一種高純度啤酒花總黃酮的制備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種高純度啤酒花總黃酮的制備方法，屬于藥用有效成分提取技術領域。
【背景技術】
[0002]啤酒花，《本草綱目》上稱為蛇麻花，是一種多年生草本蔓性植物，古人取為藥材，原產歐洲、美洲和亞洲，分布于新疆北部、東北、華北及山東、甘肅、陜西等地。啤酒花的果穗供制啤酒用，可賦予啤酒苦味和香味，啤酒花亦可作為一種植物被國內外廣泛應用。啤酒花具有健胃消食、抗菌消炎、安神利尿、抗結核等功效，可用于治療消化不良、浮腫、失眠、痢疾、結核等。研宄表明，啤酒花主要含有樹脂、揮發油、黃酮及鞣質等成份，而黃酮類是其藥理活性最為主要的有效成分之一。因而，對于啤酒花黃酮類的提取分離方面的研宄則顯得尤為重要，對于啤酒花的開發應用具有重要的社會實用價值。
[0003]然而，目前對于啤酒花方面的研宄，尤其是對于啤酒花黃酮類的提取純化方面的研宄還少有報道。
[0004]胡仕屏等在論文“啤酒花總黃酮超聲波提取工藝的研宄”中，利用單因素試驗和正交實驗法確定了一種啤酒花總黃酮的提取工藝，主要是:乙醇體積濃度40%，料液比lg/40ml，提取溫度60°C，超聲波提取時間40min。與之類似的還有馬俊鵬等在其論文“正交試驗優選啤酒花總黃酮提取工藝”中，也提供了一種提取工藝:乙醇體積濃度60%，料液比lg/25ml，提取次數三次，提取時間80min。上述的提取工藝都僅僅是對啤酒花總黃酮提取條件進行了最初步的研宄，無法保證總黃酮成分的含量要求，使各種雜質及其他成分無法得到有效的分尚。
[0005]專利申請號為200810037197.0的發明專利“啤酒花提取物及其制備方法與應用”則公開了一種以查爾酮為主要有效成分的啤酒花提取物的方法，主要是通過醇提、有機溶劑萃取、聚酰胺樹脂柱富集等步驟得到提取物。專利申請號為201210412183.9的發明專利“以啤酒花莖葉和殘次花為原料的啤酒花總黃酮制備方法”也公開了一種分離啤酒花總黃酮的方法，主要是采用乙醇為溶劑提取，過濾，膜濃縮后再經真空濃縮，從而得到啤酒花總黃酮。上述發明專利雖然都提供了一種黃酮類成分的分離方法，然而發明專利一中使用石油醚、戊烷或己烷等有機溶劑作為萃取溶劑，不利于人體安全和工業生產要求，而且僅僅通過萃取和聚酰胺柱難以將糖類、皂苷類等一些大極性成分除去掉；另外，查爾酮類在啤酒花黃酮類成分中所占的比例非常少，因而其分離方法也必然不適宜于對總黃酮類的分離。對于發明專利二而言，僅僅是做了一次粗提取的過程，但該專利也提供了一種廢棄原料再利用的思路。
[0006]綜合上述文獻及專利的情況來看，目前的研宄還不足以提供一種適合于工業化大生產要求的，用于提取純化并最終得到含量高、外觀性狀良好的啤酒花總黃酮的制備工藝。
【發明內容】
[0007]為了克服現有技術問題，本發明的目的在于提供一種簡單有效、適合于工業化生產的高純度啤酒花總黃酮的制備方法。
[0008]為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案為:
一種高純度啤酒花總黃酮的制備方法，其特征在于，包括以下步驟:
(1)制備提取液:取啤酒花原料，加入乙醇，在50-80°C的溫度條件下回流至少2h，然后經過濾、洗滌得到提取液；
(2)制備聚酰胺柱流出液:將步驟(I)得到的提取液濃縮至無醇味后加水稀釋，靜置冷卻后經硅藻土過濾，濾液直接過聚酰胺柱，依次用純化水和乙醇洗脫液洗脫，收集乙醇洗脫液洗脫部分的流出液，濃縮并加水稀釋后再過大孔樹脂柱，依次用純化水和乙醇洗脫液洗脫，收集乙醇洗脫液洗脫部分的流出液；
(3)制備啤酒花總黃酮:向步驟(2)制備得到的流出液中加入活性炭脫色后，抽濾，并將濾液濃縮至無醇味，再經噴霧干燥后得到啤酒花總黃酮。
