專利名稱：生藥提取物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含有可溶性的硅化合物作為有效成分的生藥提取物及其標(biāo)準(zhǔn)化方法。
具有生命現(xiàn)象的生物都是由細(xì)胞構(gòu)成的，細(xì)胞的機(jī)能異常會(huì)導(dǎo)致生物體的病態(tài)狀態(tài)。生物體對(duì)于內(nèi)外的環(huán)境變化，會(huì)在一定的穩(wěn)定生理?xiàng)l件下調(diào)節(jié)、維持生物體的物理和化學(xué)狀態(tài)。細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞膜與外部環(huán)境接觸，由此進(jìn)行物質(zhì)的吸收和分泌，接受來(lái)自外界的刺激發(fā)生反應(yīng)，維持生物體的恒常性。已知生體機(jī)能的維持及正?；峭ㄟ^(guò)細(xì)胞表面的各種受體和鈉、鉀、鈣等離子通道進(jìn)行的。如果因?yàn)槟撤N原因破壞了生體機(jī)能的平衡，便會(huì)發(fā)生各種疾病。
細(xì)胞膜由磷脂雙層構(gòu)成，對(duì)于選擇透過(guò)性、能動(dòng)輸送、產(chǎn)生生物電、表達(dá)免疫活性等生命的維持起著重要且復(fù)雜的功能。正常的細(xì)胞具有流動(dòng)性，對(duì)于傷害具有自身修復(fù)能力，但隨著年齡增加、各種疾病、以及病毒或細(xì)菌感染等過(guò)度的應(yīng)激刺激導(dǎo)致的內(nèi)外侵襲，使細(xì)胞膜的流動(dòng)性降低，給生體恒常性的維持造成異常。例如，高血脂、高血壓、糖尿病、年齡增大、吸煙等會(huì)對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞造成損害，導(dǎo)致動(dòng)脈硬化、腎疾病、末梢性神經(jīng)障礙等。
作為生物體內(nèi)復(fù)雜的機(jī)能調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)的一種，已知有由血管舒緩素-激肽組成的酶系。該血漿血管舒緩素-激肽體系，在生物體內(nèi)通過(guò)對(duì)細(xì)胞組織的傷害和侵害刺激會(huì)使血液凝固第Ⅶ因子活化，引起一系列的酶反應(yīng)。也就是說(shuō)，被活化的活性血液凝固第Ⅶ因子作用于同時(shí)存在于血漿中的血漿血管舒緩素，將其轉(zhuǎn)換成活性型酶的血漿血管舒緩素，然后該血漿血管舒緩素作用于血漿中的高分子激肽酶，使緩激肽游離。
作為血漿血管舒緩素-激肽系生成產(chǎn)物的緩激肽，具有末梢血管擴(kuò)張、血管通透性亢進(jìn)、發(fā)痛、發(fā)炎、白血球的游離作用等各種生理活性，是發(fā)痛、發(fā)炎、變態(tài)反應(yīng)的誘發(fā)傳遞介質(zhì)。因此，通過(guò)抑制過(guò)度的緩激肽的游離產(chǎn)生，可以緩和疼痛、炎癥、過(guò)敏癥狀等，使該病態(tài)恢復(fù)正?；?。
該血漿血管舒緩素-激肽體系，在生物體內(nèi)與其它各種酶反應(yīng)體系如腎素-血管緊張素、血液凝固系統(tǒng)、纖溶系統(tǒng)、補(bǔ)體系統(tǒng)和前列腺素、白三烯、以凝血噁烷為中心的花生四烯酸級(jí)聯(lián)、以及兒茶酚胺等具有密切的關(guān)連性，對(duì)調(diào)節(jié)生物體的機(jī)能有重要意義。因此，血管舒緩素-激肽系統(tǒng)通過(guò)與其他酶系統(tǒng)相聯(lián)系，與血壓調(diào)節(jié)作用、通過(guò)血液凝固-纖溶-補(bǔ)體系統(tǒng)的作用、或由花生四烯酸級(jí)聯(lián)生成的各種生體內(nèi)活性物質(zhì)所致的生物體調(diào)節(jié)作用或末梢循環(huán)改善作用等密切相關(guān)。如上所述，與生體機(jī)能有根本性聯(lián)系的血漿血管舒緩素-激肽體系與極其多樣的生物體內(nèi)調(diào)節(jié)系統(tǒng)有關(guān)，所以認(rèn)為對(duì)該血漿血管舒緩素-激肽體系產(chǎn)生影響的物質(zhì)與種種藥效相關(guān)。
