美味牛肝菌在制備動物亞硝酸鹽中毒的解毒產品中的應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及美味牛肝菌的新用途，特別涉及美味牛肝菌在制備動物亞硝酸鹽中毒 的解毒產品中的應用。
【背景技術】
[0002] 亞硝酸鹽是一類含有亞硝酸根離子（NCV)的無機化合物，白色或淡黃色結晶鹽類 物質，味苦，外形極似食鹽。亞硝酸鹽是自然界氮循環中的重要中間物質，廣泛存在于人類 生活環境中。水果和蔬菜中含有亞硝酸鹽，海水、地下水、自來水中也同樣含有亞硝酸鹽。而 且隨著環境污染的加劇，氮肥的過量使用，使得農產品中的亞硝酸鹽含量日趨升高。而亞硝 酸鹽作為一種允許使用的食品添加劑，被廣泛應用于肉制品中，其可與肉品中的肌紅素結 合，使其保持良好色澤外觀，此外腌制食品和發酵食品中由于微生物的發酵作用也會產生 亞硝酸鹽。
[0003] 過量攝入亞硝酸鹽會引起中毒，主要機理是亞硝酸鹽被血液吸收后，可使正常的 血紅蛋白（Fe2+)變成變性血紅蛋白（Fe3+)，從而失去攜氧能力，出現組織缺氧現象。同時亞 硝酸鹽是一種致癌物質，亞硝酸鹽與蛋白質代謝的中間產物仲胺反應，生成亞硝胺，亞硝胺 可誘發肝癌、食道癌和咽癌等。
[0004] 人亞硝酸鹽的中毒量為0. 2~0. 5克，致死量為3克。亞硝酸鹽中毒潛伏期短，一 般為數十分鐘或1~3小時，癥狀以紫紺為主。皮膚粘膜、口唇、指甲下最明顯，并伴有頭痛、 頭暈、心率加快、嘔吐、腹痛、腹瀉等。亞硝酸鹽中毒的治療方法主要有吸氧、洗胃和用美蘭 (亞甲藍)處理。美藍是亞硝酸鹽中毒的特效解毒劑，能還原高鐵血紅蛋白，恢復正常輸氧功 能。用量為每公斤體重1~2mg。同時高滲葡萄糖可提高血液滲透壓，能增加解毒功能并有 短暫利尿作用。
[0005] 美味牛肝菌（Boletus edulis)又稱大腳燕，屬于擔子菌門（Basidiomycota)、層菌 綱（Hymenomycetes)、傘菌目（Agaricases)、牛肝菌科（Boletaceae),是一種食藥兼用且經 濟價值很高的大型真菌。在我國，美味牛肝菌（B. edulis)主要分布于云南、黑龍江、四川、 貴州、西藏、內蒙古、福建等省區，其他各地的森林中也有一定量的分布。國外在北美洲，拉 丁美洲的墨西哥，歐洲北至斯堪的納維亞半島、南到希臘、意大利等地區均有分布。
【發明內容】
[0006] 本發明所要解決的技術問題是提供美味牛肝菌的新用途。
[0007] 本發明所提供的美味牛肝菌的新用途是下述1-6中的至少一種：
[0008] 1、美味牛肝菌提取物在制備動物亞硝酸鹽中毒的解毒產品（藥物或保健品或食 品）中的應用；所述美味牛肝菌提取物是用水從美味牛肝菌（Boletus edulis)子實體中提 取出來的水溶性物質。
[0009] 2、美味牛肝菌提取物在制備降解動物體內亞硝酸鹽產品（藥物或保健品或食品） 中的應用；所述美味牛肝菌提取物是用水從美味牛肝菌（Boletus edulis)子實體中提取出 來的水溶性物質。
[0010] 3、美味牛肝菌提取物在制備延長亞硝酸鹽中毒實驗動物存活時間產品（藥物或保 健品或食品）中的應用；所述美味牛肝菌提取物是用水從美味牛肝菌（Boletus edulis)子 實體中提取出來的水溶性物質。
[0011] 4、美味牛肝菌（Boletus edulis)在制備動物亞硝酸鹽中毒的解毒產品（藥物或保 健品或食品）中的應用。
[0012] 5、美味牛肝菌（Boletus edulis)在制備降解動物體內亞硝酸鹽產品（藥物或保健 品或食品）中的應用。
[0013] 6、美味牛肝菌（Boletus edulis)在制備延長亞硝酸鹽中毒實驗動物存活時間產 品(藥物或保健品或食品）中的應用。
