倍他米松戊酸酯在制備抑制腫瘤細胞轉移和擴散的藥物中的應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及倍他米松戊酸酯在制藥領域新的用途，具體涉及倍他米松戊酸酯在制 備抑制腫瘤細胞轉移和擴散的藥物中的應用。
【背景技術】
[0002] 倍他米松戊酸酯是腎上腺皮質激素類藥。具有抗炎、抗過敏及止癢的作用。硫酸 新霉素有局部抗菌作用，能抑制多數革蘭氏陽性細菌和革蘭氏陰性細菌包括葡萄球菌、變 形桿菌屬和假單胞菌屬，但對真菌無作用。
[0003] 主要用于皮膚類炎癥的外用藥，抑制和減輕皮膚的瘙癢，紅腫等癥狀。如濕瘆，牛 皮癬和皮炎。倍他米松戊酸酯易被機體吸收，但如果長期用藥會有副作用。
[0004] 現有公開文獻中尚未發現倍他米松戊酸酯的其他藥理作用。
【發明內容】
[0005] 發明目的：本發明目的在于提供一種倍他米松戊酸酯在制備抑制腫瘤細胞轉移和 擴散的藥物中的應用。
[0006] 技術方案：倍他米松戊酸酯在制備抑制腫瘤細胞轉移和擴散的藥物中的應用。
[0007] 優選地，所述腫瘤細胞為結腸癌細胞。
[0008] 優選地，其中倍他米松戊酸酯的濃度為10?40uM。
[0009] 發明人通過細胞層面的實驗研宄發現，倍他米松戊酸酯對腫瘤細胞的轉移能力有 一定的抑制作用。目前針對現有的適應癥定性其為外用藥，直接涂抹于患處。
[0010] 本發明需要在現有的細胞層面實驗基礎上根據新的適應癥療效以及后續相關實 驗設計確定新的臨床給藥方法及劑量。
[0011] 本發明通過將腫瘤細胞采集培養后，再利用藥物刺激細胞，觀察細胞形態、并定量 分析細胞層的面積，即細胞能夠與其他細胞接觸的面積，從而判斷腫瘤細胞的擴散能力。細 胞層面積越大越有利于與其他細胞形成連接。細胞迀移需要內外因素的配合。外部的因素 指的是細胞外的信號分子。內部因素則指細胞的信號傳導系統和執行運動的細胞骨架和分 子馬達，還有參與粘著斑形成的各種分子。細胞外信號結合胞膜受體完成其使命后，需要 細胞內信號分子接力，將運動信息進一步傳給細胞迀移的執行單位一一細胞骨架和分子馬 達。種類繁多的細胞內信號分子會相互作用，影響后述這兩種分子的分布，結構和活性，達 到精細調整細胞運動的目的。由此可見，腫瘤細胞的轉移，與細胞本身以及細胞之間的關系 緊密。
[0012] 癌細胞與其同源正常組織相比，細胞間的粘著性降低，故癌細胞在體內容易分散 和轉移。在正常細胞外被中的纖粘連蛋白是一種細胞外粘著糖蛋白，它增強了細胞與細胞 外基質間的粘著。癌細胞的纖粘連蛋白顯著減少或缺失，鈣粘蛋白合成發生障礙，從而破 壞了細胞與基質之間和細胞與細胞之間的粘著，因此癌細胞具有易于侵潤組織和轉移的屬 性。癌細胞的面積的增大增強了各個細胞之間的接觸面積更利于相互之間的粘連和附著。
[0013] 雖然腫瘤細胞的轉移是由多種因素共同形成導致的，但是以細胞層的面積，即細 胞能夠與其他細胞接觸的面積作為細胞轉移能力大小的依據，以此作為細胞間連接強度的 測定的方法，具有成本低廉、操作簡便、結果易判的優點，其表現出來的細胞面積增大是最 容易直接觀察辨別的，主要就是通過加藥刺激后對細胞間連接分子Ε-cadherin蛋白質進 行免疫染色，繼而進行定量測定。細胞層面積越大越有利于與其他細胞形成連接。
[0014] 本發明以為倍他米松戊酸酯為實驗對象，評估考量其在抑制腫瘤細胞轉移的能力 評價。具體以藥物刺激前后細胞面積的變化為主要依據。