本發(fā)明人等著眼于通過(guò)血漿血管舒緩素-激肽來(lái)調(diào)節(jié)神經(jīng)細(xì)胞的自律作用、免疫作用等的生物體內(nèi)硅化合物進(jìn)行了研究。硅廣泛分布于動(dòng)植物界，特別是在動(dòng)物組織中作為硅酸而豐富地存在于皮膚、毛發(fā)、骨、肺、腎上腺、胸腺、胰臟、脾臟等各臟器中，是骨形成所必須的成分。另外，在動(dòng)物組織中形成膠原交差結(jié)合鏈，是酸性粘多糖的構(gòu)成成分，皮膚的彈性與硅酸含量也有關(guān)系。
生藥自古以來(lái)就廣泛地用于醫(yī)療用途，其品質(zhì)主要是通過(guò)多年經(jīng)驗(yàn)得出的提取法來(lái)確認(rèn)，例如在日本藥局方(第十三版改正)中記載的生藥品質(zhì)評(píng)價(jià)法，大多是只利用顯色反應(yīng)或薄層色譜法的點(diǎn)樣來(lái)進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)。因此對(duì)于生藥來(lái)說(shuō)目前迫切需要一種為確保生藥具有一定效力的物性標(biāo)準(zhǔn)。利用與藥效有關(guān)的物性指標(biāo)來(lái)規(guī)定各種生藥的品質(zhì)，由此可以提供品質(zhì)穩(wěn)定的生藥提取物，對(duì)醫(yī)藥品的適當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)化作出了貢獻(xiàn)。
本發(fā)明人等著眼于生物體的硅化合物，以在生物體內(nèi)發(fā)現(xiàn)藥效的可溶性硅化合物作為指標(biāo)來(lái)規(guī)定生藥的品質(zhì)，從而完成了本發(fā)明。
本發(fā)明的目的在于提供含有可溶性硅化合物作為有效成分的生藥提取物及其標(biāo)準(zhǔn)化方法。
本發(fā)明涉及每1g干固物含有換算成硅為0.05mg以上的可溶性硅化合物的生藥提取物。
本發(fā)明的生藥提取物可以由各種生藥提取得到，例如可以使用丹參、紫芝、虎兒草、木賊、杜仲、車前草、車前子、豬苓、柴胡、當(dāng)歸、接骨木、茯苓、葛根、生蘆薈、胡蘿卜、生姜、澤瀉、五味子、三七、大棗、陳皮、麥冬、鹿茸、牛黃、地龍、熊膽、龍骨等動(dòng)植物生藥，只要是滿足本發(fā)明規(guī)定條件的來(lái)自動(dòng)植物、礦物等的任何生藥提取物都可適用。將這些生藥原料用水或乙醇、以及加入了苯酚等添加劑的適當(dāng)提取溶劑進(jìn)行提取，可以制造生藥提取物，此時(shí)進(jìn)行加熱或使溶劑的pH進(jìn)行變化，以促進(jìn)活性物質(zhì)的提取和濃縮，例如可以舉出如下的提取方法。(1)在生藥原料中加入水，煮沸攪拌，過(guò)濾除去不溶物等，得到提取液(浸膏)。然后根據(jù)需要濃縮提取液，進(jìn)行噴霧干燥或減壓冷凍干燥，實(shí)現(xiàn)粉末化。(2)在生藥原料中加入水，煮沸攪拌提取后，再加入精制水，調(diào)節(jié)pH至堿性區(qū)域(pH 8.5～10.5，如pH 9.5附近)，再次進(jìn)行煮沸攪拌提取，調(diào)節(jié)該提取液至中性附近后，與之前的提取液合并。之后與上述(1)同樣根據(jù)需要濃縮和/或干固提取液，實(shí)現(xiàn)粉末化。(3)在生藥原料中加入1％苯酚，與上述同樣進(jìn)行煮沸攪拌，得到提取液。之后與上述同樣根據(jù)需要濃縮和/或干固提取液。(4)在生藥原料中加入精制水和乙醇，與上述同樣進(jìn)行煮沸攪拌提取，再與上述同樣根據(jù)需要進(jìn)行濃縮、干固。(5)進(jìn)行上述的(1)～(4)的提取操作后，調(diào)節(jié)提取液的pH至弱堿性(如pH8.5附近)，濃縮，然后調(diào)節(jié)濃縮液的pH至中性附近，再進(jìn)行與上述同樣的粉末化。
本發(fā)明的特征在于含有可溶性硅化合物，由上述制造方法得到的生藥提取物的干固物中可溶性硅化合物含量可以用以下方法分析，以硅換算量進(jìn)行規(guī)定。
將生藥提取物加入水中(1mg/ml)，振蕩、超聲波處理后，過(guò)濾除去不溶物，利用鉬藍(lán)法測(cè)定得到的溶液中的硅含量。測(cè)定同一試料溶液的血漿血管舒緩素生成阻礙作用，作為可溶性硅化合物活性的指標(biāo)來(lái)確認(rèn)。上述血漿血管舒緩素生成阻礙作用是測(cè)定、確認(rèn)具有生物活性的可溶性硅化合物的效價(jià)(生物活性的強(qiáng)度)的重要指標(biāo)。
