抗cd40l化合物的治療性施用方法

專利名稱：抗cd40l化合物的治療性施用方法
技術領域：
本發明涉及將抗CD40L化合物治療性地施用于患者的方法。
背景技術：
產生抗體的必要反應之一是位于B細胞上的CD40與位于活化T細胞上的CD40配體(CD40L)的相互作用，這一步驟是B細胞生長和隨后產生抗體所必需的(注意在某些報導中用gp39作為CD40L的同義詞)。正如以下進一步描述的，已經制備了許多抗CD40L化合物，有一些已經在動物中檢測了改變抗體相關疾病進程的效力。
抗CD40L化合物對免疫紊亂動物作用的已報導實驗中所用的方案采用以兩周或更短時間的間隔給予動物一定劑量化合物，通常各處理之間的間隔是1-7天(參見如Mohan等，免疫學雜志1541470-1480，1995；Early等，免疫學雜志1573159-3164，1996；Stuber等，實驗醫學雜志183693-698，1996；Chen等，免疫學雜志1552833-2840，1995；Gerritse等，美國國家科學院學報932499-2504，1996；Green等，T.Virol.702569-2575，1996；Durie等，科學2611328-1330，1993；Durie等，臨床研究雜志941333-1338，1994；Larsen等，移植614-9，1996；以及Griggs等，實驗醫學雜志183801-810，1996)。尚無信息提示更不頻繁地施用抗CD40L化合物能有效抑制病原性抗體產生或者改善免疫相關疾病的發展。
發明概述本發明人已證實，以三周或更多周的間隔施用抗CD40L化合物能夠有效治療具有抗體相關性病理發生的紊亂。本發明提供了一種對抗體相關疾病患者進行治療的方法，它包括在第一天給患者施用治療有效量的抗CD40L化合物，第二天再給藥一次，兩天之間至少間隔大約三周。隨后可以給予患者相似量的抗CD40L化合物，其中連續給藥之間至少間隔大約三周。在一個實施方案中，給藥之間間隔至少約4周。
本發明另一方面教授了一種對抗體相關疾病患者進行治療的方法，包括在第一個療程以少于大約三周的間隔給患者施用治療有效量的抗CD40L化合物，然后在第二個療程以至少大約三周或至少大約4周的間隔給患者施用治療有效量的抗CD40L化合物。
以上描述的給藥方案的另一個應用是治療慢性免疫系統紊亂(例如銀屑病、變應性疾病、關節炎或多發性硬化癥)患者。
在另一個實施方案中，本發明所述方法能夠用于治療慢性自身免疫疾病，例如系統性紅斑狼瘡、重癥肌無力、自身免疫性溶血性貧血、特發性血小板減少性紫癜或抗磷脂綜合癥。
本發明又一方面提供了一種抑制患者體內對移植組織的排斥作用的方法；這種方法包括在第一天給患者施用治療有效量的抗CD40L化合物，第二天再給藥一次，兩天之間至少間隔大約三周。隨后可以以不同間隔連續給予該化合物，但在一個實施方案中，給藥時間與第二次給藥至少間隔約三周或至少約四周。移植組織可以是適于移植的任何器官或組織。特別包括在內的是皮膚、腎臟、肝臟、心臟、骨髓或眼組織移植物。移植可以是同種移植或異種移植。
本發明方法還可以用于抑制基因治療后的免疫反應。
抑制患者體內對移植組織的排斥作用的另一種給藥方案中，在第一個療程以少于大約三周的間隔給患者施用抗CD40L化合物，然后在第二療程以至少大約三周的間隔對患者給藥。
抗CD40L化合物可以是能與位于CD40L表達細胞(例如活化T細胞)表面的CD40L結合的任何化合物。在一個實施方案中，該化合物是一種抗CD40L抗體，優選是一種單克隆抗體。所述單克隆抗體可以是5c8(ATCC保藏號HB10916)。
