一種多肽在治療糖尿病中的應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及生物醫療領域，具體涉及一種多肽在治療糖尿病中的應用。
【背景技術】
[0002] 糖尿病是目前醫學界三大疑難疾病之一，其死亡率在發達國家僅次于心血管疾 病、惡性腫瘤。糖尿病是由多種病因引起的糖、脂肪和蛋白質代謝紊亂的一種疾病。糖尿病 可怕之處在于其后期引起的各種并發癥，能引起機體多器官和組織的退行性病變及損傷， 其中眼、腎臟、神經、心臟和血管是糖尿病誘導的并發癥中最主要的靶器官。患者會出現多 種并發癥，如失明、腎功能衰竭、肢體壞疽、心血管疾病和腦血管意外等。
[0003] 據統計，目前全球糖尿病患者約為2億多例，預計到2025年將增加到3億例，且其 發病率也將由目前的2. 8%上升為4. 4%。其中，發展中國家糖尿病患者人數將增長170%，遠 遠高于發達國家的42%。這預示著到2025年，發展中國家糖尿病患者所占的比例將超過全 球糖尿病患者總的75%。新增病例將主要集中在中國、印支次大陸及非洲等發展中國家。目 前中國有4. 3%的人口患有糖尿病，在未來20年內患者數目將突破5000萬。糖尿病嚴重威 脅著人類的健康，而現在該病有擴大化和年輕化的傾向，如何防治糖尿病已成為醫藥界重 點關注的一大課題。
[0004]目前，糖尿病的治療藥物有七大品種，包括胰島素及其類似物、磺酰脲類、雙胍類、 a-葡萄糖苷酶抑制劑、噻唑烷二酮衍生物、促胰島素分泌劑、中成藥等。在臨床上，根據糖 尿病的發展進程，有嚴格的用藥方案，一般通常為兩種藥物以上協同進行治療，以減少毒副 作用和并發癥的發生。然而，這些藥物的組合在治療糖尿病及其并發癥的應用中，仍然存在 一些不能很好應對的情形。
[0005] 多肽是a-氨基酸以肽鏈連接在一起而形成的化合物，它也是水解的中間產物。 許多活性多肽都是由無性的前體，經過酶的加工剪切轉化而來的，它們中間許多有共同的 來源，相似的結構，甚至還保留著若干彼此所特有的生物活性。基于對生理或病理過程機理 的研宄，研宄活性多肽結構與功能的關系及活性之間結構的異同與其活性的關系，將有助 于設計和研制新的活性多肽藥物。
[0006] 本發明對糖尿病及其并發癥的治療活性物質一一一種多肽進行了探索，以期提供 一種全新的選擇和思路，拓寬抗糖尿病藥物的選擇領域。
【發明內容】
[0007] 有鑒于此，本發明的目的在于提供一種SEQIDNO:l所示的多肽的新用途，即在制 藥和保健品中的應用。
[0008] 首先，本發明涉及SEQIDNO:1所示的多肽在制備治療和/或預防糖尿病和/或 糖尿病并發癥的藥物中的應用。
[0009]SEQIDNO:1所示的多肽，氨基酸序列為ArgArgTrpTrpCysArg(簡寫： RRWWCR)，是一個2002年發表的一種富含Trp/Arg的有抗菌活性的六肽（VogelHJ， SchibliDJ，JingW，etal.Towardsastructure-functionanalysisofbovine lactoferricinandrelatedtryptophan-andarginine-containingpeptides. BiochemCellBiol，2002，80(l):49-63.)，目前該六肽活性僅僅是抗微生物作用 (NguyenLT，ChauJK，PerryNA，etal.Serumstabilitiesofshorttryptophan-andarginine-richantimicrobialpeptideanalogs.PLoSOne, 2010,10;5 (9).pii: el2684.doi: 10. 1371/journal.pone. 0012684;ChanDI,PrennerEJ,VogelHJ. Tryptophan-andarginine-richantimicrobialpeptides:structuresandmechanisms ofaction.BiochimBiophysActa，2006，1758(9) :1184-1202.)。又如中國專利申請 201310528734. 2 "抗菌肽在制藥中的應用"，公開了其在制備抗蜜蜂囊狀幼蟲病的藥物中的 應用，但本發明涉及的RRWWCR在治療糖尿病中的用途是首次公開。