[0014] 上文中，所述美味牛肝菌子實體可為新鮮的子實體或冷凍的子實體。所述冷凍的 子實體可為將新鮮的美味牛肝菌子實體在_2〇°C可存放一年的子實體。
[0015] 上文中，所述美味牛肝菌提取物可按照如下方法獲得：將在15_25°C解凍的美味 牛肝菌子實體或新鮮的美味牛肝菌子實體在4-KTC粉碎后用水浸提，收集水溶性物質得到 所述美味牛肝菌提取物。
[0016] 上述美味牛肝菌提取物的制備方法中，所述美味牛肝菌子實體可粉碎至50-80 目。
[0017] 上述美味牛肝菌提取物的制備方法中，所述用水浸提可為在4-10°C (如4°C)用水 浸提10-30分鐘(如30分鐘)。
[0018] 上述美味牛肝菌提取物的制備方法中，可采用離心分離所述水溶性物質。所述離 心采用的離心力可為8000-10000g(如8000g)，離心時間可為10-20分鐘(如15分鐘，10-15 分鐘或15-20分鐘)。
[0019] 上文中，所述水可為生理鹽水（NaCl的濃度為0. 9%)。
[0020] 上文中，所述動物可為哺乳動物，如小鼠。所述實驗動物可為哺乳動物，如小鼠。
[0021] 本申請的實驗證明美味牛肝菌提取物對亞硝酸鹽中毒具有很強的解毒作用，雖然 美藍是亞硝酸鹽中毒的特效解毒劑，但美味牛肝菌作為一種味道鮮美的食品，在生活中經 常食用，可以預防和治療亞硝酸鹽中毒，且沒有任何毒副作用。
【具體實施方式】
[0022] 以下的實施例便于更好地理解本發明，但并不限定本發明。下述實施例中的實驗 方法，如無特殊說明，均為常規方法。
[0023] 下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業途徑得到。
[0024] 下述實施例中的生理鹽水均是指NaCl的濃度為0. 9%的NaCl水溶液。
[0025] 下述實施例中的美味牛肝菌（Boletus edulis)(高悅，吳小芹.6種外生菌根菌對 3種松苗葉綠素含量及葉綠素熒光參數的影響.南京林業大學學報（自然科學版）.2010年 第06期）采自中國云南楚雄，公眾可從野外采集，或從云南當地的野生食用菌市場購買，也 可從中國農業大學獲得，以重復本申請實驗。
[0026] 下述實施例中的美味牛肝菌均指美味牛肝菌（Boletus edulis)子實體。
[0027] 實施例1、用美味牛肝菌制備動物亞硝酸鹽中毒的解毒產品
[0028] -、美味牛肝菌提取物的制備
[0029] 取_20°C保存100天的美味牛肝菌子實體50g，加入50ml生理鹽水，在15_25°C解 凍后，在4°C用組織搗碎機粉碎至50-65目，4°C下抽提30min。抽提液在4°C 8000g離心 15min，得到的上清液（80ml)即為美味牛肝菌提取物，每克美味牛肝菌子實體得到1.6ml美 味牛肝菌提取物。將美味牛肝菌提取物在4-6°C存放。
[0030] 二、美味牛肝菌提取物對亞硝酸鹽中毒小鼠的存活率和致死時間的影響
[0031] 將步驟一制備的美味牛肝菌提取物在4-6°C存放8小時灌胃下述第三組、第四組 和第六組雄性昆明白小鼠，測試美味牛肝菌提取物對亞硝酸鹽中毒小鼠的存活率和致死時 間的影響。具體的實驗方法如下：
[0032] 實驗小鼠為4-5周齡雄性昆明白小鼠，體重相差不超過2. 0g，共120只，分為六組， 每組20只，實驗前禁食禁水12h。
[0033] 第一組為低濃度對照組，每只小鼠灌胃0. 5ml生理鹽水后立即灌胃NaNO2，劑量為 0.015g/100g 體重；
[0034] 第二組，每只小鼠灌胃0· 5ml生理鹽水后立即灌胃NaNO2，劑量為0· 025g/100g體 重；
