專利名稱：治療內皮創傷的方法
技術領域：
本發明涉及人紅細胞生成素(EPO)在預防或治療由于化療、放療、機械創傷或由于損害內皮的疾病(如炎癥、心臟病或癌癥)造成的內皮創傷中的用途。本發明進一步涉及EPO在與化療結合使用中的用途。
發明
背景技術：
紅細胞生成素(EPO)是一種在腎臟中產生的糖蛋白，是起刺激紅細胞產生(紅細胞發生)作用的主要激素。EPO刺激骨髓中定向紅細胞先祖的分裂和分化。正常的血漿紅細胞生成素的水平變化范圍為0.01-0.03單位/mL，在低氧或貧血期間可增加高達100-1000倍。參見Graber和Krantz，醫學年述(Ann.Rev.Med.29:51(1978)；Eschbach和Adamson國際腎臟雜志(Kidney Intl.)28:1(1985)。重組人紅細胞生成素(rHuEpo或epoetinα)可以Epogen(Amgen公司，Thousand Oaks,CA)和Procrit@(Ortho生物技術公司，Raritan,NJ)的形式商購獲得。EPO被用來治療貧血，包括與癌癥化療、慢性衰竭、惡性腫瘤、成年和幼年類風濕性關節炎、血紅蛋白合成障礙、早熟以及HIM感染的齊多夫定(zidovudine)治療相關的貧血。
血管內皮是一層貼附在內層血管壁并與血液直接接觸的細胞，其在循環系統與血管外腔隙之間提供了一個有活性的天然屏障。內皮在細胞、組織和器官水平上參與信號和信息的傳遞，在細胞介導以及體液免疫應答中都起作用。內皮細胞具有代謝活性，通常產生許多對血管腔以及血小板產生作用的物質。內皮血管舒張劑包括前列腺環素(PGI2)和內皮衍生松馳因子(EDRF，它可能是一氧化氮或其較穩定的加合物)；這兩種物質還發揮作用以抑制血小板聚集。
由物理創傷或如形成動脈粥樣硬化斑塊的病程導致的內皮的創傷或破壞可減少EDRF的生成，從而導致血管收縮。更為擴散和銳敏的內皮創傷，例如由慢性高血壓或局部缺血后的血液再充滿導致的內皮創傷，也導致變化的EDRF的產生。被定位于管腔內皮表面的內皮產物包括外ADP酶(ectoADPase)和血栓調節蛋白。內皮釋放的血管收縮劑包括內皮縮血管肽。內皮細胞還分泌增強內皮有絲分裂發生并可誘導新血管形成(血管發生)的生長因子。已報道粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)和粒細胞集落刺激因子(G-CSF)刺激內皮細胞的增殖和遷移。白介素-3(IL-3)也增強這些細胞的增殖。參見Bussolino等自然337:471(1989)；Brizzi等臨床研究雜志(J.Clin.Invest.)91:2887(1993)。
發明概述本發明的第一個方面是一種通過將內皮保護量的紅細胞生成素與化療劑聯合給藥來減少由化療劑導致的內皮創傷的方法。內皮保護量的紅細胞生成素可與化療劑同時或在化療劑給藥之前或之后給藥。
本發明的第二個方面是一種在用化療劑治療的個體中增強內皮細胞抑制的方法，包括將化療劑與內皮抑制量的紅細胞生成素聯合給藥。內皮抑制量的紅細胞生成素可與化療劑同時或在化療劑給藥之前或之后給藥。
本發明的另一個方面是一種治療實體血管瘤的方法，包括將內皮抑制量的紅細胞生成素與抗癌化療劑聯合給藥。內皮抑制量的紅細胞生成素可與化療劑同時或在化療劑給藥之前或之后給藥。
本發明的另一個方面是一種治療由機械創傷、暴露于放射線下、炎癥、心臟病或癌癥導致的內皮創傷的方法，包括將內皮保護量的紅細胞生成素對需要這種治療的個體給藥。
本發明前面以及其它的目的將在下面提供的說明書中詳細解釋。