可以將抗CD40L化合物制成藥物組合物，其中含有治療有效量的抗CD40L化合物和一種藥學可接受的載體。這種藥物組合物還可以包含另一種治療上有效的化合物。
附圖簡述

圖1是實驗II中對對照和實驗組(SWR×NZB)F1小鼠血液和尿液測量的幾種特性隨時間的變化表。在小鼠4月齡時，以500μg/動物的劑量腹膜內施用抗CD40L mAb MR1一次，7月齡時再給藥一次，9月齡時又給藥一次，然后以一上月的間隔給藥。表中上面5行(標有AR-BN)中的每一行包含得自單只對照動物的數據，下面6行(標有CL-CR)中的每一行包含得自單只實驗動物的數據。于1996年2月對4月齡動物開始這項實驗。雙豎線分隔了4組數據，每一數據組給出了在列于各數據之上的日期采集的尿樣和血樣中測得的數值。蛋白尿(PU)水平定為微量到4級。1級對應30mg尿白蛋白/dl白蛋白，2級對應100mg/dl，3級對應300mg/dl，4級對應2000mg/dl以上。抗MR1抗體水平(標有“抗MR1”欄給出)、抗ssDNA抗體水平以及抗dsDNA抗體水平以μg/ml血液表示。適當情況下，以幾個樣品的平均值和標準誤差，采用平均值(標準誤差)形式表示數值。破折號表示通常由于動物已經死亡而未采集樣品。ND代表“未作”。
圖2是實驗II動物隨時間的蛋白尿測量值。第一欄給出動物號(同圖1)。每欄上標樣品采集日期。NC代表“未采集”。
圖3是實驗V中對照和未處理小鼠(4.5月齡開始處理)的血液和尿特性與時間的關系表。于小鼠4.5月齡時，以500μg/動物的劑量腹膜內施用MR1于處理組動物一次，然后每月腹膜內注射500μg。表中上面7行(標有AR-BLR)中的每一行包含得自單只對照動物的數據，下面7行(標有CR-CLR)中的每一行包含得自單只處理動物的數據。于1996年5月對4.5月齡動物開始這項實驗。圖的其它描述與圖1相同。
圖4是實驗V動物的蛋白尿測量值隨時間的變化圖。動物號與圖3所述相同。圖的其它描述與圖2相同。
圖5是實驗VII中對照和未處理小鼠(5.5月齡時開始處理)的血液和尿特性與時間的關系圖。以500μg/動物的劑量，每周對處理動物腹膜內施用MR1一次，持續6周，隨后每月腹膜內注射500μg。圖中上面3行(標有AN-BL)中的每一行包含得自單只對照動物的數據(如圖6中提到的那樣，一些對照動物在采集圖5數據前即已死亡)，下面7行(標有CR-DN)中的每一行包含得自單只處理動物的數據。于1996年6月對5.5月齡動物開始這項實驗。圖的其它描述與圖1相同。
圖6是實驗VII動物的蛋白尿測量值的時間變化圖。圖中上面7行(標有AR-BN)中的每一行包含得自單只對照動物的數據，下面7行(標有CR-DN)中的每一行包含得自單只處理動物的數據。圖的其它描述與圖2相同。
圖7是實驗X中對照和未處理小鼠(5.5月齡時開始處理)的血液和尿特性與時間的關系圖。以500μg/動物的劑量，每周對處理動物腹膜內施用MR1一次，持續4周，隨后每月腹膜內注射200μg。圖中上面8行(標有AR-BLR)中的每一行包含得自單只對照動物的數據，下面8行(標有CR-DLR)中的每一行包含得自單只處理動物的數據。于1996年10月對5.5月齡動物開始這項實驗。圖的其它描述與圖1相同。
圖8是實驗X中動物的蛋白尿測量值的時間變化圖。第一欄給出與圖7相同的動物號。其它描述與圖2相同。