本發(fā)明中除了特定的可溶性硅化合物生藥提取物之外，還包含其制法和醫(yī)藥用途等種種實(shí)施方案，本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案如下。
(1)每1g干固物含有換算成硅為0.05mg以上的可溶性硅化合物的生藥提取物。
(2)上述(1)記載的生藥提取物，從一種選自下列一組動(dòng)植物生藥中提取得到丹參、紫芝、虎兒草、木賊、杜仲、車前草、車前子、豬苓、柴胡、當(dāng)歸、接骨木、茯苓、葛根、生蘆薈、胡蘿卜、生姜、澤瀉、五味子、三七、大棗、陳皮、麥冬、鹿茸、牛黃、地龍、熊膽和龍骨等。
(3)上述(1)記載的生藥提取物，從一種選自下列一組動(dòng)植物生藥中提取得到丹參、紫芝、虎兒草、木賊、杜仲、車前草、車前子、豬苓、柴胡、當(dāng)歸、接骨草、茯苓、葛根、生蘆薈和胡蘿卜。
(4)上述(1)、(2)或(3)記載的生藥提取物，在于固物中加入水(1mg/ml)，規(guī)定在該水溶液中可溶化存在的硅化合物量。
(5)上述(1)～(4)中任一項(xiàng)記載的生藥提取物的制造方法，使用pH調(diào)節(jié)至堿性區(qū)域的提取液。
(6)上述(5)記載的制造方法，使用pH調(diào)節(jié)至8.5～10.5的提取液。
(7)生藥提取物的制造方法，用中性附近的提取溶劑提取后，再進(jìn)行上述(5)或(6)記載的提取法。
(8)上述(5)～(7)中任一項(xiàng)記載的制造方法，加熱生藥原料或使之沸騰提取后，除去溶劑，得到干固物。
(9)上述(5)～(8)中任一項(xiàng)記載的制造方法，使用水、乙醇或其混合液作為提取液。
(10)上述(9)記載的制造方法，使用加入了苯酚等添加劑的提取溶劑。
(11)以可溶性硅含量作為指標(biāo)的生藥提取物的標(biāo)準(zhǔn)化方法。
(12)上述(9)記載的方法，將上述(2)或(3)記載的生藥進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。
(13)上述(12)記載的方法，根據(jù)上述(4)記載的方法將生藥進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。
(14)上述(11)～(13)中任一項(xiàng)記載的方法，組合顯色反應(yīng)等確認(rèn)試驗(yàn)對(duì)生藥進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。
(15)血漿血管舒緩素生成阻礙劑，含有上述(1)～(4)中任一項(xiàng)記載的生藥提取物作為有效成分。
(16)作為抗變態(tài)反應(yīng)劑的上述(15)記載的血漿血管舒緩素生成阻礙劑。
(17)作為鎮(zhèn)痛劑的上述(15)記載的血漿血管舒緩素生成阻礙劑。
(18)作為抗炎劑的上述(15)記載的血漿血管舒緩素生成阻礙劑。
以下利用實(shí)施例詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明，但這些并不限定本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1．可溶性硅化合物的定量在生藥提取物的干燥粉末中加入水(1mg/ml)，在室溫下振蕩10分鐘，然后在室溫下進(jìn)行10分鐘的超聲波處理，之后使用膜過(guò)濾器(0.45μm)過(guò)濾除去不溶物，濾液作為被檢試料。在3ml該試料溶液中加入0.2ml的氫氧化鈉試液(1mol/l)，放置一夜后，加入0.3ml的鹽酸試液(1mol/l)。然后加入0.1ml的鉬酸銨溶液(15g鉬酸銨四水和物溶于稀釋10倍的鹽酸水溶液64ml，加水至200ml得到的溶液)，混合，放置5分鐘后，加入0.4ml的酒石酸水溶液(170g/l)，1分鐘后加入0.1ml的1-氨基-2-萘酚-4-磺酸溶液(無(wú)水亞硫酸鈉1.4g、1-氨基-2-萘酚-4-磺酸0.3g和亞硫酸氫鈉18g溶于水成為200ml的溶液)，混合，使之顯色。放置約30分鐘后，測(cè)定波長(zhǎng)820nm處的吸光度，進(jìn)行硅的定量。在以下的實(shí)施例中簡(jiǎn)稱為定量試驗(yàn)，并給出定量結(jié)果(μg/ml)。2．血漿血管舒緩素生成阻礙作用按照文獻(xiàn)記載方法測(cè)定本發(fā)明生藥提取物對(duì)于血漿血管舒緩素生成的阻礙作用[《基礎(chǔ)與臨床》第20卷，第17號(hào)，399-405頁(yè)(1986)]。
