專利名稱：：含有磷脂酶抑制劑[[3－(2－氨基－1,2－二氧乙基)－2－乙基－1(苯甲基)－1h－吲哚...的制作方法
背景技術：
：背景[[3-(2-氨基-1,2-二氧乙基)-2-乙基-1-(苯甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸鈉(本說明書中以下稱之為化合物(Ⅰ)或活性成分)是作為人體非胰腺分泌的磷脂酶A2抑制劑的有用化合物(以下稱之為sPLA2)，見JP-A7-285933、歐洲專利申請No.95302166.4(EPPubl.No.0675110AI)和美國專利No.5,654,226中說明；這些公開的文獻結合到本發明中作為參考。用于注射的藥物不僅通常可制成乳劑、懸浮劑或溶液，還可以制成凍干制劑供使用前溶解，該制劑穩定、可保存并易于再配制成溶液。本領域技術熟練人員熟知，保持該凍干制劑無菌并且消除該凍干制劑中外來的不溶性物質是十分容易的。有關注射劑，JP-A7-285933公開了0.1g/L濃度的化合物(Ⅰ)的等滲鹽水溶液和靜脈輸注該鹽水溶液的方法，但并未像本發明一樣公開任何組合物，長時間以來一直需求化合物(Ⅰ)的穩定的藥物制劑，尤其是化合物(Ⅰ)的穩定的注射制劑或用于制備可注射制劑的化合物(Ⅰ)的凍干制劑。儲存根據已知方法制備的化合物(Ⅰ)的藥用組合物可產生產物降解(含量降低)、變色和再制成溶液性質的變壞，尤其是在使用前溶解制成注射劑時。室溫下長期儲存后，要提供穩定性好并具有好的再溶解性質，尤其是在使用前溶解制成化合物(Ⅰ)的注射劑的化合物(Ⅰ)的藥用組合物是很困難的。更詳細地講，由于化合物(Ⅰ)是極難溶解的化合物，僅僅通過將化合物(Ⅰ)與溶劑混合很難得到澄清的化合物(Ⅰ)的溶液，這使獲得注射溶液和配制溶液成為迫切的需求。即使通過改變條件如溫度等，可獲得澄清的化合物(Ⅰ)的溶液，但是長時間儲存后，化合物(Ⅰ)的溶液將發生降解或混濁，從而導致溶液中或化合物(Ⅰ)的冷凍干燥注射劑中化合物(Ⅰ)含量的降解或不均一。本發明要解決的其中之一的問題就是保持化合物(Ⅰ)在水溶液載體中的穩定性。根據現有工藝方法制備凍干產物有時會引起質量上的問題。這些問題包括某些組分與水相疊合(coinciding)升華、凍干產物中成分量降低、產物部分固化，凍干制劑碎裂和皺縮并且在塊物(cake)頂上有一薄層、粘附于瓶上部或濺落以及使冷凍干燥的塊狀物表觀不均勻。藥劑師等需要將注射劑在使用之前溶于輸注溶液中，例如，凍干注射劑應具有較好的再溶解性質。本發明要解決的另一問題是提供具有均勻的外觀、好的再溶解性和儲存期間物質不降解的優良的化合物(Ⅰ)的冷凍干燥制劑。概述本發明者研究化合物(Ⅰ)制劑的各種添加劑以解決以上所提及的問題。因此，通過在化合物(Ⅰ)的制劑中加入助溶劑，優選與穩定劑一起加入，本文發明者發現了具有理想質量的改進的化合物(Ⅰ)的制劑，如該化合物不降解、穩定性好、外觀均勻并且再溶解性能好。本發明提供儲存穩定的化合物(Ⅰ)的固體冷凍干燥組合物，其適用于制成液體以用于治療哺乳動物的炎癥(包括膿毒病)。本發明還提供用于治療哺乳動物的炎癥(包括膿毒病)的化合物(Ⅰ)的凍干組合物的水溶液。本發明還提供制備儲存穩定并易于重新配制的化合物(Ⅰ)的凍干組合物的方法。本發明還提供使用化合物(Ⅰ)的凍干組合物治療哺乳動物的炎癥的改良方法。本發明還提供單位劑量的Ⅳ袋或瓶，其裝有適于直接注射給哺乳動物，用于治療炎癥(包括膿毒病)的溶于水溶性介質中的一定濃度的化合物(Ⅰ)的凍干組合物。本發明提供裝有化合物(Ⅰ)的凍干固體組合物的劑量濃縮液(dose-concentrate)的密封的包裝容器。詳述定義術語“凍干組合物”是指通過本發明方法制備的物質的固體凍干組合物，其包括主要成分(1)[[3-(2-氨基-1,2-二氧乙基)-2-乙基-1-(苯甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸鈉；(2)助溶劑；和(3)穩定劑。術語“活性成分”(也稱“化合物(Ⅰ))是指[[3-(2-氨基-1,2-二氧乙基)-2-乙基-1-(苯甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸鈉，該化合物由下式代表術語“哺乳動物“包括人和有關的重要獸類動物、馴化的四足動物，如猴子、狗、貓、馬、羊、豬、山羊和牛。