圖9是實驗VI中對照和未處理小鼠(7月齡時開始處理)的血液和尿特性與時間的關系圖。以500μg/動物的劑量，每周對處理動物腹膜內施用MR1一次，持續6周，隨后每月腹膜內注射500μg。圖中下面4行(標有DN-EN)中的每一行包含得自每只處理動物的數據。采集該表中第一個數據時，全部對照動物即已死亡(如圖10所示)。于1996年6月對7月齡動物開始這項實驗。圖的其它描述與圖1相同。
圖10是實驗VI中動物的蛋白尿測量值的時間變化圖。圖中上面4行(標有AR-CN)中的每一行包含得自單只對照動物的數據，下面4行(標有DN-EN)中的每一行包含得自單只處理動物的數據。圖的其它描述與圖2相同。
發明詳述本發明方法包括用抗CD40L化合物以兩周以上的間隔處理患者從而治療、預防、逆轉或穩定抗體相關疾病患者。這種化合物能阻斷位于T細胞上的CD40L與B細胞上的CD40的相互作用，人們認為這樣可以抑制病原性抗體的產生(這類病原性抗體是引起多種自身免疫疾病和慢性免疫紊亂的許多病理效應的原因)。
化合物可用于本發明方法的治療用化合物包括能阻斷位于B細胞上的CD40與活化T細胞表面上表達的CD40L的相互作用的任何化合物。具體涉及的抗CD40L化合物包括多克隆抗體和單克隆抗體(mAbs)，以及抗體衍生物，例如嵌合分子、人源化分子、效應子作用弱化了的分子、雙特異性分子和抗體的偶聯物。在一個優選實施方案中，抗體是美國專利5474771中描述的5c8(該專利的說明書此處引作參考文獻)。其它已知抗5c8抗原的抗體包括抗體ImxM90、ImxM91、ImxM92(得自Immunex)，可從Ancell購買的抗CD40L mAb(克隆24-31，目錄號353-020，Bayport，MN)，可從Genzyme購買的抗CD40LmAb(Cambridge，MA，目錄號80-3703-01)。還可以買到的是PharMingen的一種抗CD40L mAb(San Diego，目錄號33580D)。已生產和鑒定了多種其它抗CD40L抗體(參見例如Bristol-Myers Squibb的WO96/23071，該專利申請的說明書此處引作參考文獻)。
本發明還包括其它類型的抗CD40L分子，例如完整Fab片段、F(ab’)2化合物、VH區、FV區、單鏈抗體(參見例如WO96/23071)、多肽、多肽的融合構建體、CD40的融合體(例如此處引作參考文獻的Hollenbaugh等，免疫方法雜志1881-7，1995文中的CD40Ig)，以及一些小分子化合物(如小亞肽化合物或非肽化合物)，它們都能夠阻斷CD40-CD40L相互作用。專利申請PCT/US96/10664(1996年6月21日遞交申請，該專利申請的說明書此處引作參考文獻)提供了小分子的設計、篩選和優化步驟。
還可以用標準重組DNA技術制備各種形式的抗體(Winter和Milstein，自然349293-99，1991)。例如，可以構建嵌合抗體，在這種抗體中，來自動物抗體的抗原結合區與人恒定區連接在一起(一種來源于非人哺乳動物的抗體，其中已通過重組DNA技術將重鏈的全部或部分鉸鏈區和恒定區和/或輕鏈的恒定區用人免疫球蛋白輕鏈或重鏈上的相應區取代)(參見例如Cabilly等的美國國家專利4816567；Morrison等，美國國家科學院學報816851-55，1984)。嵌合抗體用于人臨床治療中時能減少動物抗體引起的免疫原性應答。
另外，可以合成重組的人源化抗體。人源化抗體是最初來源于非人哺乳動物的抗體，其中已通過重組DNA技術用人免疫球蛋白輕或重鏈相應區域的氨基酸取代了抗原結合所不必需的部分或全部氨基酸(主要由人IgG序列組成的嵌合體，其中插入了特異抗原結合所需區域)(參見例如PCT專利申請WO94/04679)。用所需抗原免疫動物，分離相應的抗體，取出可變區序列中為特異抗原結合所需的部分。然后將動物源的抗原結合區克隆到已缺失了抗原結合區的人抗體基因中的適當位置。人源化抗體使在人抗體中使用異源(種間)序列達到最小程度，更不太可能引起處理對象的免疫反應。
