芳基羧酸和四唑衍生物的制作方法

專利名稱：芳基羧酸和四唑衍生物的制作方法
技術領域：
本發明涉及前列腺素I2(IP)受體調節劑，尤其是IP受體激動劑，特別是某些芳基羧酸和芳基四唑衍生物，含有它們的藥物組合物和使用它們作為治療劑的方法。
前列腺環素(PGI2)是前列腺素家族中的一員，而且是IP受體的內源激動劑配體。PGI2對整個機體具有巨大的生理和藥理效果，而且對于心血管系統，特別是血管、包括血小板的多種血細胞、腎、自主神經和炎性及免疫系統的組分具有顯著的作用。例如，在心血管系統中，PGI2產生極深的血管舒張，最終導致血壓過低。它對于非血管平滑肌也起作用，能夠引起支氣管擴張、子宮松弛和胃腸平滑肌的收縮。此外，它能降低pH、胃蛋白酶的含量和整個胃酸的分泌。在血液中，PGI2能抑制血小板的聚集并有利于無傷血管壁的抗血栓。使用穩定的PGI2模擬物發現也能抑制在形成血栓的表面如動脈粥樣硬化斑上血小板的沉積。在腎中，PGI2能激起多尿、尿鈉排泄、尿鉀排泄以及引起腎皮層中腎素的分泌。
由于PGI2的不穩定性，研制了許多化學獨特的類似物，但這些類似物缺乏受體選擇性和/或由于生物轉化而很快降解。目前，需要一種有效的、較好耐受性的、在藥動學上適合長期、方便(即QD，BID，TID)口服的高選擇性的IP受體激動劑。本發明的化合物和含有它們的組合物能夠滿足這一需要并能用于治療多種疾病，具有較小的副作用。
美國專利3,649,637(Howes等人)提到某些苯氧基四唑衍生物，已被公開可用于治療炎癥疾病。
美國專利4,878,942(Motegi等人)提到某些苯甲酰胺衍生物，已被公開具有除草和調節植物生長的活性。
美國專利5,378,716、5,536,736、5,703,099、5,935,985(Hamaka等人)和歐洲專利EP 558 062 B1提到某些苯氧基乙酸衍生物，已被公開對于血小板的聚集具有IP受體抑制活性。
美國專利5,763,489(Taniguchi等人)和PCT公開申請WO 95/24393提到某些萘衍生物，已被公開具有IP受體激動劑的活性，可用于治療動脈梗阻、再狹窄、動脈硬化、腦血管疾病或局部缺血心臟病。
英國專利申請GB 1,079,414(轉讓給Smith&Nephew)提到某些N-苯基-鄰氨基甲酰基苯氧基乙酸衍生物，已被公開具有止痛和抗炎活性。
德國專利申請DT24 32 560(轉讓給Boehringer Mannheim)提到某些2-(4-苯氨基甲酰烷基)苯氧基鏈烷酸衍生物，已被公開用于治療動脈粥樣硬化和作為具有β-內酰胺結構抗生素的中間體。
PCT公開的申請WO 99/24397(轉讓給Fujisawa)提到某些苯并環庚烯衍生物，已被公開具有IP受體激動劑的活性，可用于治療動脈梗阻、腦血管疾病、肝硬變、動脈硬化、局部缺血性心臟病、經皮經腔冠狀血管成形術后的再狹窄、高血壓和皮膚病。
PCT公開的申請WO 99/32435(轉讓給Fujisawa)提到某些萘衍生物，已被公開具有IP受體激動劑活性，可用于治療動脈硬化、腦血管疾病、局部缺血性心臟病、皮膚病、腸炎性疾病和用于抑制癌的轉移。
Vavayannis等人在Eur.J.Med.Chem.Chim.Ther.1985，20，37-42中提到某些氨基甲酸二甲酯衍生物，已被公開具有抗膽堿酯酶活性。
Marsh等人在J.Chem.Soc.Chem.Commun.1996，8，941-942中提到某些固相多元胺連接劑，已被公開用于錐蟲硫酮(trypanothione)還原酶的定向庫的合成和制備。
這里引用的所有出版物、專利和專利申請，無論在上文或下文，在此均作為參考全部并入本發明。
本發明提供式I化合物或者單個異構體、異構體的外消旋或非外消旋混合物或其藥物上可接受的鹽或溶劑化物，
其中R1和R2各自獨立為烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、環烷基或雜環基；
R3和R4各自獨立為氫、烷基、烷氧基、氨基、鹵素、鹵代烷基、羥烷基、硝基、芳基、芳烷基或雜環基；R5獨立為-COOR6或四唑基；R6獨立為氫或烷基；A獨立為亞烷基或亞烯基；B獨立為-O(CH2)m-或-(CH2)n-；m獨立為1-8的整數，含端點；n獨立為0-8的整數，含端點。
本發明還涉及藥物組合物，它包括治療有效量的至少一種式I化合物或其單個異構體、異構體的外消旋或非外消旋混合物或其藥物上可接受的鹽或溶劑化物，并混合至少一種合適的載體。在一優選的實施方案中，藥物組合物適合給藥于患有通過使用IP受體調節劑，特別是IP受體激動劑治療能減輕的病癥的對象。
本發明還涉及適合給藥于對象的藥物組合物，它包括治療有效量的至少一種式I化合物或其單個異構體、異構體的外消旋或非外消旋混合物或其藥物上可接受的鹽或溶劑化物，并混合至少一種藥物上可接受的載體。
本發明還涉及一種治療方法，它包括給需要這種治療的對象服用治療有效量的至少一種式I化合物或其單個異構體、異構體的外消旋或非外消旋混合物或其藥物上可接受的鹽或溶劑化物。在一優選的實施方案中，需要這種治療的對象患有與如下疾病有關的病癥異常的傷口愈合、組織壞死、過早的子宮收縮、胃潰瘍、雌雄性的性功能障礙、嚴重的經痛、異常的免疫調節、異常的血小板聚集或異常的嗜中性白細胞功能。在另一優選實施方案中，式I化合物或其單個異構體、異構體的外消旋或非外消旋混合物或其藥物上可接受的鹽或溶劑化物是IP受體調節劑，特別是IP受體激動劑。
本發明還涉及一種治療方法，它包括給患有與異常血流有關的病癥的對象服用治療有效量的至少一種式I化合物或其單個異構體、異構體的外消旋或非外消旋混合物或其藥物上可接受的鹽或溶劑化物。在一優選的實施方案中，給藥對象患有心血管疾病、高血壓疾病、局部缺血疾病或腎臟疾病。在一更優選的實施方案中，給藥對象患有心血管病癥，即外周動脈閉塞病(PAOD)、間歇性跛行、嚴重肢體缺血、血栓形成性疾病、動脈粥樣硬化、閉塞性血栓血管炎(伯格氏病)、雷諾氏綜合征、高安氏病(Takayashu’s disease)、移行性表層靜脈血栓性靜脈炎、急性動脈閉塞、冠狀動脈疾病、血管成形術后的再狹窄、中風或復發性心肌梗死。在另一優選的實施方案中，式I化合物或其單個異構體、異構體的外消旋或非外消旋混合物或其藥物上可接受的鹽或溶劑化物是IP受體調節劑，特別是IP受體激動劑。
除非另有說明，用于說明書和權利要求書的下述術語具有如下定義。必須注意的是，用于說明書和所附權利要求書中的單數形式“a”、“an”和“the”包括復數定義，除非文中另有詳細說明。
“烷基”是指單價支鏈或非支鏈的飽和烴基，僅由碳和氫原子組成，含有1-12(包括端點)個碳原子，除非另有說明。烷基的例子包括，但不局限于甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、正己基、辛基和十二烷基等。
“亞烷基”是指二價線型或支鏈的飽和烴基，僅由碳和氫原子組成，含有1-8(包括端點)個碳原子，除非另有說明。亞烷基的例子包括，但不局限于亞甲基、1，2-亞乙基、1，3-亞丙基、1，2-亞丙基、1，4-亞丁基、1，5-亞戊基和乙基-1，2-亞乙基等。
“亞烯基”是指二價線型或支鏈的不飽和烴基，含有至少一個雙鍵及2-8(包括端點)個碳原子，除非另有說明。亞烯基包括由不對稱碳原子形成的順或反((E)或(Z))異構體基團或其混合物。亞烯基的例子包括，但不局限于亞乙烯基、2-亞丙烯基、1-亞丙烯基、2-丁烯基和2-亞戊烯基等。
“烷氧基”是指基團-OR，其中R是此處定義的烷基。烷氧基的例子包括，但不局限于甲氧基、乙氧基、異丙氧基、丁氧基、仲丁氧基和異丁氧基等。
“芳烷基”是指基團R’R”-，其中R’是此處定義的芳基，R”是此處定義的烷基。芳烷基的例子包括，但不局限于芐基、苯乙基和3-苯基丙基等。
“芳基”是指由一個或多個稠環組成的單價單環芳烴基，其中至少一個環實質上是芳環，它可以任選被如下基團取代羥基、氰基、低級烷基、低級烷氧基、硫代烷基、鹵素、鹵代烷基、羥烷基、硝基、烷氧基羰基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、氨基羰基、羰基氨基、氨基磺酰基、磺酰基氨基和/或三氟甲基，除非另有說明。芳基的例子包括，但不局限于苯基、萘基、聯苯基、2，3-二氫化茚基和蒽二酚基(anthraquinolyl)等。
“環烷基”是指由一個或多個環組成的單價飽和碳環基，該基團可任選被如下基團取代羥基、氰基、烷基、烷氧基、硫代烷基、鹵素、鹵代烷基、羥烷基、硝基、烷氧基羰基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、氨基羰基、羰基氨基、氨基磺酰基、磺酰基氨基和/或三氟甲基，除非另有說明。環烷基的例子包括，但不局限于環丙基、環丁基、3-乙基環丁基、環戊基、環己基和環庚基等。
“雜芳基”是指含有一個或多個環的單價芳香碳環基，環中摻入1、2或3個雜原子(選自氮、氧或硫)，該基團可任選被如下基團取代羥基、氰基、低級烷基、低級烷氧基、硫代烷基、鹵素、鹵代烷基、羥烷基、硝基、烷氧基羰基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、氨基羰基、羰基氨基、氨基磺酰基、磺酰基氨基和/或三氟甲基，除非另有說明。雜芳基的例子包括，但不局限于咪唑基、噁唑基、吡嗪基、苯硫基、喹啉基、苯并呋喃基、吡啶基、吲哚基、吡咯基、吡喃基和1，5-二氮雜萘基等。
“雜環基”是指由一個或多個環組成的單價飽和碳環基，摻入1、2或3個雜原子(選自氮、氧或硫)，該基團可任選被如下基團取代羥基、氰基、低級烷基、低級烷氧基、硫代烷基、鹵素、鹵代烷基、羥烷基、硝基、烷氧基羰基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、氨基羰基、羰基氨基、氨基磺酰基、磺酰基氨基和/或三氟甲基，除非另有說明。雜環基的例子包括，但不局限于嗎啉基、哌嗪基、哌啶基、吡咯烷基、四氫吡喃基和硫代嗎啉基等。
“鹵素”是指基團氟、溴、氯和/或碘。
“鹵代烷基”是指在任何位置被一個或多個此處定義的鹵原子取代的此處定義的烷基。鹵代烷基的例子包括，但不局限于1，2-二氟丙基、1，2-二氯丙基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基和2，2，2-三氯乙基等。
“羥烷基”是指被一個或多個羥基取代的此處定義的烷基。羥烷基的例子包括，但不局限于羥甲基、2-羥基乙基、2-羥基丙基、3-羥基丙基、2-羥基丁基、3-羥基丁基、4-羥基丁基、2，3-二羥基丙基、1-(羥甲基)-2-羥基乙基、2，3-二羥基丁基、3，4-二羥基丁基和2-(羥甲基)-3-羥基丙基等。
“異構體”是指具有同樣分子式但區別在于原子鍵合的特性或順序或原子在空間的排列的不同化合物。原子空間排列不同的異構體稱為“立體異構體”。彼此成鏡像且有旋光活性的立體異構體稱為“對映體”，彼此不成鏡像的立體異構體稱為“非對映異構體”。
“手性異構體”是指含有一個手性中心的化合物。它具有兩種相反手性的對映異構體形式，可以以單個對映異構體或對映異構體混合物的形式存在。含有等量的相反手性的單個對映異構體形式的混合物稱為“外消旋混合物”。含有一個以上手性中心的化合物可以以單個非對映體或非對映體混合物的形式存在，稱為“非對映體混合物”。當存在一個手性中心時，立體異構體的特征在于手性中心的絕對構型(R或S)。絕對構型是指與手性中心相連的取代基的空間排列。所述與手性中心相連的取代基按照Cahn、Ingold和Prelog的順序規則進行排列(Cahn et al.，Angew.Chem.Inter.Edit.1966，5，385；errata511；Cahn et al.，Angew.Chem.1966，78，413；Cahn and Ingold J.Chem.Soc.(London)1951，612；Cahn et al.，Experientia 1956，12，81；Cahn，J.Chem.Educ.1964，41，116)。
“幾何異構體”指的是由于繞雙鍵的受阻旋轉產生的非對映體。這些構型在名稱上的區別在于前綴順-和反-，或Z和E，根據Cahn-Ingold-Prelog規則，這表示分子中基團在雙鍵的同側或反側。
“阿托異構體”是指由于大基團繞中心鍵的旋轉受阻而引起的阻旋作用產生的異構體。
“離去基團”是指具有合成有機化學中與其有關的常規含義的基團，即，在烷基化條件下可替換的原子或基團。離去基團的例子包括，但不局限于鹵素、鏈烷烴-或亞芳基磺酰氧基，如甲磺酰氧基、乙磺酰氧基、硫甲基、苯磺酰氧基、甲苯磺酰氧基和噻吩氧基、二鹵代膦酰氧基，任選取代的芐氧基、異丙氧基和酰氧基等。
“保護性基團”或“保護基團”具有合成有機化學中通常的定義，即，可選擇性地保護多官能化合物中的一個反應位置使得化學反應可在另一未保護的反應位置上選擇進行的基團。本發明的特定方法取決于保護反應物中活性氧原子的保護基團。隨后可選擇性除去的用于醇或酚羥基的可接受的保護基團包括保護為乙酸酯、鹵代烷基碳酸酯、芐基醚、烷基甲硅烷基醚、雜環基醚和甲基或其它烷基醚等的基團。用于羧基的保護基團類似于對羥基描述的那些，優選為叔丁基酯、芐基酯或甲基酯。
“去保護性”或“去保護”是指在完成選擇性反應后除去保護基團的過程某些保護基團優選于其它基團是由于它們方便或相對容易除去。保護的羥基或羧基的去保護劑包括碳酸鉀或碳酸鈉、醇溶液中的氫氧化鋰、甲醇中的鋅、乙酸、三氟乙酸、鈀催化劑或三溴化硼等。
“任選”或“任選地”是指隨后描述的情況可以但不必須發生，并且在本發明說明書中包括可以發生的情況和沒有發生的情況。例如，“任選鍵”是指該鍵可以存在或不存在，它包括單鍵、雙鍵或三鍵。
“惰性有機溶劑”或“惰性溶劑”是指在所述反應條件下呈惰性的溶劑，包括例如苯、甲苯、乙腈、四氫呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、氯仿、二氯甲烷、二氯乙烷、二乙醚、乙酸乙酯、丙酮、甲基乙基酮、甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、叔丁醇、二噁烷和吡啶等。除非另有說明，本發明反應中使用的溶劑均為惰性溶劑。
“藥物上可接受”是指可用于制備通常安全、無毒性以及在生物學上和其它方面都理想的藥物組合物，包括用于獸和人的藥理用途上可接受的那些。
