血塞通軟膠囊及其制備工藝的制作方法

專利名稱：血塞通軟膠囊及其制備工藝的制作方法
技術領域：
本發明涉及含有三七總皂甙有效劑量的軟膠囊劑口服藥物及其制備工藝。
三七總皂甙(Panax Notoginseng Saponins)是五加科人參屬植物三七(PanaxNotoginseng(Burk.)F.H.Chen)的蘆頭按一定工藝提取的總皂甙，為淡黃色無定性粉末，味苦微甘，易溶于水.甲醇、乙醇，難溶于丙酮、乙醚和苯，易吸潮。具有活血祛瘀，通脈活絡，抑制血小板聚集和增加腦血流量的作用。用于腦血管病后遺癥，視網膜中央靜脈阻塞，眼前房出血等。三七總皂甙毒性低，副作用極小。
以三七總皂甙為主要有效成分的“血塞通注射液”對腦梗塞和腦溢血后遺癥表現的癱瘓有較好療效，對心、肝、腎、脾和胃功能無損害，也無明顯毒副作用。以三七總皂甙為主要有效成分的口服制劑有硬膠囊、沖劑、片劑。片劑和硬膠囊等已有的口服制劑，其中有效成分三七總皂甙在水性介質中溶解速度較慢，溶解過程中易發粘、結塊結團，再溶解比較困難；并且三七總皂甙中主要有效成分如Rb1和Rg1等分子量較大，消化道吸收慢而且少，主藥大量經糞便排出體外，生物利用度低。因此已有的口服制劑對腦中風、冠心病心絞痛等無法達到理想效果，僅能以強身健體、降低血脂、改善心血管疾病等保健功能應用于臨床。注射液臨床使用不如口服制劑方便，安全性不如口服制劑。特別是對易污染的中藥注射劑，雖經滅菌也很難保證其有效成分的穩定。現許多廠家的“血塞通注射液”產品就常出現變色，結晶或沉淀等質量問題。此外有研究資料表明，心血管病人對鈉離子等金屬離子較為敏感，特別是大量的鈉離子會限制臨床的應用范圍。血塞通注射液中就有鈉離子。再者水針劑安瓿易碎易損，在北方冬天會結冰。
本發明的目的是提供一種以三七總皂甙為主要有效成分的血塞通軟膠囊及其制備工藝，產品系口服給藥劑型，能夠克服已有劑型的缺點，生物利用度高，滿足該類劑型在外觀、硬度、崩解度等和理化穩定性方面的標準。
本發明產品由藥液和囊殼兩大部分構成，其特征是藥液按重量每粒含有三七總皂甙40-250毫克、并含有溶劑和穩定劑，囊殼中含有明膠10份，甘油3.25-3.35份(重量比)和防腐劑。
溶劑可是液態聚乙二醇、異丙醇、吐溫-80、甘油、丙二醇、水及植物油(如豆油、花生油、茶油等)中的一種或幾種。
防腐劑可是甘油、丙二醇、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸丁酯、對羥基苯甲酸芐酯、對羥基苯甲酸苯酯中的一種或幾種。
穩定劑可是水、甘油、吐溫-80、乙氧基氫化蓖麻油(Gremophor RH 40)、大豆卵磷脂、蜂蠟、單硬脂酸鋁、乙基纖維素、固態聚乙二醇中的一種或幾種。
囊殼的配方中明膠、甘油配比難以掌握。甘油的量太多，囊殼較軟，比較容易受擠壓變形；甘油的量太少，囊殼較硬、脆，影響軟膠囊的質量穩定性及崩解時間。我們對囊殼的明膠、甘油的配比進行了詳細的試驗研究，最后獲得了一個較好的配比。
將適量明膠加入不銹鋼溶膠罐中，再加入適量水，密閉，70℃保溫3小時，再分別加入試驗用量的甘油、防腐劑，攪拌，抽真空脫氣2小時，放入明膠保溫桶中70℃保溫靜置過夜，第二天，壓膠丸，室溫干燥，留樣考察三個月，考查囊殼外觀和物理性能，結果如下
說明所篩選出的囊殼配方適用于溫暖潮濕的地方。
通過以上試驗，可以得出結論，囊殼的配方中應含有明膠10份，甘油3.25-3.35份(重量比)。
膠丸每粒含主藥--三七總皂甙的量是確定的；考慮經濟因素及制備方便選定每丸的大小，最終可確定實施例的藥液配方。
