一種沒藥葉細胞提取物的提取方法及其應用
【技術領域】
[0001] 本發明屬于生物美容領域，具體涉及沒藥葉細胞提取物的提取方法及其在護膚品 中的應用。
【背景技術】
[0002] 沒藥又名末藥、明沒藥、沒藥、末藥、制沒藥、炙沒藥、醋炒沒藥、生沒藥、生明沒藥 等別稱。為橄欖科植物地丁樹或哈地丁樹的干燥樹脂，主產于非洲索馬里、埃塞俄比亞以及 印度等地。采集由樹皮裂縫處滲出的白色油膠樹脂，于空氣中變成紅棕色而堅硬的圓塊。打 碎后，炒至焦黑色應用。主治胸腹瘀痛、痛經、經閉、癥瘕、跌打損傷、癰腫瘡瘍、腸癰、目赤腫 痛。有活血止痛、消腫生肌等功效。在東方是一種活血、化瘀、止痛、健胃的中藥，來自產地 古代阿拉伯及東非一帶。《北史》中即有記載，說是來自西域漕國。在西方，沒藥是一種據說 有神奇療效的藥物。希伯來人將沒藥樹枝制作成各種芳香劑、防腐劑和止痛劑。舊約時期， 常被做成油膏，涂抹在傷口，促進傷口愈合。
[0003] 沒藥中富含黃酮類化合物。植物黃酮具有消除氧化自由基，抗氧化，抗菌，抗病毒 等作用。關于沒藥葉總黃酮的提取工藝目前暫未見報道，提取沒藥葉中黃酮類化合物應用 于化妝品中也是最新的嘗試。
[0004] 目前暫無關于對沒藥葉提取類黃酮化合物的方案，但有以下方法可以提取植物的 黃酮物質：醇提法、超聲波提取法、微波萃取法。其中，醇提法是指利用乙醇的溶解性，將乙 醇作為溶劑對物質進行分離提純的方法；然而本方法提取出來的黃酮得率低、消耗有機溶 劑量大而且分離難度高，操作步驟多；超聲波提取法是采用超聲波輔助溶劑進行提取，聲波 產生高速、強烈的空化效應和攪拌作用，破壞植物藥材的細胞，使溶劑滲透到藥材細胞中， 縮短提取時間，提高提取率，但不易于在工業中廣泛生產。微波萃取是利用電磁場的作用使 固體或半固體物質中的某些有機物成分與基體有效的分離，并能保持分析對象的原本化合 物狀態的一種分離方法。
【發明內容】
[0005] 本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供了一種更為簡單的提取沒藥葉細胞 提取物的方法及將所述沒藥葉細胞與透明質酸等應用于化妝品中，具有抗衰老和清除自由 基等功效。
[0006] 本發明的目的通過以下技術方案來實現：
[0007] -種沒藥葉細胞提取物的提取方法，包括如下步驟：
[0008] (1)沒藥葉預處理：沒藥葉烘干并粉碎；
[0009] (2)酶解：將沒藥葉、纖維素酶、吐溫-80和水混合均勾，在溫度為（40-70) °C和真 空度為（_〇. 4) -（-0. 8)MPa下反應50-110min ;所述沒藥葉在水中的含量為l-150g/L，纖 維素酶在水中的含量為〇. l-l〇g/L，吐溫-80在水中的含量為0. 4g-50g/L ;
[0010] (3)過濾與濃縮：將步驟（2)獲得的浸提液進行過濾，將浸提液濃縮為濃縮前體積 的三分之一以上，得到濃縮液；
[0011] (4)提取：采用微波法在微波輸出功率為200-500W，頻率為3000MHz條件下對濃 縮液進行提取，對提取液過濾并烘干濾渣，磨成粉末得到沒藥葉細胞提取物。
[0012] 優選的，步驟（1)中沒藥葉粉碎后過40-60目篩。
[0013] 優選的，步驟（2)中所述沒藥葉在水中的含量為10_140g/L，纖維素酶在水中的含 量為2-8g/L，吐溫-80在水中的含量為2g-40g/L。
[0014] 優選的，步驟（2)中酶解反應在55°C下反應95min
[0015] 優選的，沒藥葉細胞提取物為黃酮。
[0016] 本發明還提供了一種包含本發明提供的方法提取的沒藥葉細胞提取物的護膚品， 其原料包括如下組分：
[0017] 丙二醇：1-10 份；