“藥物上可接受的載體”是指可用于制備通常與組合物其它成分相容、對接受者無害以及在生物學上和其它方面都理想的藥物組合物的載體，包括獸用或人的藥物用途上可接受的載體。用于說明書和權利要求的“藥物上可接受的載體”包括一種和多種這樣的載體。
化合物的“藥物上可接受的鹽”是指藥物上可接受的并具有母體化合物的理想藥理活性的鹽。這類鹽，例如，包括(1)與無機酸形成的酸加成鹽，無機酸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；或與有機酸形成的酸加成鹽，有機酸如乙酸、丙酸、己酸、環戊烷丙酸、羥基乙酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、丁二酸、蘋果酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、3-(4-羥基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙烷二磺酸、2-羥基-乙烷磺酸、苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲基二環-[2.2.2]辛-2-烯-1-羧酸、葡庚糖酸、4，4’-亞甲基二-(3-羥基-2-烯-1-羧酸)、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、十二烷基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羥萘甲酸、水楊酸、硬脂酸和己二烯二酸等；(2)當母體化合物中存在的酸質子被金屬離子如堿金屬離子、堿土金屬離子或鋁離子取代或與有機堿配位時所形成的鹽。可接受的有機堿包括乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇和N-甲基-葡糖胺等。可接受的無機堿包括氫氧化鋁、氫氧化鈣、氫氧化鉀、碳酸鈉和氫氧化鈉等。
應當理解的是有關藥物上可接受的鹽包括其溶劑加合物形式或晶體形式，特別是溶劑化物或多晶型體。溶劑化物含有化學計量的或非化學計量的溶劑，通常在結晶過程中形成。當溶劑是水時形成水合物，或者當溶劑是醇時形成醇化物。多晶型體包括相同元素組成化合物的不同晶體堆積排列。多晶型體通常具有不同的X射線衍射圖樣、紅外譜圖、熔點、密度、硬度、晶形、光學和電學特性、穩定性和溶解度。許多因素如重結晶溶劑、結晶速率和保存的溫度可以使得單晶形式占優勢。
“對象”是指哺乳動物和非哺乳動物。哺乳動物的例子包括但不局限于哺乳綱的任何成員人、非人的靈長類動物如黑猩猩和其它無尾猿及猴類；農場動物如牛、馬、綿羊、山羊、豬；家養動物如兔、狗和貓；實驗動物包括嚙齒動物如大鼠、小鼠和豚鼠等。非哺乳動物的例子包括，但不局限于鳥類等。該術語沒有指明特定的年齡或性別。
病癥的“治療”包括(1)預防疾病，即，使得疾病的臨床癥狀不會在感染了病癥或易感染病癥但是還沒有體驗或顯示出疾病癥狀的對象身上進一步發展。(2)抑制病癥，即，阻止病癥或其臨床癥狀的發展，或(3)減輕病癥，即，使得病癥或其臨床癥狀暫時或永久消退。
“病癥”是指任何疾病、狀態、癥狀或指征。
“治療有效量”是指當給治療疾病的對象服藥時，對這種疾病治療足以有效的化合物的量。“治療有效量”根據化合物、治療的病癥、治療的疾病的嚴重程度、對象的年齡和相對健康狀況、給藥途徑和方式、主治醫師的鑒定和其它因素將有所變化。
“調節劑”是指一種分子，例如與靶相互作用的化合物。相互作用包括，但不局限于如這里定義的激動劑和拮抗劑等。
“激動劑”是指這種分子，如能增加另一個分子或受體位點活性的化合物、藥物、酶活化劑或激素。
“拮抗劑”是指這種分子，如能降低或阻止另一個分子或受體位點活性的化合物、藥物、酶抑制劑或激素。
“藥理學效果”包括在實現預期治療目的的對象上所產生的效果。在一優選的實施方案中，藥理學效果是指治療需要這種治療的對象。例如，藥理學效果是指一種在需要這種治療的對象上能導致與如下疾病有關的病癥的預防、減輕或降低的效果異常的血流、異常的傷口愈合、組織壞死、過早的子宮收縮、胃潰瘍、雌雄性的性功能障礙、嚴重經痛或異常的嗜中性白細胞功能。在另一優選實施方案中，藥理效果是指IP受體的激活與在具有這種病癥的對象上的治療效果有關，這種病癥可通過服用IP受體調節劑，特別是IP受體激動劑來治療。
本發明化合物的命名和排序如下文所描述
通常，本申請中使用的命名法是基于AutoNom，一種用于產生IUPAC系統命名法的Beilstein研究所的計算機化系統。然而由于嚴格遵照這些推薦標準命名將導致當僅有一個取代基改變時，其名稱也顯著地改變，所以化合物是以保持分子基本結構命名法的一致性的形式來進行命名的。
例如，其中R1和R2各自為苯基、R3為甲基、R4為氫、R5為-COOH、A是亞甲基、B是-O(CH2)m-以及m為1的式I化合物稱為{3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]-2-甲基苯氧基}乙酸。
例如，其中R1是苯基、R2是芐基、R3和R4各自是氫、R5是-COOH、A是1，3-亞丙烯基、B是-(CH2)n-以及n是2的式I化合物稱為{3-[(芐基苯基氨基甲酰氧基丙烯基)甲基]苯氧基}丙酸。
在本發明概述中提到的本發明化合物家族中，某些式I化合物是優選的，其中R1和R2優選各自獨立為芳基或芳烷基，更優選為苯基或芐基，最優選為苯基；R3和R4優選各自獨立為氫、烷基、芳基、芳烷基或鹵素，更優選為氫、甲基、乙基、正丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基、溴或氯。最優選為氫或甲基；R5優選獨立為-COOR6；R6優選獨立為氫或烷基，更優選為氫；A優選獨立為亞烷基或亞烯基；B優選獨立為-O(CH2)m-；m優選獨立為1-5的整數，含端點。
n優選獨立為0-5的整數，含端點。
應當理解的是優選的式I化合物也包括式I化合物的異構體，尤其是順和反-異構體或其異構體，異構體的外消旋或非外消旋混合物，或其藥物上可接受的鹽或溶劑化物。
特別優選的化合物的例子包括如下式I化合物或其單個異構體、異構體的外消旋或非外消旋混合物或其藥物上可接受的鹽或溶劑化物
{3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]-2-甲基苯氧基}乙酸； 乙酸；
順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯氧基]乙酸；
順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯基]丙酸；
順-[3-(4-二苯基氨基甲酰氧基丁-1-烯基)苯氧基]乙酸；
順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)-2-甲基苯氧基]乙酸；
順-{3-[3-(芐基苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯氧基]乙酸；
反-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯氧基]乙酸；以及
反-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)-2-甲基苯氧基]乙酸。
一組優選的式I化合物包括那些化合物，其中A是亞烷基，B是-O(CH2)m-，以及m是1-5的整數，含端點。
同樣優選的化合物是那些其中A是亞烷基，B是-(CH2)n-，以及n是0-5的整數(含端點)的化合物。
優選的式I化合物包括那些其中A是亞烯基，B是-O(CH2)m-，以及m是1-5的整數(含端點)的化合物。
另外優選的化合物是那些化合物，其中A是亞烯基，B是-(CH2)n-，以及n是0-5的整數(含端點)。
特別優選的化合物如下{3-[二苯基氨基甲酰氧基)甲基]-2-甲基苯氧基}乙酸；[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙基)苯基]乙酸；或其單個異構體、異構體的外消旋或非外消旋混合物或其藥物上可接受的鹽或溶劑化物。
另一組特別優選的式I化合物包括如下順-{3-[3-(芐基苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯氧基]乙酸；順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯氧基]乙酸；順-[3-(4-二苯基氨基甲酰氧基丁-1-烯基)苯氧基]乙酸；順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)-2-甲基苯氧基]乙酸；反-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯氧基]乙酸；或反-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)-2-甲基苯氧基]乙酸；或其單個異構體、異構體的外消旋或非外消旋混合物或其藥物上可接受的鹽或溶劑化物。
另外特別優選的是順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯基]丙酸或其單個異構體、異構體的外消旋或非外消旋混合物或其藥物上可接受的鹽或溶劑化物。
另外優選的是一種制備式I化合物的方法，它包括將下式之一的一個化合物
與式5化合物進行反應
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、A、B、m和n具有權利要求1中給出的定義，X是指鹵素。
本發明還包括一種藥物組合物，它包括治療有效量的至少一種式I化合物，并摻入至少一種合適的載體。本發明的另一目的是前面提到的藥物組合物，其中至少一種式I化合物適合給藥于具有可通過用IP受體調節劑治療而得到減輕的病癥的對象。
本發明的另一個目的包括式I化合物用于制備包括任何一種式I化合物的藥物的用途。
本發明的另一個目的是式I化合物用于制備包括任何一種式I化合物的藥物的用途，該藥物可用于治療與如下疾病有關的病癥異常的傷口愈合、組織壞死、過早的子宮收縮、胃潰瘍、雌雄性的性功能障礙、嚴重的經痛、異常的免疫調節、異常的血小板聚集或異常的嗜中性白細胞功能。
本發明的再一個目的是權利要求1-15任一權利要求的化合物用于制備包括任何一種式I化合物的藥物的用途，該藥物可用于治療與如下疾病有關的病癥外周動脈閉塞病(PAOD)、間歇性跛行、嚴重肢體缺血、血栓形成性疾病、動脈粥樣硬化、閉塞性血栓血管炎(伯格氏病)、雷諾氏綜合征、高安氏病、移行性表層靜脈血栓性靜脈炎、急性動脈閉塞、冠狀動脈疾病、血管成形術后的再狹窄、中風、復發的心肌梗死、肺動脈高血壓、眼壓過高、與高血壓有關的耳鳴、與同種移植物移植術有關的局部缺血、腎衰竭、異常的多尿、異常的尿鈉排泄或異常的尿鉀排泄。
同樣本發明的目的是按照所述方法制備的式I化合物。
本發明也包括與IP受體有關的病癥的治療方法，該方法包括服用有效量的式I化合物。
本發明還涉及與如下疾病有關的病癥的治療方法異常的傷口愈合、組織壞死、過早的子宮收縮、胃潰瘍、雌雄性的性功能障礙、嚴重的經痛、異常的免疫調節、異常的血小板聚集或異常的嗜中性白細胞功能、外周動脈閉塞病(PAOD)、間歇性跛行、嚴重肢體缺血、血栓形成性疾病、動脈粥樣硬化、閉塞性血栓血管炎(伯格氏病)、雷諾氏綜合征、高安氏病、移行性表層靜脈血栓性靜脈炎、急性動脈閉塞、冠狀動脈疾病、血管成形術后的再狹窄、中風、復發性心肌梗死、肺動脈高血壓、眼壓過高、與高血壓有關的耳鳴、與同種移植物移植術有關的局部缺血、腎衰竭、異常的多尿、異常的尿鈉排泄或異常的尿鉀排泄，該方法包括服用有效量的式I化合物。
本發明的另一個目的是適合給藥于對象的藥物組合物，它包括治療有效量的至少一種式I化合物，并摻入至少一種藥物上可接受的載體。
本發明的再一個目的是一種治療方法，包括給需要這種治療的對象服用治療有效量的至少一種式I化合物。
同樣本發明的目的是上述方法，其中對象患有與如下疾病有關的病癥異常的傷口愈合、組織壞死、過早的子宮收縮、胃潰瘍、雌雄性的性功能障礙、嚴重的經痛、異常的免疫調節、異常的血小板聚集或異常的嗜中性白細胞功能。
此外，本發明的目的是上述方法，其中化合物是IP受體調節劑，尤其是IP受體激動劑。
本發明的再一個目的是治療方法，它包括給患有與異常血流有關的病癥的對象服用治療有效量的至少一種式I化合物，其中異常血流尤其是心血管病癥，其中心血管病癥是外周動脈閉塞病(PAOD)、間歇性跛行、嚴重肢體缺血、血栓形成性疾病、動脈粥樣硬化、閉塞性血栓血管炎(伯格氏病)、雷諾氏綜合征、高安氏病、移行性表層靜脈血栓性靜脈炎、急性動脈閉塞、冠狀動脈疾病、血管成形術后的再狹窄、中風或復發性心肌梗死。
本發明的另一個目的是上述方法，其中化合物是IP受體調節劑，尤其是IP受體激動劑。
本發明的另一個目的是上述方法，其中與異常血流有關的病癥是高血壓癥，特別是肺動脈高血壓、眼壓過高或與高血壓有關的耳鳴。
本發明的再一個目的是上述方法，其中與異常血流有關的病癥是局部缺血癥，特別是與同種移植物移植術有關的局部缺血。
本發明的另一個目的是上述方法，其中與異常血流有關的病癥是腎病，特別是腎衰竭、異常的多尿、異常的尿鈉排泄或異常的尿鉀排泄。
本發明的化合物可以按照如下所述的合成反應路線制備。
用于制備這些化合物的原料和試劑可以從商品供應商如Aldrich化學公司購買或通過如下文獻中提到的本領域技術人員熟知的方法來制備Fieser andFieser’s Reagents for Organic Synthesis，Wiley & SonsNewYork，1991，Volumes 1-15；Rodd’s Chemistry of Carbon Compounds，Elsevier Science Publishers，1989，Volumes 1-5 and Supplementals；andOrganic Reactions，Wiley & SonsNew York，1991，Volumes 1-40。下面的反應路線僅僅用于描述合成本發明化合物的一些方法，根據該公開，本領域技術人員可以對這些反應路線進行許多改變和建議。