[0009]進一步，所述的啤酒花原料為啤酒花的果穗、啤酒花釀酒廢棄的莖葉、啤酒花的殘花中的至少一種。
[0010]且在步驟(I)制備提取液的過程中，提取的次數為2-4次，優選2次。
[0011 ] 更進一步，步驟(I)中所述的提取過程中的乙醇的濃度為40-90%，優選，提取過程中的乙醇的濃度為50-70%，進一步優選提取過程中的乙醇的濃度為60%。
[0012]此外，步驟(I)中回流時的溫度優選為65°C。
[0013]而步驟(2)中所述的大孔樹脂柱中的大孔樹脂為D101、DM130、HPD-100, D241、HPD-600、AB-8 中的任一種。
[0014]且步驟(2)中所述的聚酰胺柱中的聚酰胺的粒度為30-60目。
[0015]而所述的聚酰胺柱的乙醇洗脫液為濃度為70%的乙醇洗脫液，而大孔樹脂柱的乙醇洗脫液包括依次進行洗脫的濃度為25%乙醇洗脫液和濃度為95%的乙醇洗脫液。
[0016]本發明的有益效果為:本發明所述制備方法步驟簡潔，且過程中，有機溶劑使用少、成本低，操作安全且無環境污染，而最終的產品顏色好，產品得率和含量高，適合于工業化生產，且充分應用了啤酒花釀酒及藥用的兩種不同用途，為啤酒花原料能夠得到最大限度的利用提供了路徑。
【具體實施方式】
[0017]下面結合具體實施例詳細說明本發明。
[0018]實施例1:
首先將原料啤酒花(啤酒花果穗)2kg加入到20L濃度為60%的乙醇提取液中，在65°C的溫度條件下回流2h，然后經過濾、洗滌得到提取液19.6 L ;濾渣再次加入上述等量等濃度的乙醇提取液中繼續回流2小時，過濾，合并兩次提取液，約合41.0 Lo將得到的提取液首先濃縮至無醇味，然后加水稀釋后靜置冷卻，再經硅藻土過濾后，濾液過聚酰胺柱后，依次用純化水和濃度為70%的乙醇洗脫液洗脫，收集乙醇洗脫液洗脫部分的流出液。將流出液加水稀釋后過DM130大孔樹脂柱，再次用純化水、濃度分別為25%的乙醇洗脫液和95%的乙醇洗脫液洗脫，并再次收集濃度為95%的乙醇洗脫液洗脫部分的流出液。最后將流出液加入活性炭脫色后，趁熱抽濾，并將濾液濃縮至無醇味，再經噴霧干燥后得到黃色粉末狀的物質88.6 g，經檢測，總黃酮質量含量達到86.8%。
[0019]實施例2:
首先將原料啤酒花(啤酒花果穗)2kg加入到20L濃度為90%的乙醇提取液中，在80°C的溫度條件下回流2h，然后經過濾、洗滌得到提取液18.2 L ;將濾渣再次加入上述等量等濃度的乙醇提取液中繼續回流2小時，重復提取兩次，過濾，合并三次提取液，約合62.5 Lo將得到的提取液首先濃縮至無醇味，然后加水稀釋后靜置冷卻，再經硅藻土過濾后，濾液過聚酰胺柱后，依次用純化水和濃度為70%的乙醇洗脫液洗脫，收集乙醇洗脫液洗脫部分的流出液。將流出液加水稀釋后過HPD-600大孔樹脂柱，再次用純化水、濃度分別為25%的乙醇洗脫液和95%的乙醇洗脫液洗脫，并再次收集濃度為95%的乙醇洗脫液洗脫部分的流出液。最后將流出液加入活性炭脫色后，趁熱抽濾，并將濾液濃縮至無醇味，再經噴霧干燥后得到黃色粉末狀的物質85.3 g，經檢測，總黃酮質量含量達到81.2%。
[0020]實施例3:
首先將原料啤酒花(啤酒花果穗)2kg加入到20L濃度為90%的乙醇提取液中，在65°C的溫度條件下回流2h，然后經過濾、洗滌得到提取液20.3 L ;將濾渣再次加入上述等量等濃度的乙醇提取液中繼續回流2小時，過濾，合并兩次提取液，約合42.2 Lo將得到的提取液首先濃縮至無醇味，然后加水稀釋后靜置冷卻，再經硅藻土過濾后，濾液過聚酰胺柱后，依次用純化水和濃度為70%的乙醇洗脫液洗脫，收集乙醇洗脫液洗脫部分的流出液。將流出液加水稀釋后過DlOl大孔樹脂柱，再次用純化水、濃度分別為25%的乙醇洗脫液和95%的乙醇洗脫液洗脫，并再次收集濃度為95%的乙醇洗脫液洗脫部分的流出液。最后將流出液加入活性炭脫色后，趁熱抽濾，并將濾液濃縮至無醇味，再經噴霧干燥后得到黃色粉末狀的物質46.2 g，經檢測，總黃酮質量含量達到73.5%。