附圖簡要說明
圖1是顯示置于順鉑后內皮細胞存活率的劑量反應曲線。
圖2顯示與僅置于順鉑的對照組內皮細胞培養物比較，同時置于鉑順和不同劑量的EPO的內皮細胞培養物的反應。
圖3顯示首先置于順鉑，兩小時后再置于不同劑量的EPO的內皮細胞培養物的反應(與僅置于順鉑的對照組內皮細胞培養物比較)。
圖4顯示首先置于不同劑量的EPO，兩小時后再置于順鉑的內皮細胞培養物的反應(與僅置于順鉑的對照組內皮細胞培養物比較)。
發明詳述本發明人以前已證實重組人紅細胞生成素(EPO)對人臍靜脈內皮細胞和牛毛細血管內皮細胞有促有絲分裂和化學引誘劑作用(遷移)。參見Anagnostou等Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87:5978(1990)。內皮細胞的遷移和增殖是生成血管過程中的關鍵步驟。
本發明人已發現EPO可有效地防止和/或修復由化療劑導致的內皮創傷。本發明人發現與化療劑聯合給藥EPO產生雙相應答一定劑量的EPO保護內皮細胞免于化療劑的有害影響，同時劑量的增加增強由化療劑導致的內皮生長抑制。
EPO在化療期間增強內皮生長抑制中的用途可用于治療生血管腫瘤，這是希望阻止或減慢支持腫瘤生長的新血管的形成。腫瘤需要充足的血液供應，腫瘤組織分泌的生血管因子刺激了新血管在腫瘤實體中的生長。在動物模型中，已表明抑制腫瘤組織中的血管生成觸導致腫瘤退化。高度血管化的實體腫瘤包括小腦成血管細胞瘤、乳腺管癌和喉鱗狀上皮細胞癌。異常的血管生成與其它病理疾病有關，包括糖尿病性視網膜病、新血管性青光眼、類風濕性關節炎以及牛皮癬。EPO降低或防止異常血管生成的能力在防止或降低與這些病情相關的血管生成中將是有用的。
根據本發明的一種方法是EPO作為致瘤性疾病化療中的輔助劑的用途。當希望保護內皮免于化療劑的不利影響時，EPO以內皮保護量提供。根據本發明的第二種方法是EPO作為致瘤性疾病化療中的輔助劑的用途，其中希望增強化療劑對內皮的不利影響(例如增強內皮生長的抑制)。在這種情況下，EPO以內皮抑制量提供。
如本文所采用的，EPO的內皮保護量指能降低或防止本來是由于暴露于化療劑或放射線、機械創傷或已知創傷內皮的病情而另外產生的內皮生長的抑制的劑量。另一方面，EPO的內皮保護量可定義為在暴露于化療劑或放射線、機械創傷或患有已知創傷內皮的疾病后能增加可存活內皮細胞數目的那些劑量；可存活細胞數目的增加是指與沒有EPO時所預期的數目進行比較而有所增加。EPO最有效的內皮保護量可隨給藥的時間以及內皮創傷的病因，不同而發生變化。
在內皮創傷是由于置于化療劑時，根據EPO是否與化療劑同時，或在其之前或之后給藥，EPO最有效的內皮保護量將發生變化，并可能隨所用的具體化療劑的不同而發生變化。
如本文所采用的，EPO的內皮抑制量指能增強或增加本來是由于暴露于化療劑或放射線、機械創傷或患有已知創傷內皮的疾病而產生的內皮生長的抑制的劑量。另一方面，EPO的內皮抑制量可定義為在暴露于化療劑或放射線、機械創傷或患有已知創傷內皮的病情后減少可存活內皮細胞數目的那些劑量；可存活細胞數目的減少是指與沒有EPO時所預期的數目進行比較而有所減少。EPO最有效的內皮抑制量可隨給藥的時間以及內皮創傷的病因，不同而發生變化。
在內皮創傷是由于置于化療劑時，根據EPO是否與化療劑同時，或在其之前或之后給藥，EPO最有效的內皮抑制量將發生變化，并可隨所用的具體化療劑的不同而發生變化。