反應路線中的原料和中間體如需要可以使用常規技術進行分離和提純，包括但不局限于過濾、蒸餾、結晶、色譜法等。這些物質可以使用常規手段進行表征，包括物理常數和譜圖數據。
除非另有說明，這里所述的反應均在大氣壓和約-78℃到約150℃、更優選約0℃到約125℃的溫度范圍內、最優選和方便在室溫例如約20℃下進行。
反應路線A、B、C和D描述了制備式I化合物的可替代的方法。路線A路線A描述了一種制備式I化合物的方法，其中B是-O(CH2)m-，R1、R2、R3、R4、R5、A和m如本發明概述中所定義。
一般來講，式1a的起始化合物是可以購買的或對本領域普通技術人員來說是已知的或很容易合成。例如，其中R3為溴和R4為氫的化合物1a的合成在Beijer，P.H.，Rec.Tray.Chim.Pays-Bas.1929，48，1010中有描述，以及其中R3為氯和R4為氫的化合物1a的合成在Beuhler et al.，J.Amer.Chem.Soc.1946，68，574-577中有描述。
式1a化合物也可以通過本領域普通技術人員已知的方法在格利雅試劑或有機鋰試劑存在下用烷基取代2-(2，3-二甲氧基苯基)-4，4-二甲基-4，5-二氫噁唑中的2-甲氧基而制備。隨后在改進的邁耶氏反應條件下使用強酸如硫酸水溶液水解化合物的4，5-二氫噁唑基團，然后使用合適的醚裂解劑如三溴化硼或濃酸如氫溴酸、優選是三溴化硼將3-甲氧基裂解為羥基得到產物式1a化合物。合適的反應溶劑包括非質子溶劑如四氫呋喃、苯、甲苯等。
一般來講，起始化合物式1b是可以購買的，例如從Aldrich化學公司購買，或對本領域普通技術人員來說是已知的或很容易合成。
在步驟1a中，通過使用傳統的方法將化合物1a的羧酸基團還原成醇基來制備羥甲基酚2a。合適的還原條件包括氫化鋁鋰、硼烷或硼烷衍生物在非質子有機溶劑如二乙基醚、二噁烷、四氫呋喃等中。化合物2a也可以通過裂解3-羥基鄰苯二甲酸酐的鄰苯二甲酰基、隨后還原產物至二醇來制備。合適的酐裂解和還原條件包括氫化鋁鋰、硼烷或硼烷配合物在非質子有機溶劑如四氫呋喃、二乙基醚、二噁烷和乙二醇醚等中。
在步驟2a中，可以使用合適的式R5-(CH2)m-X的烷基化試劑3將化合物2a的羥基烷基化來制備羥甲基苯氧基羧酸酯4，其中R5為保護的羧基，X是鹵素，尤其是溴或氯。反應在威廉遜合成條件下，在弱堿如碳酸鉀、碳酸銫、碳酸鈉等存在下進行。合適的反應惰性有機溶劑包括非質子有機溶劑如丙酮、二噁烷和四氫呋喃等。烷基化試劑3可以購買到或本領域普通技術人員可以合成。
另外，在步驟1b中，可以使用合適的烷基化試劑3即上文步驟2a中所述的式R5-(CH2)m-X將化合物1b的羥基烷基化來制備甲酰基苯氧基羧酸酯2b。此外，化合物2b可以通過本領域人員已知的方法進行合成，如通過合適的氧化劑如二甲亞砜、乙酐、草酰氯、甲苯磺酰氯等將伯醇基團氧化至相應的醛基。例如在Marx，M.and Tidwell，T.，J.Org.Chem，1984，49，788-793中描述了式2b化合物的合成，其中R3是甲基，R4是氫，R5是羧酸叔丁酯，m是1。
另外，在步驟2b中，可以通過傳統的方法將化合物2b中的醛基還原至醇基來制備羥甲基苯氧基羧酸酯4。合適的醛還原條件包括使用鋰氫化物如氫化鋁鋰或硼氫化物如硼氫化鈉進行還原，或在合適的質子溶劑中使用鉑或鈀催化劑進行氫化。此外，可以通過使用有機金屬試劑如格利雅試劑或烷基鋰試劑處理化合物2b來制備式4化合物，其中A是支鏈的亞烷基。合適的反應溶劑包括非質子有機溶劑如四氫呋喃和二乙基醚等。
在步驟3中，式I化合物可以通過許多本領域技術人員已知的方法來制備。例如，式I化合物可以通過使用式R1R2NC(O)X的酰化劑5將化合物4酰化來制備，其中X是鹵素，尤其是溴或氯。反應在強堿如烷基氨化鋰、烷基鋰或二(三甲硅烷基)氨化鉀的存在下進行。合適的用于反應的惰性有機溶劑包括非質子有機溶劑如二乙基醚和四氫呋喃等。酰化劑5可以購買到或由本領域普通技術人員很容易地合成。例如，通過使用酰基鹵如草酰氯、光氣或光氣等同物等處理式R1R2NH的相應胺來合成帶有不同R1和R2的化合物5。
式I化合物(其中R5是-COOR6或四唑基)通常制備為保護基團，然后使用傳統的方法脫保護得到最終產物。例如，R5為-COOR6的式I化合物制備成保護的羧基如烷基酯，隨后脫保護得到羧酸。反應在強堿如氫氧化鋰、氫氧化鈉或氫氧化鉀溶液存在下，在質子有機溶劑如甲醇、乙醇、水及其混合物中進行。
R5為四唑基的式I化合物可以制備成保護的四唑基如三苯基甲基(三苯甲基)四唑基，隨后脫保護。化合物2a可以使用式N≡C-(CH2)m-X的烷基化試劑進行處理，其中X是鹵素，尤其是溴或氯。反應在弱堿如碳酸鉀、碳酸銫或碳酸鈉存在下，在非質子有機溶劑如丙酮、二噁烷、四氫呋喃、N，N-二甲基甲酰胺等中進行。在隨后的步驟中，氰基產物與式R1R2NC(O)X的酰化劑5反應，其中X是鹵素、尤其是溴或氯，然后與加到氰基上的疊氮化鈉反應，隨后成環形成四唑基。反應在催化劑如氯化銨存在下，在非質子有機溶劑如丙酮、二噁烷、四氫呋喃、N，N-二甲基甲酰胺等中進行。另外可使用三甲硅烷基或三甲基錫疊氮化物引入疊氮基團而無需催化。
制備例1中給出了化合物1a的制備例子。實施例1-5中給出了采用路線A中描述的反應條件來制備化合物I的例子。路線B
路線B描述了另一種制備式I化合物的方法，特別是式I化合物的反式異構體，其中A是亞烯基，B是-O(CH2)m-，R1、R2、R3、R4、R5和m如本發明概述中所定義。
可替代的起始化合物羥基苯甲醛1b或鹵代酚1c(其中X是鹵素，優選是溴或碘)可以從例如Aldrich化學公司購買到或是已知的或本領域普通技術人員可以很容易地合成出。
在步驟1中，可以通過本領域人員已知的條件來制備反-羥基苯基鏈烯基羧酸酯6，其中R是(C1-C4)烷基，Aa是鍵、亞烷基或亞烯基。例如，化合物6可以通過將醛1b與亞烷基-三苯基正膦或亞烷基膦酸酯反應來制備，其中亞烷基-三苯基正膦或亞烷基膦酸酯是通過在Wittig或Horner反應條件下使用強堿如氫化鋰或氫化鈉處理鏻鹽或膦酸酯如膦酰基乙酸烷基酯時就地產生。也可以通過在Blanchette，M.A.et al.，Tetrahedron Letters，1984，25，2183中描述的反應條件下用1，8-二氮雜二環[5.5.0]十一碳-7-烯(DBU)和鹵化鋰處理醛1b來制備化合物6。用于烯化反應的合適溶劑包括惰性非質子溶劑如乙腈和四氫呋喃等。
在另一步驟1中，也可以在膦配體如三-(鄰甲苯基)膦結合鈀鹽如乙酸鈀(II)存在下，將鹵代酚1c與丙烯酸酯如丙烯酸乙酯反應制備反-羥基苯基鏈烯基羧酸酯6，其中R是(C1-C4)烷基。反應在堿如三乙胺存在下，在惰性氣氛中如在Heck-型偶合反應條件下進行。用于反應的合適溶劑包括非質子溶劑如乙腈和四氫呋喃等。
在步驟2中，通過選擇性地還原化合物6的羧酸酯基團至相應的醇基來制備反-羥基苯基鏈烯基醇7。合適的羧酸酯還原條件包括硼氫化鋰、氫化鋁鋰、氫化二異丁基鋁(DIBAL-H)、硼烷或硼烷衍生物。優選的還原條件在Trost，B.M.et al.，J.Org.Chem，1980，45，1838中有描述，包括使用由DIBAL-H形成的稱為酸根型配位化合物的鹽和烷基鋰化合物如正丁基鋰。用于反應的合適非質子溶劑包括四氫呋喃、己烷、二甲氧基乙烷和二噁烷等。
在步驟3中，通過在路線A步驟2a中描述的方法制備反-羥甲基鏈烯基苯氧基羧酸酯8，例如通過使用合適的式R5-(CH2)m-X的烷基化試劑3將化合物7中的羥基烷基化來制備，其中R5是保護的羧基。
在步驟4中，通過路線A步驟3中描述的方法來制備式I化合物的反式異構體，例如通過使用式R1R2NC(O)X的酰化劑5將化合物8酰化來制備，其中X是鹵素，尤其是溴或氯。
可選擇的是，其中A為亞烷基的式I化合物可以按照如下方法制備，即通過將產物或在最終產物之前合成的任何中間體化合物中的碳-碳雙鍵進行選擇性加氫得到相應的飽和化合物。合適的選擇性還原條件包括催化還原如阮內鎳、鈀碳、硼化鎳、鉑金屬或其氧化物等，優選為鈀金屬或其氧化物。用于反應的合適溶劑包括惰性有機溶劑如乙酸乙酯、甲醇等。優選的是，選擇性氫化化合物6、7或8得到式I化合物，其中A為亞烷基。
實施例6和7中給出了采用路線B中描述的反應條件制備式I化合物反式異構體的例子。實施例11和12中給出了采用路線B中描述的反應條件制備其中A為亞烷基的式I化合物的例子。路線C路線C描述了另一種制備式I化合物的方法，特別是式I化合物的順式異構體，其中A是亞烯基，B是-O(CH2)m-，R1、R2、R3、R4、R5和m如本發明概述中所定義。
起始化合物鹵代酚1c(其中X是鹵素，優選是溴或碘)可以從例如Aldrich化學公司購買到或是已知的或本領域普通技術人員可以很容易地合成出。
在步驟1中，通過在路線A步驟2a中描述的方法制備鹵代苯氧基羧酸酯9，例如通過使用合適的式R5-(CH2)m-X的烷基化試劑3將化合物1c中的羥基烷基化來制備，其中R5是保護的羧基。
在步驟2中，通過在乙炔偶合反應條件下將化合物9與炔基醇如炔丙醇反應制備羥甲基炔基苯氧基羧酸酯10。反應在有機鈀催化劑如四(三苯基膦)-鈀(O)或氯化二(三苯基膦)-鈀(II)存在下，任選在鹵化銅催化劑如碘化亞銅(I)存在下進行。用于反應的合適溶劑包括還充當反應物的吡咯烷。此外，反應可以在二異丙基胺，任選在鹵化銅催化劑存在下，在合適的非質子溶劑如四氫呋喃中進行。
在步驟3中，通過路線A步驟3中描述的方法來制備炔基苯氧基羧酸酯11，例如通過使用式R1R2NC(O)X的酰化劑5將化合物10酰化來制備，其中X是鹵素，尤其是溴或氯。
在步驟4中，通過在部分氫化的條件下將化合物11中的三鍵選擇性地轉化為順-雙鍵來制備式I化合物的順式異構體。用于將炔烴選擇性地部分氫化為順-烯烴的合適催化劑包括氫化二異丁基鋁(DIBAL)或用鈀催化劑如Lindlar催化劑氫化。反應中加入選擇性增強劑如喹啉并在質子有機溶劑如甲醇中進行。
在另一步驟3中，通過在上文步驟3中描述的部分氫化條件下將化合物10中的三鍵選擇性地轉化為順-雙鍵來制備順-羥甲基烯基苯氧基羧酸酯12。
在另一步驟4中，通過路線A步驟4中描述的方法來制備式I化合物的順式異構體，例如通過使用式R1R2NC(O)X的酰化劑5將化合物12酰化來制備，其中X是鹵素，尤其是溴或氯。
可選擇的是，其中A為亞烷基的式I化合物可以按照如下方法制備，即通過將產物或在最終產物之前合成的任何中間體化合物中的碳-碳雙鍵進行選擇性加氫得到相應的飽和化合物。合適的選擇性還原條件包括催化還原如阮內鎳、鈀碳、硼化鎳、鉑金屬或其氧化物等，優選為鈀金屬或其氧化物。用于反應的合適溶劑包括惰性有機溶劑如乙酸乙酯、甲醇等。優選的是，選擇性氫化化合物10、11或12得到式I化合物，其中A為亞烷基。
實施例8-10中給出了采用路線C中描述的反應條件制備式I化合物順式異構體的例子。路線D路線D描述了另一種制備式Ia化合物的方法，其中A是亞烯基，B是-(CH2)n-，R1、R2、R3、R4、R5和n如本發明概述中所定義。
按照類似于路線C中描述的方法合成式Ia化合物的順式異構體，其中B是-(CH2)n-，但采用不同的起始化合物得到最終目標產物。
起始化合物1d(其中X是鹵素，優選是溴或碘，Z是鹵素，優選是溴或碘，或-CHO或-(CH2)nCOOH，其中n如本發明概述中所定義)可以從例如Aldrich化學公司購買到或是已知的或本領域普通技術人員可以很容易地合成出。
在步驟1中，可以通過許多方法制備鹵代苯基羧酸酯13，其中Aa是鍵、亞烷基或亞烯基。例如，在硼氫化劑如9-硼二環[3.3.1]壬烷二聚物(9-BBN)存在下，將化合物1d(其中X和Z各自為鹵素)與羧酸乙烯酯如3-丁烯酸甲酯進行偶合制備化合物13，其中n為3。反應在偶合催化劑如氯化鈀和磷酸三鉀存在下，在非質子溶劑如二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺和四氫呋喃等中進行。得到的羧酸酯產物的酯轉移作用通過用醇如2-甲基-2-丙醇和堿如正丁基鋰在惰性氣氛中處理來進行。
此外，也可以通過用亞烷基-三苯基正膦或亞烷基膦酸酯處理化合物1d(其中X是鹵素，Z是-CHO)來制備化合物13(其中n是2)，其中亞烷基-三苯基正膦或亞烷基膦酸酯是通過在Wittig或Horner反應條件下使用強堿如氫化鋰或氫化鈉處理鏻鹽或膦酸酯如膦酰基乙酸烷基酯時就地產生。選擇性地氫化得到的羧酸烯基酯產物得到相應的飽和化合物。合適的選擇性還原條件包括催化還原如阮內鎳、鈀碳、硼化鎳、鉑金屬或其氧化物等，在惰性有機溶劑如乙酸乙酯、甲醇等中。
在步驟2中，通過路線C步驟2中描述的方法制備羥甲基炔基苯基羧酸酯14，例如通過用炔基醇如炔丙醇處理化合物13。此外，通過將起始化合物1d(其中X是鹵素，Z是-(CH2)nCOOH，其中n分別是0或1)與炔基醇如炔丙醇反應直接制備化合物14，其中n是0或1。
在步驟3和4中，或在另一個步驟3和4中，然后按照路線C中描述的相應方法制備式Ia化合物的順式異構體化合物。
可選擇的是，其中A為亞烷基、B是-(CH2)n-的式Ia化合物可以按照如下方法制備，即通過將產物或在最終產物之前合成的任何中間體化合物中的碳-碳雙鍵進行選擇性加氫得到相應的飽和化合物。合適的選擇性還原條件包括催化還原如阮內鎳、鈀碳、硼化鎳、鉑金屬或其氧化物等，優選為鈀金屬或其氧化物。用于反應的合適溶劑包括惰性有機溶劑如乙酸乙酯、甲醇等。優選的是，選擇性氫化化合物14、15或16得到式Ia化合物，其中A為亞烷基。
實施例13-15給出了采用路線D中描述的反應條件來制備式Ia化合物的例子。一般用途本發明化合物是IP受體調節劑，特別是IP受體激動劑，因此，其對IP受體具有選擇性激動活性。這些化合物(及含有這些化合物的組合物)在預防和治療哺乳動物，尤其是人類與血流疾病狀態直接或間接相關的各種疾病中預計是有用的。
尤其是在與心血管疾病有關的疾病狀態，包括(但不限于此)諸如間歇性跛行的外周動脈閉塞疾病(PAOD)、嚴重肢體局部缺血、血栓形成性疾病、動脈粥樣硬化、閉塞性血栓血管炎(伯格氏病)、雷諾氏綜合征、高安氏病、移行性表層靜脈血栓性靜脈炎、急性動脈閉塞、冠狀動脈疾病、血管成形術后的再狹窄、中風和復發性心肌梗死的治療中，本發明化合物預計是有用的。
本發明化合物在高血壓疾病狀態，包括(但不限于此)普通高血壓癥、肺動脈高血壓癥、眼壓過高和與高血壓癥有關的耳鳴的治療中也是有用的。
