燈盞花素在制備預防和治療電離輻射損傷藥物方面的應用
【專利說明】燈盞花素在制備預防和治療電離輻射損傷藥物方面的應用
[0001] 涉及領域
[0002] 本發明涉及醫藥領域，具體在于從植物燈盤花Erigeronbrevisca-pus中提取而 來的黃酮類有效成分燈盞花素，化學名為4, 5, 6,三羥基甲酮-7-葡萄糖醛酸苷，在制備用 于預防和治療電離輻射造成的相關損傷救治和疾病治療方面的應用。
【背景技術】
[0003] 隨著全球核事業的蓬勃發展，核技術已在核電站、航天事業、國防和生物醫藥等各 個領域廣泛應用，人類接觸電離輻射并導致損傷的機會增加，同時隨著世界核安全形勢緊 張帶來的核戰爭和核恐怖事件隱憂，電離輻射造成的機體損傷（簡稱為輻射損傷）的防護 與救治正在受到越來越多的重視。
[0004] 另一方面，惡性腫瘤的發病率和患者數量近年來一直呈持續上升的趨勢，放射治 療作為主要治療手段之一，起著不可或缺的作用，但是高劑量輻射照射難免會導致的腫瘤 周邊正常組織和器官乃至全身的急性輻射損傷，輻射損傷帶來的副反應嚴重地限制了放射 治療在腫瘤治療中的廣泛應用，也明顯影響了腫瘤患者放射治療療效和治療后的生活質 量。
[0005] 目前投放市場的輻射損傷救治相關藥物主要有：含硫化合物、激素類、細胞因子類 以及中草藥等，它們分別存在各自的固有缺陷：比如含硫化合物普遍副作用較大，氨磷汀 (又名Amifostine)作為此類化合物的代表是目前公認的防護效果最好的化合物，是國際 管理機構通過的第一個有選擇性的廣譜細胞保護劑，但是半衰期極短（7分鐘）和價格昂貴 (國內醫療市場價格在400-500元/支）限制了它的應用；而激素類藥物對輻射損傷的防 治主要是對骨髓有核細胞、造血干細胞和祖細胞，此類藥物對性器官和生殖系統的影響限 制了它的廣泛使用；細胞因子類藥物例如白介素類、集落刺激因子類藥物能夠緩解和救治 輻射導致的骨髓造血功能系統損傷，但是其輻射防護作用與給藥時間密切相關（在用于預 防和救治的醫療實踐中，此類藥物對醫護檢測水平和關注程度要求高），存在明顯的致炎作 用，且價格昂貴，難以常溫保存；中草藥類抗輻射成分主要有酚類、多糖類、天然黃酮類，具 有活性成分不明確、低毒等特點，經多年研宄，至今無上市或待上市的同類藥物。
[0006]本發明涉及一種可提取于天然植物的有效成分，燈盞花素，是從菊科短莛屬植物 燈盤花Erigeronbrevisca-pus全株植物中提取分離的黃酮類有效成分，分子式為C25H24012， 分子量為462. 21，可溶于水，化學名為4, 5,6,三羥基甲酮-7-葡萄糖醛酸苷，具有擴張腦血 管的作用，降低腦血管阻力，增加腦血流量，改善微循環，并有對抗血小板聚集的作用。臨床 用于治療突發性耳聾，閉塞性動脈硬化皮質盲，糖尿病周圍神經病變，股骨頭缺血性壞死， 類風濕關節炎，后天性麻痹性斜視，腎病綜合征等。迄今為止，燈盞花素在制備用于預防和 治療電離輻射損傷救治和腫瘤放射治療輔助藥物方面的應用尚未見報道。
【發明內容】
[0007]本發明的目的是提供燈盞花素的新用途。
[0008] 本發明所提供的燈盞花素的新用途在于：制備用于預防和治療電離輻射損傷救治 和腫瘤放射治療輔助藥物方面的應用。
[0009] 本發明所述的電離輻射損傷包括致死劑量照射、亞致死劑量和低劑量照射損傷， 也包括腫瘤放射治療所產生的輻射損傷。
[0010] 本發明提供的燈盞花素使用形式，可根據臨床需要，加入相應輔料，以片劑、丸劑、 膠囊、懸浮液、溶液、糖漿、注射劑、溶劑、霜劑、軟膏、噴霧劑等制劑形式存在。
[0011] 本發明所提供的燈盞花素新用途的使用劑量在l-l〇mg/Kg體重（人），但不限于此 范圍。
[0012] 本發明的目的和優點將通過以下優先實施例的非限制性說明進行圖示和解釋，這 些實施例是參照附圖作為例子給出的。
【附圖說明】
[0013] 圖1燈盞花素顯著延長C57鼠致死劑量照射（x射線照射：圖la，y射線照射： 圖lb)后存活天數。
[0014] 圖2燈盞花素顯著提高C57鼠亞致死劑量（9GyY射線）照射后30天生存率。
[0015] 圖3燈盞花素對低劑量（5GyY射線）照射造成的輻射損傷的造血保護作用。
[0016] 圖4燈盞花素對人乳腺癌MCF-7細胞的輻射保護作用（顯微鏡下細胞圖，1.對照 組；2.照射組；3燈盤花素0.lmg/ml;4.照射+燈盤花素0.lmg/ml)。
【具體實施方式】
[0017] 實施例一
[0018] 單次致死劑量（13Gyx射線/Y射線）照射造成的輻射損傷救治
[0019] 燈盞花素，可參考已公開的發明專利說明書或相關文獻自行制備，也可購買于醫 藥市場，給藥方式為腹腔注射，用藥劑量為3?6mg/Kg體重（鼠）。
