專利名稱：預防或治療與視網膜色素上皮細胞過度增殖相關的疾病的藥劑的制作方法
技術領域：
更具體地說，本發明涉及預防或治療與視網膜色素上皮細胞過度增殖相關的疾病的藥劑，它含由下式表示的活性成分N-(3，4-二甲氧基肉桂酰基)氨茴酸(常用名曲尼司特)或其藥用鹽
在本發明中，作為與視網膜色素上皮細胞過度增殖相關的疾病，可列舉增殖性玻璃體視網膜病。
背景技術：
已有報道，在外科上用作治療視網膜脫離的方法的視網膜固定術中，增殖性玻璃體視網膜病(已知是一種與視網膜色素上皮細胞過度增殖相關的疾病)是引起預后惡化的原因。目前，僅有玻璃體外科手術可用于治療這些增殖性玻璃體視網膜病。據稱，在目前的條件下，即使經過外科手術，預后視覺并不一定良好。視網膜色素上皮細胞增殖在這些增殖性玻璃體視網膜病的發生和發展中起重要作用是周知的。許多研究者已研究了各自藥物對視網膜色素上皮細胞增殖的抑制作用(Japanese Review of Cinical Opthalmology，1993年第9卷，第1886-1890頁和第2030-2034頁)。
另一方面，玻璃體外科手術的技術進步使視網膜脫離的治愈率有了顯著的提高。然而，據說上述治愈率的極限是92-94％。據認為，在很大程度上是由于增殖性玻璃體視網膜病(即視網膜色素上皮細胞增殖)所致。因此，開發對視網膜色素上皮細胞過度增殖具有極佳抑制作用的藥物已是進一步提高治療視網膜脫離的視網膜固定術的治愈率及預防或治療增殖性玻璃體視網膜病所要求的。
曲尼司特已被廣泛地用作治療過敏性病癥(如支氣管性哮喘、過敏性鼻炎、特應性皮炎和過敏性結膜炎)和皮膚病癥(如瘢痕瘤和肥大性瘢痕)的藥物。例如，已知曲尼司特對由過敏反應引起的化學媒介物釋放、由皮膚組織中的纖維原細胞引起的過度膠原積聚及冠狀動脈血管中的平滑肌過度增殖具有抑制作用。
然而，對曲尼司特抑制視網膜色素上皮細胞增殖及其可用作預防或治療增殖性玻璃體視網膜病的藥劑未曾有過任何揭示。
發明的公開本發明涉及一種預防或治療與視網膜色素上皮細胞過度增殖相關的疾病的藥劑，它含由下式表示的活性成分N-(3，4-二甲氧基肉桂酰基)氨茴酸或其藥用鹽
本發明涉及一種預防或治療與視網膜色素上皮細胞過度增殖相關的疾病的方法，它包括施用由上式(I)表示的N-(3，4-二甲氧基肉桂酰基)氨茴酸或其藥用鹽。
本發明涉及由上式(I)表示的N-(3，4-二甲氧基肉桂酰基)氨茴酸或其藥用鹽在制備用于預防或治療與視網膜色素上皮細胞過度增殖相關的疾病的藥學組合物中的應用。
此外，本發明涉及由上式(I)表示的N-(3，4-二甲氧基肉桂酰基)氨茴酸或其藥用鹽作為預防或治療與視網膜色素上皮細胞過度增殖相關的疾病的藥劑的應用。
本發明者為尋找對于視網膜色素上皮細胞增殖具有抑制作用的化合物進行了深入的研究。結果發現，曲尼司特對視網膜色素上皮細胞增殖具有抑制作用，從而對作為預防或治療與視網膜色素上皮細胞過度增殖相關的疾病的藥劑非常有用，由此形成了本發明的基礎。
相應地，本發明者證實，曲尼司特在使用大鼠視網膜色素上皮細胞的體外細胞增殖抑制作用試驗中顯著抑制視網膜色素上皮細胞的增殖。
由此得出的結論是，曲尼司特對視網膜色素上皮細胞增殖具有極佳的抑制作用，因此，是一種可用作預防或治療與視網膜色素上皮細胞過度增殖相關的疾病的藥劑的化合物。
由此，通過在藥學組合物中加入活性成分曲尼司特或其藥用鹽，可制備可用作預防或治療與視網膜色素上皮細胞過度增殖相關的疾病的藥劑的藥學組合物。
制備活性成分曲尼司特和其藥用鹽的各種方法是已知的，它們可容易地用下列文獻等中所述的方法制備日本特許公開公報1981年第40710號，1982年第36905號，1983年第17186號、第48545號、第55138號和第55139號，1989年第28013號和第50219號，1991年第37539號等。
作為曲尼司特的藥用鹽的例子，可列舉與無機堿的鹽(如鈉鹽和鉀鹽)、與有機胺(如嗎啉、哌啶、哌嗪和吡咯烷)形成的鹽及與氨基酸形成的鹽。
當在實際治療中使用本發明的藥學組合物時，它們可以經口給藥。優選局部給藥的形式(如滴眼劑、眼用軟膏和注射劑)。
例如，滴眼劑可用以下方法配制加熱下將曲尼司特或其藥用鹽與堿性物質一起溶解在適量的溶入了表面活性劑的無菌水中，加入聚乙烯基吡咯烷酮，視需要，加入合適的藥用添加劑(如防腐劑、穩定劑、緩沖劑、等滲劑、抗氧化劑和粘性改進劑)以使溶解完全。
例如，眼用軟膏可通過使用眼用軟膏中常用的基料適宜地加以配制。眼用軟膏還可以熱膠凝性水基藥學組合物的形式使用。
例如，可通過使用細針將注射劑直接注射到患病組織(如玻璃體或它們的相鄰組織)中，也可將注射劑用作眼內灌注液。