另外，在與局部缺血，包括(但不限于此)與諸如腎臟移植術或其它器官移植術的同種移植物移植術有關的局部缺血有關的疾病狀態的治療中，本發明化合物是有用的。在腎疾病狀態，包括(但不限于此)腎衰竭、異常多尿、異常尿鈉排泄和異常尿鉀排泄的治療中，本發明化合物也是有用的。
本發明化合物可用于治療其它的疾病狀態，這些疾病狀態與包括(但不限于此)異常傷口愈合、組織壞死、過早子宮收縮、胃潰瘍、雌雄性的性機能障礙、嚴重痛經、異常免疫調節、異常血小板凝聚和異常嗜中性白細胞機能的疾病狀態有關。
減輕了血流疾病狀態，也就可以減輕或消除由該疾病狀態引起的疼痛。例如，使用本發明化合物可以緩解與例如糖尿病性神經病有關的周圍性神經病、外傷后疼痛、外科手術后疼痛、由化療引起的疼痛等。
在例如Goodman & Gilman’s，The Pharmacological Basis ofTherapeutics，第9版，McGraw-Hill，New York，1996，第26章，601-616；Coleman，R.A.，Pharmacological Reviews，1994，46205-229；Harrison’sPrincipals of Internal Medicine，第14版，McGraw-Hill，New York，1998，1398-1403；Handbook of Phase I/II Clinical Drug Trials，O’Grady，J.andJoubert，P.H.editors，CRC Press，New York，1997，249-278中描述了上述及其它治療用途。試驗通過使用表達內源性IP受體的人體血小板膜或表達重組大鼠IP受體的中國倉鼠卵巢細胞的放射性配體頂替測定法，可測定本發明化合物的IP受體激動劑親和性。后一種測定法在實施例23中進行了更詳細的描述。
通過檢測在使用人體血小板或表達重組大鼠IP受體的中國倉鼠卵巢細胞的測定法中環腺苷酸的積聚作用，可測定本發明化合物的IP受體激動劑效能。后一種測定法在實施例24中進行了更詳細的描述。
IP受體激動劑化合物的推斷效能可在外周性血管疾病的犬科動物模型中鑒定。該測定法已被作為間歇性跛行的動物模型建立，并在實施例25中進行了更詳細的描述。給藥和藥物組合物本發明包括一種藥物組合物，它含有本發明化合物和一種或多種藥物上可接受載體和任選含有的其它治療性和/或預防性組分，所述本發明化合物包括異構體、異構體的外消旋或非外消旋混合物或其藥物上可接受的鹽或溶劑化物。
通常，本發明化合物是采用適用于具有類似藥效試劑的任何可接受的給藥方式以治療有效量進行給藥。根據諸多因素，例如，所治療疾病的嚴重性、患者的年齡和相對健康狀況、所用化合物的效能、給藥途徑和方式、給藥針對的指征以及有關醫師的選擇和經驗，合適的劑量范圍是每日1-2500mg，優選為每日1-1500mg，更優選為每日1-500mg。對于確定的疾病，對治療所述疾病的一般人員而言，無需進行過度試驗，依靠個人的知識和本申請公開的內容，即可確定本發明化合物對于所述疾病的治療有效量。
通常，本發明化合物將以藥物制劑的形式實施給藥，所述藥物制劑包括適用于經口(包括頰和舌下)給藥、經直腸給藥、經鼻給藥、局部給藥、經肺給藥、陰道給藥或腸胃外(包括肌內、動脈內、鞘內、皮下和靜脈內)給藥的劑型或適用于通過吸入給藥或吹入給藥的劑型。優選的給藥方式是以常規日劑量實施口服給藥，所述常規日劑量可根據患病程度進行調節。
本發明化合物可與常規的輔藥、載體或稀釋劑一起加入到藥物組合物制劑或單位劑型中。在藥物組合物制劑和單位劑型中可含有常規比例的常規組分，含有或不含有附加的活性化合物或物質，并且單位劑型中可含有與所采用的日劑量范圍相當的任何合適的有效量活性組分。藥物組合物可使用其固體劑型，如片劑或填充膠囊，半固體劑型，粉劑，緩釋劑，或液體劑型，如溶液、懸液、乳劑、酏劑，或適用于口服的填充膠囊；或適用于經直腸或陰道給藥的栓劑；或適用于腸胃外給藥的無菌注射溶液。相應地，每片含有1000mg活性組分的藥物制劑，或者，每片含有100-500mg活性組分的藥物制劑是合適的具有代表性的單位劑型。
本發明化合物可配制成各種各樣的口服給藥劑型。藥物組合物和藥物劑型可以含有本發明化合物或其藥物上可接受的鹽或晶型作為活性組分。藥物上可接受的載體可以是固體或液體。固體劑型包括粉劑、片劑、丸劑、膠囊、扁囊劑、栓劑和可分散的粒劑。固體載體可以是一種或多種物質，它也可以用作稀釋劑、調味劑、增溶劑、潤滑劑、懸浮劑、粘合劑、防腐劑、片劑崩解劑或封包材料。在粉劑中，載體是磨碎的固體，其與磨碎的活性組分形成混合物。在片劑中，活性組分與具有必要粘合能力的載體按適當的比例混合并壓制成所需的形狀和大小。粉劑和片劑優選含有1-約70％的活性化合物。合適的載體是碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石、糖、乳糖、果膠、糊精、淀粉、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、低熔點蠟、可可油等。術語“制劑”包括由活性化合物與作為載體提供膠囊的包封材料制成的制劑，在所述膠囊中，有或沒有載體的活性組分被與其相接觸的一種載體包裹。類似地，術語“制劑”包括扁囊劑和錠劑。片劑、粉劑、膠囊、丸劑、扁囊劑和錠劑是適用于口服給藥的固體劑型。
適用于口服給藥的其它劑型包括液體制劑或固體制劑，所述液體制劑包括乳劑、糖漿劑、酏劑、水溶液、水懸液，所述固體制劑在使用前應當能迅速轉化為液體劑型。乳劑可以在丙二醇水溶液中以溶液的形式制得，或者，乳劑可含有乳化劑，如卵磷脂、脫水山梨糖醇一油酸酯或阿拉伯膠。通過將活性組分溶解在水中并加入合適的著色劑、調味料、穩定劑和增稠劑，可制得水溶液。通過將磨碎的活性組分與粘性材料，如天然或合成樹膠、樹脂、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉及其它的已知懸浮劑一起分散在水中可制得含水懸浮液。固體制劑包括溶液、懸浮液和乳劑，并且，除了活性組分外，它還可含有著色劑、調味料、穩定劑、緩沖劑、人造和天然增甜劑、分散劑、增稠劑和增溶劑等。
本發明化合物可配制成用于腸胃外給藥(如，通過注射給藥，例如，藥團注射或連續輸注)并可配制成存在于安瓿、預充注射器、小體積輸注器中的單位劑型或與加入的防腐劑一起存在于多劑容器中。藥物組合物可以在油質或含水賦形劑中以懸浮液、溶液或乳劑成形，例如，配制成在聚乙二醇水溶液中的溶液形成。油質或無水載體、稀釋劑、溶劑或賦形劑的實例包括丙二醇、聚乙二醇、植物油(例如，橄欖油)和可注射的有機酯(如，油酸乙酯)并可含有配制用試劑，如防腐劑、潤濕劑、乳化劑或懸浮劑、穩定劑和/或分散劑。另外，活性組分可以是粉劑形式，其通過無菌固體的無菌分離獲得或通過對使用前要與適當的賦形劑(如無菌、無熱原的水)一起配制的溶液進行冷凍干燥獲得。
本發明化合物可以配制成表層局部給藥的劑型，如軟膏、乳膏或洗劑或經皮給藥的膏藥。軟膏和乳膏可以使用例如含水或油質基質并加入適當的增稠劑和/或膠凝劑進行配制。洗劑可以使用含水或油質基質并通常還含有一種或多種乳化劑、穩定劑、分散劑、懸浮劑、增稠劑或著色劑進行配制。適合于在口腔中實施局部給藥的制劑包括含有在調味基質(通常為蔗糖和阿拉伯膠或黃蓍膠)中的活性劑的糖錠劑、含有在惰性基質(例如明膠和甘油或蔗糖和阿拉伯膠)中的活性組分的軟錠劑和含有在適合的液體載體中的活性組分的漱口劑。
本發明化合物可以配制成栓劑進行給藥。首先將低熔點蠟，如脂肪酸甘油酯的混合物或可可油熔化，并通過諸如攪拌將活性組分均勻分散。然后將熔化的均勻混合物倒入常規大小的模型中，冷卻并固化。
本發明化合物可以配制用于陰道給藥。除了活性組分外，還含有諸如本領域已知的載體的陰道栓、陰道塞、乳膏、凝膠、糊劑、泡沫或噴霧劑是適合的。
本發明化合物可以配制用于經鼻給藥。通過常規的方式，例如，采用滴管、吸管或噴霧器將溶液或懸液直接施用于鼻腔。該制劑可以單劑型或多劑型提供。在使用滴管或吸管的情況下，通過給患者服用適當的預定體積溶液或懸液可實現給藥。在使用噴霧器的情況下，采用例如霧化噴霧計量泵可實現給藥。
本發明化合物可配制成氣霧劑給藥，尤其是用于呼吸道給藥，并包括鼻內給藥。化合物通常具有小的顆粒尺寸，例如，具有5微米數量級或更小。采用本領域已知的方法，如通過微粉化，可以獲得上述顆粒尺寸。用適當的推進劑，例如，諸如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷或二氯四氟乙烷的含氯氟烴(CFC)，二氧化碳或其它適合的氣體，以擠壓填充的方式提供活性組分。氣霧劑一般還可含有表面活性劑，如卵磷脂。藥物劑量可以用計量閥控制。另外，可以干粉劑的形式，例如，以在合適的粉末基質，如乳糖、淀粉、淀粉衍生物，如羥丙基甲基纖維素和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)中的化合物的粉末混合物的形式提供活性組分。粉末載體將在鼻腔中形成凝膠。粉劑組合物可以單位劑型存在，例如，以在諸如明膠的膠囊或藥筒中的形式或以發泡塞子的形式存在，由此，通過用吸入器可服用粉劑。
如果需要，可以用適合于活性組分的緩釋給藥或受控釋放給藥的腸溶衣進行藥物制劑的配制。
藥物制劑優選以單位劑型存在。這樣，藥物制劑被再細分為含有適當量的活性組分的單位劑量。單位劑型可以是包裝的制劑，每個包裝含有分散量的制劑，例如，壓緊的片劑、膠囊和小瓶或安瓿中的粉劑。單位劑型也可以是膠囊、片劑、扁囊劑或錠劑或是這些劑型以適當的量包裝的劑型。
在RemingtonThe Science and Practice of Pharmacy 1995，edited byE.W.Martin，Mack Publishing Company，19th edition，Easton，Pennsylvania中描述了其它合適的藥物載體及其制劑。在實施例16-22中描述了含有本發明化合物的典型藥物制劑。
實施例下面給出的制備例和實施例能使本領域技術人員更清楚地理解和實施本發明。但不能認為這些制備例和實施例限制了本發明的范圍，它們只是本發明具有說明性和代表性的制備例和實施例。
制備方法1式1a化合物的制備1A.3-羥基甲基-2-甲基苯甲酸的制備簡單加熱3-氨基-2-甲基苯甲酸(43.1g，285mmol)、水(70ml)和硫酸(55ml)的溶液，得到澄清溶液，然后冷卻至低于5℃。分批加入在極少量水中的亞硝酸鈉(21g，300mmol)溶液，同時保持其內部溫度低于7℃。在冰浴中攪拌大約30分鐘后，加入尿素(7g)以除去過量的腈。向重氮溶液中加入已冷卻的98％硫酸(240ml)的水(1000ml)溶液，將合并的反應混合物緩慢加熱至90℃。緩慢加入固體氫氧化鈉(410mg)。用乙酸乙酯萃取混合物，有機層用硫酸鈉干燥并蒸發，得到黃色固體3-羥基-2-甲基苯甲酸(44.4g，-100％)。1B.3-羥基-2-異丙基苯甲酸的制備使用A.I.Meyers等人在J.Org.Chem.，1978，43，1372-1379中描述的方法制備2-(2，3-二甲氧基苯基)-4，4-二甲基-4，5-二氫噁唑。
在室溫下，向在新蒸餾得到的四氫呋喃中的2-(2，3-二甲氧基苯基)-4，4-二甲基-4，5二氫噁唑(7.06g，30.0mmol)的溶液中滴加氯化異丙基鎂(2.0M，在乙醚中)(18.75ml，37.5mmol)溶液。攪拌混合物過夜，用水驟冷反應，并用乙醚稀釋。分層后，水層用乙醚洗滌兩次。將合并的有機萃取液用無水硫酸鈉干燥并真空濃縮。通過硅膠急驟色譜法提純，用己烷/乙酸乙酯洗脫，得到澄清油狀的2-(2-異丙基-3-甲氧基苯基)-4，4-二甲基-4，5-二氫噁唑(7.08g，95.4％)。
將在35％硫酸溶液(40ml)中的2-(2-異丙基-3-甲氧基苯基)-4，4-二甲基-4，5-二氫噁唑(6.18g，25mmol)溶液回流攪拌48小時。冷卻后，緩慢加入固體氫氧化鈉(18.15g)。用乙醚萃取反應混合物，并用碳酸氫鈉溶液萃取合并的有機萃取液。然后將碳酸氫鈉萃取液用3N鹽酸酸化，過濾并干燥，得到白色晶狀固體2-異丙基-3-甲氧基苯甲酸(1.73g，35.7％)。
將1M三溴化硼的二氯甲烷溶液(15ml，15mmol)滴加到2-異丙基-3-甲氧基苯甲酸的二氯甲烷溶液中。攪拌2小時后，將反應混合物冷卻至0℃，用水驟冷反應，并分層。用二氯甲烷萃取水層。合并的有機萃取液用無水硫酸鈉干燥并真空濃縮。通過硅膠急驟色譜法提純殘余物，用二氯甲烷/甲醇和1％乙酸洗脫，得到白色晶狀固體3-羥基-2-異丙基苯甲酸(1.32g，97.5％)。1C.3-羥基-2-苯基苯甲酸的制備在氮氣氣氛中，將2M碳酸氫鈉水溶液(10ml)加入到2-溴-3-甲氧基苯甲酸乙酯(2.06g，7.7mmol)、苯硼酸(benzeneboronic acid)(1.11g)和四(三苯基膦)鈀(O)(0.30g)的甲苯(35ml)懸浮液中。在80℃攪拌反應混合物2小時后，將其倒入到水中，并用乙醚萃取。蒸發有機層，通過色譜法提純殘余物，用己烷/丙酮(3∶1)洗脫，得到半固體油狀產物。從乙醚/己烷中重結晶，得到無色晶體3-甲氧基-2-苯基苯甲酸乙酯(0.69g，34％)。
在氮氣氣氛中，混合3-甲氧基-2-苯基苯甲酸乙酯(0.53g)和鹽酸吡啶(6g)，然后加熱至180℃并保持1小時。將熔化物倒入到稀鹽酸水溶液中，并用乙酸乙酯萃取。通過硅膠色譜提純，用己烷/丙酮(2∶1)和0.5％乙酸洗脫，得到白色固體3-羥基-2-苯基苯甲酸(0.25g，58％)。
實施例1{2-氯-3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]苯氧基}乙酸1A.2-氯-3-羥基甲基苯酚的制備使用Buehler等人在J.Amer.Chem.Soc.1946，68，574-577中描述的方法合成2-氯-3-羥基苯甲酸。