可通過內皮細胞增殖的減少和/或可存活內皮細胞數目的減少來評價導致可存活內皮細胞總的數目減少的內皮創傷。這種可存活內皮細胞數目的減少也可稱為內皮生長抑制或內皮細胞抑制或抑制作用。
如本文所采用的，一種減少由于對個體給藥化療劑而造成的個體內皮創傷的方法指減少或防止本來由于給藥化療劑而造成的可存活內皮細胞減少的方法。如本文所采用的，一種增強由于對個體給藥化療劑造成的個體中的內皮抑制的方法指增加或增強本來是由于給藥化療劑而造成的可存活內皮細胞減少的方法。
內皮細胞的創傷也可由放療、機械創傷以及由如炎癥、心臟病(如動脈粥樣硬化)和癌癥的疾病造成。例如在動脈粥樣硬化中，內皮創傷或功能異常導致血管舒張反應減弱以及增加血小板在動脈壁上的沉積。從沉積的血小板中釋放的血清緊張素和血栓烷A2引起動脈收縮和痙攣，增加血小板的黏附和聚集，并促進動脈粥樣硬化。通過生血管刺激而形成新的冠狀血管經常使冠狀動脈阻塞的后果得以改善。EPO在增強內皮生長和/或修復或防止內皮創傷中的使用將使其成為一個有效的治療由于機械創傷、放療或由于對內皮產生不利影響的疾病而造成的內皮創傷劑。
如本文所采用的，人紅細胞生成素(EPO)指天然產生的人紅細胞生成素糖蛋白以及重組人紅細胞生成素(rHuEpo或epoetinα，可以Epogen(Amgen公司，Thousand Oaks,CA)和Procrit(Ortho生物技術公司，Raritan,NJ)的形式商購獲得)。EPO的肽類似物也可用于本發明的方法中。如本文所采用的，肽類似物為雖然不具有與EPO相同的氨基酸序列，但具有類似的三維結構的那些化合物。在與受體相互作用的蛋白分子中，相互作用發生在穩定的三維分子的表面可達位點。可根據已知方法，通過以適宜構象排列關鍵的結合位點殘基，設計和合成模擬EPO結合區的必需的表面特征的肽。具有與EPO結合表面基本相同的分子拓撲結構的表面區域的分子將能夠模擬EPO與EPO受體的相互作用。業已知確定肽三維結構以及其類似物的方法，有時被稱為‘合理的藥物設計技術’。參見例如Geysen的美國專利號4，833，092；Nestor的美國專利號4，859，765；Pantoliano的美國專利號4,853,871；B1alock的美國專利號4,863,857(申請人特別說明本文所引用的全部美國專利公開被全文引作參考)。
在本發明的方法中，模擬紅細胞生成素生物活性的肽(EPO受體肽配體)可替代EPO。這些肽的序列可代表全長EPO蛋白序列的片段，其中該片段能與EPO受體結合以及活化它。此外，在這些肽模擬EPO生物活性時，具有不類似于EPO的序列的肽可用于本發明的方法中。Wrighton等報道了結合并活化靶細胞表面上的紅細胞生成素受體的小分子肽的鑒定和表征，雖然這些肽序列不類似于EPO的一級結構(Wrighton等科學273:458(1996,7,26))。(用二硫鍵結合的14氨基酸環肽代表這些肽激動劑，其中環肽具有已鑒定的最小共有序列。Livnah等，科學273:464(1996,7,26)描述了一種這樣的肽模擬物與紅細胞生成素受體的復合物的結構。
如本文所采用的，術語化療劑指細胞毒性抗腫瘤劑，即治療上用來阻止或降低腫瘤細胞的生長，優先殺死腫瘤細胞或打斷迅速增殖細胞的細胞周期的化學物質。化療劑也稱為抗腫瘤藥物或細胞毒性劑并為本領域所熟知。如本文所采用的，化療包括用一種化療劑或用化療劑的組合物進行治療。在需要治療的個體中，化療可與外科治療或放療或與其它抗腫瘤治療方法結合。
