烏梅及其提取物在制備防治腸癌藥物或保健品中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種中藥，具體涉及烏梅及其提取物在制備防治腸癌藥物中的新用 途，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 大腸癌（colorectalcancer,CRC)又稱結(jié)腸直腸癌，是最常見的惡性腫瘤之一，全 球每年有超過一百萬人惟患結(jié)直腸癌并造成大約五千萬人的死亡，占世界惡性腫瘤死亡第 四位，目前我國結(jié)直腸癌的發(fā)病率呈上升趨勢，國內(nèi)發(fā)病的上升速度約為4. 8%遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過國 際水平2%。
[0003] 目前用于CRC治療的藥物主要有奧沙利鉑、氟尿嘧啶、伊立替康、葉酸和貝伐單抗 等，然而CRC根治術(shù)后五年生存率仍徘徊在50 %左右，晚期更是不到30 %。早期診斷和癌 前預(yù)防成為防治結(jié)直腸癌的主要策略。防治腸道炎癌轉(zhuǎn)變成為結(jié)直腸癌化學(xué)預(yù)防的主要環(huán) 節(jié)，相關(guān)研宄在多個醫(yī)療領(lǐng)域進(jìn)行了廣泛研宄并有所發(fā)展，中醫(yī)特色的慢病管理對維持炎 癥相關(guān)腸病緩解期臨床療效確切，對急性期也有緩解作用，因此，從中醫(yī)藥中尋找低毒高效 的藥物用于CRC化學(xué)預(yù)防方面具有很好的前景。
[0004] 中醫(yī)認(rèn)為腸病癌變早期為"肛癰""腸癰";腹痛反復(fù)發(fā)作伴有粘液膿血為"久痢"； 病情進(jìn)展出現(xiàn)包塊或腸梗阻診斷為"積聚""腸結(jié)";病變后期各臟器功能受損診斷為"虛 勞"。因此，濕邪內(nèi)蘊(yùn)、氣血壅滯、脾腎虧虛是病機(jī)。臨床采用烏梅丸治療難治性腸病取得明 顯療效。其中烏梅丸中的君藥烏梅為薔薇科落葉喬木植物梅Prunusmume的近成熟果實， 經(jīng)煙火熏制而成。烏梅，味酸、氣平，可升可降，能柔肝緩肝，治療肝郁克脾，又可收斂肝氣， 固澀大腸，止血痢。具有"五止"功效，即止渴、止咳、止瀉、止痛及止血功效。
[0005] 中國專利101317904A公開了一種烏梅提取物在抗畜禽病毒、細(xì)菌、支原體或衣原 體的用途；103977105A公開了治療哮喘的防風(fēng)烏梅提取物組合物及其應(yīng)用；102091315A公 開了生姜與烏梅提取物組合物制備癌癥放、化療中解毒增效藥物中的用途，101357182A公 開了一種含有烏梅的治療糖尿病的藥物及其制備方法。但目前尚未有以烏梅提取物在制備 防治腸病癌變藥物中的用途相關(guān)報道。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0006] 發(fā)明目的：本發(fā)明在烏梅現(xiàn)有用途的基礎(chǔ)上，通過大量實驗篩選其臨床功效，開發(fā) 其新用途，提供烏梅及其提取物在制備防治腸癌藥物中的新應(yīng)用。
[0007] 技術(shù)方案：為了實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為：
[0008] 烏梅在制備防治腸癌藥物或保健品中的應(yīng)用。
[0009] 作為優(yōu)選方案，所述的烏梅在制備防治腸癌藥物或保健品中的應(yīng)用，所述的腸癌 為腸道炎性息肉、腺瘤、粘膜增生和/或炎癥性腸病轉(zhuǎn)變成的結(jié)腸癌或直腸癌。
[0010] 烏梅提取物在制備防治腸道炎癌轉(zhuǎn)變藥物或保健品中的應(yīng)用，所述的烏梅提取物 由下列方法制備得到：
[0011] 取干燥的烏梅藥材，加藥材重量5~15倍體積量的水蒸煮1~3次，每次1-3小 時，過濾。濾液合并，3000rpm離心15~30分鐘，分離上清液，60~70°C水浴濃濃縮至Ig 藥材/ml，或減壓干燥成干浸膏。
[0012] 作為優(yōu)選方案，所述的烏梅提取物在制備防治腸道炎癌轉(zhuǎn)變藥物或保健品中的應(yīng) 用，所述的腸癌為腸道炎性息肉、腺瘤、粘膜增生和/或炎癥性腸病轉(zhuǎn)變成的結(jié)腸癌或直腸 癌。