即，在用生理鹽水稀釋的正常人血漿中加入陶土懸浮液，一定時(shí)間后加入利馬豆胰蛋白酶抑制劑，使血管舒緩素生成反應(yīng)停止后，在用合成基質(zhì)D-Pro-Phe-Arg-對(duì)硝基苯胺定量生成的血管舒緩素的體系中共存被檢物質(zhì)，求出該被檢物質(zhì)的血管舒緩素生成阻礙活性。以利用生成的血管舒緩素從合成基質(zhì)游離的對(duì)硝基苯胺量為指標(biāo)，測(cè)定405nm處的吸光度，以加入上述1的被檢試料的場(chǎng)合與未加入被檢物質(zhì)的場(chǎng)合(對(duì)照)之吸光度差表示阻礙活性的強(qiáng)度。即，吸光度差(△OD)越大，血管舒緩素生成阻礙活性越強(qiáng)。另外，該阻礙活性非常強(qiáng)的被檢物質(zhì)的場(chǎng)合下，將上述被檢試料(1mg/ml)適當(dāng)稀釋后作為試料溶液，進(jìn)行本試驗(yàn)，給出基于稀釋倍率換算成原來(lái)試料濃度的活性強(qiáng)度的結(jié)果。在以下的實(shí)施例中簡(jiǎn)記為活性試驗(yàn)，結(jié)果以△OD值給出。3．生藥提取物含有成分的確認(rèn)試驗(yàn)(1)戊糖的檢測(cè)(5-甲基間苯二酚·氯化鐵(Ⅲ)法)試料溶液0.1g生藥提取物溶于10ml水中。
標(biāo)準(zhǔn)溶液0.1mg的D-核糖溶于1ml水中。
操作在1ml試料溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液中加入3ml氯化鐵(Ⅲ)溶液和0.3ml5-甲基間苯二酚的乙醇溶液，充分?jǐn)嚢?。水浴中加?5分鐘后，在流水中冷卻后，溶液呈綠色。
顯色試劑(a)0.1mg氯化鐵(Ⅲ)溶于100ml鹽酸中。
(b)0.1mg 5-甲基間苯二酚溶于100ml乙醇中。(2)己糖的檢測(cè)(蒽酮硫酸法)試料溶液0.1g生藥提取物溶于10ml水中。
標(biāo)準(zhǔn)溶液0.1mg的D-葡萄糖溶于1ml水中。
操作在冰浴冷卻的1ml試料溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液中，加入同樣用冰浴冷卻的蒽酮硫酸5ml，混合。水浴中加熱10分鐘后，在流水中冷卻后，溶液呈綠色。
顯色試劑0.2g蒽酮溶于100ml冰浴冷卻的硫酸中，一邊用冰浴冷卻一邊加入到20ml水中。(3)甾類化合物、皂苷的檢測(cè)(利伯曼反應(yīng))操作在0.1g生藥提取物中加入2ml乙酸酐，充分混合物，在水浴中加熱2分鐘后，放置至室溫，在0.7ml的上清液乙酸酐層中緩慢加入2ml硫酸后，界面呈紅色至紅褐色，或上層呈藍(lán)色至綠色。(4)含羰基化合物的檢測(cè)(2,4-二硝基苯肼)
試料溶液在0.1g生藥提取物中加入3ml無(wú)水乙醇，充分混合后放置，上清液作為試料溶液。
標(biāo)準(zhǔn)溶液10mg茴香醛溶于3ml無(wú)水乙醇中，作為標(biāo)準(zhǔn)溶液。
操作在1ml試料溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液中加入2,4-二硝基苯肼試液1ml，攪拌混合，放置，生成黃色～橙色的沉淀。
試劑1.5g 2,4-二-硝基苯肼溶于10ml硫酸和10ml水的冷卻混合液中，加水至100ml。(5)含有苯酚基化合物的檢測(cè)(氯化鐵(Ⅲ)法)試料溶液0.1g生藥提取物中加入3ml無(wú)水乙醇，充分混合后放置，上清液作為試料溶液。
操作在1ml試料溶液中加入1ml稀氯化鐵(Ⅲ)試液，攪拌后，溶液呈藍(lán)色。
試劑稀氯化鐵(Ⅲ)9g溶于水中，在2ml該溶液中加水至10ml。(6)類黃酮的確認(rèn)試料溶液50mg生藥提取物中加入10ml甲醇，穩(wěn)定地加熱2～3分鐘后，離心，在5ml上清液中加入帶狀的鎂0.1g和1ml鹽酸，放置，溶液呈紅色。(7)醛、酮(2,4-二硝基苯肼)試料溶液在0.05g生藥提取物中加入1ml稀乙醇，充分混合后放置，上清液作為試料溶液。
