專利名稱：：局部用皮膚增白美容產品的制作方法
技術領域：
：本發明涉及一種人體皮膚局部用增白美容產品以及使人體皮膚增白的方法。許多人擔心他們皮膚上的某些色素沉淀現象。例如有老年斑或皺紋的人們希望這些色斑能變得不太明顯。其他人則希望降低因日曬造成的皮膚黑化，或者能使其天然膚色變淺。為滿足這些要求，嘗試研制了許多能降低黑素細胞中色素生成的產品。但目前發現的這些物質都有不利的副作用，例如皮膚刺激性。因此這些物質不適用于化妝品，或者當能以一定濃度用于局部涂敷而其皮膚增白效果低于所預期的效果。人們認為將各種皮膚增白物質共用會降低副作用，但這樣做的主要麻煩在于由于各物質的競爭作用，這種共用也會使皮膚增白作用降低。因此需要對皮膚增白美容產品的效能進行改進。英國專利公開2287405中公開了一種皮膚增白美容制劑，其中含有光果甘草提取物或相應種的植物提取物，以及α-羥基酸、β-羥基酸或酮酸，或其酰胺、鹽或酯。這種混合物據說對酪氨酸酶具有協同抑制作用，從而能抑制黑色素的形成。國際專利申請公開94/07462公開的組合物特別是皮膚增白組合物中含有視黃醇或其衍生物以及一種雙羧基酸。美國專利5523077提出了一種皮膚增白和抑曬組合物，其中含有一種化合物，該化合物不含谷胱甘肽和氫醌或者氫醌的烷基醚或芳烷基醚。優選采用的該不含谷胱甘肽的化合物是buthioninesulfoximine或胱氨。《皮膚生物學進展》(AdvancesinBiologyofskin,W.Motagna和F.Hu編，PergamonPress,Oxford,1967,421-445頁)第26章所示的防曬研究結果包括脫色劑對正常色素細胞的作用的一覽表。在研究中，對黑色金魚皮下注射濃度為0.5％的被測化合物。報道稱包括巰基乙胺(MEA)和胱氨在內的巰基胺衍生物能減輕色素沉著。目前我們發現將某些巰基胺衍生物與雙羧基酸或甘草提取物共用能增進對黑色素生成的抑制作用。因此本發明提供了一種局部用皮膚增白美容產品，其中包含存在于適用于化妝品的載體中的組分(A)半胱氨和(B)甘草提取物或含7-30個碳原子的雙羧基酸。本發明包括一種用于人體皮膚增白的美容方法，該方法是通過在皮膚上局部涂敷本發明的產品。組分A是半胱胺。半胱胺的概念包括2-巰基乙胺(2-MEA)，即，其堿以及鹽酸巰基乙胺。最優選的組分A是2-巰基乙胺。組分B是含7-30個碳原子的雙羧基酸、甘草提取物或其混合物。雙羧基酸是具有HOOC-R-COOH結構的酸。R是直鏈或支鏈的飽和或不飽和的，它可被取代，例如可經羥基化。優選R基是不飽和的，并含8-23個碳原子，特別優選含13-20個碳原子。因此優選的酸所含的碳原子總數為10-25個碳原子，特別為15-22個碳原子。特別優選的雙羧基酸含有該鏈長且碳鏈為直鏈、未經取代的，并且是含一個、二個或三個不飽和鍵。甘草提取物例如可根據J02204495所述的方法進行制備，例如采用10份(體積)己烷與1-4份(體積)丙酮或0.5-1.5份(體積)乙醇的混合溶劑提取甘草根或其水提剩余物并除去溶劑。甘草提取物是可商購的，例如購自MaruzenPharmaceuticalCompany,Japan。優選該產品的pH為5-9，更優選為6-8。將組分A和組分B加入適用于化妝品的載體中以制得該美容產品。載體可包括常用于護膚品的成分，例如水、液體或固體護膚劑、硅油、乳化劑、溶劑、保濕劑、增稠劑、撒粉、噴灑劑等。其它特殊的皮膚有效活性成分如防曬劑和羥基酸也可加入載體中。特別優選在本發明產品加入防曬劑，特別是當產品用于一般性皮膚增白而不是色斑護理時。載體中還可包含輔劑如香精、抗氧劑、防腐劑、著色劑和緩沖劑。該產品適宜制成常用的護膚品劑型如膏霜或乳液等。該產品也可以是被稱為“洗除式產品”的產品，例如浴用凝膠，其中可能包含活性成分輸送系統，能增進漂洗過程中皮膚對活性成分的吸附，但優選該產品是免洗產品，即涂敷在皮膚上后無需仔細漂洗以便從皮膚基本除去的產品。可采用常用于制備護膚品的相同方法制備該產品。適宜先將活性成分溶解或分散于組合物的一部分水或其它溶劑或者液體中。可采用常規方法將產品盛裝于例如小罐、瓶等容器中。優選產品中所含的組分A和組分B的重量比為100∶1至1∶5000，更優選為10∶1至1∶500。產品中半胱胺的用量優選為0.001-10％(重量)，更優選為0.1-8％(重量)，特別是1-5％(重量)。產品中組分B的用量優選為0.001-20％(重量)，更優選為0.1-15(重量)特別是1-10％(重量)。組分A和B的混合用量優選占產品的0.1-25％(重量)，更優選為1-15％(重量)。