一種微波提取玉竹中氨基酸的方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于生物技術領域,具體涉及一種微波提取玉竹中氨基酸的方法。
【背景技術】
[0002]玉竹,別名鈴鐺菜、尾參、地管子、甜草根,為百合科多年生草本植物。現代藥理學研宄結果表明,玉竹的根莖具有擴張冠脈、降血脂、降血糖、改善肝臟微循環、抗腫瘤、抗衰老和增強免疫力等作用,為滋養強壯劑。玉竹富含微量元素、維生素、氨基酸、留體皂苷、黃酮、生物堿、多糖等成分,而氨基酸作為蛋白質的基本組成單位,直接參與生物體內的新陳代謝和其他生理活動,在醫藥方面可用作營養劑、代謝改善劑、抗潰瘍、防幅射、抗菌、治癌、催眠、鎮痛以及為特殊病人配制人工合成膳食等,氨基酸在食品行業可用作調味劑,在農業中可用作無害農藥,增強植物抗菌能力,其易被微生物分解,無毒性、不污染環境。可見,氨基酸利用價值和經濟價值很高。
[0003]目前,常用提取氨基酸的方法有超聲提取、加熱回流提取、浸提法等等,提取溶劑一般為水、醇、醚等,這些方法提取率不高且提取物質的功能成分破壞,效果均不理想。微波提取是一種最新發展起來的新技術,不僅可以提高提取率,還可保護提取物質的功能成分,但微波功率、提取時間、提取劑的濃度、料液比等影響提取率的提取工藝條件沒有達到最優值,導致氨基酸的提取率沒有達到理想效果。
【發明內容】
[0004]針對現有技術的不足,本發明的目的是提供一種耗時短、提取率高、保護有效成分的微波提取玉竹中氨基酸的方法。
[0005]為了達到上述目的,本發明采取的技術方案是:
[0006]一種微波提取玉竹中氨基酸的方法,包括以下步驟:
[0007](I)制備粉末:用蒸餾水沖洗干凈玉竹,瀝干水后,烘干,然后切剪成小段,用粉碎機粉碎,過40目篩得到玉竹粉末備用;
[0008](2)微波提取:稱取玉竹粉末,以料液比為l:25g/ml加入濃度為20%?30%的乙醇提取劑,置于功率為400?600w、溫度為75°C的微波輻射萃取儀提取3次,每次提取時間為 23 ?28min ;
[0009](3)過濾定容:合并并過濾提取液,將濾液定容至50ml ;
[0010](4)離心:將定容后的濾液蒸發離心,取其上清液于4°C儲存,備用;
[0011](5)測定:以天冬酰胺藥品為對照品,采用茚三酮比色法對該游離氨基酸進行測定。
[0012]作為優選技術方案,為了使微波輻射萃取儀提取時間達到較優值,以利于提高提取率和保護提取物的功能成分,所述步驟(2)中微波輻射萃取儀每次提取時間為25min。
[0013]作為優選技術方案,為了使乙醇提取劑的濃度達到較優值,以利于提高提取率和保護提取物的功能成分,所述步驟(2)中加入濃度為25%的乙醇。
[0014]作為優選技術方案,為了使為了使微波輻射萃取儀功率達到較優值,以利于提高提取率和保護提取物的功能成分,所述步驟(2)中微波輻射萃取儀功率為500w。
[0015]本發明的有益效果:利用微波輔助提取玉竹中氨基酸的方法,耗時短;微波功率、提取時間、提取劑及其濃度、料液比等提取工藝條件均采取最優,提取率高且有效保護提取物的功能成分;且本發明的提取方法簡單、易于操作,適合工業化生產。
【具體實施方式】
[0016]下面結合具體實施例對本發明作進一步地說明。
[0017]實施例1
[0018]一種微波提取玉竹中氨基酸的方法,包括以下步驟:
[0019]1、制備粉末:用蒸餾水沖洗干凈玉竹,瀝干水后,烘干,然后切剪成小段,用粉碎機粉碎,過40目篩得到玉竹粉末備用。
[0020]2、微波提取:(I)精確稱取玉竹粉末0.1000g,加入濃度為20%的乙醇提取劑
2.5ml,置于設定功率為400w、溫度為75°C的微波輻射萃取儀提取3次,每次提取時間為23min ; (2)采用抽濾的方式過濾出提取液,將濾液定至50ml ; (3)將定容后的濾液離心,控制離心轉速為4500r/min,離心時間為15min,取其上清液于4°C儲存,備用;以上三個處理按順序重復二次。
[0021]3、標準溶液的制備:精密稱取0.0lOOg的的天冬酰胺標準物質,定容于10ml容量瓶中,此溶液質量濃度為0.lmg/mlo
[0022]4、標準曲線的制備:精密量取0.lmg/ml的天冬酰胺標準溶液0.5ml, 1.0ml,1.5ml,2.0ml,2.5ml,3.0ml,3.5ml分別置于25ml比色管中,各加水至10ml,再分別加入pH為8.04的磷酸鹽2ml和2%的茚三酮溶液2ml,搖勻,置于沸水中顯色15min,取出后立即用冷水冷卻至室溫,靜放5min,定容至25ml,搖勾,再放置15min,于566nm處測定各標準溶液的吸光度A,以試劑空白調零,以吸光度(A)為橫坐標,質量濃度(C)為縱坐標進行線性回歸。結果表明,天冬素在I?14yg/ml與吸光度呈良好的線性關系,可得回歸方程為C =0.4953A-0.0029,R2 = 0.9992。