本發明產品的最佳配方中含有組份 量(克/粒)三七總皂甙0.04-0.25溶劑 0.25-0.40穩定劑0.02-0.05血塞通軟膠囊的制備工藝包括以下步驟工藝1將三七總皂甙打粉過80-120目篩后，在攪拌狀態下逐漸加入到液態聚乙二醇中，加熱使溶液保溫在50-70℃并攪拌使其溶解，溶解后加入水和甘油等，攪拌使其混合均勻，過濾、脫氣后壓丸、干燥，即得。
工藝2將三七總皂甙打粉過80-120目篩后，按處方配比投料，先將穩定劑熱溶于部分溶劑內，再將熱溶物緩慢地加進預熱到35-45℃的剩余溶劑內，邊加邊攪拌，然后再將各種固體逐一加入，每次加入后充分混合，以保證完全濕潤，過膠體磨粉碎后壓丸、干燥，即得。
本品為黃色透明軟膠囊。
本發明的積極效果是提供了一種以三七總皂甙為主要有效成分的血塞通軟膠囊及其制備工藝，產品系口服給藥劑型，能夠克服已有劑型的缺點，生物利用度高，滿足該類劑型在外觀、硬度、崩解度等和理化穩定性方面的標準。
本發明按上述工藝制備，其詳細組份由下列實施例給出，但本發明的保護范圍，不局限于此。實施例1組份 量(克/粒)三七總皂甙 0.1聚乙二醇 0.33甘油 0.023水 適量膠囊殼 0.17實施例2組份 量(克/粒)三七總皂甙 0.15異丙醇 0.35乙氧基氫化蓖麻油 0.04甘油 0.03水 適量膠囊殼 0.19實施例3組份 量(克/粒)三七總皂甙 0.05聚乙二醇 0.2 7乙氧基氫化蓖麻油 0.041甘油 0.04水 適量膠囊殼 0.14實施例4組份 量(克/粒)三七總皂甙 0.2液態聚乙二醇 0.4固態聚乙二醇 0.018甘油 0.03水 適量膠囊殼 0.19實施例5組份 量(克/粒)三七總皂甙 0.1玉米油 0.30大豆卵磷脂 0.01蜂蠟 0.03水 適量膠囊殼 0.15實施例6組份 量(克/粒)三七總皂甙 0.05水 適量吐溫-800.003豆油 0.17大豆卵磷脂 0.006乙基纖維素(100cps) 0.025膠囊殼 0.12實施例1至4的膠囊(殼)皮膜液的組成明膠 100kg甘油35kg水 適量對羥基苯甲酸甲酯0.22kg對羥基苯甲酸丙酯0.055kg實施例5至6的膠囊(殼)皮膜液的組成明膠 100kg甘油 33kg水適量對羥基苯甲酸乙酯 0.25kg實施例的制備工藝為工藝1將三七總皂甙打粉過100目篩后，在攪拌狀態下逐漸加入到液態聚乙二醇中，加熱使溶液保溫在60℃左右并攪拌使其溶解，溶解后加入水和甘油等，攪拌使其混合均勻，過濾、脫氣后壓丸、干燥，即得。或者工藝2將三七總皂甙打粉過100目篩后，按處方配比投料。先將穩定劑熱溶于適量的液體基質內，再將熱溶物緩慢地加進預熱到40℃的剩余基質內，邊加邊攪拌，然后再將主藥等各種固體逐一加入，每次加入后充分混合，以保證完全濕潤，過膠體磨粉碎后壓丸、干燥，即得。
根據新藥(中藥)穩定性試驗膠囊劑項下的要求，對血塞通軟膠囊三批樣品在室溫條件、及光照(在光照度為2800LX下照240小時)和濕度影響因素進行了質量觀察，并測定了各項數據，結果如下表1 970125-1批室溫留樣初步考察結果
表2 970125-2批室溫留樣初步考察結果
表3 970125-3批室溫留樣初步考察結果
表4光對血塞通膠丸的影響
<p>表5濕度對血塞通膠丸的影響
注軟膠囊劑的崩解時限規定為1小時以內(中國藥典一九九五年版二部附錄64頁)。含量限為90-110％。
本發明通過下面試驗證明其性能一、動物急性毒性試驗材料1、血塞通膠丸每丸含三七總皂甙100mg。昆明制藥股份有限公司研究開發中心提供，批號970125-2.加熱，加蒸餾水溶解稀釋至所需劑量濃度，38℃水溶恒溫備用；2、實驗動物ICR小鼠由云南省天然藥物藥理重點實驗室提供，(云衛動管第A12號)雌雄各半，W:19-21g，觀察飼養環境與該室普通小鼠相同。