也能用于本發明方法和組合物中的是靈長動物抗體或靈長動物源化抗體。
抗體片段和單價抗體也可用于本發明方法和組合物中。單價抗體包含與另一重鏈Fc(或莖)區結合的重鏈/輕鏈二聚體。“Fab”區指的是與包含重鏈Y形部分的序列以及全部輕鏈大致相同或相似的部分，它們一起(以聚合體形式)顯示出抗體活性。Fab蛋白包括一條重鏈和一條輕鏈的聚合體(通常稱為Fab’)，以及相當于抗體Y的兩個分支片段的四聚體(通常稱為F(ab)2)，上述任何聚合體可以是共價或非共價聚合的，只要能夠與特異抗原或抗原族選擇性反應即可。
另外，可以用標準重組DNA技術，通過改變抗原結合位點附近的氨基酸殘基來改變重組抗體與它們的抗原的結合親和力。根據分子模型進行誘變可以提高人源化抗體的抗原結合親和力(Queen等，美國科學院學報8610029-33，1989；PCT專利申請WO94/04679)。提高或降低抗體對CD40L的親和力都有可能是需要的，這取決于目標組織的類型或預想的具體治療方案。用噬菌體展示技術(參見例如此處引作參考文獻的Winter等，免疫學年度綜述12433-455，1994；及Schier等，分子生物學雜志25528-43，1996)可以實現這一點。例如，用一定量的對CD40L親和力有所減弱的抗體處理患者以進行半預防性治療是有好處的。同樣，用對CD40L親和力有所增強的抗體進行短期治療也比較有利。
對象術語“患者”是指可以施用抗CD40L化合物的任何哺乳動物患者。可用本發明方法進行治療的具體患者包括人以及非人靈長動物、綿羊、馬、牛、山羊、豬、狗、貓、兔、豚鼠、倉鼠、沙鼠、大鼠和小鼠，以及由這些宿主衍生或來源的器官、腫瘤和細胞。
本發明方法針對的對象患有抗體產生方面的疾病。
給藥途徑本發明化合物可以采用醫學上可接受的任何方式給藥。包括通過腸胃外途徑注射，例如靜脈內、血管內、動脈內、皮下、肌內、腫瘤內、腹膜內、心室內、表皮內注射，或其它注射方式，以及經口、鼻、眼、直腸或局部給藥。本發明還特別包括緩釋給藥方式(通過諸如儲存注射途徑)。某些形式的抗CD40L化合物還適合口服給藥，可以制成懸液或丸劑。
治療劑量和頻率針對特定免疫綜合癥給予患者的任何特定化合物的劑量和給藥頻率要由患者的醫生根據多方面因素作出判斷。通常劑量由臨床前和臨床試驗(包括大量試驗，以確定不同劑量化合物對患者的有益和有害影響)確定。即使已有這種建議，醫生也常常應該基于多方面考慮(例如患者年齡、治療狀況、體重、性別以及同時使用其它藥物)，改變不同患者的劑量。確定用于治療狼瘡性腎炎的每種抗CD40L化合物的最佳劑量對醫藥領域技術人員而言是一項常規工作。
根據本發明可以用多種方案治療狼瘡或其它免疫綜合癥。通常，給藥頻率應由主治醫生確定，并可能包括高頻給藥療程(如每天或每周的間隔)，再改變到低頻給藥療程(每月或更長的間隔)。
