一種夏枯草總黃酮的提取純化方法及其應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及化學及醫藥技術領域，尤其涉及一種夏枯草總黃酮的提取純化方法及 其應用。
【背景技術】
[0002] 癌癥是一大類惡性腫瘤的統稱，是當今世界上第一大嚴重威脅人類健康的疾病， 多種誘發因素如環境污染、化學污染(化學毒素)、電離輻射、自由基毒素等都可導致癌癥的 發生。目前癌癥的治療包括手術治療、化學治療、放射治療、中醫治療等，這些治療手段對 癌癥均有一定療效，但是其作用效果有限，且放射治療、化學治療對正常組織損害也較大， 因此，癌癥的治療仍然是人類面對的極大考驗。中醫藥治療癌癥現在已經被國內外醫療專 家廣泛的認可，大量的臨床試驗及科研研宄已經證實了中醫治療癌癥的效果，無論在抑制 或殺傷腫瘤細胞方面還是術后調理，減輕放、化療不良反應，改善癥狀和體征，提高生存質 量等方面，均發揮了重要的作用，因此，近年來中醫中藥在癌癥的治療方面日益被人們所關 注。
[0003] 夏枯草為唇形科植物夏枯草的干燥果穗，2010版《中國藥典》收載的中藥材，始載 于《神農本草經》。《神農本草經》言："主寒熱、瘰疬、鼠瘺、頭瘡，破癥，散癭結氣，腳腫濕痹"； 《本草通玄》:"夏枯草，補養厥陰血脈，又能疏通結氣。目痛、瘰疬皆系肝癥，故建神功。然久 用亦防傷胃，與參、術同行，方可久服無弊"；《綱目》:"黎居士《易簡方》，夏枯草治目疼，用沙 糖水浸一夜用，取其能解內熱，緩肝火也。樓全善云，夏枯草治目珠疼至夜則甚者，神效，或 用苦寒藥點之反甚者，亦神效。蓋目珠連目本，肝系也，屬厥陰之經。夜甚及點苦寒藥反甚 者，夜與寒亦陰故也。夏枯稟純陽之氣，補厥陰血脈，故治此如神，以陽治陰也"。從古代各家 本草對其性狀、產地、用途等方面進行考證與目前習用的夏枯草，即主要為含黃酮類及三萜 皂苷類等物質相符。臨床上夏枯草用于淋巴結核、甲狀腺腫、乳癰、頭目眩暈、口眼歪斜、筋 骨疼痛、肺結核、血崩、帶下、急性傳染性黃疸型肝炎及細菌性痢疾等疾病的治療；而有關其 有效成分之一總黃酮富集物的高純度純化方法、抗肝腫瘤活性研宄迄今為止尚未見報道。
[0004] 夏枯草中黃酮類化合物作為其中主要的活性成分，具有廣泛的生物活性，在心血 管系統、中樞神經系統、血液系統、免疫系統、抗炎、抗衰老、抗腫瘤等方面都有較顯著的療 效，但其生物活性的研宄主要集中在抗氧化活性方面。夏枯草化學成分復雜，除黃酮類化合 物，還含有其它類多種化學成分，主要有黃酮類、三萜皂苷類、苯丙素、留體、有機酸、揮發油 及糖等。因此，藥材提取液中含有大量非黃酮類雜質，不利于闡明藥效物質組分和作用機 制，難以投入到新藥的研發中，故對夏枯草總黃酮純化方法的研宄具有現實意義。根據文獻 報道，對夏枯草中總黃酮富集純度未達到90%以上，不利于研宄其發揮藥效的物質基礎、作 用機制及其藥效組分的解析和表征，很難將其研發成臨床新藥。
【發明內容】
[0005] 針對上述問題，本發明提供一種夏枯草總黃酮的提取純化方法及其應用，該方法 使夏枯草中總黃酮富集物純度達到94%以上，用于制備治療肝癌的藥物。
[0006] 為實現本發明的上述目的，本發明提供一種夏枯草總黃酮的提取純化方法，包括 以下步驟。
[0007] 步驟1、取夏枯草藥材粉碎過篩，加1-30倍量5-95%的乙醇，回流提取1-3次，每次 1-5 h，過濾，合并濾液，作為提取液，備用。
[0008] 步驟2、將步驟1中的提取液，加熱濃縮至濃度為0. 05-0. 5 g/mL，再用HCl和NaOH 溶液調節pH值為1-7,作為上樣液。
[0009] 步驟3、上樣液純化：將步驟2中的上樣液，上NKA-9大孔吸附樹脂，所述夏枯草藥 材與樹脂用量比為〇. 1-1.0 g/mL，用1-10 BV水除雜后，再用1-10BV的10-95%乙醇洗脫。