[0013]作為優(yōu)選方案，所述的烏梅提取物在制備防治腸道炎癌轉(zhuǎn)變藥物或保健品中的應(yīng) 用，將烏梅提取物和藥學(xué)上可接受的載體制備成含片、顆粒劑，片劑，膠囊劑或口服液制劑。
[0014]本發(fā)明在制成含片時，把烏梅提取物添加甜味劑，成型劑和/或粘合劑，混合均 勻，然后壓片制成含片。
[0015]本發(fā)明在制成片劑時，把烏梅提取物添加載體乳糖或玉米淀粉，需要時加入潤滑 劑硬脂酸鎂，混合均勻，然后壓片制成片劑。
[0016]本發(fā)明在制成膠囊劑時，把中藥提取物細(xì)粉添加載體乳糖或玉米淀粉混合均勻， 整粒，然后裝膠囊制成膠囊劑。
[0017]本發(fā)明在制成顆粒劑時，把中藥提取物細(xì)粉和稀釋劑乳糖或玉米淀粉混合均勻， 整粒，干燥，制成顆粒劑。
[0018]有益效果：本發(fā)明和現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點：
[0019] (1)本發(fā)明在烏梅現(xiàn)有功效的基礎(chǔ)之上，通過大量實驗篩選，深入研宄，提供烏梅 及其提取物在防治腸癌中的新用途。本發(fā)明采用經(jīng)典模型AOM-DSS誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸腫瘤， 實驗結(jié)果表明，烏梅及其提取物能夠顯著改善腸病癌變過程中模型小鼠體重下降的狀況， 顯著改善腸病癌變小鼠不斷進(jìn)展的體質(zhì)量下降、稀便及便血等癥狀；并且腸道外觀及病理 研宄表明烏梅提取物能顯著降低腸病癌變小鼠結(jié)腸腫瘤發(fā)生率，提示烏梅及其提取物具有 很好的防治腸病癌變的功效，臨床上可以用于防治腸癌疾病。
[0020] (2)本發(fā)明提供的烏梅及其烏梅提取物，可以方便和藥學(xué)載體制備成多種劑型，臨 床上服用方便，且實驗結(jié)果表明本發(fā)明提供的組合物，療效可靠，使用安全，長期服用無毒 副作用。
【具體實施方式】
[0021] 根據(jù)下述實施例，可以更好地理解本發(fā)明。然而，本領(lǐng)域的技術(shù)人員容易理解，實 施例所描述的具體的物料配比、工藝條件及其結(jié)果僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)當(dāng)也不會限 制權(quán)利要求書中所詳細(xì)描述的本發(fā)明。
[0022] 實施例1
[0023]烏梅提取物的制備方法：取干燥的烏梅藥材，加水蒸煮2-3次，每次1-3小時。第 一次加水量5-15倍的水，過濾，藥渣第二次加5-15倍量的水，過濾，第三次加5-10倍量的 水，過濾。將3次濾液合并，離心（3000rpm) 15分鐘，分離上清液，60°C水浴濃度至Ig藥材 /ml，或減壓干燥成干浸膏。
[0024] 實施例2烏梅提取物對AOM-DSS誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸腫瘤預(yù)防和治療作用研宄。
[0025]1.實驗材料
[0026]I. 1實驗用藥物及試劑
[0027] 烏梅提取物：本發(fā)明實施例1制備的得到的烏梅提取物；氧化偶氮甲烷 (Azoxymethane，AOM)購自sigma公司，批號：SLBD6763V;葡聚糖硫酸鈉（dextransodium sulfate,DSS)購自Mpbio公司，批號：M8667〇
[0028] 1. 2實驗動物及飼養(yǎng)
[0029]C57小鼠，18_22g，雄性，由揚(yáng)州大學(xué)比較醫(yī)學(xué)中心提供，合格證號： SCXK(蘇）2012-0004。全價營養(yǎng)顆粒飼料：由江蘇省協(xié)同醫(yī)藥生物技術(shù)有限公司提供。飼 養(yǎng)條件：室溫20 ± 2°C，濕度55 - 65 %，明暗交替，光照適度，通風(fēng)潔凈良好。
[0030] 2?方法
[0031] 2. 1A0M-DSS誘導(dǎo)的炎性腸病癌變小鼠模型造模方法：
[0032] 采用C57小鼠，預(yù)先飼養(yǎng)兩周，給予單次小劑量偶氮氧甲烷（A0M10mg/kg)腹腔注 射聯(lián)合三個循環(huán)DSS喂飼（2 %DSS飲水1周+正常飲水2周為一個循環(huán)），復(fù)制AOM-DSS 誘導(dǎo)的炎性腸病相關(guān)的結(jié)直腸癌小鼠模型。