為了舉例說明抗CD40L化合物的給藥因素，以下提供針對抗CD40L mAb的給藥策略實例。其它類型抗CD40L化合物的劑量可以很容易地調節。通常，考慮每次劑量為約0.05-50mg/kg患者體重，最常用劑量在1-20mg/kg范圍。用于急性治療時，有效抗體劑量為約1mg/kg體重到約20mg/kg體重，每天給藥，持續約1-5天，優選通過靜脈內大量給藥方式。負荷保持療法的負荷期可以使用相同的劑量和給藥方案，而在保持期經靜脈內或肌內給予抗體約0.1mg/kg體重到約20mg/kg體重，連續給藥之間的間隔期為一周到3個月。長期治療還可以通過保持療法進行，這種方法中抗體經靜脈內或肌內途徑給藥，劑量為約0.1mg/kg體重到約20mg/kg體重，療程間隔期為約1周到約3個月。施用的抗體量也可以是約0.2mg/kg體重到約10mg/kg體重。另外，可以通過間歇性的靜脈內大量給藥方案進行長期治療，其中給予的抗體量為約1.0mg/kg體重到約100mg/kg體重，連續治療間的間隔為1到6個月。除了間歇性的大量給藥方案外，其它方案中均可經口、肺、鼻或皮下途徑給藥。
通常，治療開始時采用低劑量的抗體。例如，通過例如注射或輸液將起始量的抗體給予患者。對70kg的患者，起始劑量每天應含有約1.0mg到約30mg的抗體。對幾天內重復給藥的方式，這樣的劑量可以連續每天給予，每2到6天給予，每周一次給予，每2到4周給予或每月一次給予，直到觀察到疾病癥狀受到所需抑制。但是，其它給藥方案也適用。當癥狀已減輕到希望的水平，則可以停止治療。但由于病癥復發，患者可能需要進行長期的間歇性治療。
根據本發明用于治療狼瘡或其它抗體相關疾病的候選方案，可以通過連續給藥或與常規抗狼瘡治療劑或藥物(例如，水楊酸鹽、皮質類固醇或免疫抑制劑)結合使用而增強抗體的效力。或者，可以將抗體與常規藥劑偶聯。這樣可以有利地使給予的常規藥劑比在單一療法中的用量更低，例如低于常規劑量的大約50％。因此，可以避免由這種藥劑帶來的許多副作用。
本發明治療狼瘡的結合療法包括與靶向B細胞的藥劑同時使用抗CD40L抗體，如抗CD19、抗CD28或抗CD20抗體(未偶聯物或放射標記物)、IL-14拮抗劑、LJP394(LaJolla Pharmaceuticals受體阻斷因子)、IR-1116(Takeda小分子)和抗Ig獨特型單克隆抗體。或者，這種結合可以包括靶向T細胞/B細胞的藥劑，例如CTLA4Ig、IL-2拮抗劑、IL-4拮抗劑、IL6拮抗劑、受體拮抗劑、抗B7單克隆抗體、TNF、LFA1/ICAM拮抗劑、VLA4/VCAM拮抗劑、brequinar和IL-2毒素偶聯物(如DAB)、強的松、環磷酰胺及其它免疫抑制劑。這種結合還可以包括靶向T細胞的藥劑，例如CD4拮抗劑、CD2拮抗劑、IL-12。
對非狼瘡性免疫綜合癥患者進行治療的結合療法可以包括給予抗CD40L化合物以及通常用于所述具體免疫綜合癥的藥劑。
一旦患者狀況好轉，如果需要就將維持量的抗CD40L抗體單獨給予或與常規抗狼瘡藥物結合使用。隨后，可以根據癥狀情況將給藥量或給藥頻率或兩者減少到能夠維持改善狀況的水平。當癥狀緩和到預期水平，則可以停止治療。在另一些情況下，可以由患者的醫生確定采用非經常性療法(例如間隔4周或以上)。但由于病癥復發，患者可能需要進行長期的間歇性治療。
劑型將本發明方法中所用的抗CD40L化合物以藥學有效量(即對抗體相關疾病、免疫相關紊亂患者或需要抑制排斥作用的具有移植物或轉基因的患者能產生有益療效的量)給予患者。
醫學上的有益效果應包括避免患者醫療狀況惡化或使其有所改善。比如說，常常會被病原性抗體損傷的一種器官是SLE患者的腎臟。在用本發明方法進行治療的這些患者中，可以采用一種或多種實驗室檢測法監控腎功能和健康狀況，這些檢測法中測量的是血液或尿液中相關物質的濃度，其它尿特征，或者將各種物質從血液清除到尿液中的速率。醫生可能單獨或結合使用這些檢測法中測得的各參數來評估腎功能或損傷程度。這種參數的實例包括血液中尿素、肌酸酐或蛋白質的濃度；尿液中蛋白質或各種血細胞(如紅細胞或白細胞)的濃度；菊粉、肌酸酐、尿素或對氨基馬尿酸的清除速率；以及高血壓或浮腫的存在與否。醫學上的有益效果還應包括自身抗體，如狼瘡患者血清中抗dsDNA抗體的減少。