作為實例的化療劑為長春花生物堿、表鬼臼毒素、蒽環霉素抗生素、放線菌素D、普卡霉素、(嘌呤霉素、短桿菌肽D、paclitaxel(Taxol@,Bristol Myers Squibb)、秋水仙堿、細胞松弛素B、依米啶、美登素以及安吖啶(或“mAMSA”)。長春花生物堿類描述在Goodman和Gilman的治療的藥物學基礎，1227-1280(第7版，1985)(下文為“Goodman和Gilman”)。長春花生物堿的實例為長春花新堿、長春堿和長春地辛。表鬼臼毒素類描述在Goodman和Gilman，見上文1280-1281。表鬼臼毒素的實例為依托泊甙、依托泊甙正醌和替尼泊甙。蒽環霉素抗生素類描述在Goodman和Gilman，見上文1283-1285。蒽環霉素抗生素的實例為柔紅霉素、阿霉素、米托蒽醌和比生群。放線菌素D，也稱為更生菌素描述在Goodman和Gilman，見上文1281-1283。普卡霉素，也稱為光神霉素，描述在Goodman和Gilman，見上文1287-1288。其它的化療劑包括順鉑(Platinol,Bristol Myers Squibb)；卡鉑(Paraplatin,Bristol Myers Squibb)；絲裂霉素(Mutamycin,Bristol MyersSquibb)；六甲蜜胺(Hexalen,U.S.Bioscience,Inc.)；環磷酰胺(Cytoxan,Bristol Myers Squibb)；洛莫司叮[CCNU](CeeNU,Bristol Myers Squibb)；卡莫司叮[BCNU](BiCNU,Bristol Myers Squibb)。
如本領域技術人員所知，化療藥物的給藥方法根據所使用的具體的化療劑而發生變化。根據所使用的化療劑，例如可通過注射(靜脈內、肌肉內、腹膜內、皮下、腫瘤內、胸膜內)或口服給藥化療劑。
如本文所采用的，一種化合物與另一種化合物“聯合”給藥指以足夠接近的時間給藥兩種化合物，這樣一種化合物的存在改變另一種的生物作用。兩種化合物可同步(同時)或依次給藥。可通過在給藥前混合化合物，或通過在相同時間點但在不同的組織位點給藥化合物或使用不同的給藥途徑來完成同時給藥。
如本文所采用的短語“同時的給藥”、“同步的給藥”或“同時給藥”指化合物在相同的時間點或彼此緊接著給藥。在后一種情況下，兩種化合物在足夠接近的時間內給藥，以致觀察到的結果與化合物在相同時間點給藥時獲得的結果難以區別。
用本發明方法治療的個體包括人和動物(例如狗、貓、牛、馬)個體，優選為哺乳動物個體。
許多化療劑在細胞周期的特定時期起作用，并僅對處于分裂過程中的細胞具有活性。對化療最敏感的腫瘤為具有高百分比處于細胞分裂過程的細胞的腫瘤，包括但不局限于乳腺、肝、腦、肺以及卵巢癌。高度血管化的實體瘤適宜于用內皮抑制量的EPO結合化療劑治療，因為這些腫瘤依賴于血管生成以為生長的腫瘤組織提供足夠的血液供應。
可通過本領域技術人員顯而易見的任何適宜的方式給藥根據本發明所使用的EPO。可全身(例如靜脈內)或局部(例如注射至腫瘤、緊圍繞腫瘤的組織中或注射至包含腫瘤的解剖學腔隙中)給藥EPO。例如，在內皮抑制量的EPO作為化療的輔助劑使用時，可將EPO局部給藥至希望防止血管生成的腫瘤(或緊圍繞腫瘤的組織)中。例如在全身性地遞送化療劑時，可通過靜脈注射全身性地給藥內皮保護量的EPO。
與化療劑結合使用的EPO的給藥劑量和給藥時間將類似地取決于所希望達到的效果。本發明人發現根據EPO的給藥時間(同時、在化療劑給藥之前或之后)以及給藥劑量的不同，EPO既能起保護內皮免受化療劑的生長抑制作用，又能起增強使用化療劑所見到的內皮生長抑制的作用。如何通過常規實驗確定與特定的化療劑結合使用以獲得所需效果的EPO的給藥劑量和時間對于本領域技術人員來講是顯而易見的。