術語“炎癥”指疾病，如腸炎、膿毒病、敗血性休克、成人呼吸窘迫癥、胰腺炎、外傷引起的休克、支氣管哮喘、過敏性鼻炎、類風濕性關節炎、囊性纖維化、中風、急性支氣管炎、慢性支氣管炎、急性細支氣管炎、慢性細支氣管炎、骨關節炎、痛風、脊椎關節炎、關節強硬脊椎炎、Reiter氏綜合征、關節病性牛皮癬、腸病性(enterapathric)脊椎炎、幼年性關節炎或幼年性關節強硬脊椎炎、反應性關節炎、感染或感染后關節炎、gonoccocal關節炎、結核性關節炎、病毒性關節炎、真菌性關節炎、梅毒性關節炎、Lyme氏疏螺旋體病、與“脈管炎癥”有關的關節炎、結節性多動脈炎、高敏感性脈管炎、Luegenec氏肉芽腫病、多肌痛性風濕病、關節細胞動脈炎、鈣結晶沉積關節病、假性痛風、非關節性風濕病、粘液囊炎、腱鞘炎(tenosynomitis)、上髁炎(網球肘)、腕管綜合征(carpaltunnelsyndrome)、重復使用損傷(打字)、其它類型的關節炎、神經病性關節病(charco和關節)、關節積血、Henoch-Schonlein紫癜、骨關節病、多中心網狀組織細胞核情況(reticulohistiocytosis)、與某些疾病有關的關節炎、suocoilosis、血色素沉著癥、鐮狀細胞病和其它血紅蛋白病、血脂蛋白過高癥、血丙種球蛋白過少、甲狀旁腺機能亢進、肢端巨大癥、家族性地中海病、Behat氏病、全身性紅斑狼瘡或者由脂肪酸和花生四烯酸級聯(cascade)及其有害產物釋放介導的sPLA2誘發或維持的疾病。術語“崩潰溫度(collapsetemperature)”指無定形固體的玻璃化轉變溫度或者晶形固體低共熔溫度。崩潰溫度是該產物未完全冷凍以上的溫度。冷凍干燥顯微鏡能夠測定升華過程中冷凍溶液開始失去其剛性結構時的溫度。對于[[3-(2-氨基-1,2-二氧乙基)-2-乙基-1-(苯甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸鈉冷凍溶液，猝滅前崩潰溫度在大約-33℃下測定，而猝滅后崩潰溫度在大約-13℃下測定。術語“助溶劑”是指螯合劑。“有效量的助溶劑”是指一定量的能使活性成分形成適于醫療用途的穩定水溶液的助溶劑。術語“穩定劑”是指固體糖或糖-醇。“有效量的穩定劑”是指一定量的能使該凍干組合物易溶解形成適于醫療用途的水溶液的穩定劑。術語“劑量濃縮液”是指藥物制劑的溶液。可將該劑量濃縮液置于容器中，在該容器中可通過加入含水性溶劑形成藥物制劑或者可以取出外部處理。該劑量濃縮液可直接應用，但是一般被進一步稀釋成單位劑量濃度以給予哺乳動物。可以根據本發明的方法，應用該劑量濃縮液的總體積或者其等份體積制備供治療之用的單位劑量。術語“活性成分的相當(equivalent)的酸”或“化合物(Ⅰ)的相當的酸”指[[3-(2-氨基-1,2-二氧乙基)-2-乙基-1-(苯甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸。在本說明書中，活性成分的重量用[[3-(2-氨基-1,2-二氧乙基)-2-乙基-1-(苯甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸鈉的實際重量表示。但在表示活性成分的比例(重量％)中，根據活性成分的相當的酸計算。因此，計算該相當的酸的相當重量，必須將活性成分的重量乘以因子100/105.8。制備該活性成分的方法
技術領域：
：本發明中所用的化合物(Ⅰ)可通過JP-A7285933中所述的已知方法合成，并且可以以其任何狀態，包括晶體、非晶體、水合物、溶劑化物或這些形式的混合物，制成本發明的組合物或制劑。類似地，化合物(Ⅰ)可通過美國專利No.5,654,326中所述的合成方案制備；該專利公開內容結合到本發明中作為參考。制備化合物(Ⅰ)的另一方法在美國專利申請號09/105381，1998年6月26日申請中說明，題目“4-取代1H-吲哚-3-乙醛酰胺(glyoxyamides)的制備方法”，其全部公開內容結合到本發明中作為參考。以下步驟(A)-(F)說明化合物(Ⅰ)的合成制備[[3-(2-氨基-1,2-二氧乙基)-2-乙基-1-(苯甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸鈉，該化合物由下式表示步驟A．制備2-乙基-4-甲氧基-1H-吲哚將140mL(0.18mol)1.3M仲丁基鋰的環己烷溶液慢慢加入到N-叔丁氧基羰基-3-甲氧基-2-甲基苯胺(21.3g,0.09mol)的250mLTHF中，期間用干冰-乙醇浴保持溫度低于-40℃。移去外浴，使溫度升至0℃，然后換上外浴。