以藥學可接受的組合物形式將本發明抗CD40L化合物施用于患者，所述組合物中可包含藥學可接受的載體。在與抗CD40L化合物或其它活性組分有效活性一致的濃度下，這種載體相對無毒，對患者也無害，因此由載體引起的任何副作用不會破壞組合物中活性成分的有益效果。組合物中還可包含其它相容性物質；本文中所稱的“相容性”是指藥物組合物中的諸組分能夠與抗CD40L化合物混合，并能互相混合，而不會存在能顯著降低藥物療效的相互作用。鼻腔噴霧制劑中包含活性化合物的純化水溶液和防腐劑及等滲劑。這種制劑優選被調整到與鼻粘膜相容的pH和等滲狀態。適于口服的本發明劑型可以作為離散單元提供，如膠囊、cachet、藥片、藥丸或錠劑，每一單元內含粉末或顆粒形式的預定量強效抗CD40L化合物；作為脂質體提供；作為含水液體或不含水液體中的懸浮液提供，如糖漿、酏劑(elixir)、乳劑或頓服劑。
長間隔期施用抗CD40L化合物治療非人受試者狼瘡性腎炎的用途我們選擇在狼瘡性腎炎動物模型中說明抗CD40L化合物的效力。系統性紅斑狼瘡(SLE)是一種致命的自身免疫疾病，其特征是會產生抗多種組織、經常是抗DNA的自身抗體。在美國近140000人口受到SLE侵襲，在西歐有105000人口，主要是育齡婦女。多數患者中，狼瘡相關性免疫球蛋白和免疫復合體沉積在腎小球中，導致腎功能衰退。如果間隔較長時間地使用抗CD40L化合物能有效地選擇性抑制抗體的產生，則這種給藥方案將對腎炎發揮有益療效。這可以通過處理動物中腎炎進展延緩、腎炎減弱、存活力增加或者甚至在某些動物中腎功能提高得到證實。
在以下描述的幾項研究中，我們檢測了倉鼠抗muCD40L mAb MR1對雌性(SWR X NZB)F1小鼠腎炎發展進程的影響。給對照動物注射Syrian倉鼠多克隆Ig或Ha4/8(針對KLH的Armenian倉鼠mAb)。將蛋白尿水平定為微量到4級。1級對應30mg尿白蛋白/dl白蛋白，2級對應100mg/dl，3級對應300mg/dl，4級大于2000mg/dl。2級代表中度腎炎，2.5或更高值代表重度腎炎。
如果不處理，或者用非特異性的倉鼠免疫球蛋白處理對照動物，小鼠正常在12月齡時死亡。盡管未處理動物開始時的蛋白尿水平各不相同，多數在3月齡時達到中度蛋白尿水平；蛋白尿水向趨向于隨年齡增加。在大約5月齡時，所有對照動物中通常已具有可檢測量的抗dsDNA抗體，多數具有可檢測量的抗ssDNA抗體；這與正常小鼠(例如(SWR X NZB)F1小鼠的雌性SWR親代)中完全檢測不到這些抗體形成鮮明對比。
實驗II4月齡時開始處理(圖1和2)MR1處理在小鼠4個月大時開始。當鼠長到4個月大時，用MR1以500μg/動物的劑量對處理動物腹膜內給藥一次，7個月時給藥一次，9個月時再給藥一次，隨后每月注射一次。處理4個月后，5只對照動物中已死亡4只，而6只處理動物中有4只存活。這4只本來存活的處理小鼠有3只分別在12、13和13.5個月時死亡。一只仍活著，現在已15個月，對這個品系的小鼠來說這是極其長壽的。有趣的是，這只存活動物(小鼠II圖2中的DN)在8到13月齡有中度腎炎(蛋白尿2+)，而最近兩個月已降低到微量蛋白尿水平。這是這一品系小鼠中腎炎功能性逆轉的首次報道。