未確定可以單次量或多次量給藥的EPO的最大量。在三至四周中已給藥高達1,500單位/kg的劑量而沒有由于EPO本身引起的毒性作用。參見Eschbach等，慢性尿毒癥的預防(Prevention of ChronicUremia)(Friedman等編)，Field and Wood Inc.,Philadelphia,pp 148-155(1989)。在本方法中，在希望保護內皮免受由化療劑導致的內皮創傷和/或內皮生長抑制時，以內皮保護量給藥EPO。適宜的內皮保護劑量為約100U/kg-約200U/kg。在本方法中，在希望增強由化療劑導致的內皮創傷和/或內皮生長抑制時，EPO以內皮抑制量給藥，其可為約750U/kg-約2000U/kg。如上所述，與化療劑結合使用的EPO的給藥劑量和時間將取決于所需效果以及使用的化療劑。
提供下面的實施例以說明本發明，不應被認為是對它們的限定。實施例1材料和方法細胞培養人臍靜脈內皮細胞是從來源于剖腹產術的臍帶中得到的(HUVECs)。用標準方法在覆蓋有0.5％豬皮明膠(Sigma化學公司，St.Louis,MO)的25cm2T-燒瓶中培養HUVECs。補充有20％規定的胎牛血清(FBS)(Hyclone,Logan,UT),16U/ml肝素(Sigma),50ug/ml來源于牛下丘腦的內皮促細胞分裂劑(Biomedical Technologies,Stoughton,MA),100U/ml青霉素和100ug/ml鏈霉素的培養基199被用于HUVECs的生長(Life Technologies,Gaithersburg,MD)。如本領域所知，內皮細胞的特征為馮維勒布蘭德氏因子抗原陽性、相似及典型的鵝卵石(cobblestone)形態以及存在Weillebrand-Palade氏體。保護/抑制分析使用比色法確定在將內皮細胞培養物置于試驗物后的代謝活性細胞的數目。本項分析使用四唑鎓化合物[3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑鎓](MTS)和電子偶合劑吩嗪甲硫酸鹽(PMS；可從Promega公司購得，Madison,Wisconsin)的溶液。參見Denizot和Lang，免疫學方法雜志(J.Immunol.Methods)89:271(1986)；Promega CorporationTechnical Bulletins 112,152和169。MTS被在代謝活性細胞中發現的脫氫酶生物還原為甲。以490nm處的吸光率測定甲的量，它與培養物中的活細胞的數目成正比。
收集在完全(補充)M199培養基中生長的對數期內皮細胞。在80-90％完全鋪滿時，將EC培養物單細胞層用磷酸緩沖液(PBS)洗滌，用0.25％胰蛋白酶的1mM EDTA溶液處理1-2分鐘，接著將細胞懸浮在完全培養基中。分別使用血細胞計數器和錐蟲藍染色確定細胞的數目和存活率。制備7.22×104細胞/ml培養基的細胞懸液，將90ul(6.5×103細胞)分散在96井平板的各井中。在37℃,5％CO2，增濕空氣下培養過夜后，以在下面描述的實施例中說明的濃度和順序加入EPO和/或化療劑。接著再將平板保溫24小時。如制造商所推薦，在保溫末期，將20ul新制備的混合MTS/PMS(20∶1比例)溶液加入到各井中，將平板再保溫1-4小時。使用ELIAS平板計數器記錄在490nm處各井的吸光率。通過將490nm處的校正的吸光率對加入物(EPO、化療劑或其混合物)的濃度作圖確定LD50以及各種處理對細胞存活率以及化學敏感性的影響。統計學研究對于保護/抑制分析，將實驗重復三次。所有其它實驗進行至少5次。將結果取平均值并以平均值±SD表示。所有實驗的對照組包括用下面一種處理的1-2個重復三次的井1)1ug/ml順鉑；2)50ug/ml順鉑；3)10或20U/ml EPO；4)0.6或1.2U/ml EPO。