[0010] 步驟4、連續多次經過步驟3的純化工藝得富集物，將富集物減壓干燥至粉末或浸 膏，即得。
[0011] 本發明還提供夏枯草總黃酮在制備治療肝癌藥物中的應用。
[0012] 所述夏枯草總黃酮可加入藥學上可接受的輔料或載體，制成不同劑型的治療肝癌 的藥物。
[0013] 與現有技術相比本發明的有益效果。
[0014] 本發明提供夏枯草總黃酮的提取純化方法及其應用，該方法從夏枯草干燥果穗中 提取純化總黃酮富集物，純度達到94%以上，可以有效排除雜質對藥效成分的干擾并且為 藥效物質組分的解析及闡明其作用機制奠定基礎；通過藥理藥效研宄表明夏枯草總黃酮具 有明顯的抗肝腫瘤活性，并呈明顯的量效關系，同時純度增加，可減小服用劑量、降低不良 反應，為研宄其發揮藥效的物質基礎及作用機制奠定基礎，擴大了夏枯草的應用范圍；同時 為開發以夏枯草總黃酮富集物為原料的具有廣泛臨床使用價值和商業開發價值的抗肝腫 瘤新藥和工業生產提供理論和實驗依據。
【具體實施方式】
[0015] 下面結合具體實施例進一步詳細說明本發明。
[0016] 1、夏枯草總黃酮提取工藝研宄。
[0017] 1.1單因素水平考察。
[0018] 表1 :夏枯草藥材不同粉碎粒徑提取總黃酮的含量（％)。
【主權項】
1. 一種夏枯草總黃酮的提取純化方法，包括以下步驟： 步驟1、取夏枯草藥材粉碎過篩，加1-30倍量5-95%的乙醇，回流提取1-3次，每次1-5 h，過濾，合并濾液，作為提取液，備用； 步驟2、將步驟1中的提取液，加熱濃縮至濃度為0. 05-0. 5g/mL，再調節pH值為1-7， 作為上樣液； 步驟3、上樣液純化：將步驟2中的上樣液，上NKA-9大孔吸附樹脂，用1-10 BV水除雜 后，再用1-10BV的10-95%乙醇洗脫； 步驟4、連續多次經過步驟3的純化工藝得富集物，將富集物減壓干燥至粉末或浸膏， 即得。
2. 如權利要求1所述的夏枯草總黃酮的提取純化方法，其特征在于，所述步驟2中采用 HCl和NaOH溶液調節pH值為1-7。
3. 如權利要求1所述的夏枯草總黃酮的提取純化方法，其特征在于，所述步驟3中夏枯 草藥材與樹脂用量比為〇. 1-1. 〇g/mL。
4. 如權利要求1所述的夏枯草總黃酮的提取純化方法，其特征在于，所述純化工藝的 次數為三次。
5. 如權利要求1所述的夏枯草總黃酮的提取純化方法，其特征在于，所述連續三次純 化工藝后得到的夏枯草總黃酮純度大約達到94%以上。
6. 夏枯草總黃酮在制備治療肝癌藥物中的應用。
7. 如權利要求1所述的夏枯草總黃酮的應用，其特征在于，所述夏枯草總黃酮可加入 藥學上可接受的輔料或載體，制成不同劑型的治療肝癌的藥物。
【專利摘要】一種夏枯草總黃酮的提取純化方法，步驟為：（1）取夏枯草藥材粉碎過篩，加1-30倍量5-95%的乙醇，回流提取1-3次，每次1-5h，過濾，合并濾液，得提取液；（2）將所述提取液加熱濃縮至濃度為0.05-0.5g/mL，再調節pH值為1-7，得上樣液；（3）將所述上樣液，上NKA-9大孔吸附樹脂，用1-10BV水除雜后，再用1-10BV的10-95%乙醇洗脫；（4）連續多次經過步驟3的純化工藝得富集物，減壓干燥至粉末或浸膏，即得。本發明還提供夏枯草總黃酮在制備治療肝癌藥物中的應用，通過藥理藥效研究表明夏枯草總黃酮具有明顯的抗肝腫瘤活性，并呈明顯的量效關系，為開發以夏枯草總黃酮富集物為原料的具有廣泛臨床使用價值和商業開發價值的抗肝腫瘤新藥和工業生產提供理論和實驗依據。
【IPC分類】A61K36-536, A61P35-00
【公開號】CN104873570
【申請號】CN201510302298
【發明人】孟憲生, 李楠楠, 包永睿, 王帥
【申請人】遼寧中醫藥大學
【公開日】2015年9月2日
【申請日】2015年6月5日