[0023]5、游離氨基酸的測定:精密量取上述提取上清液5ml置于25ml比色管中,并加水至10ml,再加入pH為8.04的磷酸鹽2ml和2%的茚三酮溶液2ml,搖勻,置于沸水中顯色15min,取出后立即用冷水冷卻至室溫,靜放5min,定容至25ml,搖勾,再放置15min,于566nm處測定其的吸光度(A);將測定得到的吸光度值代入回歸方程,該方法下測得游離氨基酸的含量為24.06%。
[0024]實施例2
[0025]—種微波提取玉竹中氨基酸的方法,包括以下步驟:
[0026]1、制備粉末與實施例1相同。
[0027]2、微波提取:(I)精確稱取玉竹粉末0.1500g,加入濃度為20%的乙醇提取劑
3.75ml,置于設定功率為500w、溫度為75°C的微波輻射萃取儀提取3次,每次提取時間為25min ; (2)采用抽濾的方式過濾出提取液,將濾液定至50ml ; (3)將定容后的濾液離心,控制離心轉速為5000r/min,離心時間為20min,取其上清液于4°C儲存,備用;以上三個處理按順序重復三次。
[0028]3、標準溶液的制備與實施例1相同。
[0029]4、標準曲線的制備與實施例1相同。
[0030]5、游離氨基酸的測定與實施例1相同;將測定得到的吸光度值代入回歸方程,該方法下測得游離氨基酸的含量為24.15%。
[0031]實施例3
[0032]—種微波提取玉竹中氨基酸的方法,包括以下步驟:
[0033]1、制備粉末與實施例1相同。
[0034]2、微波提取:(I)精確稱取玉竹粉末0.2000g,加入濃度為20%的乙醇提取劑5.0ml,置于設定功率為600w、溫度為75°C的微波輻射萃取儀提取3次,每次提取時間為28min ; (2)采用抽濾的方式過濾出提取液,將濾液定至50ml ; (3)將定容后的濾液離心,控制離心轉速為4000r/min,離心時間為lOmin,取其上清液于4°C儲存,備用;以上三個處理按順序重復三次。
[0035]3、標準溶液的制備與實施例1相同。
[0036]4、標準曲線的制備與實施例1相同。
[0037]5、游離氨基酸的測定與實施例1相同;將測定得到的吸光度值代入回歸方程,該方法下測得游離氨基酸的含量為23.98%。
[0038]應當指出,以上案例僅是本發明有代表性的例子。顯然,本發明的技術方案并不限于上述實施例,還可以有許多變性。
【主權項】
1.一種微波提取玉竹中氨基酸的方法,其特征在于,包括以下步驟: (1)制備粉末:用蒸餾水沖洗干凈玉竹,瀝干水后,烘干,然后切剪成小段,用粉碎機粉碎,過40目篩得到玉竹粉末備用; (2)微波提取:稱取玉竹粉末,以料液比為l:25g/ml加入濃度為20%?30%的乙醇提取劑,置于功率為400?600w、溫度為75°C的微波輻射萃取儀提取3次,每次提取時間為23 ?28min ; (3)過濾定容:合并并過濾提取液,將濾液定容至50ml; (4)離心:將定容后的濾液蒸發離心,取其上清液于4°C儲存,備用; (5)測定:以天冬酰胺藥品為對照品,采用茚三酮比色法對該游離氨基酸進行測定。
2.根據權利要求1所述一種微波提取玉竹中氨基酸的方法,其特征在于:所述步驟(2)中微波輻射萃取儀每次提取時間為25min。
3.根據權利要求1所述一種微波提取玉竹中氨基酸的方法,其特征在于:所述步驟(2)中加入濃度為25%的乙醇。
4.根據權利要求1?3任意一項所述一種微波提取玉竹中氨基酸的方法,其特征在于:所述步驟(2)中微波輻射萃取儀功率為500w。
【專利摘要】本發明公開一種微波提取玉竹中氨基酸的方法,包括以下步驟:用蒸餾水沖洗干凈玉竹,瀝干水后,烘干,切剪成小段后粉碎,過40目篩,以料液比為1:25g/ml向粉末加入濃度為20%~30%的乙醇提取劑,置于功率為400~600w、溫度為75℃的微波輻射萃取儀提取3次,每次提取時間為23~28min;合并并過濾提取液,定容后蒸發離心,取其上清液于4℃儲存,測定氨基酸含量。利用微波輔助提取,耗時短;采取最優的提取工藝條件,提取率高且有效保護提取物的功能成分;且本發明的提取方法簡單、易于操作,適合工業化生產。
【IPC分類】A01P3-00, A23L1-227, A01P1-00, A61K36-8969, A01N65-42
【公開號】CN104740296
【申請號】CN201510091130
【發明人】周可幸
【申請人】周可幸
【公開日】2015年7月1日
【申請日】2015年2月28日