[0010] 進一步，所述糖尿病并發癥包括糖尿病眼疾、糖尿病腎病、糖尿病肢體壞疽、糖尿 病心血管病和糖尿病腦血管意外。
[0011] 進一步，所述藥物的給藥途徑為經皮給藥。優選地，將所述多肽制備為治療糖尿病 和/或糖尿病并發癥創傷的擦拭劑，其中多肽濃度為200yg/mL。
[0012] 進一步，所述藥物中，SEQIDNO:1所示的多肽的存在形式包括前體多肽，所述前 體多肽經剪切轉化得到SEQIDNO: 1所示的多肽。
[0013] 進一步，組成SEQIDNO:1所示的多肽的氨基酸為L-型氨基酸和/或D-型氨基 酸。
[0014] 其次，本發明還涉及SEQIDNO:1所示的多肽在制備糖尿病和/或糖尿病并發癥 的保健品中的應用。
[0015] 進一步，所述糖尿病并發癥包括糖尿病眼疾、糖尿病腎病、糖尿病肢體壞疽、糖尿 病心血管病和糖尿病腦血管意外。
[0016] 進一步，所述保健品中，SEQIDNO:1所示的多肽的存在形式包括前體多肽，所述 前體多肽經剪切轉化得到SEQIDNO:1所示的多肽。
[0017] 進一步，組成SEQIDNO:1所示的多肽的氨基酸為L-型氨基酸和/或D-型氨基 酸。
[0018] 再有，本發明還涉及一種預防和/或治療糖尿病和/或糖尿病并發癥的藥物組合 物，包括有效量的SEQIDNO:1所示的多肽和藥學上可接受的載體。
[0019] 為了更好的理解本發明的實質，本發明開展了藥理實驗以證明SEQIDNO:1所示 的多肽在制藥和保健領域的用途。經實驗證實，本發明的多肽RRWWCR在防治糖尿病的活性 中，表現出保護和減輕機體組織器官損傷、延長壽命和降血糖作用；特別是經皮膚創傷擦拭 給藥，多肽RRWWCR可修復糖尿病小鼠損傷組織，部分小鼠糖尿病可康復。
[0020] 本發明的有益技術效果是： (1)本發明為目前抗糖尿病藥物提供了一種全新的選擇和思路，拓寬了抗糖尿病藥物 的選擇領域。
[0021] (2)本發明多肽RRWWCR的應用證明其有顯著的抗糖尿病效果，能保護和減輕機體 組織器官損傷、延長壽命和降血糖作用，特別是經皮膚創傷擦拭給藥，多肽RRWWCR可修復 糖尿病小鼠損傷組織。
【附圖說明】
[0022] 圖1為實驗小鼠肺臟血管紅細胞組織切片圖； 圖2為實驗小鼠脾臟組織切片圖； 圖3為實驗小鼠肝臟組織切片圖； 圖4為實驗小鼠腎臟組織切片圖。
【具體實施方式】
[0023] 下面結合實施例對本發明作進一步說明。所舉實施例是為了更好地對本發明的內 容進行說明，但并不是本發明的內容僅限于所舉實施例。所以熟悉本領域的技術人員根據 上述
【發明內容】
對實施方案進行非本質的改進和調整，仍屬于本發明的保護范圍。 實施例
[0024] 1)六肽的準備： RRWWCR六肽采用化學合成(具體采用固相法合成，其方法可以參見SchnlzerM，AlewoodP,JonesA,AlewoodD,KentSBH.InsituneutralizationinBoc-chemistry solidphasepeptidesynthesis.IntJPeptResTher. 2007 ;13:31_44)，HPLC純度大于 98%。將六肽粉末溶于生理鹽水配制成lOOOyg/mL的溶液，分裝后冷凍保存備用。使用時 用生理鹽水稀釋成相應濃度。
[0025] 2)實驗步驟： 選擇8周齡昆明鼠，禁食不禁水12小時后，按120mg/kg劑量腹腔注射1%鏈脲佐菌素 溶液，分別于注射后第3天和第7天禁食不禁水12小時，尾靜脈采血，使用強生血糖儀測空 腹小鼠血糖濃度。此兩次血糖濃度超過15mmol/L的小鼠用于給藥試驗。此后每周測空腹 血糖1次。