當溫度冷卻至-60℃后，滴加18.5g(0.18mol)N-甲氧基-N-甲基丙酰胺的等體積THF液。將該反應混合液攪拌5分鐘，除去冷卻外浴，再攪拌18小時。然后倒入300mL乙醚和400mL0.5NHCl的混合液中。分離有機層，用水、鹽水洗滌，經MgSO4干燥，減壓濃縮得到25.5g粗品1-[2-(叔丁氧基酰氨基)-6-甲氧基苯基］-2-丁酮。將該物質溶解于250mL二氯甲烷和50mL三氟乙酸中，攪拌共17小時。減壓濃縮該混合液，向該殘留的油狀液中加入乙酸乙酯和水。分離乙酸乙酯，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮。殘留物經硅膠層析三次，用20％EtOAc/己烷洗脫得到13.9g的2-乙基-4-甲氧基-1H-吲哚。步驟B．制備2-乙基-4-甲氧基-1-(苯甲基)-1H-吲哚將2-乙基-4-甲氧基-1H-吲哚(4.2g,24mmol)溶解于30mLDMF中，加入960mg(24mmol)的60％NaH/礦油。1.5小時后，加入2.9mL(24mmol)芐基溴。4小時后，將該混合液用水稀釋，用乙酸乙酯提取2次。將合并的乙酸乙酯用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，減壓濃縮。殘留物經硅膠層析，用20％EtOAc/己烷洗脫得到3.1g(收率49％)的2-乙基-4-甲氧基-1-(苯甲基)-1H-吲哚。步驟C．制備2-乙基-4-羥基-1-(苯甲基)-1H-引哚通過將3.1g(11.7mmol)的2-乙基-4-甲氧基-1-(苯甲基)-1H-吲哚用48.6mL1MBBr3的二氯甲烷溶液處理，室溫下攪拌5小時，使其發生O-脫甲基化反應，然后減壓濃縮。將殘留物溶于乙酸乙酯中，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。減壓濃縮后，殘留物經硅膠層析，用20％EtOAc/己烷洗脫得到1.58g(收率54％)的2-乙基-4-羥基-1-(苯甲基)-1H-吲哚。步驟D制備[[2-乙基-1-(苯甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸甲酯將2-乙基-4-羥基-1-(苯甲基)-1H-吲哚(1.56g,6.2mmol)加入到248mg(6.2mmol)的60％NaH/礦油的20mLDMF混合液中，攪拌0.67小時。然后，加入0.6mL(6.2mmol)溴乙酸甲酯，繼續攪拌17小時。將該混合液用水稀釋，并用乙酸乙酯提取。將該乙酸乙酯溶液用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，減壓濃縮。殘留物經硅膠層析，用20％EtOAc/己烷洗脫得到1.37g(收率69％)的[[2-乙基-1-(苯甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸甲酯。步驟E．制備[[3-(2-氨基-1,2-二氧乙基)-2-乙基-1-(苯甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸甲酯將草酰氯(0.4mL,42mmol)加入到1.36g(4.2mmol)的[[2-乙基-1-(苯甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸甲酯的10mL二氯甲烷溶液中，將該混合液攪拌1.5小時。減壓濃縮該混合液，將殘留物溶于10mL二氯甲烷中。通入無水氨0.25小時，將該混合液攪拌1.5小時，減壓蒸發。將殘留物與20mL乙酸乙酯攪拌，過濾該混合液。將該濾液濃縮得到1.37g的[[3-(2-氨基-1,2-二氧乙基)-2-乙基-1-(苯甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸甲酯和氯化銨的混合物。該混合物熔點172-187℃。步驟F．制備[[3-(2-氨基-1,2-二氧乙基)-2-乙基-1-(苯甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸，鈉鹽將788mg(2mmol)的[[3-(2-氨基-1,2-二氧乙基)-2-乙基-1-(苯甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸甲酯、10mLNaOH和30mLMeOH的混合物加熱回流0.5小時，室溫下攪拌0.5小時，然后減壓濃縮。