在0℃，將2-氯-3-羥基苯甲酸(2.59g，15mmol)的四氫呋喃溶液滴加到硼烷(48mmol)的四氫呋喃(150ml)溶液中。然后加熱反應混合物至60℃并攪拌過夜。冷卻后，用水驟冷反應混合物并用3M氫氧化鈉使其呈堿性。分離出水層，用3M鹽酸酸化，并用二氯甲烷萃取。將合并的有機萃取液用無水硫酸鈉干燥并真空濃縮。在乙醇/己烷中重結晶，得到白色晶狀固體2-氯-3-羥基甲基苯酚(1.63g，64.8％)。1B.(2-氯-3-羥基甲基苯氧基)乙酸甲酯的制備在室溫下，將碳酸銫(3.42g，10.5mmol)加入到2-氯-3-羥基甲基苯酚(1.59g，10mmol)的丙酮溶液中，并攪拌反應混合物30分鐘。然后加入溴乙酸甲酯(1.68g，11mmol)。攪拌混合物過夜，過濾，真空濃縮濾液。通過硅膠急驟色譜法提純殘余物，用二氯甲烷/甲醇洗脫，得到白色晶狀固體(2-氯-3-羥基甲基苯氧基)乙酸甲酯(1.94g，84.1％)。1C.{2-氯-3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]苯氧基}乙酸的制備將(2-氯-3-羥基甲基苯氧基)乙酸甲酯(1.94g，8.41mmol)的四氫呋喃溶液冷卻至-78℃，用雙(三甲基甲硅烷基)氨化鉀(10.1mmol)處理，并在-78℃攪拌約1小時。然后滴加二苯基氨基甲酰氯(2.92g，12.6mmol)的四氫呋喃溶液，并將所得混合物加熱至室溫，攪拌過夜。用水驟冷混合物的反應，用乙醚稀釋，并分層。水層用乙醚萃取兩次。將合并的有機萃取液用硫酸鈉干燥并真空濃縮。通過硅膠急驟色譜法提純殘余物，用己烷/丙酮(4∶1)洗脫，得到白色晶狀固體{2-氯-3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]苯氧基}乙酸甲酯(1.72g，48.0％)。
將{2-氯-3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]苯氧基}乙酸甲酯(0.64g，1.5mmol)溶解于甲醇(20ml)、水(5ml)和四氫呋喃(2ml)的混合物中。加入氫氧化鋰(0.07g，1.65mmol)水溶液并攪拌混合物過夜。真空濃縮混合物，用水稀釋殘余物并用乙醚洗滌。水層用3M鹽酸酸化，將形成的白色沉淀過濾并干燥。從甲醇中重結晶，得到白色針狀的{2-氯-3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]苯氧基}乙酸(0.47g，76.5％)；m.p.182.2-182.9℃；1H NMR 4.66(s，2H)，5.30(s，2H)，6.83(dt，J＝7.5Hz，2H)，7.11(t，J＝8.0Hz)，7.28(m，10H)；13C NMR 64.98(t)，66.02(t)，112.96(d)，121.62(d)，126.27(d)，126.93(d)，127.02(d)，128.94(d)，135.79(s)，142.34(s)，153.68(s)，154.27(s)，170.26(s).分析C22H18ClNO5計算值C，64.16；H，4.41；N，3.40。實際值C，64.30；H，4.39；N，3.56。
實施例2{3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]-2-甲基苯氧基}乙酸2A.3-羥基甲基-2-甲基苯酚的制備在0℃下，在攪拌的同時，將溶解在無水四氫呋喃(200ml)中的3-羥基-2-甲基苯甲酸(44.4g，285mmol)(按制備例1A制備)的溶液加入到1M硼烷的四氫呋喃(800ml)溶液中。在加熱套中加熱得到的半固狀混合物至剛剛達不到回流，并保持加熱約15小時。向反應混合物中加入甲醇(200ml)。真空蒸發得到的澄清溶液，然后用另外幾份甲醇蒸發，得到3-羥基甲基-2-甲基苯酚(30.3g，99％)。2B.(3-羥基甲基-2-甲基苯氧基)乙酸叔丁酯的制備將溴乙酸叔丁基酯(75g，385mmol)加入到3-羥基甲基-2-甲基苯酚(46.6g，337mmol)和細粉狀的碳酸鉀(60g)的丙酮(500ml)溶液/懸浮液中。在回流下加熱混合物約40小時或直至完成反應。過濾去固體，蒸發液體殘余物。通過硅膠色譜法提純殘余物，用丙酮/己烷洗脫，得到淡黃色油狀(3-羥基甲基-2-甲基苯氧基)乙酸叔丁基酯(80.1g，96％)。2C.{3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]-2-甲基苯氧基}乙酸的制備將溶解在四氫呋喃(400ml)中的(3-羥基甲基-2-甲基苯氧基)乙酸叔丁基酯(80.1g，318mmol)的溶液冷卻至-50℃，并用由二異丙基胺(49ml)和2.5M正丁基鋰(130ml)的四氫呋喃(100ml)溶液制備的二異丙基氨化鋰(325mmol)的新鮮溶液處理。在-50℃處理約10分鐘后，加入溶解在四氫呋喃(100ml)中的二苯基氨基甲酰氯(80.8g，350mmol)溶液。再攪拌整個反應混合物30分鐘，然后經3小時加熱至室溫。真空蒸發溶液，并將其倒入到稀鹽酸中，用乙醚萃取。有機層用鹽水干燥，蒸發，用硅膠色譜提純，用丙酮/己烷(1∶5→1∶3)洗脫，得到白色固體{3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]-2-甲基苯氧基}乙酸叔丁基酯(104.1g，73％)。
將{3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]-2-甲基苯氧基}乙酸叔丁基酯(104.1g，233mmol)和氫氧化鋰(10.3g，245mmol)溶解在水(100ml)、甲醇(300ml)和四氫呋喃(300ml)的混合物中。混合物變為固體，但在回流溫度加熱后又重新變為液體。在室溫攪拌澄清溶液約16小時，并真空蒸發。將殘余物倒入到稀鹽酸中并用二氯甲烷萃取。蒸發溶劑并將殘余物從己烷/丙酮中重結晶，得到灰白色顆粒{3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]-2-甲基苯氧基}乙酸(87.0g，95％)；熔點180.1-180.7℃。分析C23H21NO5計算值C，70.58；H，5.41；N，3.58。實際值C，70.51；H，5.37；N，3.76。
實施例33A.除相應地用式1a的其它化合物代替實施例2A中的3-羥基-2-甲基苯甲酸外，按實施例2所述的方法，可以制備式I的下述化合物{2，6-二甲基-3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]-苯氧基}乙酸；熔點177.6-178.1℃。
1HNMR 2.21(s，3H)，2.27(s，3H，4.62(s，2H)，5.30(s，2H)，6.65(d，J＝8.4Hz，1H)，6.93(d，J＝8.4Hz，1H)，7.22(m，10H).13C NMR11.83(q)，19.25(q)，62.53(t)，65.67(t)，112.19(d)，126.14(d)，126.90(d)，128.02(d)，128.07(d)，128.88(d)，131.96(s)，134.02(s)，142.51(s)，153.88(s)，154.79(s)，172.66(s).分析C24H23NO5+0.1H2O計算值C，70.78；H，5.74；N，3.44。實際值C，70.52；H，5.67；N，3.52。
{2-溴-3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]苯氧基}乙酸；熔點188.2-189.0℃。分析C20H18BrNO5計算值C，57.91；H，3.98；N，3.07。實際值C，57.91；H，3.98；N，3.13。
{3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]-2-苯基苯氧基}乙酸；熔點181.0-181.5℃。分析C28H23NO5計算值C，74.16；H，5.11；N，3.09。實際值C，73.84；H，5.15；N，3.19。
{3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]-2-乙基苯氧基}乙酸；熔點160.9-161.7℃。
1H NMR 0.95(t，J＝7.4Hz，3H)，2.57(q，J＝7.4，2H)，4.69(s，2H)，5.17(s，2H)，6.79(d，J＝7.9Hz，1H)，6.81(d，J＝7.9Hz，1H)，7.08(t，J＝7.9，1H)，7.30(m，10H)，12.98(bs，1H).13C NMR 13.79(q)，18.58(t)，64.60(t)，64.92(t)，111.27(d)，121.35(d)，126.28(d)，127.07(d)，128.91(d)，130.80(s)，134.65(s)，142.26(s)，153.74(s)，155.45(s)，170.19(s).分析C24H23NO5計算值C，71.10；H，5.72；N，3.45。實際值C，70.98；H，5.71；N，3.61。
{3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]-2-丙基苯氧基}乙酸；熔點51.0-54.0℃。
1H NMR0.858(t，J＝7.4Hz，3H)，1.41(sextet，J＝7.4Hz，2H)，2.56(t，J＝7.7Hz，2H)，4.33(s，2H)，5.17(s，2H)，6.76(t，J＝8.8Hz，2H)，7.02(t，J＝8.0Hz，1H)，7.29(m，10H).13C NMR14.44(q)，22.33(t)，27.58(t)，65.18(t)，66.50(t)，111.49(d)，120.71(d)，126.12(d)，126.31(d)，127.12(d)，128.97(d)，129.29(s)，134.64(s)，142.34(s)，153.84(s)，156.43(s)，170.43(s).分析C25H25NO5·0.55H2O計算值C，69.83；H，6.12；N，3.39。實際值C，69.93；H，6.13；N，3.26。
{3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]-2-異丙基苯氧基}乙酸叔丁基胺鹽(0.49g，58.4％)；熔點173.7-182.2℃。1H NMRδ(ppm)1.19(s，3H)，1.21(s，9H)，3.05(septet，J＝6.8Hz，1H)，4.16(s，2H)，5.12(s，2H)，6.72(d，J＝7.6Hz，1H)，6.74(d，J＝8.4Hz，1H)，6.98(tr，J＝7.9Hz，1H)，7.29(m，10H)，8.33(br s，3H)；13C NMRδ(ppm)20.50(q)，27.41(q)，28.06(d)，50.13(s)，66.32(t)，67.89(t)，113.09(d)，121.59(d)，126.02(d)，126.34(d)，127.23(d)，129.00(d)，133.49(s)，134.37(s)，142.39(s)，153.84(s)，158.15(s)，171.13(s).分析C25H25NO5·C4H11N計算值C，70.71；H，7.37；N，5.69。實際值C，70.75；H，7.39；N，5.84。3B.將3-羥基鄰苯二甲酸酐(0.77g，4.7mmol)的四氫呋喃(15ml)溶液與硼烷-四氫呋喃配合物(20ml)一起回流18小時。冷卻得到的懸浮液并用過量的甲醇分解(放出氣體)，真空除去溶劑。用甲醇蒸發殘余物，得到白色固體(2，3-雙羥基甲基)苯酚(0.72g，98％)。隨后，除了相應地用(2，3-雙羥基甲基)苯酚代替實施例2B中的3-羥基甲基-2-甲基苯酚外，按實施例2所述方法進行，并相應按實施例2C進行，可以制備式I的下述化合物{3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]-2-羥基甲基苯氧基}乙酸；熔點137.2-137.9℃。分析C23H21NO6計算值C，67.81；H，5.20；N，3.44。實際值C，67.81；H，5.24；N，3.57。3C.除用N-苯基-N-吡啶-3-基氨基甲酰氯或N-環己基-N-苯基氨基甲酰氯代替實施例2C中的二苯基氨基甲酰氯外，按實施例2所述方法進行，可以制備式I的下述化合物{2-甲基-3-[(苯基吡啶-3-基氨基甲酰氧基)甲基]苯氧基}乙酸；熔點180.1-180.7℃。分析C22H20N2O5·0.35H2O計算值C，66.27；H，5.23；N，7.03。實際值C，66.41；H，5.36；N，6.76。
{3-[(環己基苯基氨基甲酰氧基)甲基]苯氧基}乙酸；熔點175.5-176.2℃。1H NMR 0.90(m，1H)，1.10(m，2H)，1.32(m，2H)，1.53(m，1H)，1.71(m，2H)，1.89(m，2H)，2.10(s，3H)，4.15(m，1H)，4.58(s，2H)，5.08(s，2H)，6.70(m，2H)，7.06(m，3H)，7.32(m，3H)；13C NMR 11.04(q)，25.28(t)，25.83(t)，31.96(t)，56.85(d)，65.37(t)，65.73(t)，111.23(d)，121.60(d)，125.90(s)，125.98(d)，127.45(d)，128.61(d)，130.05(d)，136.45(s)，138.20(s)，156.20(s)，171.21(s).分析C23H27NO5計算值C，69.50；H，6.85；N，3.52。實際值C，69.36；H，6.85；N，3.70。
實施例4{3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]苯氧基}乙酸4A.(3-甲酰基苯氧基)乙酸甲酯的制備將碳酸鉀粉末(5g)加入到3-羥基苯甲醛(3.1g，25mmol)和溴乙酸甲酯(4.6g，30mmol)的丙酮(40ml)溶液中，回流下攪拌混合物4小時。然后將反應混合物倒入到過量水中，用二氯甲烷萃取，并蒸發。得到的黃色油狀物在Kugelrohr(1mmHg，150℃)上蒸餾，得到無色油狀的(3-甲酰基苯氧基)乙酸甲酯(4.53g，93％)。4B.(3-羥基甲基苯氧基)乙酸甲酯的制備將硼氫化鈉(1g)的水溶液(10ml)迅速加入到(3-甲酰基苯氧基)乙酸甲酯(4.53g)的甲醇(50ml)溶液中。約10分鐘后，用過量的10％鹽酸水溶液酸化得到的澄清溶液，將其倒入到水中，用二氯甲烷萃取，并蒸發溶劑。在硅膠色譜上提純，用5％丙酮/二氯甲烷洗脫，得到無色油狀的(3-羥基甲基苯氧基)乙酸甲酯(2.51g，55％)。4C.{3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]苯氧基}乙酸的制備在吡啶(2ml)中混合(3-羥基甲基苯氧基)乙酸甲酯(400mg，2mmol)和二苯基氨基甲酰氯(580mg，2.5mmol)。在氮氣氣氛中靜置得到的黃色溶液10天。然后將混合物倒入到水中，用二氯甲烷萃取，并蒸發。殘余物通過硅膠色譜提純，用5％丙酮/二氯甲烷洗脫，得到無色油狀的{3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]苯氧基}乙酸甲酯(575g，73％)。