展開(kāi)溶劑正丁醇。乙酸·水(4∶1∶5)的上層薄層板硅膠(默克5553)試料量5μl顯色試劑將0.4g2,4-二硝基苯肼溶于2N鹽酸100ml中。展開(kāi)試料液后，噴霧顯色試劑，放置，呈黃色～褐色。(8)萜、甾類化合物、糖(茴香醛)試料溶液在0.05g生藥提取物中加入1ml稀乙醇，充分混合后放置，上清液作為試料溶液。
展開(kāi)溶劑正丁醇·乙酸·水(4∶1∶5)的上層薄層板硅膠(默克5553)試料量5μl顯色試劑在0.5mlp-茴香醛中加入1ml硫酸，加入乙醇至20ml。展開(kāi)試料液后，噴霧顯色試液，之后于105℃下加熱5分鐘，呈藍(lán)色～紫色和灰色～黑色。(9)胺·吲哚衍生物(p-二甲基氨基苯甲醛)試料溶液在0.05g生藥提取物中加入1ml稀乙醇，充分混合后放置，上清液作為試料溶液。
展開(kāi)溶劑正丁醇·乙酸·水(4∶1∶5)的上層薄層板硅膠(默克5553)試料量5μl顯色試劑p-二甲基氨基苯甲醛1g溶于50ml鹽酸中，再加入50ml乙醇。展開(kāi)試料液后，噴霧顯色試液，放置，呈藍(lán)色～紫色。(10)叔胺的檢測(cè)(德雷根道爾夫試液)試料溶液在0.05g生藥提取物中加入1ml50％乙醇，分散后用超聲波處理30分鐘，之后于60℃下加熱提取5分鐘。然后進(jìn)行離心分離，其上清液作為試料溶液。
展開(kāi)溶劑(a)正丁醇·乙酸·水(4∶1∶5)的上層(b)甲醇薄層板硅膠60F 254試料量5μl顯色試劑根據(jù)日本藥典操作展開(kāi)試料液后，噴霧顯色試液，放置，呈黃色～橙色。(11)生物堿(氯化鉑-碘化鉀試液)試料溶液在0.05g生藥提取物中加入1ml50％乙醇，分散后用超聲波處理30分鐘后，再于60℃下加熱提取5分鐘。然后進(jìn)行離心分離，其上清液作為試料溶液。
展開(kāi)溶劑(a)正丁醇·乙酸·水(4∶1∶5)的上層(b)甲醇薄層板硅膠60F 254試料量5μl顯色試劑根據(jù)日本藥典操作展開(kāi)試料液后，噴霧顯色試液，放置，呈紅褐色。(12)三氯化銻顯色物試料溶液在100mg生藥提取物中加入2ml 50％乙醇，穩(wěn)定地加熱2～3分鐘后，離心，上清液作為試料溶液。
展開(kāi)溶劑(a)正丙醇·水(64∶36)(b)正己烷·乙酸乙酯(3∶7)薄層板硅膠(加入螢光劑)，UV=365nm試料量3μl顯色試劑根據(jù)日本藥典操作展開(kāi)試料液后，噴霧顯色試液，呈藍(lán)色。(13)茚滿三酮顯色物試料溶液將0.1g生藥提取物溶于10ml水。
展開(kāi)溶劑正丁醇·乙酸·水(4∶1∶5)的上層薄層板硅膠(默克5553)試料量5μl顯色試劑根據(jù)日本藥典操作展開(kāi)試料液后，噴霧顯色試液后，呈藍(lán)色～紫色。實(shí)施例1(1)在紫芝150g中加入精制水3L，煮沸攪拌提取1小時(shí)后，減壓下濃縮提取液至約800ml，噴霧干燥，得到粉末。
(定量試驗(yàn))0.650μg/ml(活性試驗(yàn))0.772(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(3)、(4)、(7)、(8)、(9)、(10)、(11)、(12)、(13)(2)在紫芝150g中加入精制水3L，煮沸攪拌提取1小時(shí)。再于殘?jiān)屑尤刖扑?L，調(diào)節(jié)pH至9.5，同樣煮沸攪拌提取1小時(shí)后，調(diào)節(jié)提取液的pH至7.0，與之前的提取液合并，減壓下濃縮至約800ml，噴霧干燥，得到粉末。
(定量試驗(yàn))0.737μg/ml(活性試驗(yàn))1.440(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(3)、(4)、(7)、(8)、(9)、(10)、(11)、(12)、(13)(3)在紫芝150g中加入苯酚水溶液3L，煮沸攪拌提取1小時(shí)后，減壓下濃縮提取液至800ml，噴霧干燥，得到粉末。
(定量試驗(yàn))0.682μg/ml(活性試驗(yàn))0.608(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(3)、(4)、(7)、(8)、(9)、(10)、(11)、(12)、(13)(4)在紫芝150g中加入苯酚水溶液3L，煮沸攪拌提取1小時(shí)。調(diào)節(jié)提取液的pH至8.5后，減壓濃縮至約800ml，調(diào)節(jié)濃縮液的pH至7.0后，噴霧干燥得到粉末。