試驗方法及給藥方案正式試驗前預試，按孫氏改良寇氏綜合計算法設計給藥方案，共分五組，按0.4ml/10g灌胃，6h內連續給藥2次，藥液0.8等比稀釋，最大劑量組2次給藥劑量為10g/kg，動物隨機分組，每組10只，藥前面2h停食，藥后正常飼養觀察，并記錄中毒表現及死亡情況，死亡動物剖檢，肉眼觀察各主要臟器的中毒性病變，存活動物繼續飼養觀察一周。
試驗結果高劑量組第一次給藥后6h內即有部分動物死亡，動物死亡多發生在藥后24h以內，部分動物稀便，不進食，鎮靜。死亡動物腸胃充液，充氣，腸系膜充血。48h不死亡動物即可健康存活，一周內逐日恢復正常，給藥情況及結果見下表血塞通膠丸小鼠急性毒性試驗(ig)
LD50=6730mg/kgLD5095％可信限為6730±1260mg/kg二、動物長期毒性試驗材料和方法1、藥物血塞通膠丸由昆明制藥股份有限公司提供，批號970125-1，規格為100mg/丸，每045ml含主藥100mg。
2、動物SD大鼠80只，雌雄各半，由云南省天然藥物藥理重點實驗室提供(云衛動管第A12號)。
3、方法將動物隨機分成4組，每組20只，雌雄各半，分籠飼養，投藥前觀察一周，待各組動物活動、進食、糞便等情況均無異常，然后開始投藥。
(1)小劑量組按150mg/kg/日給藥。
(2)中劑量組按450mg/kg/日給藥。
(3)大劑量組按750mg/kg/日給藥。
(4)對照組給予空白溶劑。
上述四組均按0.3375ml/100g，每天上午灌胃一次，共計56天，中間不停藥。
檢查項目每周稱體重，并隨之調整給藥劑量，籠旁觀察皮毛、眼、鼻、粘膜、呼吸、行為、活動、進食、飲水和二便性狀等；用藥結束后，采血檢查五項血液學指標紅細胞(RBc)，白細胞(WBc)，血小板(PLT)，血色素(Hb)及白細胞分類；11項血液生化指標丙氨酸氨基轉移酶(ALT)，血清谷草轉氨酶(AST)，血清總蛋白(TP)，血清尿素氮(BUN)，肌酐(Crea)，總膽固醇(T-CH0)，血糖(Glu)，白蛋白(ALB)。
AST/ALT,A/G；2/3的動物作病理學檢查系統尸檢；心，肝，脾，肺，腎，臟器系數；腦、心、肝、脾、肺、腎、腎上腺，胸腺，卵巢，睪丸，子宮組織學光鏡檢查和1/3的動物留存觀察2周。
試驗結果1、血塞通軟膠丸各個劑量組及空白溶劑對照組在56天試驗期內均活動正常，行為活潑，毛色光潤，未見糞便異常，無一死亡。
2、四組動物體重增長情況基本一致。
3、血液學檢查，血塞通各個劑量組與對照組比較均無差異性。
4、血液生化檢測，除小劑量雄鼠ALT高于對照組外，其余與對照組比較均無差異性。
5、四組動物的腦，心，脾，肺，腎，腎上腺，胸腺，卵巢，睪丸，子宮等11種臟器外觀正常，病理解剖學及病理組織學檢查均無特殊的病理學改變。
血塞通軟膠丸成人用量15mg/kg/日，據此，大鼠長期毒性試驗，大、中、小劑量分別相當于成人用量的50,30。及10倍，故采用大劑量的1/50作為臨床用藥的上限，即15mg/kg/日是安全的。
鑒于本品小鼠LD50(6730mg/kg)為臨床推薦劑量的400倍以上，56天長期毒性試驗各項指標無異常，故留存動物免作病理學檢查，且可免作犬的長期毒性試驗。
三、血塞通的主要藥效學實驗實驗材料(一)藥物血塞通膠丸(昆明制藥股份有限公司，批號970125，實驗時取囊心藥液用生理鹽水稀釋)血塞通注射液(昆明制藥股份有限公司，批號970351-07)(二)動物小鼠，昆明種，大鼠，SD種，均購自云南省天然藥物藥理重點實驗室家兔，雌雄各半，2.0-3.0kg，購自昆明醫學院動物科。
(三)其它722型可見光分光光度計，BS-631型血小板聚集儀，MP120-1型電子天平，試劑均為分析純或藥用規格(其中，血小板活化因子及花生四烯酸為Sigma公司產品，二磷酸腺苷為瑞士進口分裝)。