本發明藥用組合物和凍干組合物中成分的特性和比例本發明一實施方案是包含作為活性成分的化合物(Ⅰ)和有效量的作用為螯合劑的助溶劑的藥用組合物，該助溶劑優選是例如至少一種選自檸檬酸、乙二胺四乙酸(如，EDTA二鈉)、多磷酸及其它們的鹽，更優選檸檬酸鈉。多磷酸及其它們的鹽的實例是如第六版日本食物添加劑標準中所述的多磷酸鉀，以及如第六版日本食物添加劑標準或者第二版日本化妝品成分標準中所述的多磷酸鈉。現有的檸檬酸鈉有檸檬酸三鈉無水物、檸檬酸三鈉二水合物和檸檬酸三鈉五水合物，但最常用和最優選的是檸檬酸三鈉無水物(分子量294.10)。該助溶劑的量隨助溶劑的種類以及化合物(Ⅰ)的濃度而變化，可以大約為1％-400％(w/w)，優選1％-200％(w/w)，最優選1％-100％(w/w)的化合物(Ⅰ)的相當的酸量。對于用檸檬酸鈉的藥用組合物，該助溶劑的量為10％-150％(w/w)，更優選25％-100％(w/w)的化合物(Ⅰ)的相當酸的量。以上段落中所述的藥用組合物還優選具有有效量的穩定劑。該穩定劑是至少一個選自固體糖和糖醇的藥學上可接受的化合物，更優選是至少一個選自甘露醇、木糖醇、山梨醇、葡萄糖、果糖、乳糖和麥芽糖的化合物。甘露醇是最優選的穩定劑成分。該穩定劑的量隨穩定劑的種類以及化合物(Ⅰ)的濃度而變化，可以為40％-500％(w/w)，優選50％-300％(w/w)，更優選50％-250％(w/w)，最優選50％-200％(w/w)的化合物(Ⅰ)的相當酸的量。在不改變本發明的目的和范圍時，可向本發明的制劑中任選加入其它藥學上可接受的添加劑。在制備本發明的注射溶液時，可向其中加入等滲劑、潤滑劑或者其它添加劑。除活性成分、助溶劑和穩定劑外，以上所述的藥用組合物優選是無鹽的。本發明的凍干組合物以上部分中所述的藥用組合物優選是冷凍干燥的。最優選通過應用化合物(Ⅰ)崩潰溫度性質，用猝滅步驟制備該凍干組合物。該凍干組合物含有大約1％-200％(w/w)的化合物(Ⅰ)的相當酸的量的助溶劑。該助溶劑的比例與以上藥用組合物部分中所提到的比例相同。當該助溶劑是EDTA二鈉(或其酸或其它鹽)時，優選用量為約1％-15％(w/w)的化合物(Ⅰ)的相當酸的量。當該助溶劑是檸檬酸三鈉二水合物時，優選用量為約10％-100％的活性組分的量。穩定劑的性質和比例與以上藥周組合物部分中所提到的那些相同。甘露醇是最優選的本發明凍干組合物的穩定劑成分。表1中列出本發明個別優選的凍干組合物(單位毫克)表1A.I.=活性成分，檸檬酸鈉=檸檬酸三鈉二水合物，EDTA=乙二胺四乙酸二鈉鹽除含有的式(Ⅰ)化合物、助溶劑和穩定劑外，本發明的固體凍干組合物優選是基本無鹽的。可以將凍干的藥用組合物溶解于藥學上可接受的載體中，如無菌水、任選鹽水的無菌水和/或含有糖的無菌水中。例如，靜脈注射時，可將本發明組合物以2mg/ml的濃度溶解于4％葡萄糖/0.5％檸檬酸鈉水溶液中。此處所用術語“凍干組合物”、“藥用組合物”和“藥用制劑”是指日本藥典“Generalurlesforpreparation”中所述的所有制劑，優選溶液劑和注射劑，更優選注射溶液和注射用凍干制劑。制備本發明凍干組合物的方法本發明的凍干組合物指通過冷凍干燥含有化合物(Ⅰ)的溶液，任選經過加熱處理過程并且在高真空下干燥除去升華水而制備的制劑。這種凍干制劑包括以上所提的注射用凍干制劑。該凍干制劑可以通過常用的方法制備，包括塔盤(tray)冷凍干燥、噴霧冷凍干燥和管瓶冷凍干燥的方法。管瓶冷凍干燥較適于制備以下所述的本發明的多劑量單位劑型。為通過本發明方法獲得化合物(Ⅰ)的溶液，可將化合物(Ⅰ)、助溶劑和溶劑混合，然后攪拌至混合液澄清。溶劑優選是水性溶劑，如日本藥典中所述的水、純凈水、注射用水、等滲氯化鈉溶液或葡萄糖注射液，優選無鹽的水性溶劑，如水、純化水、注射用水或葡萄糖注射液。另外，形成本發明組合物溶液的適當的溶劑為美國藥典(1995,ISBN0195-7996)中所述說明的任何注射溶液，例如“無菌注射用水”、“葡萄糖氯化鈉注射液”、“葡萄糖注射液”、“甘露醇注射液”或“甘露醇氯化鈉注射液”。為通過本發明方法得到化合物(Ⅰ)的凍干制劑，首先要制備冷凍干燥前的處理溶液。該冷凍干燥前的處理溶液可以通過將化合物(Ⅰ)、助溶劑和溶劑混合并攪拌制備，優選該混合液變為澄清為止。對于向溶劑中加入成分的次序，特別優選首先將助溶劑和穩定劑溶解，然后再溶解化合物(Ⅰ)。該溶劑優選是水性溶劑，如以上提出的溶劑和日本藥典中所述的溶劑，更優選無鹽的水性溶劑，如水、注射用水或葡萄糖注射液。