(定量試驗(yàn))0.627μg/ml(活性試驗(yàn))0.824(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(3)、(4)、(7)、(8)、(9)、(10)、(11)、(12)、(13)實(shí)施例2在虎兒草150g中加入精制水3L，煮沸攪拌提取1小時(shí)。調(diào)節(jié)提取液的pH至8.5后，減壓濃縮至約800ml，調(diào)節(jié)濃縮液的pH至7.0后，噴霧干燥得到粉末。
(定量試驗(yàn))0.388μg/ml(活性試驗(yàn))1.184(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(1)、(2)、(3)、(6)、(8)、(9)、(10)、(11)、(12)、(13)實(shí)施例3(1)以丹參為生藥原料，進(jìn)行與實(shí)施例1的(1)同樣的提取、濃縮干固操作。
(定量試驗(yàn))0.304μg/ml(活性試驗(yàn))1.848(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(2)、(5)、(7)、(8)、(9)、(10)、(11)、(12)、(13)
(2)以丹參為生藥原料，進(jìn)行與實(shí)施例1的(2)同樣的提取、濃縮干固操作。
(定量試驗(yàn))0.347μg/ml(活性試驗(yàn))2.268(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(2)、(3)、(5)、(7)、(8)、(9)、(10)、(11)、(12)、(13)實(shí)施例4(1)以木賊為生藥原料，進(jìn)行與實(shí)施例1的(1)同樣的提取、濃縮干固操作。
(定量試驗(yàn))2.700μg/ml(活性試驗(yàn))0.716(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(2)、(6)、(8)、(10)、(11)、(12)、(13)(2)以木賊為生藥原料，進(jìn)行與實(shí)施例1的(2)同樣的提取、濃縮干固操作。
(定量試驗(yàn))2.728μg/ml(活性試驗(yàn))0.876(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(2)、(6)、(8)、(9)、(10)、(11)、(12)、(13)(3)以木賊為生藥原料，進(jìn)行與實(shí)施例2同樣的提提、濃縮干固操作。
(定量試驗(yàn))15.93μg/ml(活性試驗(yàn))0.996(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(2)、(6)、(8)、(9)、(10)、(11)、(12)、(13)實(shí)施例5(1)以杜仲為生藥原料，進(jìn)行與實(shí)施例1的(1)同樣的提取、濃縮干固操作。
(定量試驗(yàn))1.276μg/ml(活性試驗(yàn))0.688(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(2)、(4)、(7)、(8)、(9)、(10)、(11)、(12)、(13)(2)以木賊為生藥原料，進(jìn)行與實(shí)施例1的(2)同樣的提取、濃縮干固操作。
(定量試驗(yàn))1.805μg/ml(活性試驗(yàn))0.880(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(2)、(3)、(4)、(7)、(8)、(9)、(10)、(11)、(12)、(13)實(shí)施例6以車前草為生藥原料，進(jìn)行與實(shí)施例2同樣的提取、濃縮干固操作。
(定量試驗(yàn))0.809μg/ml(活性試驗(yàn))0.780(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(2)、(3)、(7)、(8)、(10)、(11)、(12)、(13)實(shí)施例7以車前子為生藥原料，進(jìn)行與實(shí)施例1的(2)同樣的提取、濃縮干固操作。
(定量試驗(yàn))0.392μg/ml(活性試驗(yàn))0.752(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(2)、(4)、(5)、(7)、(8)、(9)、(10)、(11)、(12)、(13)實(shí)施例8(1)以豬苓為生藥原料，進(jìn)行與實(shí)施例1的(1)同樣的提取、濃縮干固操作。