如必要，雙羧基酸可以其鹽或酯的形式加入本發明產品中，它可在產品中或皮膚上或者皮膚內部分釋放出酸。同樣，能釋放出半胱胺的半胱胺衍生物也可用作組分A。可按照常規護膚品的相似涂敷方法將該產品涂敷在皮膚上。例如可將其每日1-3次涂敷在皮膚(例如面部和/或手部或手臂)上。對于色斑，用戶例如可選擇將該產品僅涂敷在作用部位。一般經2-4月會出現可見的皮膚增白效果，這要視皮膚的情況、產品中組分A和B的用量和產品的用量、以及涂敷頻率而定。本發明產品特別適用于一般性皮膚增白，當產品用于日用時，其中還可特定地包含防曬劑。測定方法*細胞維持在37℃、濕度飽和、5％二氧化碳存在條件下，將B16-F1小鼠黑素瘤細胞(AmericanTypeCultureCollection,Maryland,USA)在75平方厘米的含RPMI1640培養基(ICN-Flow，分類號12-60-54)的培養瓶中維持，培養基中額外加入了L-葡糖胺(4mM)和10％胎牛血清(FBS)。細胞每周經繼代移植2次。*色素沉著試驗微融合的第3代和第25代間的B16細胞的接種密度達5×105細胞/75平方厘米后72小時進行采集。對細胞計數，經離心(60克)成球，并再懸浮于加有L-葡糖胺(4mM)和10％FBS的DMEM(ICN-Flow分類號16-427-54)。將細胞再接種在含100μlDMEM的微量滴定盤的圓底孔中，接種密度為5×103細胞/孔。接種盤培養過夜。約24小時后，除去培養基并立即更換成200μl含或不含被測物的經預熱的新鮮培養基。每項處理過程重復4次。將180μl已著色的培養基轉移到干凈的平底微量滴定盤中，在每孔中充入正辛烷蒸氣以除去氣泡，用微滴定盤讀數器(DynatechMR5000)測定其在540nm下的吸光度，并用新鮮培養基的吸光度基準值校準，從而測定出約120小時后每孔中產生的黑色素量。校準的吸光度值與黑色素濃度成正比，被測的皮膚增白成分的色素沉著百分比可按下式計算色素沉著百分比=(540nm下被測物光密度/540nm下參照物光密度)×100％其中540nm下和被測物光密度和540nm下參照物光密度是指孔中含被測物的培養基和不含被測物的培養基經校準的吸光度平均值。被測物產生的抑制百分比即為色素沉著百分比。*細胞成活率試驗可通過抑制黑色素生成過程來減少黑色素產生，細胞毒性和細胞增殖對黑色素的產生也有影響。為測定這是否存在，通過中性紅色染料的吸光度來測定細胞成活率。中性紅是水溶性染料，能透過完整的胞質膜并在完整細胞的溶菌體內部富集。中性紅染料的吸收量與培養物中活細胞數成正比。換除微量滴定盤中黑色素分析用培養基后，立即將200μl含濃度為25μl/ml的中性紅(購自Sigma,UK，分類號2889)的200μl經預熱的新鮮培養基加入細胞中，培養3小時以維持細胞。倒置滴定盤并在吸水紙上輕拍可除去沒有吸收染料的細胞。用200μlPBS洗滌細胞，然后再除去PBS。加入100μl溶劑(50％水、49％乙醇、1％乙酸)。在室溫下靜置20分鐘，然后用微量滴定盤振蕩器將各滴定盤振蕩5秒鐘。按上述方法測定吸光度。在對下述的被測皮膚增白成分的測定中，被測物對細胞的成活率并無顯著影響。測定下表所示的是對被測的皮膚增白成分及其混合物的測定及其用量。所有成分的用量均以mmol計，但甘草提取物的用量以百萬分之一重量份(ppm)計。被測成分引起黑色素生成抑制百分比也列于表中。試驗中，被測物取自2-巰基乙胺和檸檬酸的含水基液。首先將甘草提取物溶于DMSO。使得每孔中DMSO濃度為0.5％(重量)。當采用DMSO時，應確保對照組每孔中DMSO的用量(0.5％)也相同。先將雙羧基酸溶于1N氫氧化鈉中。將p調節至8.0至9.0，然后進一步稀釋該溶液，得到適用的基液。其pH為7.4。表A中所示的測定用雙羧基酸是C18-雙羧基酸。該雙羧基酸產品購自UnichemaNetherlands。它主要由帶有含18個碳原子的直鏈的單-和雙-不飽和雙羧基酸構成，如R基帶有16個碳原子。