一種柞樹葉提取物及其制備方法及應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種柞樹葉提取物其制備方法及應用，屬于提取工藝領域。
【背景技術】
[0002] 柞樹（Querus mongolica Fisch)為殼斗科（Fagaceae)櫟屬（Quercus)落葉喬木， 有蒙古櫟、遼東櫟、麻櫟、槲樹等種類，葉緣有鋸齒，少有全緣。雄花柔荑花序下垂，雌花單生 于總苞內。堅果單生，果皮內壁無毛，不發育的胚珠位于種子基部之外側。樹干奇特蒼勁，樹 形優美多姿，枝繁葉茂，耐修剪、易造型，經拉片造型后冠如華蓋，千姿百態，神韻獨具，是風 景園林、庭院別墅區造型景觀精品樹種。全世界約有300余種，中國有60余種，柞林面積約 有1億多畝。具有耐寒、耐旱能力強，適應能力強等特點，我國主要分布在東北和華北地區， 其中遼寧省柞樹林有182萬公頃，占林地面積的14. 7%，資源極為豐富。研宄發現，柞樹葉 除含有豐富的蛋白質、多糖、粗纖維、多種礦物質元素外，還含有單寧、黃酮類等一些生物活 性物質。一直以來柞樹葉主要作為柞蠶飼料被人們熟知，但實際上，很早以前就被應用于食 品、藥品或易于降解的食品包裝材料。如遼寧、吉林、黑龍江、山東等地民間有傳統著名小吃 "波羅葉餅子"（柞樹葉餅子），近幾年柞樹葉已出口日本用于制作年糕，深受日本人歡迎，每 片葉子收購價達〇. 6?0. 7元錢。但利用柞樹葉提取抑菌活性成分并用于食品防腐、外用治 療皮膚、粘膜由細菌引起的感染性疾病及果蔬保鮮防腐、化妝品外用消炎等方面未見報道。
【發明內容】
[0003] 本發明通過對柞樹葉中高效抑菌活性成分的提取，使本發明制備的柞樹葉提取物 可以應用于制藥、衛生材料、化妝用品、洗滌用品、果蔬保鮮及食品防腐等領域。
[0004] 本發明提供了一種柞樹葉提取物的制備方法，所述制備方法包括如下步驟：
[0005] ①將柞樹葉浸取，得到浸取液，濃縮浸取液；
[0006] ②將步驟①所得產品利用超濾得到分子量為500?5000Dr的柞樹葉提取物。
[0007] 本發明所述柞樹葉優選為來源于麻櫟、遼東櫟、蒙古櫟、槲樹或銳齒槲櫟。
[0008] 本發明所述柞樹葉浸取前優選為清洗、22?30°C陰干、粉碎至小于40目。
[0009] 本發明所述浸取優選為將柞樹葉與浸取劑按料液比為I : 10?20g/mL，20?25°C 浸取4?12h，浸取1?3次，過濾，離心。
[0010] 本發明所述浸取劑優選為水或65?95%乙醇。
[0011] 本發明所述65?95%乙醇優選為65?95% (V/V)乙醇水溶液。
[0012] 本發明所述濃縮優選為當浸取劑為水時將浸取液55?65°C回流濃縮至浸取液體 積的5?15%;或當浸取劑為65?95%乙醇時將浸取液55?65°C回流濃縮至浸取液體積 的5?15%，得到第一次濃縮液，向第一次濃縮液中加入其5?10倍體積的水，55?65°C 回流濃縮至第一次濃縮液的體積。
[0013] 本發明所述超濾優選為先將步驟①所得產品利用截留分子量在5000Dr以下物 質的超濾裝置內，〇. 05?0. 08MPa過濾，收取分子量在5000Dr以下的物質，再將分子量在 5000Dr以下的物質利用截留分子量在500Dr以上物質的超濾裝置內，0. 05?0. 08MPa過 濾，收取分子量在500Dr以上的物質。
[0014] 本發明另一方面的目的在于提供上述本發明所述制備方法得到的柞樹葉提取物。
[0015] 本發明所述柞樹葉提取物主要成分為單寧、黃酮、多糖和葉蛋白類等活性物質。
[0016] 本發明又一方面的目的在于提供上述本發明所述柞樹葉提取物在抑菌上的應用。
[0017] 本發明有益效果為：
[0018] ①本發明有利于提高柞樹資源的利用率；
[0019] ②本發明浸取劑為水或65?95%乙醇，有利于降低成本，避免溶劑殘留，又可重 復利用溶劑；