化合物(Ⅰ)的冷凍干燥前的處理溶液可以包含的化合物(Ⅰ)的濃度為大約0.5％-2％(w/w)。如果要求，可將冷凍干燥前的處理溶液進行過濾。該過濾方法包括，例如，在制備注射劑、滅菌濾液和/或冷凍干燥前將處理液超濾以除去冷凍干燥前處理溶液中微生物或其它污染物質。如果要求，可將冷凍干燥前的處理溶液進行分裝處理。該分裝處理包括，例如，在管制瓶冷凍干燥情況下的分裝過程，該過程是將冷凍干燥前適當體積的處理溶液分裝入瓶中，使該瓶裝有一定濃度的化合物(Ⅰ)以便使瓶裝產品含有所要求量的化合物(Ⅰ)。冷凍干燥過程如下進行該凍干組合物優選通過順序進行加熱和冷卻過程制備。制備凍干組合物的過程包括以下連續步驟a)將含有[[3-(2-氨基-1,2-二氧乙基)-2-乙基-1-(苯甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸鈉、助溶劑和穩定劑的凍干組合物成分溶于水性溶劑中；b)將(a)步驟生成的溶液冷卻至溫度-33℃以下；c)將(b)步驟的產物加熱至溫度-33℃以上；d)將(c)步驟的產物冷卻至溫度-33℃以下；e)將(d)步驟的產物加熱至溫度-13℃以上，在低于一個大氣壓下(subatmospheric)，在足夠時間內從水性溶劑中除去水，得到固體凍干產物。步驟(a)是優選通過在水性溶劑中溶解[[3-(2-氨基-1,2-二氧乙基)-2-乙基-1-(苯甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸鈉；選自檸檬酸、乙二胺四乙酸、多磷酸及其它們鹽的助溶劑，其量為化合物(Ⅰ)的相當酸量的1-100％(w/w)；和選自甘露醇、木糖醇、山梨糖醇、葡萄糖、果糖、乳糖和麥芽糖的穩定劑進行，其量為化合物(Ⅰ)的相當酸量的50-200％(w/w)。另外，步驟(b)、(c)、(d)和(e)每步都優選進行至少0.5小時，步驟(e)在低于133Pa(1000毫米汞柱)下的低于一個大氣壓下進行。在該冷凍干燥過程中優選的參數是其中將化合物(Ⅰ)冷凍至-35℃至-45℃的那些參數。該冷卻步驟優選進行2-4小時。以下稱此步驟為“初步冷凍過程”。如果要求，其后可將初步冷凍過程所得到的冷凍溶液溫熱至-5℃至-25℃，優選-10℃至-20℃。該溫熱步驟進行3小時以上，優選5-10小時。以下稱此步驟為“加熱處理過程”。將加熱處理過程中得到組合物再冷凍，優選冷凍至-35℃至-45℃。該冷卻步驟優選進行2-4小時。以下稱此步驟為“再冷凍過程”。根據本領域技術人員熟悉的方法，在高真空下，將經過初步冷凍過程、加熱處理過程和再冷凍過程獲得的組合物干燥除去升華水。如此得到本發明的凍干制劑。如果要求，可進行兩步溫度和真空度不同的干燥步驟以完全除去水。以下稱此步驟為“干燥過程”。如果進行兩步干燥過程，這兩步干燥過程稱為“初步干燥”過程和“第二次干燥”過程。冷凍過程除去大多數原先存在的水，但是終產物凍干組合物可含有某些游離水。一般地，該水量可為0.5％-5％(重量)。更常見該水量的范圍更一般為0.8％-2％(重量)。本發明的劑量濃縮液和單位劑量形式本發明制劑的劑量濃縮液形式是標準處理間隔時間(standardtreatmentinterval)(如12或24小時)內使用的一定量本發明凍干藥物制劑的密封包裝物。該劑量濃縮液形式可通過將足以治療哺乳動物1小時至1周，優選4-48小時期間的量的凍干組合物裝于容器(如玻璃或塑料瓶、管制瓶、安瓿)中制備。該容器還優選含有足夠的空間以允許(ⅰ)加入水性溶劑(ⅱ)凍干組合物在加入的水性溶劑中攪拌和完全形成溶液所必需額外的空間。該容器可裝置有可穿透的頂端，例如，橡膠密封墊，以便可以通過皮下注射器透過該密封墊加入水性溶劑，然后通過相同的方法取出該濃縮液。劑量濃縮液形式的實例是容積為約10-100毫升、裝有50-5000毫克凍干藥用組合物的玻璃管制瓶。一具體的實例為含有凍干藥用組合物的具有橡膠密封墊的20ml玻璃瓶，其中該組合物包含105.8mg化合物(Ⅰ)、50mg檸檬酸三鈉二水合物和200mg甘露醇。固體組合物上的空間具有能夠供加入溶劑(如無菌注射用水)以及攪拌整體內容物的空間的安瓿空間。向該劑量濃縮液形式中加入水性溶劑而得到液體濃縮液，然后一般可通過取出等份部分或者按下列部分提出的稀釋全部內容物而形成單位劑量的液體藥用制劑。本發明的單位劑量將在劑量濃縮液容器中形成的凍干組合物的濃縮溶液(一般為亮黃色)加入到含有適當水性溶劑的Ⅳ(靜脈注射)容器中。