五味子在抑制ras原癌基因過表達中的應用
【技術領域】
[0001] 本發明具體涉及五味子在抑制ras原癌基因過表達中的應用，屬于中藥領域。
【背景技術】
[0002] 五味子ScAisaWra 是落葉木質藤本，性溫,味甘，微酸，具有收斂固潘， 益氣生津，補腎寧心等功效，是常用中藥之一。五味子具有廣泛的藥理作用，例如強心，抗肝 損傷，鎮靜安定，抗腫瘤，免疫調節等作用。
[0003] 約30%的人類腫瘤是由于ras原癌基因突變后過度激活導致Ras蛋白表達水平 增高造成的。若Ras蛋白持續處于活化狀態，可與下游的效應蛋白結合，將信號傳遞到下 游信號元件，引起細胞的異常增殖，導致腫瘤的發生。研究表明約90%胰腺癌、50%結腸癌、 30%-40%肺腺癌及5%-40%的白血病是由于ras基因的過度激活造成的。
[0004] 因此，以Ras蛋白和Ras蛋白所調控的信號通路為靶標的腫瘤治療在治療由ras 原癌基因突變所導致的腫瘤中具有非常重要的價值，Ras已成為公認的篩選抗相關惡性腫 瘤藥物的靶標。如2005年12月20日美國FDA批準的晚期腎細胞癌治療藥物Nexavar， 其直接靶標就Ras信號途徑，可抑制Raf/MEK /ERK信號傳導通路，直接抑制腫瘤生長。
[0005] 迄今為止，沒有文獻報道過五味子能夠抑制ras原癌基因的過表達，市場上也沒 有以五味子為原料的藥物，能夠專性抑制由ras原癌基因過表達導致的腫瘤。
【發明內容】
[0006] 本發明的目的是提供一種五味子的新用途，特別是五味子在抑制ras原癌基因過 表達中的應用。
[0007] 另一個目的是提供一種五味子在制備抗腫瘤藥物中的新用途，其所述的腫瘤是由 ras原癌基因過表達導致的。
[0008] 由于ras信號通路從線蟲到人高度保守，在秀麗隱桿線蟲中let-60基因編碼保守 的Ras蛋白，它與人類的Ras蛋白相比具有83%的同源性。如果ras突變，在秀麗隱桿線蟲 中會引起線蟲產生多陰門，在人類中則是引起細胞的惡性增殖，導致腫瘤的發生。因此，模 式生物秀麗隱桿線蟲) Ras/MAPK信號通路過度激活型突變體被 作為受試群體廣泛應用于篩選抑制ras原癌基因通路過度激活的抗腫瘤藥物。因此，本實 驗采用了一株秀麗隱桿線蟲突變株作為評估抑制ras原癌基因通路過度激活藥物的模型， 并得出了五味子對ras原癌基因過表達有明顯下調作用、具有抑制ras原癌基因通路過度 激活的結論。
[0009] 本發明的有益效果在于：本發明提供了一種五味子的新用途，拓寬了五味子的用 藥范圍；五味子對ras原癌基因過表達有明顯下調作用，可以專性抑制ras原癌基因的過 表達，而不是直接抑制細胞的增殖分化，即五味子起作用是ras通路機制依賴地，而非廣泛 的細胞毒作用；且五味子無細胞毒性，僅僅作用于過度激活表達的Ras蛋白，不作用于野生 型的Ras蛋白。今后我們有望將五味子應用在抗腫瘤藥物的制備中，其中，所述腫瘤是由 ras原癌基因的過表達導致的，從而為此類腫瘤患者提供更好的治療，為一些疑難癌癥的治 療提供新的途徑。
[0010] 以下提供具體實施例以實現本發明所述的五味子在制備由ras原癌基因過度表 達所致的抗腫瘤藥物中的應用，但不限于這些實施例。
【具體實施方式】
[0011] 實施例一五味子藥液的制備 五味子來源：購自蘭州黃河藥市。
[0012] 稱取五味子9g ;先用蒸餾水浸泡20分鐘，然后文火煮沸，煎煮30min，定容，離心， 棄去沉淀，將上清無菌過濾，置4°C冰箱待用，使用時稀釋不同的濃度。
[0013] 實施例一五味子藥液對秀麗隱桿線蟲MT2124 (let-60過度激活突變）的作用 Ras是一種小分子蛋白，參與調控動物發育過程中的很多重要環節。ras信號通路 從線蟲到人高度保守，在秀麗隱桿線蟲中let-60基因編碼保守的Ras蛋白，它與人類的 Ras蛋白相比具有83%的同源性。如果ras突變，在秀麗隱桿線蟲中會引起線蟲產生多陰 門，在人類中則是引起細胞的惡性增殖，導致腫瘤的發生。因此，模式生物秀麗隱桿線蟲 (CaeflorAaM/iis e/egafls) Ras/MAPK信號通路過度激活型突變體被作為腫瘤模型廣泛應 用于篩選抑制原癌基因 ras通路過度激活的抗腫瘤藥物。
[0014] MT2124是let-60/ras過度激活的秀麗隱桿線蟲，會產生多陰門的表型。將藥液稀 釋一定的濃度，作用于秀麗隱桿線蟲MT2124,如果能夠抑制受試線蟲群體多陰門產生個體 的比例，而只有一個真陰門的野生型線蟲個體比例上升，則說明藥物作用于ras通路，下調 了該通路的過度激活，具有抗腫瘤活性。群體中野生型線蟲的比例越高，則藥物作用效果越 顯著。如以突變體比例表示則相反，其中，野生型比例（％) =1〇〇%_突變體比例（％) 實驗材料：秀麗隱桿線蟲MT2124,基因型：let-60(nl046) IV，購自CGC (Caenorhabditis Genetics Center);大腸桿菌0P50 (尿啼陡滲漏突變株)，作為秀麗隱桿 線蟲的食物，購自 CGC (Caenorhabditis Genetics Center)。
[0015] 試劑制備： LNGM板的制備
【主權項】
1. 五味子在抑制ras原癌基因過表達中的應用。
2. 五味子在制備抗腫瘤藥物中的應用，所述的腫瘤是由ras原癌基因過表達導致的。
【專利摘要】本發明涉及五味子在抑制ras原癌基因過表達中的應用，具體講的是五味子在制備抑制ras原癌基因過表達的抗腫瘤藥物中的應用。研究表明約90%胰腺癌、50%結腸癌、30%-40%肺腺癌及5%-40%的白血病是由于ras原癌基因過表達造成的，Ras蛋白已成為公認的篩選抗相關惡性腫瘤藥物的靶標。動物實驗表明五味子可特異性下調ras原癌基因突變后所致的過表達，而不作用于野生型ras原癌基因，因此毒性低。本發明提供了一種五味子的新用途，可在制備抗腫瘤（由ras原癌基因過表達所致腫瘤）藥物中應用。
【IPC分類】A61K36-79, A61K36-57, A61P35-00
【公開號】CN104706730
【申請號】CN201310688566
【發明人】李紅玉, 李孟惠, 萬鳳奇, 支德娟, 李洋, 黃堅, 張占欣, 陳曉雨, 李瑩輝
【申請人】蘭州大學
【公開日】2015年6月17日
【申請日】2013年12月17日