[0020] X射線照射裝置X-RadRS-2000輻照儀，電壓160KV，波段射線能量為50KeV，劑量 率 1. 01Gy/min。
[0021] Y射線照射裝置137Cs輻照儀，劑量率0? 5Gy/min。
[0022] C57BL/6小鼠，雌雄各半，體重18-20g，合格證號SCXK(京）2012-0001，分組情況 為：不照射組、照射并給生理鹽水組、照射并給燈盞花素組，每組10只。
[0023] 采用單次致死劑量全身照射，給藥方案為照射前30分鐘腹腔給藥，照射后立即補 充給藥一次，之后每24小時給藥一次，連續14天。
[0024] 檢測指標：存活天數。
[0025] 實驗結果見圖1，燈盞花素顯著延長C57鼠致死劑量照射后的存活天數。
[0026] 實施例二
[0027] 亞致死劑量（9Gyy射線）照射造成的輻射損傷救治
[0028] 藥品信息、動物信息、輻照裝置和參數、給藥方式與實施例一相同。
[0029] 照射劑量為9Gy。
[0030] 檢測指標：30天生存率。
[0031] 實驗結果見圖2,燈盞花素顯著提高C57鼠亞致死劑量照射后的生存率。
[0032] 實施例三
[0033] 低劑量（5Gyy射線）照射造成的輻射損傷的造血保護作用
[0034] 藥品信息、動物信息、輻照裝置和參數、給藥方式與實施例一相同。
[0035] 照射劑量為5Gy。
[0036] 檢測指標：體重、外周血計數、單側股骨計數、粒細胞巨噬細胞集落形成單位、脾臟 指數、胸腺指數。
[0037] 實驗結果見圖3,燈盞花素顯著緩解低劑量照射引起的動物的造血系統損傷。
[0038] 實施例四
[0039] 燈盞花素對多種腫瘤細胞/正常細胞的輻射保護作用
[0040] 藥品信息，福照裝置和參數與實施例一相同。
[0041] 細胞系采用乳腺癌MCF-7細胞、乳腺癌MDA-MB-231細胞、肝癌IfepG2細胞、肺癌 A549細胞、人胚腎HEK293細胞、人微血管內皮HMEC-1細胞。
[0042] 實驗過程：
[0043] 1.細胞系及培養
[0044] 采用人肝癌H印G2細胞、人肺癌A549細胞，分別用含10 %FBS(Gibico， REF10099-141)，含 100yg/ml鏈霉素和 100U/ml青霉素，高糖DMEM(Hyclone，SH30243. 01B) 和PRMI1640(Hyclone，SH30809. 01B)培養，置于37°C，5% 0)2的恒溫培養箱中常規傳代培 養。
[0045]2?藥物處理及照射
[0046] 細胞培養至對數生長期，更換含不同濃度藥物的培養液，繼續培養24小時，接受 不同劑量Y射線照射。
[0047] 3.克隆形成實驗
[0048] 細胞照射后，按不同的照射劑量接種不同細胞數量接種到60_培養皿。細胞連續 培養3周后用甲醇固定，加姬姆薩應用液染色30分鐘，流水洗凈，計數細胞數多50的克隆 個數。通過克隆形成率PE=(對照組克隆數/實驗組細胞數）X100%和存活分數=克隆 數八實驗組細胞數XPE)計算克隆形成率和存活分數。并按多靶單擊模型擬合繪制細胞 存活曲線。
[0049] 檢測指標：IC50(殺死50%細胞的放射劑量）
[0050] 實驗結果見圖4和表1，燈盞花素可提高多種腫瘤細胞或正常細胞的輻射耐受劑 量，有一定的輻射保護作用。
[0051] 表1燈盞花素對多種腫瘤細胞/正常細胞Y射線照射IC50的影響（Gy)
[0052]
【主權項】
1. 燈盞花素在制備預防和治療電離輻射損傷救治藥物中的應用。
2. 根據權利要求1所述的應用，其中所述的電離輻射損傷救治包括但不限于單次致死 劑量照射造成的急性電離輻射損傷救治。
3. 根據權利要求1所述的應用，其中所述的電離輻射損傷救治包括但不限于單次/多 次低劑量照射造成的造血系統損傷救治。
4. 燈盞花素在制備腫瘤放射治療輔助藥物中的應用。
5. 根據權利要求4所述的應用，其中所述的腫瘤放射治療包括但不限于乳腺癌。
【專利摘要】本發明涉及醫藥領域，公開了燈盞花素在制備預防和治療電離輻射損傷藥物方面的應用。從植物燈盞花Erigeronbrevisca-pus中提取而來的黃酮類有效成分燈盞花素，化學名為4，5，6，三羥基甲酮-7-葡萄糖醛酸苷，它能夠在細胞水平和動物活體水平發揮輻射保護作用，并且在廣泛的輻射劑量范圍下，均有保護作用，該活性成分質量穩定，成本低廉，來源廣泛，可用于制備預防和治療電離輻射造成的相關損傷救治和疾病治療方面的藥物。
【IPC分類】A61P17-16, A61P39-00, A61K31-7048, A61P7-00, A61P35-00
【公開號】CN104523735
【申請號】CN201410858051
【發明人】樊賽軍, 賀欣
【申請人】中國醫學科學院放射醫學研究所
【公開日】2015年4月22日
【申請日】2014年12月30日