表A2-巰基乙胺和雙羧基酸<tablesid="table1"num="001"><tablewidth="510">％抑制百分比二羧基酸(mM)00.512-巰基乙胺(mM)00-9390.011-10890.029-3900.03192888</table></tables>表B2-巰基乙胺和甘草提取物<tablesid="table2"num="002"><tablewidth="536">％抑制百分比甘草提取物(ppm)01.83.572-巰基乙胺(mM)001625720.0172430890.02104453890.0326535291</table></tables>表C2-基乙胺和煙酰胺(對照組)<tablesid="table3"num="003"><tablewidth="518">％抑制百分比煙酰胺0510152-巰基乙胺(mM)00-23-17-140.0136-17-10-60.0248-4350.0361025</table></tables>表D甘草提取物和檸檬酸(對照組)<tablesid="table4"num="004"><tablewidth="508">％抑制百分比甘草提取物(ppm)01.83.5檸檬酸(mM)0013690.5425817157516458</table></tables>如果兩種皮膚增白成分彼此不相互反應，可以預知將其共用時的色素沉著比例(色素沉著百分比/100)應為其單獨使用時色素沉著比例之和。由此可計算出共用并且無相互反應時的抑制百分比。上述結果表明半胱胺與雙羧基酸或甘草提取物的結合物對抑制黑色素產生具有協同作用。與此相反，半胱胺與常用的皮膚增白成分煙酰胺的結合物卻顯示不產生增效作用。看來這些藥劑有害地相互影響而不是相互增強彼此的效應。表D表明將甘草提取物和檸檬酸(一種α-羥基酸)共用并無相互作用，盡管根據英國專利公開GB2287405的內容本應具有協同作用。加入檸檬酸還會對甘草提取物的黑色素生成抑制作用產生不利影響。實施例1以下組合物描述的是本發明的膏霜乳化體。<tablesid="table5"num="005"><tablewidth="550">化學成分全名或其CIFA命名商標名重量％甘草提取物3.02-巰基乙胺2.0EDTA二鈉SequestereneNa20.05硅酸鋁鎂VeegumUltra0.6對羥苯甲酸甲酯MethylParaben0.15單甲基聚硅氧烷DCAntifoamEmulsion0.011、3-丁二醇ButyleneGlycol1,33.0羥乙基纖維素Natrosol250HHR0.5甘油(美國藥典)GlycerineUSP2.0黃原膠Keltrol10000.2三乙醇胺Triethanolamine(99％)1.2硬脂酸Pristerene49113.0對羥苯甲酸丙酯NFPropylparabenNF0.1氫化硬脂酸甘油酯NaturechemGMHS1.5硬脂醇Lanette18DEO1.5棕櫚酸異硬脂醇酯ProtachemISP6.0辛酸C12-15醇酯HetesterFAO3.0二甲基聚硅氧烷SiliconeFluid200(50cts)1.0膽甾醇NFCholesterolNF0.5脫水山梨醇硬脂酸酯SorbitanStearate1.0丁基化羥甲苯EmbanoxBHT0.05乙酸生育酚酯VitaminEAcetate0.1PEG-100硬脂酸酯Myrj592.0硬脂酰乳酸鈉PationicSSL0.5羥基辛酸HydroxycaprylicAcid0.1棕櫚酸和黃醇酯VitaminAPalmitate0.062-紅沒藥醇Alpha-bisabolol0.2去離子水加至100</table></tables>實施例2實施例1的組合物中，用8.0％(C18，單-和雙-不飽和)雙羧基酸替代3.0％甘草提取物。權利要求1．人體皮膚局部用增白美容產品，其中包含存在于適用于化妝品的載體中的組分(A)半胱氨和(B)甘草提取物或含7-30個碳原子的雙羧基酸。2．權利要求1的產品，其中雙羧基酸是含10-25個碳原子、優選15-22個碳原子的不飽和雙羧基酸。3．權利要求1或2的產品，其中所含組分A和組分B的重量比為100∶1至1∶5000，優選為10∶1至1∶500。4．權利要求1-3中任一權利要求的產品，其中包含0.001-10％(重量)、優選0.1-8％(重量)、更優選1-5％(重量)的半胱胺。5．權利要求1-4中任一權利要求的產品，其中包含0.001-20％(重量)、優選0.1-15％(重量)、更優選1-10％(重量)的組分B。6．權利要求1-5中任一權利要求的產品，其中含有防曬劑。7．用于人體皮膚增白的美容方法，其中是通過在皮膚上局部涂敷權利要求1-6中任一權利要求的產品。全文摘要一種人體皮膚局部用增白美容產品,其中包含存在于適用于化妝品的載體中的組分(A)半胱氨和(B)甘草提取物或含7—30個碳原子的雙羧基酸。共用的組分在減少黑色素產生方面具有協同作用。文檔編號A61K31/44GK1213535SQ9812058公開日1999年4月14日申請日期1998年10月3日優先權日1997年10月3日發明者M·R·格林,A·D·赫斯,J·P·麥庫克,G·拉曼,I·R·斯科特申請人:尤尼利弗公司