作為先導設計開發抗癌、抗艾滋病藥物，同時，作為良好的抗氧化劑，綠原酸在醫藥、日用化工、食品等領域都有廣泛的應用。
[0004]在我國，綠原酸的生產技術落后，大多采用乙醇法，產量低，應用范圍不大，有些品種尚屬空白，大量生產綠原酸對發展國民經濟的生產具有重要的意義。
【發明內容】
[0005]本發明的目的是克服現有技術的不足，提出一種能夠提升綠原酸純度、安全綠色，提高綠原酸利用率的一種新型金銀花提取物的加工方法。
[0006]本發明實現目的的技術方案是:
[0007]一種新型金銀花提取物的加工方法，包括以下組分及質量分數:金銀花10 — 20份，纖維素酶70%乙醇溶液。
[0008]中藥材金銀花提取物的新型加工方法，步驟是:
[0009](I)取經干燥粉碎后的樣品5g，加30mL水；
[0010](2)將纖維素酶配成含量為2.5%的標準酶液，在上述金銀花樣品中分別加
0.5ml, 1.0ml, 1.5ml, 2.0ml, 2.5ml，45°C溫度下酶處理 2h ；
[0011](3)加入10倍量70%的乙醇，80°C水浴回流提取2次，每次2h，離心，收集上清液；
[0012](4)真空減壓濃縮至50mL，用0.2mol/L鹽酸溶解并定容至10mL容量瓶中；
[0013](5)在324nm處測定吸光度，定量。平行三次。
[0014]本發明的優點和有益效果為:
[0015]1.本發明創新了金銀花提取物加工方法，該法綠原菌酸得率比乙醇回流法提高25.97%，充分體現了該法在金銀花提取過程中的優勢，是國內金銀花提取加工的重大突破，為國內提取方法開辟了新途徑。
[0016]2.本工藝提取條件較為溫和，避免了綠原酸在高溫條件下分解，大大地提高了綠原酸的產率。
[0017]3.本發明工藝簡單、操作容易，涉及設備設施少，適合規模化生產和產業化等多種優點，應用于工業生產上切實可行，可為金銀花中提取綠原酸的工業化大生產提供參考。
【具體實施方式】
[0018]下面通過具體實施例對本發明作進一步詳述，以下實施例只是描述性的，不是限定性的，不能以此限定本發明的保護范圍。
[0019]首先確定最適的酶用量、酶解時間、溫度對實驗的影響,包括如下步驟:
[0020]酶的用量對綠原酸得率的影響
[0021]設置了0.5，1.0, 1.5，2.0, 2.5，3.0, 3.5，4.0, 4.5，5.0%10 個水平纖維素酶用量對纖維素酶處理效果的影響，以不加酶液為對照，45°C條件下酶處理2h。
[0022]酶解時間對綠原酸得率的影響
[0023]金銀花樣品中加1.0ml酶液，酶解溫度45 °C，酶解時間
0.5，1.0, 1.5，2.0, 2.5，3.0, 3.5h金銀花提取物的平均得率和綠原酸得率。
[0024]酶處理溫度對綠原酸得率的影響
[0025]設置了25°C，30°C 35°C，40°C，45°C , 50°C , 55°C , 60°C 8 個水平研究溫度對纖維素酶處理效果的影響，試驗時每個金銀花樣品加酶液1.0ml，酶處理2h。
[0026]實驗結果表明:當酶用量為2.5%時，綠原酸得率最高；酶解時間2小時時綠原酸得率最高；纖維素酶處理的最適溫度范40°C _50°C，在45°C時綠原酸得率最高，當高于50°C時，綠原酸得率降低，可以看出，纖維素酶的最適溫度為45°C。
[0027]實施例1:
[0028]金銀花，纖維素酶，乙醇
[0029](I)取經干燥粉碎后的樣品5g，加30ml水；
[0030](2)將纖維素酶配成含量為2.5%的標準酶液，在上述金銀花樣品中分別加0.5ml,