實驗V4.5月齡時開始處理(圖3和4)MR1處理在小鼠4.5個月大時開始。當鼠長到4.5個月大時，用MR1以500μg/動物的劑量對處理動物腹膜內給藥一次，隨后每月腹膜內注射500μg。4.5個月后，7只對照動物中已死亡6只，而7只處理動物中有6只存活。處理8個月后，對照全部死亡，而7只處理小鼠中只有3只死亡。如圖4所示，7只MR1處理動物中有4只的蛋白尿水平維持降低，表明腎炎發生逆轉。這4只動物仍活著，已12.5月齡。
實驗VII5.5月齡開始處理(圖5和6)MR1處理在小鼠5.5個月大時開始。用MR1以500μg/動物的劑量對處理動物腹膜內給藥，每周處理一次，共6周，隨后每月注射。處理5個月后(小鼠10.5月齡)，7只對照動物中已死亡6只，而7只處理動物在12月大時仍全部存活。以下數值是在8.5月齡時(處理3.5個月后)仍存活的動物中測得的。
抗ssDNA 抗dsDNA PU對照 2.40 48.86.346.310.1 4平均值(標準誤差) 5.8(2.6) 5.4(4.1) 4(0)MR1 2.70 12.00 1.52.01.530 0 22.70 10 0 23.50 1.5平均值(標準誤差) 1.8(1.2) 0.2(0.5)1.7實驗X5.5月齡時開始的低頻率處理(圖7和8)MR1處理在小鼠5.5個月大時開始。用MR1以500μg/動物的劑量對處理動物腹膜內給藥，每周給藥一次，共4周，隨后每月腹膜內注射200μg。研究中所用16只小鼠(對照和處理組各8只，現在8.5月大)，只有一只對照動物在7.5月大時死亡。如圖8所示，8只對照動物中7只的蛋白尿水平穩步增長到高水平，7只存活對照小鼠平均為+3.4。所有8只MR1處理小鼠中除1只外均維持低水平蛋白尿，目前8只處理小鼠平均為+2。如圖7所示，處理動物中的6只，而對照中只有1只沒有可檢測水平的抗dsDNA抗體。
實驗VI7月齡時開始處理(圖9和10)MR1處理在小鼠7個月大時開始。將MR1以500μg/動物的劑量對4只處理動物腹膜內給藥，每周一次，共6周，隨后每月腹膜內注射500μg。10個月大時，4只對照動物全部死亡。而處理小鼠中的2只在11個月時死亡，第3只在13個月時死亡，4只處理動物中的1只經7個月處理，目前仍存活(14個月大)。這只存活的處理動物(編號VIER)目前蛋白尿水平為1級，具有可檢測水平的抗dsDNA抗體和抗ssDNA抗體。
這些實驗表明，用抗CD40L mAb處理(SWR X NZB)F1小鼠，給藥間隔至少3周以上時，與對照動物相比，可以顯著而普遍地延長小鼠生命，并且減慢腎炎發展(由蛋白尿水平所示)。在某些動物中這種處理確實逆轉了腎炎，這一點可由蛋白尿水平的下降證實。32只處理動物中，11只由于抗CD40L mAb治療而蛋白尿水平下降；而對照動物中沒有類似的下降。進行血清血尿氮(BUN)檢測的24只處理動物中，3只在處理后BUN水平下降，這在任何對照動物中都未觀察到。另外，MR1處理經常會導致抗DS和抗SS DNA自身抗體的血清濃度降低，而這些抗體是未處理的這類動物正常產生的。
這些實驗中的疾病減弱或預防結果表明，以3周或更多周的間隔給藥時，抗CD40L化合物可以成功地用來治療抗體相關性疾病。這是一個令人驚訝的意外發現，它比起初設計的給藥方案有顯著的優勢。特別是對進行慢性疾病治療的患者，治療(尤其是注射或靜脈內治療)頻率降低可使花費、不便以及不適下降。另外，給藥次數減少、間隔更長時間預計將降低治療的任何副作用。
雖然為了便于清楚理解，通過圖解和實例方式比較詳細地描述了以上發明，然而，對本領域技術人員來說，很顯然，可以在本發明范圍內進行某些改變和調整，這只受到后附權利要求書范圍的限制。
權利要求