[0035] 第三組，每只小鼠灌胃0. 3ml美味牛肝菌提取物和0. 2ml生理鹽水后立即灌胃 NaNO2，劑量為 0· 025g/100g 體重；
[0036] 第四組，每只小鼠灌胃0. 5ml美味牛肝菌提取物后立即灌胃NaNO2，劑量為 0· 025g/100g 體重；
[0037] 第五組，每只小鼠灌胃0. 5ml生理鹽水后立即灌胃NaNO2，劑量為0. 036g/100g體 重；
[0038] 第六組，每只小鼠灌胃0. 5ml美味牛肝菌提取物后立即灌胃NaNO2，劑量為 0· 036g/100g 體重。
[0039] 從給藥開始，觀察并記錄各組實驗小鼠的存活時間直至給藥后42天。
[0040] 結果表明第一組給藥后4-6分鐘實驗小鼠出現中毒癥狀，嘴唇發紫，眼發紫，四肢 無力，但20只小鼠全部存活，5h后癥狀消失。
[0041] 第二組小鼠給藥后27. 6分鐘內20只小鼠全部死亡，該20只小鼠的平均存活時間 為18. 1 ±9. 5分鐘。
[0042] 第三組小鼠給藥后32.9分鐘內18只死亡，該死亡的18只小鼠平均存活時間為 27. 6±5. 3分鐘，該死亡的18只小鼠的存活時間比第二組(對照組)的存活時間平均延長了 52. 5%。其余2只小鼠在給藥后42天還沒有死亡，中毒5h后癥狀消失。
[0043] 第四組小鼠給藥后60. 0分鐘內4只小鼠死亡，該死亡的4只小鼠的平均存活時間 為45. 0± 15. 0分鐘，該死亡的4只小鼠的存活時間比第二組(對照組)的存活時間平均延長 了 148. 6%。其余16只小鼠在給藥后42天還沒有死亡，中毒5h后癥狀消失。
[0044] 第五組小鼠給藥后15. 2分鐘內20只小鼠全部死亡，該20只小鼠的平均存活時間 僅為11.5±3. 7分鐘。
[0045] 第六組小鼠給藥后20. 8分鐘內20只小鼠全部死亡，該20只小鼠的平均存活時 間為17. 0±3. 8分鐘，該20只小鼠的平均存活時間比對照組(第五組）的存活時間延長了 47. 8%。
[0046] 表1美味牛肝菌液對亞硝酸鹽中毒致死時間的影響
[0047]
【主權項】
1. 美味牛肝菌提取物在制備動物亞硝酸鹽中毒的解毒產品中的應用；所述美味牛肝 菌提取物是用水從美味牛肝菌（Boletus edulis)子實體中提取出來的水溶性物質。
2. 美味牛肝菌提取物在制備降解動物體內亞硝酸鹽產品中的應用；所述美味牛肝菌 提取物是用水從美味牛肝菌（Boletus edulis)子實體中提取出來的水溶性物質。
3. 美味牛肝菌提取物在制備延長亞硝酸鹽中毒實驗動物存活時間產品中的應用；所 述美味牛肝菌提取物是用水從美味牛肝菌（Boletus edulis)子實體中提取出來的水溶性 物質。
4. 美味牛肝菌（Boletus edulis)在制備動物亞硝酸鹽中毒的解毒產品中的應用。
5. 美味牛肝菌（Boletus edulis)在制備降解動物體內亞硝酸鹽產品中的應用。
6. 美味牛肝菌（Boletus edulis)在制備延長亞硝酸鹽中毒實驗動物存活時間產品中 的應用。
【專利摘要】本發明公開了美味牛肝菌在制備動物亞硝酸鹽中毒的解毒產品中的應用。實驗證明美味牛肝菌提取物對亞硝酸鹽中毒具有很強的解毒作用，雖然美藍是亞硝酸鹽中毒的特效解毒劑，但美味牛肝菌作為一種味道鮮美的食品，在生活中經常食用，可以預防和治療亞硝酸鹽中毒，且沒有任何毒副作用。
【IPC分類】A23L1-28, A61P39-02, A61K36-07
【公開號】CN104857028
【申請號】CN201410061944
【發明人】王賀祥, 張薇薇, 耿雪冉, 劉芹, 楊冬雪, 袁翔鶴, 石瑤, 陳穩穩
【申請人】中國農業大學
【公開日】2015年8月26日
【申請日】2014年2月24日