實驗方法(-)腦缺血保護實驗1、參照文獻方法制備不完全性腦缺血模型(結扎頸總動脈合并降壓法)用戊巴妥鈉麻醉大鼠，分離出左右頸動脈及股動脈。聯接血壓測量裝置，結扎左右頸總動脈并從股動脈放血降壓至5.3-6.00kPa(40-45mmHg)(假手術對照組不結扎動脈亦不放血)，在維持該血壓使腦缺血30min后將血重新注入大鼠恢復大腦灌注，此時鼠腦既遭受缺血損傷，亦產生再灌注損傷。
(1)腦缺血后腦含水量的測定取雄性大鼠55只(264±17g)隨機分為5組，實驗前6小時口服灌胃受試藥物(假手術對照組及腦缺血模型組灌胃同量生理鹽水，下同)，實驗時再灌胃給藥一次，既按上法制備缺血模型，在恢復血液灌注后再十二指腸給藥一次，3小時后斷頭取前腦，稱重，置110℃烤至恒重，計算腦含水量％(腦含水量％=(濕重-干重)/濕重×100％)。
(2)腦缺血后腦毛細血管通透性的測定取大鼠55只(244±16g，雌雄各半)，隨機分為5組，實驗前6小時口服灌胃受試藥物，實驗時再灌胃給藥一次，按上法制備缺血模型，在結扎頸總動脈前10min分別靜注伊文思蘭60mg/kg，在恢復血液灌注后再十二指腸給藥一次，5小時后斷頭取前腦，稱重，置甲酰胺溶液中，在45℃下溫育60小時后用分光光度計在632nm處測吸收度，根據標準曲線計算出腦內伊文思蘭的含量(ug/g濕腦重)。
(3)腦缺血后腦組織形態學的檢查取大鼠20只(259±19g，雌雄各半)，隨機分為5組，實驗前6小時口服灌胃受試藥物，實驗時再灌胃給藥一次，按上法制備缺血模型，在恢復血液灌注后再十二指腸給藥一次，3小時后斷頭取前腦，福爾馬林固定，冠狀切片，HE染色，光境檢查。
2、小鼠常壓下耐缺氧實驗取小鼠56只(23.8±1.8g，雌雄各半)，隨機分為4組，于實驗前6小時及30min分別灌胃給藥兩次，將小鼠置裝有鈉石灰的玻璃干燥器內(聯接一調壓瓶使壓力與外界相等)，密閉并計時，記錄小鼠缺氧死亡時間。
3、小鼠斷頭后張口實驗取雄性小鼠64只(24.2±1.7g)，隨機分為4組，于實驗前6小時及30min時分別灌胃給藥兩次，實驗時將小鼠鼠頭剪下，立即記錄張口喘氣時間。
(二)抗凝血實驗1、凝血時間影響實驗取小鼠60只(23.8±1.7g，雌雄各半)，隨機分為5組，于實驗前6小時及30min分別灌胃給藥兩次，實驗時摘眼球取血用毛細管法測定凝血時間。
2、血小板聚集功能影響實驗按Bron氏比濁法進行體外實驗，采兔血制備富血小板血漿(PRP)和貧血小板血漿(PPP)調節PRP中血小板數至5×108cell/L，分別取藥液與FRP混合，溫育20min，分別加入誘導劑血小板活化因子(PAF)(終濃度為7.2hmol/L)，花生四烯酸(從)(終濃度為0.35mmol/L)，二磷酸腺苷(ADP)(終濃度為3umol/L)誘導血小板聚集，用血小板聚集儀測定血小板最大聚集百分率，并計算藥物的血小板聚集抑制率。
上述實驗數據用X±SD表示，全部實驗結果均用方差分析法進行統計分析。
結果1、血塞通膠丸對腦缺血后腦含水量的影響腦缺血模型組腦含水量與假手術組比較有顯著性差異，腦含水量明顯升高，血塞通膠丸(200、100mg/kg,po)與血塞通注射液(60kg；iv)均能使腦缺血后腦含水量明顯下降，減輕腦水腫。同時，血塞通膠丸還顯示出明顯的量效關系。
2、血塞通膠丸對腦缺血后腦血管通透性的影響腦缺血模型組腦組織中伊文思蘭含量與假手術組比較明顯升高，此結果說明腦缺血可使腦血管通透性升高，血塞通膠丸(100、200mg/kg,po)與血塞通注射液(60mg/kg；iv)均能使腦缺血后腦中伊文思蘭含量明顯下降，說明此二藥可抑制腦缺血后腦血管通透性的升高。