[0018] 沒藥葉細胞提取物：0. 01-5份；
[0019] 透明質酸：0· 01-3份；
[0020] POE 油醇醚：0· 5-1. 5 份；
[0021] 尼泊金酯：0· 01-0. 5 份；
[0022] 維生素 B :0· 001-0. 1 份；
[0023] 維生素 E :0· 001-0. 1 份；
[0024] 羧甲基纖維素：0. 5-5份
[0025] 剩余為水，總量為100份。
[0026] 優選的，按重量份計包括如下組分：
[0027] 丙二醇：3-8 份；
[0028] 沒藥葉細胞提取物：0· 05-4份；
[0029] 透明質酸：0· 02-2. 5 份；
[0030] POE 油醇醚：0· 2-1. 2 份；
[0031] 尼泊金酯：0· 04-0. 45 份；
[0032] 維生素 B :0· 002-0. 08 份；
[0033] 維生素 E :0· 002-0. 08 份；
[0034] 羧甲基纖維素：1-4. 5份
[0035] 剩余為水，總量為100份。
[0036] 優選的，所述護膚品為面膜、爽膚水、面霜、乳液、眼箱、洗面乳。
[0037] 有益效果
[0038] 1、簡化工藝且操作簡便：本發明采用纖維素酶和沒藥反應，過濾且采用乙醇進行 提取的新工藝相對于超聲波提取法和微波萃取法提取工藝操作簡便；且本發明只有在提 取時使用乙醇，且本發明中的乙醇溶液可循環使用，相較于其他方法而言，消耗的有機溶劑 少。
[0039] 2、將沒藥葉提取物應用于抗衰老護膚品中，從而達到美容效果。
[0040] 3、本發明包含沒藥葉提取物的護膚品不僅具有保濕、美白、光滑皮膚的功效，而且 還具有抗衰老，去皺的功效。
[0041] 4、本發明提取率高、節能、省時。與傳統酶法比較，本發明提取率高出0. 5% ;由于 整個提取工藝無需使用太多設備設施，主要是沒藥葉與纖維素酶反應相較于其他工藝具有 明顯節能的優點；此外，整個提取工藝只需2. 5個小時，比傳統酶法提取提高了 2-2. 5個小 時。
【具體實施方式】
[0042] 為了使本發明的目的、技術方案及優點更加清楚明白，以下結合實施例，對本發明 進行進一步詳細說明。
[0043] 實施例1
[0044] ①沒藥的預處理：沒藥葉子洗凈，自然陰干，50°C恒溫烘干，粉碎過60目篩；
[0045] ②混合：稱取沒藥葉10g，放入三角瓶中，加入0· 4g吐溫-80和0· Ig纖維素酶和 水，混合溶液共1L，混合均勻攪拌，使沒藥葉與吐溫-80和纖維素酶充分混合；
[0046] ③酶解：將裝有沒藥葉粉末，吐溫-80,纖維素酶的三角瓶放在水浴鍋內，水浴溫 度為70°C，真空度為_0.8MPa酶解反應IlOmin ;
[0047] ④過濾：酶解反應結束后進行減壓過濾，將固液混合物轉移到濾紙上，打開抽氣泵 開始抽濾；
[0048] ⑤浸提液濃縮：進過過濾后，使用旋轉薄膜濃縮這個方法，通過反復濃縮，將浸提 液濃縮為原來的30% ;
[0049] ⑥提取在微波提取裝置的輸出功率為200,頻率為3000MHz對濃縮液進行提取和 過濾，對過濾后得到的濾渣烘干，并磨成粉末得到沒藥葉細胞提取物。
[0050] ⑦將黃酮粉末稱取10g，加入燒杯中，加入50ml的水混合均勻，移至100mL容量瓶 中，定容。
[0051] ⑧測定黃酮濃度；參照《中國藥典2010版》記載的花黃酮類物質含量測定方法為
[2]繪制蘆丁的標準曲線；以蘆丁為對照物，采用硝酸鋁顯色法在510nm處測定不同質量濃 度P (mg/ml)的蘆丁吸光度，繪制蘆丁標準曲線，總黃酮得率的計算各提取工藝下測得吸光 度，代入蘆丁標準曲線方程計算出測定液的質量濃度，以下是沒藥葉總黃酮的得率計算公 式：