[0020] ③本發明利用超濾得到分子量為500?5000Dr的柞樹葉提取物，制備方法簡單易 行，設備投入少，易于工業化生產；
[0021] ④本發明制備的柞樹葉提取物具有廣譜抑菌作用；
[0022] ⑤將本發明制備的柞樹葉提取物加入到化妝品中，對化妝品中的易滋生菌有顯著 的抑制和殺滅作用，可延長化妝品的保質期；將本發明制備的柞樹葉提取物加入到食品中， 可作為食品防腐劑使用；本發明制備的柞樹葉提取物可作為外用抑菌劑治療皮膚、粘膜等 由細菌引起的感染性疾病；將果蔬浸泡在本發明制備的柞樹葉提取物中可作為保鮮防腐劑 使用。
【具體實施方式】
[0023] 下述非限制性實施例可以使本領域的普通技術人員更全面地理解本發明，但不以 任何方式限制本發明。
[0024] 實施例1
[0025] -種麻櫟柞樹葉提取物的制備方法，所述制備方法包括如下步驟：
[0026] ①將柞樹葉清洗、25°C陰干、粉碎至40目后與去離子水按料液比為lg/15mL，20°C 浸取12h，浸取3次，合并，過濾，3000rpm離心lOmin，得到浸取液，將浸取液65°C水浴回流 濃縮至浸取液體積的6. 67 %，得到lg/mL濃縮液；
[0027] ②將步驟①所得lg/mL濃縮液用去離子水稀釋成lg/10mL，過濾，將濾液利用截留 分子量在5000Dr以下物質的超濾膜裝置內，0. 05?0. 08MPa過濾收取分子量在5000Dr以 下的物質，再將分子量在5000Dr以下的物質利用截留分子量在500Dr以上物質的超濾膜裝 置內，0. 05?0. 08MPa過濾收取分子量在500Dr以上的物質，得到分子量為500Dr?5000Dr 的柞樹葉提取物。
[0028] 實施例2
[0029] 一種麻櫟柞樹葉提取物的制備方法，與實施例1的區別為：將柞樹葉清洗、25°C陰 干、粉碎至40目后與65%乙醇按料液比為lg/15mL，20°C浸取12h，浸取3次，合并，過濾， 3000rpm離心lOmin，得到浸取液，將浸取液60°C回流濃縮至浸取液體積的6. 67%，得到第 一次濃縮液，向第一次濃縮液中加入其10倍體積的去離子水，60°C回流濃縮至第一次濃縮 液的體積，得到lg/mL濃縮液。
[0030] 實施例3
[0031] 一種麻櫟柞樹葉提取物的制備方法，與實施例1的區別為：將柞樹葉清洗、25°C陰 干、粉碎至40目后與75%乙醇按料液比為lg/15mL，20°C浸取12h，浸取3次，合并，過濾， 3000rpm離心lOmin，得到浸取液，將浸取液60°C回流濃縮至浸取液體積的6. 67%，得到第 一次濃縮液，向第一次濃縮液中加入其10倍體積的去離子水，60°C回流濃縮至第一次濃縮 液的體積，得到lg/mL濃縮液。
[0032] 實施例4
[0033] -種麻櫟柞樹葉提取物的制備方法，與實施例1的區別為：將柞樹葉清洗、25°C陰 干、粉碎至40目后與85%乙醇按料液比為lg/15mL，20°C浸取12h，浸取3次，合并，過濾， 3000rpm離心lOmin，得到浸取液，將浸取液60°C回流濃縮至浸取液體積的6. 67%，得到第 一次濃縮液，向第一次濃縮液中加入其10倍體積的去離子水，60°C回流濃縮至第一次濃縮 液的體積，得到lg/mL濃縮液。
[0034] 實施例5
[0035] 一種麻櫟柞樹葉提取物的制備方法，與實施例1的區別為：將柞樹葉清洗、25°C陰 干、粉碎至40目后與95%乙醇按料液比為lg/15mL，20°C浸取12h，浸取3次，合并，過濾， 3000rpm離心lOmin，得到浸取液，將浸取液60°C回流濃縮至浸取液體積的6. 67%，得到第 一次濃縮液，向第一次濃縮液中加入其10倍體積的去離子水，60°C回流濃縮至第一次濃 縮液的體積，得到lg/mL濃縮液。
[0036] 應用例1
[0037] 實施例1?5制備得到的柞樹葉提取物抑菌作用實驗：
