八寶丹在制備預防或治療腦缺血及其并發癥藥物中的用圖
【技術領域】
[0001] 本發明屬于醫藥領域，尤其涉及八寶丹在制備預防或治療腦缺血及其并發癥藥物 中的用途。
【背景技術】
[0002] 腦缺血在醫學上稱為中風，是指中斷或減少供養腦部的動脈中的血流。近年研究 表明，腦缺血不僅出現神經細胞壞死.同時發生遲發性神經元死亡，而遲發性或選擇性細 胞死亡主要是通過細胞凋亡實現的，全腦或局部腦梗死均能激活細胞凋亡過程。腦缺血是 危害人類生命與健康的多發病，具有發病率高、致殘率高、病死率高和復發率高的特點。目 前對治療腦缺血的藥物的機理研究主要集中在與細胞凋亡關系密切的幾個重要因素，如氧 自由基、一氧化氮、興奮性氨基酸毒性、鈣超載因素、轉錄信號的激活、缺血后基因表達的影 響，但是目前尚未研究出有效的藥物，因此，尋找新型有效的腦缺血治療藥物是目前的研究 執占。
[0003] 八寶丹是由牛黃、蛇膽、羚羊角、珍珠、三七、麝香等制成的制劑，具有消炎、清涼解 毒、消腫止痛用于濕熱蘊結所致發熱，黃疸，小便黃赤，惡心嘔吐，納呆，脅痛腹脹，舌苔黃膩 或厚膩干白，或濕熱下注所致尿道灼熱刺痛、小腹脹痛，以及傳染性病毒性肝炎、急性膽囊 炎、急性泌尿系感染等治療作用，主治功能為清熱解毒，涼血化瘀，消腫止痛。用于熱毒血瘀 所致急慢性病毒性肝炎，癰疽疔瘡，無名腫毒，跌打損傷及各種炎癥。經過藥理研究表明， 八寶丹具有消炎、清涼解毒、消腫止痛等作用，對急性肝炎、眼炎、耳炎及一切炎癥引起的疼 痛、發熱等癥，都有很好療效；此外，對消化系統癌細胞有明顯的抑制作用。目前，八寶丹腦 缺血、由于腦缺血引起的腦梗塞、由于腦缺血引起的記憶功能受損等方面還未見相關報道。
【發明內容】
[0004] 為了解決現有技術治療腦缺血及其并發癥尚無有效的藥物的缺陷，本發明目的在 于公開八寶丹在制備預防或治療腦缺血及其并發癥藥物中的用途以解決上述的問題。
[0005] 八寶丹具有消炎、清涼解毒、消腫止痛等作用，對急性肝炎、眼炎、耳炎及一切炎癥 引起的疼痛、發熱等癥都有很好療效；此外，對消化系統癌細胞有明顯的抑制作用。本發明 公開了八寶丹在制備預防或治療腦缺血及其并發癥藥物中的用途，所述的并發癥為腦缺血 引起的腦梗塞和腦缺血引起的記憶功能受損，八寶丹主要是通過降低大腦海馬中的一氧化 氮和一氧化氮合酶的過氧化物含量，保護大腦海馬神經元，達到預防或治療腦缺血的作用， 八寶丹通過降低血清MDA含量，減少自由基對大腦的損傷，從而減少腦埂塞的面積，達到預 防或治療腦缺血引起的腦梗塞的作用，同時經過藥效實現進行了證實，八寶丹具有保護腦 缺血引起的記憶功能受損的作用。八寶丹為口服制劑，其人用給藥量1 mg/kg*d -500 mg/ kg ? d，優選的人用給藥量為10mg/kg ? d-400 mg/kg ? d。本發明八寶丹在制備預防和治療 腦缺血、腦缺血引起的腦梗塞、腦缺血引起的記憶功能受損中治療效果顯著，無副作用，具 有顯著的臨床推廣價值。
[0006] 相對于現有技術，本發明的優點在于：本發明的八寶丹在制備預防和治療腦缺血、 腦缺血引起的腦梗塞、腦缺血引起的記憶功能受損中治療效果顯著，無副作用，有效地減輕 患者的痛苦，具有顯著的臨床推廣價值。 具體實施例
[0007] 實施例1、八寶丹對腦缺血模型大鼠海馬一氧化氮和一氧化氮合酶的影響 本試驗采用尼莫地平作為陽性對照藥物，它是一種Ca2+通道阻滯劑，通過有效地阻止 Ca2+進入細胞內、抑制平滑肌收縮，達到解除血管痙攣之目的。動物實驗證明，尼莫地平對 腦動脈的作用遠較全身其他部位動脈的作用強許多，并且由于它具有很高的脂溶性特點， 易透過血腦屏障。此外，可選擇性地作用于腦血管平滑肌，擴張腦血管，增加腦血流量，明顯 減少血管痙攣引起的缺血性腦損傷。
[0008] 1、材料與方法 1.1動物分組 SPF級健康雄性SD大鼠72只，體重280~320 g，由廣東省醫學實驗動物中心提提供。 造模6周后，SD大鼠隨機分為6組，正常對照組、模型組、尼莫地平組、八寶丹一組、八寶丹 二組和八寶丹三組，每組12只。造模后第7周正常對照組和模型組SD大鼠分別給予等體 積的溶媒灌胃，尼莫地平組SD大鼠給予lOmgAkg ?(!)，八寶丹一組SD大鼠給藥劑量50mg/ (kg*d)(按照八寶丹粉的量計），八寶丹二組SD大鼠給藥劑量75 mgAkg*d)(按照八寶 丹粉的量計），八寶丹三組SD大鼠給藥劑量為lOOmgAkg ?(!)(按照八寶丹粉的量計），連 續給藥3周。