因此，對于每個實驗，3-6個井獲得了上面四種對照組處理(總共12-24個對照組井)。還對由重復三次的未處理細胞井構成的其它對照組進行了實驗。實施例2順鉑LD50的測定如實施例1描述地制備含有內皮細胞的96井平板，在37℃,5％CO2，增濕空氣下培養過夜。制備160ug/ml順鉑溶液，將系列稀釋物加入到各井中(5ul/井；濃度從0.03125ug/ml變化至4.0ug/ml。接著將平板保溫兩天(48小時))，使用實施例1描述的MTS/PMS方法確定內皮細胞的存活率。使用ELISA平板計數器記錄490nm處各井的吸光率。將校正的490nm處的吸光率對順鉑的濃度(ug/ml)作圖(圖1)以提供劑量-反應曲線。產生50％最大反應所需順鉑的濃度(順鉑的LD50)被確定為0.45ug/ml。
根據上面的發現，如下面實施例所提供的，用1ug/ml劑量的順鉑來測定EPO對內皮細胞的影響。實施例3順鉑和EPO同時給藥對內皮細胞的影響為了確定EPO和順鉑結合使用對內皮細胞的影響，將EPO的系列稀釋物與順鉑一起同時加入到內皮細胞培養物中。
如實施例1描述地制備內皮細胞培養物。將順鉑(最終濃度為1ug/ml)與5ul各種濃度的EPO制備物(最終EPO濃度從0.15變化至20U/ml)同時加入到各試驗井中。使用實施例1描述的MTS/PMS比色分析法確定內皮細胞的存活率。將結果與對照組井比較(僅用1ug/ml順鉑處理的內皮細胞，其被當作基線并在圖2中以0％代表)。結果提供在圖2中；“對照組的百分數”為相對于對照組，490nm處的光密度變化的百分數，這樣“0％”說明試驗井具有與對照組類似數目的代謝活性細胞，而“50％”說明多50％,“-50％”說明少50％的代謝活性細胞。
如圖2所示，當EPO與順鉑同時加入到細胞培養物中時，觀察到雙相反應。當EPO與順鉑同時加入時，用0.15-1.25U/mlEPO處理的內皮細胞培養物被保護免于順鉑的創傷作用。當EPO與順鉑同時加入時，0.3U/ml的EPO濃度提供內皮細胞的最大保護；存活細胞的數目比在僅用順鉑處理的對照組培養物中觀察到的高約30％。
還如圖2所示，與單獨用順鉑處理的培養物比較，當EPO與順鉑同時加入時，在用5-20U/ml EPO處理的培養物中的內皮細胞生長被抑制。與僅暴露于順鉑的對照組細胞相比，用5U/ml EPO和1ug/ml順鉑處理的培養物顯示存活細胞的數目減少了33％。實施例4在暴露于順鉑后給藥的EPO對內皮細胞的影響在本實驗中，在培養物暴露于順鉑2小時后，將EP0的系列稀釋物加入到內皮細胞培養物中。
如實施例1描述地制備內皮細胞的培養物。將順鉑加入到各試驗井中(順鉑的最終濃度為1ug/ml)；2小時后，加入最終濃度變化范圍為0.15-20U/ml的EPO制備物。使用如實施例描述的MTS/PMS比色法確定內皮細胞的存活率。將結果與對照組井(僅用1ug/ml順鉑處理的內皮細胞)比較。