[0033] 2. 2烏梅提取物對AOM-DSS誘導(dǎo)的炎性腸病癌變小鼠結(jié)腸腫瘤預(yù)防和治療作用。
[0034]C57小鼠30只，隨機(jī)分為3組，每組10只。分別為正常對照組，模型組，烏梅提取 物組2g/kg。空白對照組給予等量的生理鹽水；模型組，烏梅提取物組采用上述方法造模， 小劑量A0M10mg/kg腹腔注射一周后，烏梅提取物組每天口服給予烏梅提取物2g/kg，模型 組給予等量的生理鹽水。記錄小鼠體重，大便性狀及便血情況。實驗終點時處死小鼠，取血， 取結(jié)直腸組織測量長度和重量。記錄腫瘤個數(shù)，多發(fā)性及腫瘤大小。部分用10%中性福爾 馬林固定，進(jìn)行病理檢查并統(tǒng)計評分；部分保存于液氮供WesternBlot檢測。
[0035] 2. 3小鼠疾病活動指數(shù)（DAI)計算
[0036] [1]小鼠體重變化：每日對各組小鼠稱體重并記錄觀察值，利用公式計算體質(zhì)量 下降百分比。其公式如下：第n天體質(zhì)量下降（％)=(第n-1天體質(zhì)量-第n天體質(zhì)量）/ 第n-1天體質(zhì)量X100%。小鼠體質(zhì)量增加者記0分。
[0037] [2]小鼠糞便性狀：觀察各實驗組小鼠肛門口以及其周圍體毛變化：①正常糞便： 成形的球塊狀、周圍體毛干凈；②半稀便：糊狀便，但不粘附在肛周；③稀便：水樣便，粘附 肛周體毛。
[0038] [3]小鼠便血情況：采用大便隱血試紙檢測判定為小鼠糞便正常者，為糞便隱血 陰性；小鼠糞便不正常者，觀察糞便顏色改變情況：①顏色顯現(xiàn)為紅色或褐色者，可認(rèn)定為 肉眼血便；②對肉眼血便不明顯或糞便性狀不正常而可疑隱血者，使用大便隱血膠體金檢 測試紙，按使用說明書檢測大便隱血情況（酶聯(lián)免疫吸附法）。綜合以上觀察，對小鼠疾病 活動指數(shù)（diseaseactivityindex,DAI)進(jìn)行評估。
[0039] 表1小鼠疾病活動指數(shù)（體質(zhì)量下降、糞便性狀、大便隱血/血便）評分標(biāo)準(zhǔn)
[0040]
【主權(quán)項】
1. 烏梅在制備防治腸癌藥物或保健品中的應(yīng)用。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的烏梅在制備防治腸癌藥物或保健品中的應(yīng)用，其特征在于， 所述的腸癌為腸道炎性息肉、腺瘤、粘膜增生和/或炎癥性腸病轉(zhuǎn)變成的結(jié)腸癌或直腸癌。
3. 烏梅提取物在制備腸癌藥物或保健品中中的應(yīng)用，所述的烏梅提取物由下列方法制 備得到： 取干燥的烏梅藥材，加藥材重量5~15倍體積量的水蒸煮1~3次，每次1-3小時，過 濾， 濾液合并，3000rpm離心15~30分鐘，分離上清液，60~70°C水浴濃濃縮至Ig藥材/ ml，或減壓干燥成干浸膏。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的烏梅提取物在制備防治腸癌藥物或保健品中的應(yīng)用，所述的 腸癌為腸道炎性息肉、腺瘤、粘膜增生和/或炎癥性腸病轉(zhuǎn)變成的結(jié)腸癌或直腸癌。
5. 根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的烏梅提取物在制備防治腸癌藥物或保健品中的應(yīng)用，其 特征在于，將烏梅提取物和藥學(xué)上或食品上可接受的載體制備成含片，顆粒劑，膠囊劑或口 服液制劑。
【專利摘要】本發(fā)明公開了烏梅及其提取物在防治腸癌中的新用途，本發(fā)明在烏梅現(xiàn)有功效的基礎(chǔ)上，通過大量實驗深入研究，采用AOM-DSS誘導(dǎo)的腸病癌變的小鼠模型，研究結(jié)果表明烏梅及其提取物能夠顯著改善腸病癌變過程中模型小鼠體重下降的狀況，顯著改善腸病癌變小鼠不斷進(jìn)展的體質(zhì)量下降、稀便及便血等癥狀；顯著降低腸病癌變小鼠結(jié)腸腫瘤發(fā)生率，具有很好的預(yù)防和控制腸癌的功效。
【IPC分類】A61P35-00, A61K36-736, A23L1-29
【公開號】CN104800321
【申請?zhí)枴緾N201510179383
【發(fā)明人】陳玉根, 王瓊, 楊柏霖, 曹園, 朱敏, 周錦勇, 朱萱萱
【申請人】江蘇省中醫(yī)院
【公開日】2015年7月29日
【申請日】2015年4月15日