[0009] 1. 2試劑和儀器 八寶丹采用廈門中藥廠生產的八寶丹膠囊（國藥準字Z10940006); 尼莫地平：購自江蘇康緣藥業股份有限公司； NO、N0S試劑盒：購自南京建成生物工程研究所； 一抗nNOS、iNOS、eNOS和t3肌動蛋白抗體：北京博奧森生物技術有限公司；羊抗兔 Ig-G :北京鼎國生物技術有限公司。
[0010] DYCZ-24D型垂直板電泳槽，北京六一儀器廠； JS-250電泳儀，上海培清科技有限公司； TS-2000A脫色搖床，江蘇其林貝爾儀器制造有限公司； MDF - U333 低溫冰箱，SANYO ;Precisa XS125 電子天平； UV2550分光光度計，日本島津。
[0011] 1. 3腦缺血SD大鼠模型的制備 SD大鼠術前禁食12 h、禁水4 h，用10%水合氯醛（0. 30 ml/100 g)腹腔注射麻醉，仰 臥固定于木制手術臺上。頸前部備皮，酒精、碘酒消毒后，沿腹側頸正中切開，依次鈍性分離 皮下脂肪、胸骨舌骨肌和胸鎖乳頭肌，再分別分離暴露左、右側頸總動脈及氣管，于近心端 和遠心端雙重結扎后從中間剪斷，然后逐層縫合肌肉、皮膚。正常對照組SD大鼠同法行頸 前皮膚切開，分離皮下脂肪。
[0012] 1. 4 N0含量和N0S活性的測定 造模后第10周，各組SD大鼠斷頭取腦，去除嗅球、小腦，取出大腦海馬稱重，加入9倍 冷生理鹽水，電動勻楽機研磨，制成10%勻楽液，3000 r/min，離心10 min,取上清液，按試 劑盒說明書測定NO含量和NOS活性。
[0013] 各組SD大鼠新鮮腦組織海馬抽提蛋白后取等量的蛋白進行十二烷基硫酸鈉聚丙 烯酰胺凝膠電泳分離，電轉移至硝酸纖維素膜，室溫封閉30 min，nNOS、iNOS、eNOS和t3肌 動蛋白一抗500倍稀釋于封閉液中，4°C反應過夜后室溫孵育2 h。充分漂洗后辣根過氧化 物酶標記的二抗羊抗兔IgG 1500倍稀釋于封閉液中，室溫孵育1 h。將膜置于DAB顯色液 中，顯影、定影、曝光。利用Quantity one軟件分析條帶的灰度值。
[0014] 1.5統計學方法 采用SPSS 12.0統計軟件，數據以x±s表示，組問比較采用方差分析，方差齊者采用 LSD檢驗，方差不齊者采用Tamhane' S檢驗，P〈0. 05為差異有統計學意義。
[0015] 2 結果 2. 1各組SD大鼠海馬N0含量和N0S活性的比較 如表1所示，與正常對照組比較，模型組SD大鼠海馬N0含量和N0S活性明顯升高 (P〈0. 01);與模型組比較，尼莫地平組和八寶丹各劑量組SD大鼠海馬N0含量和N0S活性 明顯降低（P〈〇. 05);與陽性對照藥尼莫地平相比，八寶丹各劑量組SD大鼠海馬N0含量和 N0S活性均顯著降低（P〈0. 05)，其中八寶丹二組與尼莫地平治療組相比具有極顯著差異 (P〈0. 01)。
[0016] 表1各給藥組SD大鼠海馬NO含量和N0S活性比較
【主權項】
1. 八寶丹在制備預防或治療腦缺血及其并發癥藥物中的用途。
2. 如權利要求1所述的用途，其特征在于，所述的并發癥為腦缺血引起的腦梗塞。
3. 如權利要求1所述的用途，其特征在于，所述的并發癥為腦缺血引起的記憶功能受 損。
4. 如權利要求1所述的用途，其特征在于，八寶丹為口服制劑，其人用給藥量I mg/ kg · d -500 mg/kg · d〇
5. 如權利要求4所述的用途，其特征在于，八寶丹為口服制劑，其人用給藥量為IOmg/ kg · d-400mg/kg · d〇
【專利摘要】本發明屬于醫藥領域，尤其涉及八寶丹在制備預防或治療腦缺血及其并發癥藥物中的用途，所述的腦缺血的并發癥為腦缺血引起的腦梗塞、腦缺血引起的記憶功能受損。八寶丹主要是通過降低大腦海馬中的一氧化氮和一氧化氮合酶的過氧化物含量，保護大腦海馬的神經元，達到治療腦缺血的作用，通過降低血清MDA含量，減少自由基對大腦的損傷，從而減少腦埂塞的面積，達到治療腦缺血引起的腦梗塞的效果，通過藥效實驗發現，八寶丹也具有保護腦缺血引起的記憶功能受損的作用。本發明的八寶丹在制備預防或治療腦缺血、腦缺血引起的腦梗塞、腦缺血引起的記憶功能受損中治療效果顯著，無副作用，具有顯著的臨床推廣價值。
【IPC分類】A61P25-28, A61K35-413, A61K36-258, A61P9-10, A61K35-55, A61K35-618, A61P25-00, A61K35-32, A61K35-583
【公開號】CN104622931
【申請號】CN201510019151
【發明人】孫喜翠
【申請人】孫喜翠
【公開日】2015年5月20日
【申請日】2015年1月15日