按實施例2C所述的方法水解{3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]苯氧基}乙酸甲酯，得到白色固體{3-[(二苯基氨基甲酰氧基)甲基]苯氧基}乙酸(353mg，65％)；熔點142.2-143.8℃；1HNMR 4.63(s，2H)，5.11(s，2H)，6.82(m，3H)，7.30(m，11H)，12.80(bs，1H).分析C22H19NO5計算值C，70.02；H，5.07；N，3.71.實際值C，70.06；H，5.07；N，3.89。
實施例5{3-[(1-二苯基氨基甲酰氧基)乙基]-2-甲基苯氧基}乙酸5A.(3-甲酰基-2-甲基苯氧基))乙酸叔丁基酯的制備按Marx，M.和Tidwell，T.在J.Org.Chem，1984，49，788-793中所述的方法制備(3-羥基甲基-2-甲基苯氧基)乙酸叔丁基酯。
將草酰氯(0.46ml，5.25mmol)滴加到二甲亞砜(0.88ml，12.50mmol)的二氯甲烷溶液(40ml)中。冷卻混合物至-78℃并攪拌1小時。通過套管將(3-羥基甲基-2-甲基苯氧基)乙酸叔丁基酯(1.26，5.00mmol)的二氯甲烷溶液加入到反應混合物中，并在-78℃再攪拌1小時。加入三乙胺(3.49ml，25mmol)。加熱反應混合物至室溫，將其倒入到水中并分層。水層用二氯甲烷萃取兩次。合并的有機萃取液用2N鹽酸和飽和的碳酸氫鈉洗滌，用無水硫酸鈉干燥并真空濃縮。通過硅膠色譜提純，用己烷/丙酮洗脫，得到淡黃色結晶固體(3-甲酰基-2-甲基苯氧基)乙酸叔丁基酯(1.07g，85.9％)。5B.[3-(1-羥基乙基)-2-甲基苯氧基]乙酸叔丁基酯的制備將(3-甲酰基-2-甲基苯氧基)乙酸叔丁基酯(0.94g，3.75mmol)溶解于新鮮蒸餾得到的四氫呋喃中并冷卻至-78℃。滴加氯化甲基鎂(2.62ml，7.88mmol)，在-78℃攪拌混合物2小時。然后加熱混合物至室溫，再攪拌6小時，然后小心地用水驟冷反應，用乙酸乙酯萃取。有機萃取液用無水硫酸鈉干燥并真空濃縮。通過硅膠色譜提純，用己烷/丙酮洗脫，得到澄清油狀的[3-(1-羥基乙基)-2-甲基苯氧基]乙酸叔丁基酯(594mg，59.5％)。5C.[3-(1-二苯基氨基甲酰氧基)乙基-2-甲基苯氧基]乙酸的制備將[3-(1-羥基乙基)-2-甲基苯氧基]乙酸叔丁基酯(553mg，2.00mmol)和二苯基氨基甲酰氯(695mg，3.00mmol)溶解于新鮮蒸餾得到的四氫呋喃(30ml)中并冷卻至-78℃。滴加二異丙基氨化鋰(1.20ml，2.40mmol)。然后加熱混合物至室溫并攪拌過夜，用乙醚驟冷反應，分層。有機層用無水硫酸鈉干燥并真空濃縮。通過硅膠色譜提純，用己烷/丙酮(9∶1)洗脫，得到澄清油狀的[3-(1-二苯基氨基甲酰氧基)乙基-2-甲基苯氧基]乙酸叔丁基酯(411mg，44.5％)。
將[3-(1-二苯基氨基甲酰氧基)乙基-2-甲基苯氧基]乙酸叔丁基酯(346mg，0.75mmol)溶解在甲醇(25ml)和水(10ml)中。加入氫氧化鋰(69mg，1.65mmol)水溶液并室溫攪拌混合物6小時。真空濃縮混合物，殘余物用水稀釋，用乙醚洗滌。水層用稀鹽酸酸化并用二氯甲烷萃取。有機萃取液用無水硫酸鈉干燥并真空濃縮，得到透明泡沫狀的[3-(1-二苯基氨基甲酰氧基)乙基-2-甲基苯氧基]乙酸(293mg，96.4％)；熔點57.0-69.0℃；1H NMR1.35(d，J＝6.5Hz，3H)，2.13(s，3H)，4.67(s，2H)，5.96(q，J＝6.5Hz，1H)，6.67(d，J＝7.8Hz，1H)，6.74(d，j＝8.2Hz，1H)，7.08(t，J＝8.0Hz，1H)，7.26(m，6H)，7.39(m，4H)，12.99(br s，1H)；13C NMR9.56(q)，20.44(q)，63.82(t)，69.83(d)，109.33(d)，116.41(d)，121.56(s)，125.20(d)，125.28(d)，125.99(d)，127.87(d)，140.33(s)，141.21(s)，154.46(s)，169.16(s).分析C22H18ClNO5·0.14CH2Cl2計算值C，69.47；H，5.62；N，3.36。實際值C，69.41；H，5.62；N，3.78。
實施例6反-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯氧基]乙酸6A.反-3-(3-羥基苯基)丙烯酸甲酯的制備在室溫和氮氣氣氛下，將膦酰基乙酸三甲酯(trimethylphosphonoacetate)(9.94ml，61.4mmol)、氯化鋰(2.60g，12.2mmol)和1，8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)(15.92ml，106.5mmol)的乙腈(80ml)溶液攪拌30分鐘。加入3-羥基-苯甲醛(5.00g，40.9mmol)，室溫再攪拌混合物3小時。加入水，用乙醚萃取水相。合并的有機部分用水、鹽水洗滌用硫酸鎂干燥，并蒸發至干。通過急驟色譜提純，用己烷/乙酸乙酯洗脫，得到白色結晶固體反-3-(3-羥基苯基)丙烯酸甲酯(6.30g，86％)。6B.反-3-(3-羥基丙烯基)苯酚的制備在-5℃和氬氣氣氛下，通過向2.5M的正丁基鋰的己烷(6.73ml，16.8mmol)溶液中加入1.0M二異丁基氫化鋁(DIBAL-H)的甲苯(16.8ml，16.8mmol)溶液，就地生成正丁基二異丁基氫化鋁鋰。加入四氫呋喃(70ml)，并冷卻混合物至-78℃。經15分鐘，將反-3-(3-羥基苯基)丙烯酸甲酯(1.0g，5.61mmol)的四氫呋喃(70ml)溶液滴加到混合物中，使混合溶液的溫度上升至-20℃，并攪拌3小時。冷卻混合物至-78℃，加入十水硫酸鈉(6g)，隨后加入飽和氯化銨(150ml)和濃鹽酸使pH為2-3。用二氯甲烷萃取混合物，萃取液用水、鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，并濃縮至干。通過急驟色譜提純，用己烷/乙酸乙酯洗脫，得到純的透明結晶固體反-3-(3-羥基丙烯基)苯酚(0.58g，68％)。6C.反-[3-(3-羥基丙烯基)苯氧基]乙酸叔丁基酯的制備室溫和氨氣氣氛下，將溴乙酸叔丁基酯(0.60ml，4.03mmol)和碳酸鉀(1.12g，8.06mmol)的溶液加入到反-3-(3-羥基丙烯基)苯酚(0.58g，3.84mmol)的丙酮(15ml)溶液中，并攪拌約20小時。過濾混合物，將濾液濃縮至干。通過急驟色譜提純，用己烷/乙酸乙酯洗脫，得到純的透明油狀的反-[3-(3-羥基丙烯基)苯氧基]乙酸叔丁基酯(0.987g，97％)。6D.反-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯氧基]乙酸的制備在-78℃和氬氣氣氛下，將反-[3-(3-羥基丙烯基)苯氧基]乙酸叔丁基酯(0.50g，1.89mmol)的四氫呋喃(15ml)溶液加入到2.0M二異丙基氨化鋰的庚烷/四氫呋喃/乙苯(1.04ml，2.08mmol)和二苯基氨基甲酰氯(0.46g，1.98mmol)的溶液中.使混合物溫度上升至0-5℃并保持此溫度16小時。加入飽和氯化銨，并用二氯甲烷萃取產物。萃取液用水、鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并濃縮至干。通過急驟色譜提純，用己烷/乙酸乙酯(7∶3)洗脫，得到純的白色結晶固體反-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯氧基]乙酸叔丁基酯(0.56g，65％)。
在室溫和氮氣氣氛下，將1.0M氫氧化鋰(1.46ml，1.46mmol)加入到反-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯氧基]乙酸叔丁基酯(0.56g，1.22mmol)的甲醇(2ml)和四氫呋喃(2ml)溶液中。室溫攪拌混合物3小時。蒸發溶劑，加入水，隨后加入2N鹽酸使pH為1-2，并用乙酸乙酯萃取產物。萃取液用水、鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并濃縮至干。從乙醚中重結晶，得到白色結晶固體反-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯氧基]乙酸(0.38g，78％)，熔點112.4-113.7℃。
實施例7反-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)-2-甲基苯氧基]乙酸7A.反-3-(3-羥基-2-甲基苯基)丙烯酸乙酯的制備在氮氣氣氛下，將丙烯酸乙酯(1.16ml，10.7mmol)、乙酸鈀(60.1mg，0.27mmol)、三鄰甲苯基膦(160mg，0.54mmol)和三乙胺(1.62ml)加入到3-溴-2-甲基苯酚(1g，5.35mmol)的乙腈(2.5ml)溶液中。在82℃加熱混合物16小時并冷卻。加入1N鹽酸，混合物用乙酸乙酯萃取。萃取液用水和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，并濃縮至于。通過急驟色譜提純，用己烷/乙酸乙酯洗脫，得到透明油狀的反-3-(3-羥基-2-甲基苯基)丙烯酸乙酯(480mg，43.5％)。7B.反-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)-2-甲基苯氧基]乙酸的制備除用反-3-(3-羥基-2-甲基苯基)丙烯酸甲酯代替實施例6B中的反-3-(3-羥基苯基)丙烯酸甲酯外，按實施例6所述的方法進行，并相應按實施例6C進行，就可以制備白色固體反-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)-2-甲基苯氧基]乙酸(141mg，89％)；熔點118.0-118.6℃。
實施例8順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)-2-甲基苯氧基]乙酸8A.(3-溴-2-甲基苯氧基)乙酸叔丁基酯的制備在氮氣氣氛下，將溴乙酸叔丁基酯(1.08ml，7.27mmol)和碳酸鉀(2.01g，14.55mmol)加入到3-溴-2-甲基苯酚(1.29g，6.92mmol)的丙酮(17ml)溶液中，并室溫攪拌混合物5小時。過濾混合物，蒸發濾液至干，得到淡黃色油狀(3-溴-2-甲基苯氧基)乙酸叔丁基酯(2.12g，100％)。8B.[3-(3-羥基丙-1-炔基)-2-甲基苯氧基]乙酸叔丁基酯的制備在室溫和氬氣氣氛下，將四(三苯膦)鈀(O)(0.41g，0.35mmol)和炔丙醇(0.83ml，14.3mmol)加入到(3-溴-2-甲基-苯氧基)乙酸叔丁基酯(2.13g，7.08mmol)的吡咯烷(21ml)溶液中。在75-80℃加熱混合物2.5小時。加入過量的飽和氯化銨，并用乙醚萃取混合物。萃取液用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，并濃縮至干。通過急驟色譜提純，用己烷/乙酸乙酯洗脫，得到油狀的[3-(3-羥基丙-1-炔基)-2-甲基苯氧基]乙酸叔丁基酯(0.38g，19.5％)。8C.[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙-1-炔基)-2-甲基苯氧基]乙酸叔丁基酯的制備在-78℃和氬氣氣氛下，將2.0M的二異丙基氨化鋰的甲苯/庚烷/乙苯溶液(0.77ml，1.54mmol)滴加到攪拌的[3-(3-羥基丙-1-炔基)-2-甲基苯氧基]乙酸叔丁基酯(370mg，1.34mmol)的四氫呋喃(4ml)溶液中。攪拌混合物10分鐘，加入固體二苯基氨基甲酰氯(310mg，1.34mmol)。使混合物溫度上升到0-5℃，攪拌16小時。加入飽和氯化銨，并用乙酸乙酯萃取混合物。萃取液用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，并濃縮至于。通過急驟色譜提純，用己烷/乙酸乙酯洗脫，得到無色油狀的[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙-1-炔基)-2-甲基苯氧基]乙酸叔丁基酯(220mg，35％)。8D.順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)-2-甲基苯氧基]乙酸的制備在氮氣氣氛下，將喹啉(22μl)和Lindlar催化劑(22mg)加入到[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙-1-炔基)-2-甲基苯氧基]乙酸叔丁基酯(215mg，0.46mmol)的甲醇(2ml)溶液中。在充滿氫氣的球形瓶中攪拌混合物35分鐘。將混合物過濾，處理濾液至干。通過急驟色譜提純，用己烷/乙酸乙酯(92.5∶7.5)洗脫，得到無色油狀的順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)-2-甲基苯氧基]乙酸叔丁基酯(150mg，69.4％)。