[0052]
[0053]
【主權項】
1. 一種沒藥葉細胞提取物的提取方法，其特征在于，包括如下步驟： (1) 沒藥葉預處理：沒藥葉烘干并粉碎； (2) 酶解：將沒藥葉、纖維素酶、吐溫-80和水混合均勻，在溫度為（40-70) °C和真空度 為（-0. 4) - (-0. 8) MPa下反應50-1 IOmin ;所述沒藥葉在水中的含量為l-150g/L，纖維素酶 在水中的含量為〇. l-l〇g/L，吐溫-80在水中的含量為0. 4g-50g/L ; (3) 過濾與濃縮：將步驟（2)獲得的浸提液進行過濾，將浸提液濃縮為濃縮前體積的三 分之一以上，得到濃縮液； (4) 提取：采用微波法在微波輸出功率為200-500W，頻率為3000MHz條件下對濃縮液 進行提取，對提取液過濾并烘干濾渣，磨成粉末得到沒藥葉細胞提取物。
2. 根據權利要求1所述的一種沒藥葉細胞提取物的提取方法，其特征在于，步驟（1)中 沒藥葉粉碎后過40-60目篩。
3. 根據權利要求1所述的一種沒藥葉細胞提取物的提取方法，其特征在于，步驟（2)中 所述沒藥葉在水中的含量為10_140g/L，纖維素酶在水中的含量為2-8g/L，吐溫-80在水中 的含量為2g-40g/L。
4. 根據權利要求1所述的一種沒藥葉細胞提取物的提取方法，其特征在于，步驟（2)中 酶解反應在55°C下反應95min
5. 根據權利要求1所述的一種沒藥葉細胞提取物的提取方法，其特征在于，沒藥葉細 胞提取物為黃酮。
6. -種包含權利要求1所述的方法提取的沒藥葉細胞提取物的護膚品，其特征在于， 其原料包括如下組分： 丙二醇：1-10份； 沒藥葉細胞提取物：〇. 01-5份； 透明質酸：〇. 01-3份； POE油醇醚：0· 5-1. 5份； 尼泊金酯：0.01-0. 5份； 維生素 B :0.001-0. 1份； 維生素 E :0.001-0. 1份； 羧甲基纖維素：0.5-5份； 剩余為水，總量為100份。
7. 根據權利要求6所述的護膚品，其特征在于，按重量份計，包括如下組分： 丙二醇：3-8份； 沒藥葉細胞提取物：〇. 05-4份； 透明質酸：0.02-2. 5份； POE油醇醚：0· 2-1. 2份； 尼泊金酯：〇. 04-0. 45份； 維生素 B :0. 002-0. 08 份； 維生素 E :0. 002-0. 08 份； 羧甲基纖維素：1-4. 5份； 剩余為水，總量為100份。
8.根據權利要求6-7任一項所述的護膚品，其特征在于，所述護膚品為面膜、爽膚水、 面霜、乳液、眼箱、洗面乳。
【專利摘要】本發明公開了一種沒藥葉細胞提取物的提取方法及其應用，提取方法包括如下步驟：(1)沒藥葉烘干并粉碎；(2)酶解：將沒藥葉、纖維素酶、吐溫-80和水混合均勻，在溫度為(40-70)℃和真空度為(-0.4)—(-0.8)MPa下反應50-110min；(3)獲得的混合物進行過濾和濃縮；(4)提取：采用微波法在微波輸出功率為200-500W,頻率為3000MHz條件下對濃縮液進行提取，過濾提取液并對濾渣烘干，磨成粉末得到沒藥葉細胞提取物。本發明提取的沒藥葉細胞提取物與透明質酸等組成的抗衰老護膚品具有抗衰老、清除自由基等功效。
【IPC分類】A61Q19-02, A61Q19-08, A61Q19-00, A61K8-97, A61Q19-10
【公開號】CN104706553
【申請號】CN201510072717
【發明人】陳海佳, 王一飛, 葛嘯虎, 黎敏聰, 池詩源
【申請人】廣州賽萊拉干細胞科技股份有限公司
【公開日】2015年6月17日
【申請日】2015年2月11日