[0038] 實驗材料：樣品為實施例1?5制備得到的柞樹葉提取物，受試菌為金黃色葡萄球 菌金黃亞種ATCC1. 2465、大腸埃希氏菌ATCC1. 90、普通變形桿菌ATCC1. 491、痢疾志賀氏菌 ATCC1. 1869和腸道沙門氏菌亞種ATCC1. 1190,細菌用營養肉湯和營養瓊脂培養基。
[0039] 實驗方法：
[0040] ①菌懸液的制備將金黃色葡萄球菌金黃亞種、大腸埃希氏菌、普通變形桿菌、痢疾 志賀氏菌和腸道沙門氏菌亞種用相應斜面培養基活化2次，用無菌生理鹽水配成菌體或孢 子濃度為IO6?10 7CfVmL的菌懸液；
[0041] ②抑菌作用的測定選取直徑為9cm的培養皿，每個培養皿加15mL培養基，移取上 述各個菌懸液0. 5mL分別加入各個平板上，涂布均勻，凝固后，每個培養皿等距離放置5個 滅菌牛津杯，于其中分別滴加0. 2mL實施例1?5制備得到的柞樹葉提取物，對照加無菌生 理鹽水，每個菌重復實驗5次，普通變形桿菌置于30°C，其余菌置于37°C培養24h，移去牛津 杯，量取各個抑菌圈直徑。
[0042] 實施例1?5制備得到的柞樹葉提取物抑菌情況見表1 (抑菌圈直徑為5次實驗 平均值）。
[0043] 表1實施例1?5制備得到的柞樹葉提取物抑菌情況
[0044]
【主權項】
1. 一種柞樹葉提取物的制備方法，其特征在于：所述制備方法包括如下步驟： ① 將柞樹葉浸取，得到浸取液，濃縮浸取液； ② 將步驟①所得產品利用超濾得到分子量為500?5000Dr的柞樹葉提取物。
2. 根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述柞樹葉浸取前清洗、陰干、粉碎。
3. 根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述浸取為將柞樹葉與浸取劑按料 液比為1 :1〇?20g/mL，20?25°C浸取4?12h，浸取1?3次。
4. 根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于：所述浸取劑為水或65?95%乙醇。
5. 根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述濃縮為當浸取劑為水時將浸取 液55?65°C回流濃縮至浸取液體積的5?15% ;或當浸取劑為65?95%乙醇時將浸取 液55?65°C回流濃縮至浸取液體積的5?15%，得到第一次濃縮液，向第一次濃縮液中加 入其5?10倍體積的水，55?65°C回流濃縮至第一次濃縮液的體積。
6. 根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述超濾為先將步驟①所得產品 利用截留分子量在5000Dr以下物質的超濾裝置內，0. 05?0. 08MPa過濾，收取分子量在 5000Dr以下的物質，再將分子量在5000Dr以下的物質利用截留分子量在500Dr以上物質的 超濾裝置內，〇. 05?0. 08MPa過濾，收取分子量在500Dr以上的物質。
7. 權利要求1所述制備方法得到的柞樹葉提取物。
8. 權利要求7所述的柞樹葉提取物在抑菌上的應用。
【專利摘要】本發明涉及一種柞樹葉提取物其制備方法及應用，屬于提取工藝領域，所述制備方法包括如下步驟：①將柞樹葉浸取，得到浸取液，濃縮浸取液；②將步驟①所得產品利用超濾得到分子量為500～5000Dr的柞樹葉提取物，本發明有益效果為本發明制備的柞樹葉提取物具有抑菌作用。
【IPC分類】A61K36-185, A61K8-97, A23L3-3472, A61K127-00, A23B7-153, A61P31-04
【公開號】CN104606265
【申請號】CN201410852045
【發明人】王林美, 岳冬梅, 夏興宏, 李樹英
【申請人】遼寧省農業科學院大連生物技術研究所
【公開日】2015年5月13日
【申請日】2014年12月30日