在室溫和氮氣氣氛下，將一水合氫氧化鋰(13mg，0.31mmol)加入到攪拌的順-[3-(3-羥基丙烯基)-2-甲基苯氧基]乙酸叔丁基酯(144mg，0.30mmol)的四氫呋喃(1.4ml)、甲醇(0.31ml)和水(0.30ml)的溶液中。室溫攪拌混合物4小時，加入1N鹽酸使pH為1-2，然后加入水，并用乙酸乙酯萃取。萃取液用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，并濃縮至干。從二氯甲烷/己烷中結晶，得到白色固體順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)-2-甲基苯氧基]乙酸(141mg，89％)，熔點133.4-135.5℃。
實施例9順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯氧基]乙酸9A.(3-溴苯氧基)乙酸叔丁基酯的制備在氮氣氣氛下，將溴乙酸叔丁基酯(1.88ml，12.69mmol)和碳酸鉀(3.5g，25.38mmol)加入到3-溴苯酚(2.09g，12.08mmol)的丙酮(30ml)溶液中，并室溫攪拌混合物5小時。過濾混合物，蒸發濾液至干，得到無色油狀(3-溴苯氧基)乙酸叔丁基酯(3.53g，100％)。9B.[3-(3-羥基丙-1-炔基)苯氧基]乙酸叔丁基酯的制備在室溫和氬氣氣氛下，將四(三苯膦)鈀(O)(0.66g，0.57mmol)和炔丙醇(1.34ml，22.97mmol)加入到(3-溴苯氧基)乙酸叔丁基酯(3.3g，11.49mmol)的吡咯烷(35ml)溶液中，在75-80℃加熱混合物2.5小時。加入過量的飽和氯化銨，并用乙醚萃取混合物。萃取液用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，并濃縮至干。通過急驟色譜提純，用己烷/乙酸乙酯洗脫，得到淡黃色油狀的[3-(3-羥基丙-1-炔基)苯氧基]乙酸叔丁基酯(1.93g，64％)。9C.順-[3-(3-羥基丙烯基)苯氧基]乙酸叔丁基酯的制備在氮氣氣氛下，將喹啉(54μl)和Lindlar催化劑(54mg)加入到攪拌的[3-(3-羥基丙-1-炔基)苯氧基]乙酸叔丁基酯(547mg，2.09mmol)的甲醇(4.3ml)溶液中。在充滿氫氣的球形瓶中攪拌混合物1小時，過濾，處理濾液至干。將殘余物通過急驟色譜提純，用己烷/乙酸乙酯洗脫，溶解于乙醚中，并用2N鹽酸(10ml)和10％碳酸氫鈉洗滌，硫酸鈉干燥，濃縮得到無色油狀的順-[3-(3-羥基丙烯基)苯氧基]乙酸叔丁基酯(420mg，76％)。9D.順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯氧基]乙酸的制備在-78℃和氬氣氣氛下，將2.0M的二異丙基氨化鋰的四氫呋喃/庚烷/乙苯溶液(0.9ml，1.8mmol)加到攪拌的順-[3-(3-羥基丙烯基)苯氧基]乙酸叔丁基酯(421mg，1.56mmol)的四氫呋喃(4.5ml)溶液中。攪拌混合物10分鐘，加入固體二苯基氨基甲酰氯(361mg，1.56mmol)。使混合物溫度上升到0-5℃，并攪拌16小時。加入飽和氯化銨，并用乙酸乙酯萃取混合物。萃取液用硫酸鈉干燥，并濃縮至干。通過急驟色譜提純，用己烷/乙酸乙酯(9∶1)洗脫，得到順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯氧基]乙酸叔丁基酯(433mg，60.4％)。
在室溫和氮氣氣氛下，將一水合氫氧化鋰(48.2mg，1.15mmol)加入到攪拌的順-[3-(3-羥基丙烯基)苯氧基]乙酸叔丁基酯(421mg，1.04mmol)的四氫呋喃(4.9ml)、甲醇(1.3ml)和水(1.2ml)的溶液中，室溫攪拌4小時。加入1N鹽酸使pH為1-2，然后加入水。混合物用乙酸乙酯萃取，萃取液用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，并濃縮至干。用乙醚(3.5ml)溶解得到的油狀物并加入叔丁基胺(94μl)。過濾得到的懸浮液，用乙醚洗滌得到的固體，得到順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯氧基]乙酸的叔丁基胺鹽(360mg，82.5％)，熔點132.5-135℃。
實施例1010A.除任選用式1c的其它化合物代替實施例8A中的3-溴-2-甲基苯酚或實施例9A中的3-溴苯酚或者任選用式3的其它化合物代替溴乙酸叔丁基酯或者任選用其它的炔基醇代替炔丙醇外，按實施例8或實施例9所述的方法進行，可以制備式I的下述化合物順-[3-(4-二苯基氨基甲酰氧基丁-1-烯基)苯氧基]乙酸叔丁基胺鹽；熔點112.5-112.8℃，順-[3-(5-二苯基氨基甲酰氧基戊-1-烯基)苯氧基]乙酸叔丁基胺鹽；分析C26H25NO5計算值C，71.41；H，7.19；N，5.55。實際值C，71.02；H，7.12；N，5.54，順-[3-(6-二苯基氨基甲酰氧基己-1-烯基)苯氧基]乙酸叔丁基胺鹽；熔點87.0-88.5℃，順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯氧基]丁酸叔丁基胺鹽；熔點102-106℃，和順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯氧基]戊酸；熔點56.3-56.7℃。10B.除任選用式1c的其它化合物代替實施例8A中的3-溴-2-甲基苯酚或實施例9A中的3-溴苯酚和用式5的其它化合物代替二苯基氨基甲酰氯外，按實施例8或實施例9所述的方法進行，可以制備式I的下述化合物順-[3-(3-(甲基苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯氧基]乙酸叔丁基胺鹽；熔點152.3-154.2℃；和順-[3-(3-(芐基苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯氧基]乙酸叔丁基胺鹽；熔點107.0-108.5℃。
實施例11[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙基)苯基]乙酸11A.3-(3-羥基苯基)丙酸甲酯的制備在室溫和氮氣氣氛下，將負載于碳上的10％鈀(0.31g)加入到反-3-(3-羥基苯基)丙烯酸甲酯(31.0g，17.4mmol)(按實施例6A所述方法制備)的乙酸乙酯(30ml)溶液中。在球形瓶的瓶壓下，將混合物加氫4小時。濾除催化劑，濃縮濾液至干。粗產物3-(3-羥基苯基)丙酸甲酯(3.16g)直接用于下一步驟中。11B.3-(3-羥基丙基)苯酚的制備在0-5℃和氬氣氣氛下，將1.0M氫化鋁鋰的四氫呋喃溶液(35.07ml，35.07mmol)加入到3-(3-羥基苯基)丙酸甲酯(3.16g，17.5mmol)的四氫呋喃(30ml)溶液中。室溫攪拌混合物6小時，向混合物中加入十水硫酸鈉(15g)，隨后冷卻至0-5℃，然后滴加水(約10ml)和濃鹽酸至pH為2-3。混合物用乙酸乙酯萃取，萃取液用水、鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并濃縮至干。通過急驟色譜提純，用己烷/乙酸乙酯洗脫，得到透明油狀的3-(3-羥基丙基)苯酚(2.34g，88％)。11C.[3-(3-羥基丙基)苯氧基]乙酸叔丁基酯的制備將溴乙酸叔丁基酯(2.39ml，16.2mmol)和碳酸鉀(4.47g，32.3mmol)加入到3-(3-羥基丙基)苯酚(2.34g，15.4mmol)的丙酮溶液中。室溫攪拌混合物約20小時，過濾，濃縮萃取液至干。通過急驟色譜提純，用己烷/乙酸乙酯洗脫，得到透明油狀的[3-(3-羥基丙基)苯氧基]乙酸叔丁基酯(3.65g，89％)。11D.[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙基)苯基]乙酸的制備將2.0M的二異丙基氨化鋰(7.57ml，15.1mmol)溶液和二苯基氨基甲酰氯(3.35g，14.5mmol)的四氫呋喃(100ml)溶液加入到[3-(3-羥基丙基)苯氧基]乙酸叔丁基酯的四氫呋喃(40ml)溶液中。使混合物溫度上升到0-5℃，并在此溫度下保持16小時。加入飽和氯化銨，并用二氯甲烷萃取混合物。有機層用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，并濃縮至干。通過硅膠色譜提純，用丙酮/己烷(7∶3)洗脫，得到黃色油狀的[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙基)苯基]乙酸叔丁基酯(3.88g，61％)。隨后進行酯的水解和重結晶，得到白色結晶固體[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙基)苯基]乙酸(0.47g，54％)，熔點133.7-134.6℃。
實施例12除用式6的其它化合物代替實施例11A中的反-3-(3-羥基苯基)丙烯酸甲酯外，按實施例11所述方法進行，可以制備式I的下述化合物[3-(2-二苯基氨基甲酰氧基乙基)苯基]乙酸，熔點123.0-123.3℃；[3-(4-二苯基氨基甲酰氧基丁基)苯基]乙酸，熔點117.8-119.6℃；[3-(5-二苯基氨基甲酰氧基戊基)苯基]乙酸，熔點128.1-128.7℃；[3-(6-二苯基氨基甲酰氧基己基)苯基]乙酸，熔點99.8-101.7℃；[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙基)-2-甲基苯基]乙酸，熔點128.7-129.2℃；和[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙基)-2-甲基苯基]戊酸，熔點81.5-81.9℃。
實施例13順-[3-(4-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯基]丙酸13A.3-(3-溴苯基)丙烯酸叔丁基酯的制備在室溫和氮氣氣氛下，將二乙基膦酰基乙酸叔丁基酯(2.86ml，12.2mmol)、氯化鋰(0.52g，12.2mmol)和1，8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)(1.57ml，10.54mmol)的乙腈(25ml)溶液攪拌30分鐘。加入3-溴苯甲醛(0.95ml，10.5mmol)，室溫下再攪拌混合物3小時。加入水，水相用乙醚萃取。合并的有機部分用水、鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并蒸發至干。通過急驟色譜提純，用己烷/乙酸乙酯洗脫，得到透明油狀的3-(3-溴苯基)丙烯酸叔丁基酯(2.24g，97％)。13B.3-(3-溴苯基)丙酸叔丁基酯的制備在室溫和氮氣氣氛下，將氧化鉑(IV)(0.002g，0.032mmol)加入到3-(3-溴苯基)丙烯酸叔丁基酯(2.24g，7.90mmol)的甲醇(7ml)和四氫呋喃(1ml)的溶液中。在球形瓶的瓶壓下加氫混合物10小時。過濾混合物，濃縮濾液至干。通過急驟色譜提純，用己烷/乙酸乙酯洗脫，得到透明油狀的3-(3-溴苯基)丙酸叔丁基酯(1.32g，58％)。13C.[3-(3-羥基丙-1-炔基)苯基]丙酸叔丁基酯的制備在室溫和氬氣氣氛下，將四(三苯基膦)鈀(O)(0.41g，0.14mmol)、碘化亞銅(0.5g，0.25mmol)和炔丙醇(0.29ml，4.91mmol)加入到3-(3-溴苯基)丙酸叔丁基酯(2.13g，7.08mmol)的吡咯烷溶液(8ml)中。在75-80℃加熱混合物5小時。冷卻至室溫后，加入飽和的氯化銨，混合物用乙醚萃取。萃取液用鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并濃縮至干。通過急驟色譜提純，用己烷/乙酸乙酯(85∶15)洗脫，得到黃色油狀的[3-(3-羥基丙-1-炔基)苯基]丙酸叔丁基酯(0.21g，33％)。13D.順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯基]丙酸的制備除用[3-(3-羥基丙-1-炔基)苯基]丙酸叔丁基酯代替實施例8C中的[3-(3-羥基丙-1-炔基)-2-甲基苯氧基]乙酸叔丁基酯外，按實施例8所述的方法進行，相應地按實施例8D進行，得到透明油狀的順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯基]丙酸(0.14g，75％)。從含有叔丁基胺的乙醚中重結晶，可以得到順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯基]丙酸叔丁基胺鹽(570mg，75％)，熔點131.8-132.4℃。
實施例1414A.除用3-溴苯基乙酸代替3-溴苯甲醛、用其它炔基醇代替炔丙醇外，按實施例13所述方法進行，可以制備式Ia的下述化合物順-[3-(4-二苯基氨基甲酰氧基丁-1-烯基)苯基]乙酸叔丁基胺鹽；熔點151.2-153.1℃。14B.除在實施例13A中用3-碘苯甲酸代替1，3-二溴苯、任選用其它炔基醇代替炔丙醇外，按實施例13所述方法進行，可以制備式Ia的下述化合物順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯基]苯甲酸；熔點137.5-137.8℃；順-3-(4-二苯基氨基甲酰氧基丁-1-烯基)苯甲酸叔丁基胺鹽；熔點172.8-176.8℃；和順-3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯甲酸叔丁基胺鹽；熔點180.5-184.0℃。14C.除用3-溴苯基乙酸代替3-溴苯甲醛、用其它炔基醇代替炔丙醇、氫化碳-碳雙鍵至相應的飽和鍵外，按實施例13所述方法進行，可以制備式Ia的下述化合物[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丁基)苯基]乙酸叔丁基胺鹽；熔點112.3-113.1℃。