3、血塞通膠丸對腦缺血后腦組織形態學的影響境下可見假手術對照組大鼠腦神經細胞及神經膠質細胞形態正常，核膜清楚，核仁明顯，胞漿透亮或淡染，胞膜清楚，腦缺血模型組大鼠腦組織出現明顯病理改變，在額頭、頂葉、顳葉皮層及海馬等處可見神經細胞核固縮(縮小呈三角形，深染，核仁消失)、核溶解(核結構淡染、消失、核輪廓不清)，這些部位的神經細胞半數以上出現缺血性壞死及神經細胞脫失等改變，另見神經膠質細胞明顯腫脹，間質血管擴張充血，間質疏松水腫明顯。血塞通膠丸(100、200mg/kg,po)組及血塞通注射液(60mg/kg；iv)組腦組織神經細胞核固縮、核溶解等缺血變化與腦缺血模型組相比明顯降低，只有極少數神經細胞出現死亡，神經膠質細胞腫脹及間質疏松亦明顯減輕，呈現出明顯的缺血保護作用。
4、血塞通膠丸對小鼠常壓耐缺氧能力的影響給血塞通膠丸(200mg/kg,po)與血塞通注射液(120mg/kg；iv)有明顯延長小鼠存活時間的作用。
5、血塞通膠丸對小鼠斷頭后張口呼吸時間的影響給血塞通膠丸(200mg/kg,po)與血塞通注射液(60mg/kg；iv)均有延長小鼠張口呼吸時間的作用。
6、血塞通膠丸對小鼠凝血時間的影響給血塞通膠丸(200mg/kg,po)與血塞通注射液(120mg/kg；iv)均有延長凝血時間的作用。
7、血塞通膠丸對血小板聚集功能的影響血塞通膠丸在0.625-2.5mg/ml的濃度范圍內能顯著抑制PAF誘導的血小板聚集，抑制率達15.4-88.5％，在2.5mg/ml的濃度時能顯著抑制ADP誘導的血小板聚集，抑制率達39.5％,血塞通注射液在0.625-2.5mg/ml范圍內對PAF及ADP誘導的血小板聚集亦有顯著抑制作用，抑制率達8.0-75.1％及20.9-33.9％。
權利要求
1.一種血塞通軟膠囊，由藥液和囊殼兩大部分構成，其特征是藥液按重量每粒含有三七總皂甙40-250毫克，并含有溶劑和穩定劑，囊殼中含有明膠10份，甘油3.25-3.35份(重量比)和防腐劑。
2.如權利要求1所說的血塞通軟膠囊，其特征是溶劑為液態聚乙二醇、異丙醇、吐溫-80、甘油、丙二醇、水及植物油(如豆油、花生油、茶油等)中的一種或幾種。
3.如權利要求1所說的血塞通軟膠囊，其特征是防腐劑為甘油、丙二醇、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸丁酯、對羥基苯甲酸芐酯、對羥基苯甲酸苯酯中的一種或幾種。
4.如權利要求1所說的血塞通軟膠囊，其特征是配方中含有組份 量(克/粒)三七總皂甙 0.04-0.25溶劑 0.25-0.40穩定劑 0.02-0.05
5.一種血塞通軟膠囊的制備工藝，其特征是包括以下步驟將三七總皂甙打粉過80-120目篩后，在攪拌狀態下逐漸加入到液態聚乙二醇中，加熱使溶液保溫在50-70℃并攪拌使其溶解，溶解后加入水和甘油等，攪拌使其混合均勻，過濾、脫氣后壓丸、干燥，即得。
6.一種血塞通軟膠囊的制備工藝，其特征是包括以下步驟將三七總皂甙打粉過80-120目篩后，按處方配比投料，先將穩定劑熱溶于部分溶劑內，再將熱溶物緩慢地加進預熱到35-45℃的剩余溶劑內，邊加邊攪拌，然后再將各種固體逐一加入，每次加入后充分混合，以保證完全濕潤，過膠體磨粉碎后壓丸、干燥，即得。
全文摘要
本發明涉及軟膠囊劑口服藥物及其制備工藝。產品由藥液和囊殼兩大部分構成,其特征是藥液按重量每粒含有三七總皂甙40—250毫克、并含有溶劑和穩定劑,囊殼中含有明膠10份,甘油3.25—3.35份(重量比)和防腐劑。積極效果是提供了一種以三七總皂甙為主要有效成分的血塞通軟膠囊及其制備工藝,產品系口服給藥劑型,能夠克服已有劑型的缺點,生物利用度高,滿足該類劑型在外觀、硬度、崩解度等和理化穩定性方面的標準。
文檔編號A61P9/00GK1228960SQ9810659
公開日1999年9月22日 申請日期1998年3月17日 優先權日1998年3月17日
發明者李南高, 王存志, 丁江生 申請人:昆明制藥股份有限公司