[0021]本發明按照上述實施例進行了說明應當理解，上述實施例不以任何形式限定本發明，凡采用等同替換或等效變換方式所獲得的技術方案，均落在本發明的保護范圍之內。
【主權項】
1.一種高純度啤酒花總黃酮的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)制備提取液:取啤酒花原料，加入乙醇，在50-80°C的溫度條件下回流至少2h，然后經過濾、洗滌得到提取液； (2)制備聚酰胺柱流出液:將步驟(I)得到的提取液濃縮至無醇味后加水稀釋，靜置冷卻后經硅藻土過濾，濾液直接過聚酰胺柱，依次用純化水和乙醇洗脫液洗脫，收集乙醇洗脫液洗脫部分的流出液，濃縮并加水稀釋后再過大孔樹脂柱，依次用純化水和乙醇洗脫液洗脫，收集乙醇洗脫液洗脫部分的流出液； (3)制備啤酒花總黃酮:向步驟(2)制備得到的流出液中加入活性炭脫色后，抽濾，并將濾液濃縮至無醇味，再經噴霧干燥后得到啤酒花總黃酮。
2.根據權利要求1所述的一種高純度啤酒花總黃酮的制備方法，其特征在于，所述的啤酒花原料為啤酒花的果穗、啤酒花釀酒廢棄的莖葉、啤酒花的殘花中的至少一種。
3.根據權利要求1所述的一種高純度啤酒花總黃酮的制備方法，其特征在于，在步驟(I)制備提取液的過程中，提取的次數為2-4次。
4.根據權利要求1或3所述的一種高純度啤酒花總黃酮的制備方法，其特征在于，在步驟(I)制備提取液的過程中，提取的次數為2次。
5.根據權利要求1所述的一種高純度啤酒花總黃酮的制備方法，其特征在于，步驟(I)中所述的提取過程中的乙醇的濃度為40-90%。
6.根據權利要求1或5所述的一種高純度啤酒花總黃酮的制備方法，其特征在于，步驟Cl)中所述的提取過程中的乙醇的濃度為50-70%，優選60%。
7.根據權利要求1所述的一種高純度啤酒花總黃酮的制備方法，其特征在于，步驟(I)中回流時的溫度為65 °C。
8.根據權利要求1所述的一種高純度啤酒花總黃酮的制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述的大孔樹脂柱中的大孔樹脂為0101、011130、即0-100、0241、即0-600、48-8中的任一種。
9.根據權利要求1所述的一種高純度啤酒花總黃酮的制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述的聚酰胺柱中的聚酰胺的粒度為30-60目。
10.根據權利要求1所述的一種高純度啤酒花總黃酮的制備方法，其特征在于，所述的聚酰胺柱的乙醇洗脫液為濃度為70%的乙醇洗脫液，而大孔樹脂柱的乙醇洗脫液包括依次進行洗脫的濃度為25%乙醇洗脫液和濃度為95%的乙醇洗脫液。
【專利摘要】本發明公開了一種高純度啤酒花總黃酮的制備方法，包括以啤酒花為原料經乙醇回流得到提取液，經過聚酰胺柱處理后，再過大孔樹脂柱，經洗脫得到溶液，活性炭脫色后噴霧干燥，最終得到含量高、外觀性狀良好的啤酒花總黃酮。本發明所述制備方法步驟簡潔，且過程中，有機溶劑使用少、成本低，操作安全且無環境污染，而最終的產品顏色好，產品得率和含量高，適合于工業化生產，且充分應用了啤酒花釀酒及藥用的兩種不同用途，為啤酒花原料能夠得到最大限度的利用提供了路徑。
【IPC分類】A61K36-60
【公開號】CN104815003
【申請號】CN201510220128
【發明人】季浩, 張宇
【申請人】江蘇天晟藥業有限公司
【公開日】2015年8月5日
【申請日】2015年5月4日