有用的溶劑是以上所提的標準注射溶液(如5％葡萄糖或無菌注射用水等)。典型的單位劑量Ⅳ袋是常用的具有注入和輸出方法并具有標準(如250ml和500ml)容積的玻璃或塑料容器。以能達到濃度為每ml約0.05-2.0mg化合物(Ⅰ)，優選0.2-0.8mg/ml的量，向單位劑量Ⅳ袋中加入該凍干藥用制劑的濃縮溶液。在不改變本發明的目的和范圍下，可向本發明的凍干制劑中加入其它藥學上可接受的添加劑。在該凍干制劑用于注射之用時，可向其中加入等滲劑、潤滑劑或者其它添加劑。應用本發明組合物治療炎癥應用該凍干組合物治療的改進方法如下本發明稀釋的制劑可以通過皮下或肌內注射或者通過靜脈注射給予。靜脈注射是治療哺乳動物的優選給藥方式，特別是在緊急情況下，它具有起效快和快速進入循環系統的優點。本發明凍干藥用劑型優選用適于注射的水性溶劑和給予哺乳動物所制備的液體單位劑量形式(即Ⅳ袋)稀釋。兒科使用的Ⅳ袋容積為100ml。可清楚了解的是根據患者年齡和狀況的不同，有必要改變常規的劑量。所以，本發明所給予能達到治療或預防作用的化合物的具體劑量將根據具體的周圍環境而確定，包括例如所給予的化合物、給藥途徑和所治療的疾病。一般的日劑量含有約每kg體重0.01-50mg本發明活性成分的無毒化合物(Ⅰ)劑量水平。本發明治療或預防膿毒病的方法是給予需要此治療的哺乳動物治療上有效量的通過溶解本發明藥用制劑制備的溶液。對于膿毒病患者的給藥可以是連續或間斷給藥。決定是否開始治療膿毒病將依據膿毒病臨床特征表現或者顯示膿毒串聯(cascade)(包括腎病并發癥或者血凝結異常或者多器官衰竭)發生的實驗室試驗而決定。典型的臨床特征為發熱、發冷、心動過速、呼吸急促、精神狀態變化、低溫、高溫、呼吸速率或心率加快或抑制、白細胞計數增加或降低以及低血壓。這些及其它癥狀在本領域都是非常熟悉的，見標準參考資料，如Harrison’sPrinciplesofInternalMedicine(ISBN0-07-032370-4)1994,p511-515。確定治療時間的期限可根據從商業上提供的試驗的標準臨床試驗結果或者能確定膿毒病癥狀的檢測儀器決定。本發明方法可通過連續或間斷地給予治療上有效量的由凍干藥用制劑制備的溶液直至達到有效地治療膿毒發作來進行。可進行多至總數約60日的給藥，其優選療程持續達10日。本發明方法的結束治療的決定可根據從商業上提供的試驗的標準臨床試驗結果或者檢測儀器或者膿毒病臨床癥狀特征的消失確定。膿毒病復發時可以恢復進行治療。根據本發明方法和組合物還可以成功治療兒科形式的膿毒病。實施例通過以下實施例(但不限于此)更詳細地說明和解釋本發明實施例1和對照實施例1通過將表2中的物質與溶劑混合制備溶液，該溶劑是體積為20ml的注射用水、等滲氯化鈉溶液和5％葡萄糖溶液中的一種。表2溶液的制備A.I.=活性成分，檸檬酸鈉=檸檬酸三鈉二水合物溶解度試驗是在制備后立即以及室溫下儲備24小時后通過裸眼觀測該溶液來進行的。表3-5給出溶解度的試驗結果。每個表中清楚顯示出加入本發明的助溶劑能改善該溶液的穩定性。表3溶解度試驗結果(向表1的制劑中加入20ml水1)表4溶解度試驗結果(向表1的制劑中加入20ml鹽水2)表5溶解度試驗結果(向表1的制劑中加入20ml葡萄糖溶液3)表2-4中的符號意義0…極好的溶液△溶液中稍稍出現結晶1水…注射用水2鹽水…等滲氯化鈉溶液3葡萄糖溶液…5％葡萄糖溶液實施例2-4＆對照實施例2冷凍干燥前的處理溶液通過將表6的物質溶解于如日本藥典中所述的溶劑的注射用水中制備，化合物(Ⅰ)的濃度為10mg/g。將冷凍干燥前的處理溶液用孔隙尺度為0.22微米的濾膜無菌過濾，然后分裝于玻璃管制瓶中。冷凍干燥如下進行。在-40℃下進行初步冷凍過程3小時，在-10℃下進行加熱處理過程10小時，再在-40℃下進行再冷凍過程3小時。然后，在0℃、2.0Pa下進行初步干燥過程24小時，再在60℃、2.0Pa下進行第二次干燥過程5小時。由此得到實施例2-4的凍干制劑。為進行對照，根據方法制備對照實施例2的制劑，該方法其中過濾過程和分裝過程與實施例2-4相同，冷凍干燥與實施例2-4的過程基本相同，其在-40℃下進行初步冷凍過程3小時，在10℃、10Pa下進行初步干燥步驟20小時，再在40℃、2.0Pa下進行第二次干燥步驟5小時。表6凍干制劑的組成(1瓶)A.I.=活性成分，檸檬酸鈉=檸檬酸三鈉二水合物表7顯示在實施例2-4中冷凍干燥后即刻觀察到的冷凍干燥濾餅的外觀。加入本發明穩定劑得到良好的凍干制劑，其中該冷凍干燥濾餅沒有碎裂部分、皺縮部分以及濾餅表面上的薄層部分，并且該濾餅未有許多變色。