[0015] 有益效果：1、本發明利用倍他米松戊酸酯制備的藥物對腫瘤細胞的轉移能力進行 抑制，倍他米松戊酸酯為低毒藥物，可在腫瘤擴散過程中起到較大的阻斷作用，與此同時再 采用其他相關腫瘤藥物進行治療，可以大量減少正常細胞的死亡量；而現有的腫瘤藥物多 為細胞毒藥物，在殺死腫瘤細胞的同時大量正常細胞也一起死亡；2、本發明所使用的倍他 米松戊酸酯為成藥庫的現有藥物化合物，研發周期與新藥研發的周期相比可明顯減少。
【附圖說明】
[0016] 圖1為IOuM濃度倍他米松戊酸酯處理后的結腸癌細胞圖；
[0017] 圖2為40uM濃度倍他米松戊酸酯處理后的結腸癌細胞圖；
[0018] 圖3為60uM濃度倍他米松戊酸酯處理后的結腸癌細胞圖；
[0019] 圖4為80uM濃度倍他米松戊酸酯處理后的結腸癌細胞圖；
[0020] 圖5為IOOuM濃度倍他米松戊酸酯處理后的結腸癌細胞圖；
[0021] 圖6為陽性對照組，由IOuM濃度nocodazole處理后的結腸癌細胞圖；
[0022] 圖7為陰性對照組。
【具體實施方式】
[0023] 下面通過附圖對本發明技術方案進行詳細說明，但是本發明的保護范圍不局限于 所述實施例。
[0024] 實施例1 :倍他米松戊酸酯在制備抑制結腸癌細胞轉移和擴散的藥物中的應用。 具體實驗方案如下：
[0025] 1、實驗材料
[0026] 本發明實驗階段采用的是結腸癌細胞（HT29)，陽性對照采用的藥物是 nocodazole (實驗濃度為IOuM)。陰性對照組沒有經過任何處理。
[0027] 其中實驗采用倍他米松戊酸酯化合物C27H37FO 6, CAS NO.為2152-44-5,濃度分別 為 100uM，80uM，60uM，40uM，10uM。
[0028] 2、實驗方法
[0029] 對培養24小時的結腸癌細胞（細胞密度：105)進行藥物刺激2小時處理：
[0030] (1)將培養皿中狀態較好的結腸癌細胞離心，加入適量培養液制成細胞懸浮液；
[0031] (2)取細胞懸液計數，按照IO5的密度加入24孔盤中，放入37°C的CO 2培養箱中培 養；
[0032] (3) 24小時后，換液，培養液中加入相應量的倍他米松戊酸酯化合物配置到實驗所 需濃度，以及陽性對照藥物，然后繼續培養2小時；
[0033] (4)培養2小時后將細胞于2%的PFA溶液下37°C固定10分鐘，再進行熒光染色。
[0034] 3、實驗結果處理
[0035] 對熒光染色后的結腸癌細胞觀察，將觀察的圖片用Image J處理并計算其細胞面 積在加藥前后的數據，Ratio是實驗組與陰性對照組的比值。結果見表1。
[0036] 表1倍他米松戊酸酯對HT29細胞刺激2小時后的面積大小
【主權項】
1. 倍他米松戊酸酯在制備抑制腫瘤細胞轉移和擴散的藥物中的應用。
2. 根據權利要求1所述的應用，其中腫瘤細胞為結腸癌細胞。
3. 根據權利要求1所述的應用，其中倍他米松戊酸酯的濃度為10~40uM。
【專利摘要】本發明公開倍他米松戊酸酯在制備抑制腫瘤細胞轉移和擴散的藥物中的應用。發明利用倍他米松戊酸酯制備的藥物對腫瘤細胞的轉移能力進行抑制，倍他米松戊酸酯為低毒藥物，可在腫瘤擴散過程中起到較大的阻斷作用，與此同時再采用其他相關腫瘤藥物進行治療，可以大量減少正常細胞的死亡量；而現有的腫瘤藥物多為細胞毒藥物，在殺死腫瘤細胞的同時大量正常細胞也一起死亡。
【IPC分類】A61K31-573, A61P35-04
【公開號】CN104546869
【申請號】CN201510068109
【發明人】滕文臣
【申請人】江蘇澳格姆生物科技有限公司
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2015年2月9日