(定量試驗(yàn))0.725μg/ml(活性試驗(yàn))0.189(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(2)、(3)、(7)、(8)、(10)、(11)、(12)、(13)(2)以豬苓為生藥原料，進(jìn)行與實(shí)施例1的(2)同樣的提取、濃縮干固操作。
(定量試驗(yàn))0.964μg/ml(活性試驗(yàn))0.573(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(2)、(3)、(4)、(5)、(8)、(10)、(12)、(13)實(shí)施例9以柴胡為生藥原料，進(jìn)行與實(shí)施例1的(2)同樣的提取、濃縮干固操作。
(定量試驗(yàn))0.281μg/ml(活性試驗(yàn))0.434(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(2)、(3)、(8)、(9)、(10)、(11)、(12)、(13)實(shí)施例10以當(dāng)歸為生藥原料，進(jìn)行與實(shí)施例1的(2)同樣的提取、濃縮干固操作。
(定量試驗(yàn))0.077μg/ml(活性試驗(yàn))0.164(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(2)、(8)、(9)、(10)、(12)、(13)實(shí)施例11(1)以接骨木為生藥原料，進(jìn)行與實(shí)施例1的(3)同樣的提取、濃縮干固操作。
(定量試驗(yàn))0.203μg/ml(活性試驗(yàn))0.090(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(2)、(3)、(8)、(9)、(10)、(11)、(12)、(13)(2)以接骨木為生藥原料，進(jìn)行與實(shí)施例1的(4)同樣的提取、濃縮干固操作。
(定量試驗(yàn))0.227μg/ml(活性試驗(yàn))0.063(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(2)、(3)、(8)、(9)、(10)、(11)、(12)、(13)實(shí)施例12(1)以茯苓為生藥原料，進(jìn)行與實(shí)施例1的(1)同樣的提取、濃縮干固操作。
(定量試驗(yàn))0.969μg/ml(活性試驗(yàn))0.055(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(2)、(3)、(4)、(7)、(8)、(12)、(13)(2)以茯苓為生藥原料，進(jìn)行與實(shí)施例1的(2)同樣的提取、濃縮干固操作。
(定量試驗(yàn))1.711μg/ml(活性試驗(yàn))0.084(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(2)、(3)、(4)、(8)、(10)、(11)、(12)、(13)實(shí)施例13(1)以葛根為生藥原料，進(jìn)行與實(shí)施例1的(1)同樣的提取、濃縮干固操作。
(定量試驗(yàn))0.118μg/ml(活性試驗(yàn))0.071(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(2)、(3)、(5)、(6)、(8)、(9)、(10)、(11)、(12)、(13)(2)以葛根為生藥原料，進(jìn)行與實(shí)施例1的(2)同樣的提取、濃縮干固操作。
(定量試驗(yàn))0.122μg/ml(活性試驗(yàn))0.078(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(2)、(3)、(5)、(6)、(8)、(10)、(11)、(12)、(13)實(shí)施例14以生蘆薈為生藥原料，進(jìn)行與實(shí)施例1的(1)同樣的提取、濃縮干固操作。
(定量試驗(yàn))0.536μg/ml(活性試驗(yàn))0.074(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(2)、(5)、(8)、(12)、(13)實(shí)施例15以人參為生藥原料，進(jìn)行與實(shí)施例1的(1)同樣的提取、濃縮干固操作。