1.0ml, 1.5ml, 2.0ml, 2.5ml,以不加酶液為對照，45°C溫度下酶處理2h。
[0031](3)加入10倍量70%的乙醇，80°C水浴回流提取2次，每次2h，離心，收集上清液；
[0032](4)真空減壓濃縮至50ml，用0.2mol/L鹽酸溶解并定容至10ml容量瓶中；
[0033](5)在324nm處測定吸光度，定量，平行三次。
[0034]實施例2:
[0035]金銀花，纖維素酶，乙醇
[0036](I)取經干燥粉碎后的樣品5g，加30mL水；
[0037](2)將纖維素酶配成含量為2.5%的標準酶液，在上述金銀花樣品中分別加0.5，
1.0，1.5,2.0,2.5mL,以不加酶液為對照，45°C溫度下酶處理2h。
[0038](3)加入10倍量70%的乙醇，80°C水浴回流提取2次，每次2h，離心，收集上清液；
[0039](4)真空減壓濃縮至50mL，用0.2mol/L鹽酸溶解并定容至10mL容量瓶中；
[0040](5)在324nm處測定吸光度，定量，平行三次。
[0041]實施例3:
[0042]金銀花，纖維素酶，乙醇
[0043](I)取經干燥粉碎后的樣品5g，加30ml水；
[0044](2)將纖維素酶配成含量為2.5%的標準酶液，在上述金銀花樣品中分別加0.5，1.0,1.5,2.0,2.5mL,不加酶液為對照，45°C溫度下酶處理2h。
[0045](3)加入10倍量70%的乙醇，80°C水浴回流提取2次，每次2h，離心，收集上清液；
[0046](4)真空減壓濃縮至50ml，用0.2mol/L鹽酸溶解并定容至10ml容量瓶中；
[0047](5)在324nm處測定吸光度，定量，平行三次。
[0048]本發明提取的綠原菌酸得率比單獨乙醇回流法提高約25.97%，反應條件溫和，采用該工藝綠原酸得率最高可達6.38%。
【主權項】
1.基于醇提法提取金銀花提取物的酶法加工，其特征在于:包括以下組分及其質量分數:金銀花10 — 20份，纖維素酶70份，乙醇溶液。2.基于醇提法提取金銀花提取物的酶法加工，其特征在于: (1)取經干燥粉碎后的樣品5g，加30ml水； (2)將纖維素酶配成含量為2.5%的標準酶液，在上述金銀花樣品中分別加0.5ml,.1.0ml, 1.5ml, 2.0ml, 2.5ml,以不加酶液為對照，45°C溫度下酶處理2h ； (3)加入10倍量70%的乙醇，80°C水浴回流提取2次，每次2h，離心，收集上清液； (4)真空減壓濃縮至50ml，用0.2mol/L鹽酸溶解并定容至10ml容量瓶中，在324nm處測定吸光度，定量，平行三次。
【專利摘要】本發明公開了中藥材金銀花提取物的新型加工方法，綠原酸是金銀花的主要藥用成分，具有抗菌消炎、降脂降糖、調節免疫、抑制突變和抗腫瘤等作用，目前國內提取的方法主要是醇提法，這種方式雖簡單易行，但綠原酸得率較低，本發明在醇提的基礎上加上酶提，研究了酶的用量、酶反應時間、溫度對實驗的影響，在此基礎上運用醇提方法進行提取，與原有技術相比，該法綠原菌酸得率比乙醇回流法提高約25.97%，反應條件溫和，采用該工藝綠原酸得率最高可達6.38%，由此可見，酶法提取新工藝能夠顯著提高綠原酸得率。
【IPC分類】A61K36/355
【公開號】CN104922186
【申請號】CN201410098541
【發明人】張剛
【申請人】天津綠格瑞科技發展有限公司
【公開日】2015年9月23日
【申請日】2014年3月18日