表7冷凍干燥后的濾餅的外觀1該濾餅沒有碎裂部分、皺縮部分以及濾餅表面上的薄層部分。對10瓶實施例4中得到的凍干制劑中的化合物(Ⅰ)進行含量均勻度試驗。通過HPLC方法測定化合物(Ⅰ)的含量。每瓶中化合物(Ⅰ)的含量相當于化合物(Ⅰ)理論量值的99.0％-103.4％，它表明本發明的凍干制劑具有滿意的含量均勻度。測定10瓶實施例4中得到的凍干制劑的重新配制時間。該再重新配制時間的測定通過向該樣品中加入10ml注射用水，以200次/mm振搖所得到的溶液，然后測定至樣品完全溶解的時間來進行。該重新配制時間為7-18秒。本發明凍干制劑具有滿意的重新配制性質。在60℃下，將三只密封的實施例2的凍干制劑的小瓶進行2個月的存儲穩定性試驗。3瓶中殘余含量百分率都相當于冷凍干燥后最初值的99％。本發明凍干制劑具有滿意的存儲穩定性。表8凍干制劑的組成(1瓶)<tablesid="table8"num="008"><table>實施例5A.I.127mg檸檬酸鈉36mg甘露醇180mg</table></tables>A.I.=活性成分，檸檬酸鈉=檸檬酸三鈉二水合物冷凍干燥如下進行。在-40℃下進行初步冷凍步驟3小時，在-10℃下進行加熱處理步驟10小時，再在-40℃下進行再冷凍過程3小時。然后，在0℃、10Pa下進行初步干燥步驟60小時，再在60℃、4Pa下進行第二次干燥步驟5小時。由此得到實施例5的凍干制劑。在實施例5中冷凍干燥后即刻觀測該濾餅的外觀。該濾餅沒有碎裂部分、皺縮部分以及濾餅表面上的薄層部分，該濾餅的顏色為暗白色。對10瓶實施例5中得到的凍干制劑中的化合物(Ⅰ)進行含量均勻度試驗。通過HPLC方法測定化合物(Ⅰ)的含量。每瓶中化合物(Ⅰ)的含量相當于化合物(Ⅰ)理論量值的99.8％-101.3％，它表明本發明的凍干制劑具有滿意的含量均勻度。測定10瓶實施例5中得到的凍干制劑的重新配制時間。該重新配制時間的測定通過向該樣品中加入10ml注射用水，以200次/mm振搖所得到的溶液，然后測定至樣品完全溶解的時間來進行。該再溶解時間為22-29秒。本發明凍干制劑具有滿意的重新配制性質。(B)向該容器中先加入甘露醇和檸檬酸鈉，然后攪拌至完全溶解。(C)向該容器中加入[[3-(2-氨基-1,2-二氧乙基)-2-乙基-1-(苯甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸鈉，然后攪拌至完全溶解。(D)加入剩余的水使最終活性成分的濃度達到10mg/ml。如下進行冷凍干燥的連續過程1．將含有10ml本實施例以上步驟中制備的處理溶液的可密封瓶置于預冷至0℃的冷凍干燥器的隔板上。2．當將全部管瓶置于隔板上后，將隔板溫度冷卻至-40℃。當所檢測管瓶的產品溫度為-40℃時，即將管瓶在此溫度下保持2小時。3．然后將隔板溫度升至-10℃以使該冷凍的溶液猝滅。該溫度在能使溶質結晶的該溶液的崩潰溫度之上。在該溫度下，將產物保持數小時。4．短時間內再將隔板溫度降至-40℃以完成猝滅(溫度循環)過程。5．然后通過將隔板溫度增加至0℃并將干燥箱壓力降低至約13.3Pa(100毫米汞柱)開始初步干燥。初步干燥24小時以上直至產物的溫度開始升高，其表明已除去了溶劑水。6．通過在保持干燥箱壓力13.3Pa(100毫米汞柱)下，將干燥箱溫度升至28℃并且保持數小時實現第二次干燥。產物為灰白色的固體未碎裂餅。如以上實施例所示，本發明提供了穩定并具有良好重新配制性質的化合物(Ⅰ)的藥用組合物。本領域技術熟練人員清楚了解對于本發明組合物和方法可以進行各種修飾和改變。因而表明本發明包括這些修飾和改變，只要這些修飾和改變在增補的權利要求及其等價物的范圍之內。特地將以上所引用的所有出版物的公開內容全部結合到本發明中作為參考，其程度如將每個文獻分別結合作為參考相同。權利要求1．藥用組合物，它含有作為活性成分的[[3-(2-氨基-1,2-二氧乙基)-2-乙基-1-(苯甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸鈉和作為助溶劑的螯合劑。2．根據權利要求1的藥用組合物，其中所述螯合劑是至少一個化合物，其選自檸檬酸、乙二胺四乙酸、多磷酸以及它們的鹽。3．根據權利要求1的藥用組合物，其中所述螯合劑是檸檬酸鈉。4．根據權利要求1的藥用組合物，其中所述螯合劑的量是活性成分的相當的酸量的1％-400％(w/w)。5．根據權利要求3的藥用組合物，其中檸檬酸鈉的量是活性成分的相當酸量的10％-100％(w/w)。