(定量試驗(yàn))0.087μg/ml(活性試驗(yàn))0.051(確認(rèn)試驗(yàn))陽(yáng)性(2)、(3)、(4)、(7)、(8)、(10)、(11)、(12)、(13)從使用上述各種生藥的實(shí)施例結(jié)果可以看出，含有一定量以上的可溶性硅化合物，可使該生藥提取物表現(xiàn)出一定的藥效，以該可溶性硅化合物為指標(biāo)，可以對(duì)目前為止標(biāo)準(zhǔn)很模糊的生藥進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。在生藥提取物中含有的硅化合物包括各種化合物，但本發(fā)明中只是概括地規(guī)定用鉬藍(lán)法測(cè)定的硅換算量。生藥種類不同，其他含有物質(zhì)也不同，通過(guò)適當(dāng)組合對(duì)這些含有物質(zhì)的顯色試驗(yàn)，可以更嚴(yán)格地進(jìn)行生藥的標(biāo)準(zhǔn)化。
由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，作為從生藥中的提取方法，使用pH調(diào)節(jié)至堿性區(qū)域的溶液(pH9.5附近)進(jìn)行提取操作，可溶性硅化合物的提取效率有增加的傾向，是一種理想的提取方法。
由此可知，本發(fā)明以與藥效關(guān)聯(lián)的可溶性硅化合物為指標(biāo)，可以規(guī)定各種生藥的品質(zhì)，進(jìn)而可以提供品質(zhì)穩(wěn)定的生藥提取物，對(duì)醫(yī)藥品的適當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)化作出了巨大的貢獻(xiàn)。
本發(fā)明的生藥提取物可以浸膏狀或干燥粉末狀作為醫(yī)藥或醫(yī)藥用原料使用，不使用添加劑直接用作醫(yī)藥，或與適當(dāng)?shù)乃幱锰砑觿┙M合后制劑。制劑時(shí)可以利用各種常用制劑方法，制成口服或非口服給藥的固體、半固體或液體劑型。處方時(shí)本發(fā)明生藥提取物單獨(dú)使用或多種組合使用，也可與其他化學(xué)合成醫(yī)藥活性成分適宜組合制成復(fù)合劑。
口服給藥劑可以以提取物浸膏形式直接使用，或添加緩沖劑、保存劑、糖類等矯味劑、香料等，制劑成優(yōu)選的劑型。干燥提取物浸膏成粉末狀時(shí)，可以直接使用干燥粉末形式，或加入適當(dāng)?shù)奶砑觿┤缛樘?、甘露糖、玉米淀粉、馬鈴薯淀粉等常用賦形劑，結(jié)晶纖維素、纖維素衍生物、阿拉伯膠、玉米淀粉、明膠等粘合劑，玉米淀粉、馬鈴薯淀粉、羧甲基纖維素鉀等崩解劑，滑石、硬脂酸鎂等潤(rùn)滑劑，其他的增量劑，濕潤(rùn)化劑，緩沖劑，保存劑，矯味劑，香料等，制成片劑、散劑、顆粒劑或膠囊劑?；蛘吒鶕?jù)疾病的種類，制成最適于治療的劑型，如注射劑、栓劑、吸入劑、氣霧劑、滴眼劑、軟膏、敷劑等藥學(xué)上允許的劑型。
權(quán)利要求
1．生藥提取物，含有作為有效成分的可溶性硅化合物。
2．生藥提取物的標(biāo)準(zhǔn)化方法，以可溶性硅的含量為指標(biāo)。
全文摘要
本發(fā)明提供含有作為有效成分的可溶性硅化合物的生藥提取物及其標(biāo)準(zhǔn)化方法。本發(fā)明的生藥提取物從來(lái)自動(dòng)植物的種種生藥提取得到,以可溶性硅化合物為指標(biāo)規(guī)定生藥提取物的品質(zhì)。本發(fā)明以與藥效關(guān)連的可溶性硅化合物為指標(biāo),可以規(guī)定各種生藥的品質(zhì),從而可以提供品質(zhì)穩(wěn)定的生藥提取物,對(duì)于醫(yī)藥品的適當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)化作出了巨大的貢獻(xiàn)。
文檔編號(hào)A61K36/00GK1220164SQ98122719
公開(kāi)日1999年6月23日 申請(qǐng)日期1998年11月27日 優(yōu)先權(quán)日1997年11月28日
發(fā)明者小西, 甚右衛(wèi)門(mén) 申請(qǐng)人:日本臟器制藥株式會(huì)社