1.對抗體相關疾病患者進行治療的方法，包括在第一天給患者施用治療有效量的抗CD40L化合物，第二天再次給藥，第一天和第二天之間至少間隔大約3周。
2.根據權利要求1的方法，還包括在第三天給患者施用治療有效量的抗CD40L化合物，第二天和第三天之間至少間隔大約3周。
3.根據權利要求1的方法，其中所述的第一天和第二天之間的間隔是至少大約4周、至少大約6周或者至少大約8周。
4.對抗體相關疾病患者進行治療的方法，包括在第一個療程以少于大約三周的間隔給患者施用治療有效量的抗CD40L化合物，然后在第二個療程以至少大約三周的間隔給患者施用治療有效量的抗CD40L化合物。
5.根據權利要求4的方法，其中所述抗CD40L化合物在第二個療程以至少大約4周的間隔施用于患者。
6.對慢性自身免疫疾病患者進行治療的方法，包括在第一天給患者施用治療有效量的抗CD40L化合物，第二天再次給藥，第一天和第二天之間至少間隔大約3周。
7.根據權利要求6的方法，還包括在第三天給患者施用治療有效量的抗CD40L化合物，第二天和第三天之間至少間隔大約3周。
8.根據權利要求6的方法，第一天和第二天之間至少間隔大約4周。
9.對慢性免疫系統紊亂患者進行治療的方法，包括在第一個療程以少于大約三周的間隔給患者施用治療有效量的抗CD40L化合物，然后在第二個療程以至少大約三周的間隔給患者施用治療有效量的抗CD40L化合物。
10.根據權利要求9的方法，其中所述抗CD40L化合物在第二個療程以至少大約4周的間隔施用于患者。
11.根據權利要求9的方法，其中所述慢性免疫系統紊亂是系統性紅斑狼瘡、變應性疾病、重癥肌無力、自身免疫性溶血性貧血、特發性血小板減少性紫癜或抗磷脂綜合癥。
12.根據權利要求9的方法，其中所述慢性免疫系統紊亂是銀屑病、關節炎或多發性硬化癥。
13.根據權利要求9的方法，其中所述抗CD40L化合物是一種抗CD40L抗體。
14.根據權利要求13的方法，其中所述抗體是單克隆抗體。
15.根據權利要求14的方法，其中所述單克隆抗體是5c8。
16.根據權利要求9的方法，其中所述抗CD40L化合物被制成含有治療有效量的抗CD40L化合物和藥學可接受載體的藥物組合物。
17.根據權利要求16的方法，其中所述藥物組合物還含有第二種治療上有效的化合物。
18.一種抑制患者體內移植組織排斥作用的方法，包括在第一天給患者施用治療有效量的抗CD40L化合物，第二天再次給藥，第一天和第二天之間至少間隔大約3周。
19.根據權利要求18的方法，還包括在第三天給患者施用治療有效量的抗CD40L化合物，第二天和第三天之間至少間隔大約3周。
20.根據權利要求18的方法，其中第一天和第二天之間至少間隔大約4周。
21.根據權利要求18的方法，其中所述移植組織是腎臟、肝臟或心臟。
22.根據權利要求18的方法，其中所述移植組織是同種移植物或異種移植物。
23.一種抑制患者體內移植組織排斥作用的方法，包括在第一個療程以少于大約三周的間隔給患者施用治療有效量的抗CD40L化合物，然后在第二個療程以至少大約三周的間隔給患者施用治療有效量的抗CD40L化合物。
24.一種抑制患者體內轉基因產物免疫反應的方法，包括在第一天給患者施用治療有效量的抗CD40L化合物，第二天再次給藥，第一天和第二天之間至少間隔大約3周。
全文摘要
以三周或更多周的間隔施用抗CD40L化合物能夠有效治療免疫相關性紊亂。
文檔編號A61P37/06GK1248921SQ98802832
公開日2000年3月29日 申請日期1998年1月9日 優先權日1997年1月10日
發明者S·L·卡里德, D·W·托瑪斯 申請人:拜奧根有限公司