6．根據權利要求1的藥用組合物，除所述活性成分和該螯合劑外，它是無鹽的。7．根據權利要求1的藥用組合物，它是通過冷凍干燥的。8．根據權利要求7的藥用組合物，它還包括至少一個作為穩定劑的化合物，其選自固體糖和糖-醇。9．根據權利要求8的藥用組合物，其中所述穩定劑是至少一個化合物，其選自甘露醇、木糖醇、山梨醇、葡萄糖、果糖、乳糖和麥芽糖。10．根據權利要求8的藥用組合物，其中所述穩定劑是甘露醇。11．根據權利要求8的藥用組合物，其中所述穩定劑的量是活性成分的相當酸量的40％-500％(w/w)。12．凍干組合物，它含有作為活性成分的[[3-(2-氨基-1,2-二氧乙基)-2-乙基-1-(苯甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸鈉、穩定劑和助溶劑。13．權利要求12的組合物，其中所述助溶劑是至少一個化合物，其選自檸檬酸、乙二胺四乙酸、多磷酸以及它們的鹽；而所述穩定劑是選自甘露醇、木糖醇、山梨醇、葡萄糖、果糖、乳糖和麥芽糖中的至少一個化合物。14．權利要求12的組合物，其中所述助溶劑是檸檬酸鈉二水合物或EDTA二鈉；所述穩定劑是甘露醇。15．權利要求12的組合物，其中相對于每活性成分的相當酸的量，所述穩定劑以1％-100％(w/w)量存在，助溶劑以50％-200％(w/w)量存在。16．權利要求12或13或14或15中任一項的組合物，除活性成分、助溶劑和穩定劑外，它是無鹽的。17．制備本發明藥物制劑的方法，其包括步驟a)將含有[[3-(2-氨基-1,2-二氧乙基)-2-乙基-1-(苯甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸鈉、助溶劑和穩定劑的組合物溶于水性溶劑中；b)將(a)步驟生成的溶液冷卻至溫度約-33℃以下；c)將(b)步驟產物加熱至溫度約-33℃以上；d)將(c)步驟產物冷卻至溫度約-33℃以下；e)將(d)步驟產物加熱至溫度約-13℃以上，在低于一個大氣壓下(subatmospheric)，用足夠時間從水性溶劑中除去水，得到固體凍干產物。18．權利要求17的方法，其中步驟(a)通過將下列物質溶解于水性溶劑中進行[[3-(2-氨基-1,2-二氧乙基)-2-乙基-1-(苯甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸鈉；選自檸檬酸、乙二胺四乙酸、多磷酸以及它們的鹽的助溶劑，其量是活性成分的相當酸量的1％-100％(w/w)；選自甘露醇、木糖醇、山梨醇、葡萄糖、果糖、乳糖和麥芽糖的穩定劑，其量是活性成分所述的相當酸量的50％-200％w/w)。19．權利要求17的方法，其中步驟(b)、(c)、(d)和(e)每一步都至少進行半小時，步驟(e)在低于133Pa(1000毫米汞柱)下的低于一個大氣壓下進行。20．根據權利要求17方法制備的凍干組合物。21．抑制由脂肪酸釋放介導的sPLA2的方法，它包括使sPLA2與從權利要求1或12的組合物中制備的治療有效量的溶液接觸。22．治療哺乳動物，包括人的緩解炎癥病理作用的方法，其中該方法包括非腸道給予該哺乳動物治療有效量的從權利要求1或12的組合物中制備的溶液。23．治療或預防膿毒病的方法，其包括給予治療有效量的含有以下成份的水溶性溶液a)[[3-(2-氨基-1,2-二氧乙基)-2-乙基-1-(苯甲基)-1H-吲哚-4-基]氧基]乙酸鈉，b)檸檬酸三鈉二水合物，和c)甘露醇。24．用于制備治療易患膿毒病哺乳動物，包括人的藥物的權利要求1或12的凍干組合物。25．包含權利要求1或12凍干組合物的劑量濃縮包裝封閉容器，該容器具有足夠的空間以加入足量體積的水性溶劑形成所述制劑的濃縮溶液。26．在治療炎性疾病中適于裝有供靜脈注射液體的單位劑量Ⅳ袋或Ⅳ瓶，其中該改良方法包括用從權利要求1或12的組合物中制備的水性溶液灌裝所述袋。27．根據本文任何實施例說明的用于治療炎性疾病的凍干組合物。全文摘要本文說明含有[[3－(2－氨基－1,2－二氧乙基)－2－乙基－1－(苯甲基)－1H－吲哚－4－基]氧基]乙酸鈉、助溶劑和穩定劑凍干藥用組合物。這些組合物易于儲存,并易溶于水性介質而制成注射液,以用于治療膿毒病等。文檔編號A61P31/04GK1299277SQ99805662公開日2001年6月13日申請日期1999年3月2日優先權日1998年3月3日發明者W·L·康菲爾,H·泰申請人:鹽野義制藥株式會社,伊萊利利公司