結果提供在圖3中，表明當在加入順鉑后將EPO加入到細胞培養物時觀察到了雙相反應。當在暴露于順鉑2小時后加入EPO時，用0.15-5U/ml EPO處理的內皮細胞培養物被保護免于順鉑的創傷作用。在暴露于順鉑之后用1.25U/mlEPO處理過的內皮細胞培養物中，存活細胞的數目比對照組高34％。相反，在暴露于順鉑2小時后給藥10-20U/ml EPO的內皮細胞培養物中，細胞的存活率比在對照組(僅暴露于順鉑中)中所觀察到的要低。實施例5在暴露于順鉑之前給藥的EPO對內皮細胞的影響在本實驗中，在將培養物暴露于順鉑之前2小時，將EPO的系列稀釋物加入到內皮細胞培養物中。
如實施例1描述地制備內皮細胞的培養物。每個試驗井加入5ul濃度為0.15-20U/ml的EPO制備物；2小時后，將順鉑加入到各試驗井中(5ul 1ug/ml的順鉑)。使用如實施例描述的MTS/PMS比色法確定內皮細胞的存活率。將結果與對照組井(僅用1ug/ml順鉑處理的細胞)比較。
結果提供在圖4中，表明了在暴露于順鉑之前2小時暴露于EPO后的存活內皮細胞的數目的降低(與僅暴露于順鉑的對照組細胞比較)。與對照組比較，細胞增殖和存活率降低了81％。抑制為劑量依賴性的；與對照組比較，低如5和2.5U/ml的EPO濃度分別降低細胞生長58％和48％。
前面是對本發明的說明，不應認為是對它們的限定。本發明用下面的權利要求來定義，權利要求的等效物應被包括在其中。
權利要求
1．一種減少由對個體給藥化療劑導致的個體內皮創傷的方法，包括將化療劑與內皮保護量的紅細胞生成素聯合給藥。
2．根據權利要求1的方法，其中將所述內皮保護量的紅細胞生成素與所述化療劑同時給藥。
3．根據權利要求1的方法，其中所述內皮保護量的紅細胞生成素在所述化療劑之前給藥。
4．根據權利要求1的方法，其中所述內皮保護量的紅細胞生成素在所述化療劑之后給藥。
5．根據權利要求1的方法，其中所述化療劑為順鉑。
6．一種增強用化療劑治療的個體的內皮細胞抑制的方法，包括將化療劑與內皮抑制量的紅細胞生成素對個體聯合給藥。
7．根據權利要求6的方法，其中將所述內皮抑制量的紅細胞生成素與所述化療劑同時給藥。
8．根據權利要求6的方法，其中所述內皮抑制量的紅細胞生成素在所述化療劑之前給藥。
9．根據權利要求6的方法，其中所述內皮抑制量的紅細胞生成素在所述化療劑之后給藥。
10．根據權利要求6的方法，其中所述化療劑為順鉑。
11．根據權利要求6的方法，其中所述個體患有選自小腦成血管細胞瘤、乳腺管癌以及喉鱗狀上皮細胞癌的腫瘤生長。
12．一種在需要這種治療的個體中治療實體血管瘤的方法，包括將內皮抑制量的紅細胞生成素與抗癌化療劑聯合給藥。
13．根據權利要求12的方法，其中將所述內皮抑制量的紅細胞生成素與化療劑同時給藥。
14．根據權利要求12的方法，其中所述內皮抑制量的紅細胞生成素在所述化療劑之前給藥。
15．根據權利要求12的方法，其中所述內皮抑制量的紅細胞生成素在所述化療劑之后給藥。
16．一種治療需要這種治療的個體中的由機械創傷、暴露于放射線下、炎癥、心臟病或癌癥導致的內皮創傷的方法，包括對所述個體給藥內皮保護量的紅細胞生成素。
全文摘要
描述了人紅細胞生成素(EPO)在預防或治療由于化療、放療、機械創傷或由于損害內皮的疾病(如炎癥、心臟病或癌癥)造成的內皮創傷中的用途。描述了EPO在與化療劑聯合給藥中的用途。
文檔編號A61K45/00GK1235512SQ97199338
公開日1999年11月17日 申請日期1997年9月10日 優先權日1996年9月11日
發明者阿塔納修斯A·阿納諾斯托, 喬治·西高納斯 申請人:東卡羅萊娜大學