本發明的藥學組合物可以緩釋制劑的形式給藥。例如，將曲尼司特制劑摻入作為緩釋制劑的緩釋聚合物丸粒或微囊中，該丸粒或微囊可通過外科手術植入待治療的組織中。緩釋聚合物的例子包括乙烯/乙酸乙烯酯共聚物、聚氫甲基丙烯酸酯(polyhydrometacrylate)、聚丙烯酰胺、聚乙烯基吡咯烷酮、甲基纖維素、乳酸聚合物、乳酸-乙醇酸共聚物等，較佳的是可生物降解的聚合物，如乳酸聚合物和乳酸/乙醇酸共聚物。
當在實際治療中使用本發明的藥學組合物時，作為活性成分的曲尼司特或其藥用鹽的劑量根據所治療的患者的年齡、癥狀程度、治療值等而適宜地確定。劑量應由具有治療效果的合適濃度固定。例如，當藥學組合物為滴眼劑時，較好的是，0.001-2重量％眼用軟膏每日施用1至數次，每次1至數滴。
實施本發明的最佳方式下面結合實施例對本發明作更詳細的說明。實施例證實對視網膜色素上皮細胞增殖的抑制作用的試驗(1)視網膜色素上皮細胞的分離和培養將視網膜色素上皮細胞從大鼠中分離出來并加以培養是用Sakagami等所述的方法(Ophthalmic Res.，1995年第27卷第262-267頁)進行的。將戊巴比妥注射到六日齡Brown Norway大鼠的腹膜中使其麻醉，取出它們的眼睛。為滅菌而將眼睛浸漬在70％乙醇中之后，用漢氏平衡鹽溶液(HBSS)漂洗。然后在0.1％蛋白酶K溶液中于37℃溫育15分鐘。接著，用HBSS漂洗眼球，然后放入內有杜皮克氏改良愛哥爾氏培養基(DMEM)/補充了10％胎牛血清(FBS)的Ham氏F12培養基(1/1)的培養皿中。在眼睛的鋸齒緣的正下方開一個圓切口。然后取出前節、晶狀體和玻璃體并舍棄。在立體顯微鏡下將視網膜色素上皮細胞從視網膜上剝下。用不含鈣和鎂的HBSS清洗視網膜色素上皮細胞片。將視網膜色素上皮細胞片在0.1％胰蛋白酶溶液中于37℃溫育7分鐘之后，用巴斯德吸液管將細胞吸出來。將吸出的細胞在DMEM/補充了10％胎牛血清(FBS)的Ham氏F12培養基(1/1)中培養，用于下面的實驗。(2)試驗用藥物的制備試驗用藥物是通過將曲尼司特溶解在二甲亞砜(DMSO)中并將溶液用用于內皮細胞培養的培養基稀釋至規定的最終濃度而制得的。DMSO的最終濃度為0.5％。(3)實驗方法將含4×104個細胞的細胞懸浮液(200μL)加入到涂有膠原的96孔平皿的各孔中并在含5％CO2的空氣氛圍中于37℃培養。1日后，更換培養基，用200μL的含各種濃度的曲尼司特的DMEM/補充了10％FBS的Ham氏F12培養基(1/1)培養。4日后，往各孔中加入20μL的Alamar Blue(一種用于分析細胞增殖的試劑)。溫育4小時之后，用免疫讀數器(immnoreader)測定在620nm的吸光度并計算細胞數目。(4)效果評價將未處理組的細胞數目表示為100％，計算用各種濃度的曲尼司特處理過的組中細胞增殖的抑制率。(4)結果如下表所示，曲尼司特以濃度依賴性方式顯著抑制視網膜色素上皮細胞的增殖。
<p>工業上應用的可能性含作為活性成分的曲尼司特或其藥用鹽的藥學組合物對視網膜色素上皮細胞的增殖具有顯著的抑制活性，因此，非常適合用作預防或治療與視網膜色素上皮細胞過度增殖相關的疾病(如增殖性玻璃體視網膜病)的藥劑。
權利要求
1.一種預防或治療與視網膜色素上皮細胞過度增殖相關的疾病的藥劑，它含由下式表示的活性成分N-(3，4-二甲氧基肉桂酰基)氨茴酸或其藥用鹽
2.如權利要求1所述的預防或治療與視網膜色素上皮細胞過度增殖相關的疾病的藥劑，其特征在于，其劑型是滴眼劑或眼用軟膏。
3.預防或治療與視網膜色素上皮細胞過度增殖相關的疾病的方法，它包括施用由下式表示的N-(3，4-二甲氧基肉桂酰基)氨茴酸或其藥用鹽
4.由下式表示的N-(3，4-二甲氧基肉桂酰基)氨茴酸
或其藥用鹽在制備用于預防或治療與視網膜色素上皮細胞過度增殖相關的疾病的藥學組合物中的應用。
5.由下式表示的N-(3，4-二甲氧基肉桂酰基)氨茴酸
或其藥用鹽作為預防或治療與視網膜色素上皮細胞過度增殖相關的疾病的藥劑的應用。
全文摘要
本發明涉及一種預防或治療與視網膜色素上皮細胞過度增殖相關的疾病(如增殖性玻璃體視網膜病)的藥劑,它含由下式表示的活性成分N－(3,4－二甲氧基肉桂酸基)氨茴酸或其藥用鹽(見上式),對視網膜色素上皮細胞的增殖具有抑制活性。
文檔編號A61K31/196GK1252718SQ98804256
公開日2000年5月10日 申請日期1998年4月10日 優先權日1997年4月18日
發明者竹花泰雄, 北澤牧雄 申請人:橘生藥品工業株式會社