[0026] 以0. 7g/kg劑量腹腔注射7g/L戊巴比妥鈉麻醉小鼠，用8%硫化鈉脫毛，待2-3 分鐘用溫水擦拭以便洗去該部位脫下的被毛。在背部皮膚松弛狀態下，在背部脊柱上方不 宜被自身舔舐和撓傷部位印上8 _印跡，用消毒眼科剪按印跡剪去全層皮膚，形成機械損 傷動物模型。將皮膚創傷模型小鼠分為高濃度組（1000ug/mL)、中濃度組（200yg/mL)、低 濃度組（40yg/mL)和不給藥組，每組15只。給藥組創后即在創傷處用消毒棉簽沾取RRWWCR 六肽相應濃度溶液擦拭，每日擦拭1次，連續擦拭10天。不給藥組在創傷處擦拭生理鹽水。 此時記為給藥第1周。每4周以同樣方式構建皮膚創傷和給藥，如此重復3次。
[0027] 為了觀察糖尿病在模型小鼠上所引起的并發癥及其對機體器官和組織所造成的 退行性病變及損傷，小鼠繼續飼養直至不給藥組小鼠出現死亡，每組小鼠處死5只，取心、 肝、脾、肺、腎等組織用10%福爾馬林固定，制備石蠟切片，HE染色，觀察組織病理改變，如圖 1-4所示。
[0028] 3)實驗結果： 小鼠血糖水平見表1。
【主權項】
1. SEQ ID NO :1所示的多肽在制備治療和/或預防糖尿病和/或糖尿病并發癥的藥物 中的應用。
2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于：所述糖尿病并發癥包括糖尿病眼疾、糖尿 病腎病、糖尿病肢體壞疽、糖尿病心血管病和糖尿病腦血管意外。
3. 根據權利要求2所述的應用，其特征在于：所述藥物的給藥途徑為經皮給藥。
4. 根據權利要求1至3任意一項所述的應用，其特征在于：所述藥物中，SEQ ID NO :1 所示的多肽的存在形式包括前體多肽，所述前體多肽經剪切轉化得到SEQ ID NO :1所示的 多肽。
5. 根據權利要求1至3任意一項所述的應用，其特征在于：組成SEQ ID NO: 1所示的 多肽的氨基酸為L-型氨基酸和/或D-型氨基酸。 6. SEQ ID NO :1所示的多肽在制備糖尿病和/或糖尿病并發癥的保健品中的應用。
7. 根據權利要求6所述的應用，其特征在于：所述糖尿病并發癥包括糖尿病眼疾、糖尿 病腎病、糖尿病肢體壞疽、糖尿病心血管病和糖尿病腦血管意外。
8. 根據權利要求6或7所述的應用，其特征在于：所述保健品中，SEQ ID NO : 1所示的 多肽的存在形式包括前體多肽，所述前體多肽經剪切轉化得到SEQ ID NO :1所示的多肽。
9. 根據權利要求6或7所述的應用，其特征在于：組成SEQ ID NO :1所示的多肽的氨 基酸為L-型氨基酸和/或D-型氨基酸。
10. -種預防和/或治療糖尿病和/或糖尿病并發癥的藥物組合物，包括有效量的SEQ ID NO :1所示的多肽和藥學上可接受的載體。
【專利摘要】本發明涉及生物醫療領域，具體涉及一種多肽在治療糖尿病中的應用：如SEQ ID NO：1所示的多肽在制備治療和/或預防糖尿病和/或糖尿病并發癥的藥物中的應用，或者在制備糖尿病和/或糖尿病并發癥的保健品中的應用。本發明的多肽具有顯著的抗糖尿病效果，能保護和減輕機體組織器官損傷、延長壽命和降血糖作用，特別是經皮膚創傷擦拭給藥，多肽RRWWCR可修復糖尿病小鼠損傷組織，為目前抗糖尿病藥物提供了一種全新的選擇和思路，拓寬了抗糖尿病藥物的選擇領域。
【IPC分類】A61P9-00, A61P27-02, A61K38-08, A61P13-12, A61P17-02, A61P3-10, A61P9-10
【公開號】CN104524544
【申請號】CN201410731375
【發明人】沈克飛, 鄭華, 張邑帆, 付利芝, 楊睿, 曹蘭, 王孝友
【申請人】重慶市畜牧科學院
【公開日】2015年4月22日
【申請日】2014年12月5日