實施例15[3-(4-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯基]丁酸15A.4-(3-溴苯基)丁酸甲酯的制備在0-5℃和氬氣氣氛下，將[9-硼(Bora)雙環[3.3.1]壬烷二聚物](13.4ml，6.68mmol)(9-BBN二聚物)加入到3-丁烯酸甲酯(0.71ml，6.68mmol)的四氫呋喃(2.7ml)溶液中，攪拌混合物4小時。加入N，N-二甲基甲酰胺(27ml)、氯化鈀(II)、二氯甲烷(130g，0.16mmol)、1，3-二溴苯(0.77ml，61.37mmol)和磷酸鉀(粉末，1.5g，6.94mmol)。在50℃處理混合物過夜。加入水，混合物用乙醚萃取。萃取液用水、鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，并濃縮至干。通過急驟色譜提純，用己烷/乙酸乙酯洗脫，得到透明油狀的4-(3-溴苯基)丁酸甲酯(0.26mg，16％)。15B.4-(3-溴苯基)丁酸叔丁基酯的制備在-10℃和氬氣氣氛下，將正丁基鋰(4.43ml，11.07mmol)加入到2-甲基-2-丙醇(1.0ml，10.53mmol)的四氫呋喃(21ml)溶液中，并攪拌混合物10分鐘。在-10℃滴加4-(3-溴苯基)丁酸甲酯(1.35g，5.27mmol)的四氫呋喃(5.3ml)溶液，使混合物溫度上升至室溫，攪拌16小時。加入飽和氯化銨，用乙酸乙酯萃取產物。萃取液用硫酸鈉干燥，并濃縮至干。通過急驟色譜提純，用己烷/乙酸乙酯(98∶2)洗脫，得到黃色油狀的4-(3-溴苯基)丁酸叔丁基酯(74％)。15C.順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯基]丁酸的制備除用4-(3-溴苯基)丁酸叔丁基酯代替實施例8C中的[3-(3-羥基丙-1-炔基)-2-甲基苯氧基]乙酸叔丁基酯外，按實施例8所述方法進行，得到透明油狀順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯基]丙酸(0.14g，75％)。從含有叔丁基胺的乙醚中重結晶，可以得到順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯基]丁酸叔丁基胺鹽，熔點112.4-115.3℃。
實施例16用作口服給藥的組合物
混合上述組分，并將其分配到膠囊中，每粒膠囊含有100mg；一個膠囊大致為總的日劑量。
實施例17用作口服給藥的組合物
將上述組分混合并用溶劑，如用甲醇使其成為顆粒。然后將其干燥并用適當的制片機將其制成片劑(每片含有大約20mg活性化合場)。
實施例18用作口服給藥的組合物
給藥的懸浮液。
實施例19腸胃外給藥配方(
使所述溶液達到重量，通過0.2微米的膜過濾器過濾，并在無菌條件下封裝。
實施例20栓劑配方
>將上述組分一起熔化并在蒸汽浴上混合，然后注模，每模含2.5g總重量。
實施例21局部給藥配方
>將除水外的所有組分混合并攪拌加熱至大約60℃。然后在劇烈攪拌下，加入大約60℃的足夠量的水，使組分乳化，然后加入適量水至約100g。
實施例22鼻噴霧劑制備一些含有0.025-0.5％活性化合物的含水懸浮液作為鼻噴霧劑。該制劑任選含有非活性組分，如微晶纖維素、羧甲基纖維素鈉、葡萄糖等。可加入鹽酸調節pH值。采用鼻噴霧計量泵，通常每開動一次可提供50-100微升鼻噴霧劑制劑。一般的用藥規律是每4-12小時噴霧2-4次。
實施例23IP受體結合測定通過使用表達大鼠重組IP受體的中國倉鼠卵巢細胞的放射性配體頂替測定法，可測定本發明化合物的IP受體親和性該測定法是使用[3H]iloprost作為放射性配體的極成熟測定法的改進方法。
在37℃，在5％二氧化碳下，將表達大鼠重組IP受體的中國倉鼠卵巢細胞保持在有10％胎牛血清和250μg/ml遺傳霉素的Hams F-12介質中。在冰浴中使用2mM EDTA的磷酸鹽緩沖鹽水(無鈣/鎂，4℃)收獲細胞并以500 xg進行離心。測定細胞數并將顆粒保持在-70℃。
在室溫下將顆粒解凍，然后在檢測緩沖液(20mM Tri-HCl，5mM氯化鎂，pH7.4)中稀釋至適當的濃度并快速均化。最后將顆粒懸液加入到含有緩沖液、待測化合物和放射性配體的測定試管。測定試管在25℃下培養1小時，用冰冷的檢測緩沖液漂洗3次，使用液體閃爍計數測定結合放射性。
對于每個待測化合物，使用迭代曲線擬合技術測定產生50％結合抑制作用的濃度(IC50)和希爾斜率(Hill slope)。根據Cheng和Prusoff(1973)方法測定各待測化合物的抑制解離常數(Ki)。
檢測了本發明的許多化合物，發現在上述測定法中本發明化合物具有活性，且pKi范圍是大約4.8-大約7.2。
實施例24IP受體激動劑活性測定通過檢測在使用表達大鼠重組IP受體的中國倉鼠卵巢細胞的測定法中激動劑介導的環腺苷酸的積聚作用來測定本發明化合物的IP受體激動劑效能。使用市場上可購得的腺苷酸環化酶cAMP閃光板測定儀(New EnglandNuclear)來測定環腺苷酸濃度。
在37℃，在5％二氧化碳(95％O2)下，將表達大鼠重組IP受體的中國倉鼠卵巢細胞保持在有10％胎牛血清和250μg/ml遺傳霉素的Ham’s混合物中。使用含2mM EDTA的Dulbecco氏磷酸鹽緩沖鹽水以大約90％鋪滿度收獲細胞，以1000xg洗滌一次并重新懸浮在洗滌緩沖液中。將樣品等分，以測定蛋白質。將細胞懸浮液以1000xg進行離心并在來自檢測試劑盒的“刺激和檢測緩沖液”中調節至110-140 E+3細胞/50μl。
在室溫下用50μl細胞(110-140 E+3細胞)培養待測化合物或賦形劑5分鐘。在培養之后，將100μl裂解/示蹤溶液加入到加樣孔中并在過夜培養后在Packard Topcount微量培養板閃爍計數器上計數放射性。結合到抗體上的放射性環腺苷酸的量與加入的非放射性環腺苷酸成反比。然后測定pEC50值并與標準激動劑值相對照。
檢測了本發明的許多化合物，發現在上述測定法中本發明化合物具有活性，且對細胞內環腺苷酸的刺激作用pEC50＞4.82。
實施例25間歇性跛行的犬科動物模型IP受體激動劑化合物的推斷效能可在外周性血管疾病的犬科動物模型中鑒定。采用Bohm，E.等人在Arch.Pharmacol.1990，341，Suppl.R61中描述的方法的改進方法，通過測定外科手術誘發急性后肢動脈機能不全的狗的運動能力，來確定間歇性跛行癥狀的緩解程度。
簡單地講，在用特級Sephadex進行與股骨連接/部分切除術和小動脈閉塞有關的外科手術前，訓練狗在踏車上運動，根據達臨床癥狀(跛行或不能繼續踏車運動)的時間，測定每個狗的運動能力(速率和速度)。在手術進行5-10天后，再次測定運動耐性，直至達到手術前基線運動能力。運動測試的最后是觀察跛行臨床現象，如跛行或不能繼續踏車運動。檢測在踏車運動前和/或踏車運動后流向正常后肢和手術操作后肢的血流，每周1-3次。
使用成對的t檢驗法，將手術后的響應與手術前的響應進行對比。使用兩樣品t檢驗法，在各檢驗日檢驗治療組和對照組之間的區別。
在該模型中，與對照動物相比，在手術介入后的一定時間間隔內，本發明化合物增加了在踏車上的運動時間。在股動脈部分切除術后，在踏車上訓練的狗的運動時間有明顯下降。一般，手術后，狗需要21-28天來恢復踏車上的正常運動時間；但是，用本發明化合物治療的狗在治療后5-10天內就恢復正常運動時間。
雖然本發明已參照具體實施方案進行了描述，但是，本領域技術人員應當可以理解的是在不脫離本發明基本精神和范圍的條件下，可以作出許多改進并可以替代出與本發明相當的方法。另外，可以作出許多改進方法來適應特定的情況、物質、物質的組合物、方法或方法步驟，以達到本發明的目的和范圍。所有這樣的改進方法應當包括在所附權利要求書的保護范圍之內。
權利要求
1.式I化合物或者其單個異構體、異構體的外消旋或非外消旋混合物或其藥物上可接受的鹽或溶劑化物
其中R1和R2各自獨立為烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、環烷基或雜環基；R3和R4各自獨立為氫、烷基、烷氧基、氨基、鹵素、鹵代烷基、羥烷基、硝基、芳基、芳烷基或雜環基；R5獨立為-COOR6或四唑基；R6獨立為氫或烷基；A獨立為亞烷基或亞烯基；B獨立為-O(CH2)m-或-(CH2)n-；m獨立為1-8的整數，含端點；n獨立為0-8的整數，含端點。
2.根據權利要求1的化合物，其中R1和R2各自獨立為芳基或芳烷基。
3.根據權利要求1或2的化合物，其中R1和R2各自獨立為苯基或芐基。
4.根據權利要求1-3中任一權利要求的化合物，其中R3和R4各自獨立為氫、烷基、芳基、芳烷基或鹵素。
5.根據權利要求1-4中任一權利要求的化合物，其中R3和R4各自獨立為氫、甲基、乙基、正丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基、溴或氯。
6.根據權利要求1-5中任一權利要求的化合物，其中R5是-COOR6。
7.根據權利要求1-6中任一權利要求的化合物，其中R6是氫。
8.根據權利要求1-7中任一權利要求的化合物，其中A是亞烷基，B是-O(CH2)m-，m是1-5的整數，含端點。
9.根據權利要求8的化合物，該化合物是[3-[二苯基氨基甲酰氧基)甲基]-2-甲基苯氧基}乙酸；[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙基)苯基]乙酸；或者其單個異構體、異構體的外消旋或非外消旋混合物或其藥物上可接受的鹽或溶劑化物。
10.根據權利要求1-7中任一權利要求的化合物，其中A是亞烷基，B是-(CH2)n-，n是0-5的整數，含端點。
11.根據權利要求1-7中任一權利要求的化合物，其中A是亞烯基，B是-O(CH2)m-，m是1-5的整數，含端點。
12.根據權利要求11的化合物，該化合物是順-{3-[3-(芐基苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯氧基]乙酸；順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯氧基]乙酸；順-[3-(4-二苯基氨基甲酰氧基丁-1-烯基)苯氧基]乙酸；順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)-2-甲基苯氧基]乙酸；反-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯氧基]乙酸；或反-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)-2-甲基苯氧基]乙酸；或者其單個異構體、異構體的外消旋或非外消旋混合物或其藥物上可接受的鹽或溶劑化物。
13.根據權利要求1-7中任一權利要求的化合物，其中A是亞烯基，B是-(CH2)n-，n是0-5的整數，含端點。
14.根據權利要求13的化合物，該化合物是順-[3-(3-二苯基氨基甲酰氧基丙烯基)苯基]丙酸或者其單個異構體、異構體的外消旋或非外消旋混合物或其藥物上可接受的鹽或溶劑化物。
15.根據權利要求1-11中任一權利要求的化合物，或者其單個異構體、異構體的外消旋或非外消旋混合物或其藥物上可接受的鹽或溶劑化物，選自
16.制備權利要求1-15中任一權利要求化合物的方法，該方法包括將下式之一的一個化合物
與式5化合物進行反應，
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、B、m和n具有權利要求1中給出的定義，X是指鹵素。
17.一種藥物組合物，它包括治療有效量的至少一種根據權利要求1-15中任一權利要求的化合物，并摻入至少一種合適的載體。
18.根據權利要求17的藥物組合物，其中至少一種根據權利要求1-15中任一權利要求的化合物適合給藥于具有病癥的對象，所述病癥可通過用IP受體調節劑治療而得到減輕。
19.根據權利要求1-15中任一權利要求的化合物用于制備包括任何一種權利要求1-15中化合物的藥物的用途。
20.根據權利要求1-15中任一要求權利的化合物用于制備包括任何一種權利要求1-15中化合物的藥物的用途，該藥物可用于治療與如下疾病有關的病癥異常的傷口愈合、組織壞死、過早的子宮收縮、胃潰瘍、雌雄性的性功能障礙、嚴重的經痛、異常的免疫調節、異常的血小板聚集或異常的嗜中性白細胞功能。
21.根據權利要求1-15中任一權利要求的化合物用于制備包括任何一種權利要求1-15中化合物的藥物的用途，該藥物可用于治療與如下疾病有關的病癥外周動脈閉塞病(PAOD)、間歇性跛行、嚴重肢體缺血、血栓形成性疾病、動脈粥樣硬化、閉塞性血栓血管炎(伯格氏病)、雷諾氏綜合征、高安氏病、移行性表層靜脈血栓性靜脈炎、急性動脈閉塞、冠狀動脈疾病、血管成形術后的再狹窄、中風、復發性心肌梗死、肺動脈高血壓、眼壓過高、與高血壓有關的耳鳴、與同種移植物移植術有關的局部缺血、腎衰竭、異常的多尿、異常的尿鈉排泄或異常的尿鉀排泄。
22.按照權利要求16的方法制備的權利要求1-15中任一權利要求的化合物。
23.與IP受體有關的病癥的治療方法，該方法包括服用有效量的權利要求1-15中任一權利要求的化合物。
24.與如下疾病有關的病癥的治療方法異常的傷口愈合、組織壞死、過早的子宮收縮、胃潰瘍、雌雄性的性功能障礙、嚴重的經痛、異常的免疫調節、異常的血小板聚集或異常的嗜中性白細胞功能、外周動脈閉塞病(PAOD)、間歇性跛行、嚴重肢體缺血、血栓形成性疾病、動脈粥樣硬化、閉塞性血栓血管炎(伯格氏病)、雷諾氏綜合征、高安氏病、移行性表層靜脈血栓性靜脈炎、急性動脈閉塞、冠狀動脈疾病、血管成形術后的再狹窄、中風、復發性心肌梗死、肺動脈高血壓、眼壓過高、與高血壓有關的耳鳴、與同種移植物移植術有關的局部缺血、腎衰竭、異常的多尿、異常的尿鈉排泄或異常的尿鉀排泄，該方法包括服用有效量的權利要求1-15中任一權利要求的化合物。
全文摘要
本發明涉及通常是IP受體調節劑,尤其是IP受體激動劑的化合物及其單個異構體、異構體的外消旋或非外消旋混合物或其藥物上可接受的鹽或溶劑化合物,該化合物由式Ⅰ表示。其中R
文檔編號A61P43/00GK1266054SQ9912779
公開日2000年9月13日 申請日期1999年12月23日 優先權日1998年12月23日
發明者F·J·羅裴茨-塔比阿, A·V·繆赫爾朵夫, C·奧揚, D·L·斯威蘭克 申請人:弗·哈夫曼-拉羅切有限公司