專利名稱：診斷組合物的制作方法
胃潰瘍病造成了嚴重的健康問題，并以藥品開支耗費公眾大量的資金，和勞動力損失。現已完全查明，胃中幽門螺桿菌(Helicobacterpylori)的存在是引發胃潰瘍和/或十二指腸潰瘍的必要先決條件。如果胃是沒有幽門螺桿菌，則不會發生胃潰瘍。另外還發現借助抗生素治愈幽門螺桿菌感染之后，不會再復發胃潰瘍病。因此，目前胃潰瘍病被認為是由細菌引起的疾病，它能夠也應當被治愈。
十分需要可靠而又簡單的診斷方法，因為有龐大的患胃腸疾病的患者群需要檢查幽門螺桿菌感染的存在。
本發明是基于這樣的知識，即幽門螺桿菌可以產生很大量的脲酶。正常情況下，這種酶不存在于人體內，而這種酶在人胃中的存在則是存在幽門螺桿菌的明確表征。幽門螺桿菌已在人的胃中建立．起生態小環境。這種細菌在中性pH下生長旺盛，發現其存在于胃的粘膜層之下。它能產生大量的脲酶，再由脲酶催化尿素分解成氨和碳酸氫鹽。這些碳酸氫鹽隨后又在胃中的酸性環境下分解成CO2和水。
在瑞典，每年大約有470,000患者在尋求用藥物治療類似胃潰瘍或與胃潰瘍相關的失調和疾病。因此，就健康的經濟考慮和患者的關注而言，最重要的是能夠以簡單而又可靠的方法診斷并治療幽門螺桿菌感染。
本發明涉及一種固體制劑，它能夠簡單而又可靠地診斷出胃中正發生的與幽門螺桿菌感染相關的脲酶活性。可用于驗證幽門螺桿菌存在的現有方法活組織檢查法這些方法(細菌培養、組織學檢查、快速尿素測試)的共同特征是，它們都是針對活組織檢查材料進行的。這涉及到借助光學纖維對胃進行胃鏡檢查，在此期間，取出胃粘膜的組織樣品。該方法費用高昂而且會給患者造成痛苦。血清學方法這類方法的共同特征包括測定血液或胃分泌物中抗幽門螺桿菌的特異抗體的存在。這類方法的一個缺陷是，必須采集血樣或從胃中采集分泌物。血清學方法的另一個缺點是它不能表明在進行檢查時存在細菌。
--以被感染幽門螺桿菌之時起到可以證實存在抗這種細菌的抗體止，大約需要20天時間。
--在成功地治愈所述細菌感染之后，在很長時間內血液中都保持高濃度抗體，從而大大限制了進行精確的后續檢查的可能性。尿素呼出試驗該方法基于由幽門螺桿菌產生的脲酶。脲酶可催化尿素分解成氨和碳酸氫鹽。該碳酸氫鹽隨后又在胃的酸性環境中轉化成CO2和水。
目前，尿素呼出試驗是以如下方式進行的讓患者服含有同位素(11C、13C、14C)標記的尿素水溶液。當胃中含有產生脲酶的幽門螺桿菌和酸時，尿素被分解，而同位素標記的碳原子轉化成CO2，它是通過呼出的空氣分泌的，然后測定呼出的空氣中同位素標記的CO2濃度。
另一種加以改變的方法，是測定其它分解產物，即氨的濃度。在這種方法中，不需要對尿素中的碳進行同位素標記。盡管不是必需的，但可以對氮進行同位素標記，因為正常情況下呼出的空氣中不存在氨。這些氨是通過胃壁形成的，并進入血液循環中，然后通過肝，并在經過肺泡的呼出空氣中分泌。
該方法的優點是，該檢查方法是非入侵性的，即患者不必忍受儀器(胃鏡)造成的不適，而且不必采集血樣或胃分泌樣品。另外，實際上該細菌是否具有真正局部的繁殖區無關緊要，因為所服用的尿素會擴散至胃的整個表面上。
申請日為1994年11月2日的瑞典專利申請9403755-3(相當于國際專利申請PCT/SE 95/01212(WO 96/14091))披露了診斷藥物制劑，該制劑含有同位素標記的尿素，它基本上不含水，并且優選含有一種固態水溶性酸。該制劑被用于驗證幽門螺桿菌在胃里的存在，方法是測定由該細菌的脲酶所產生的同位素標記的CO2在呼出空氣中是否存在。該文獻未提及驗證氨在呼出空氣中存在。
美國專利說明書US-A4,947,861披露了可以通過測定氨在呼出空氣中的存在驗證胃中是否存在幽門彎曲桿菌(Campylobacter pylori)，這些氨是在由所述細菌產生的脲酶的作用下產生的。該文獻僅提及患者應當攝入尿素，但未提及以何種形式攝入尿素。另外，在攝入尿素之后，能夠獲得檢驗結果之前要花費10-60分鐘(第三欄，第52-53行)。不同的是，在攝入本發明的無水制劑時，至多用10分鐘時間即可獲得檢驗結果。
尿素呼出檢驗的缺陷與很多實際情況相關1．以水溶液形式攝入尿素，這使得尿素能由患者口腔和咽中的產生脲酶菌分解，這有可能導致與幽門螺桿菌存在相關的假陽性結果。
2．在分析CO2時，為了檢驗正確發揮功能，在胃中必需存在一定量的氫離子，以使所產生的碳酸氫鹽分解成CO2。很多患有胃潰瘍的患者都是用酸分泌抑制藥物進行治療，在用現有的檢驗方法檢查這類患者時會出現假陰性結果。
3．在水浴中尿素只有短暫化學穩定性，在將該檢驗方法應用于臨床實踐時會產生實際困難。而且，同位素標記的尿素也比較昂貴。
4．同位素標記的尿素的使用，需要用復雜而又昂貴的質譜儀設備，以證明具體的碳同位素。不過同位素14C具有放射性，并可以通過閃爍測定法更方便地顯示。不過，不會有人推薦患者攝入放射性物質，即使所攝入的劑量很小。
通過以上說明可以了解，有幾種已知的驗證幽門螺桿菌在胃中是否存在的方法，而且，這些方法具有若干缺陷，例如，不能正確顯示細菌的存在，此外，還給患者帶來不適。
因此，迫切需要改進的診斷方法，該方法可以在所有條件下提供更大的診斷可靠性，具有較高的實用價值。
本發明的一般性說明含有尿素的基本上無水的膠囊、片劑或某些其它很快可溶的固體制劑，在用于診斷胃潰瘍病而測定氨的存在時具有幾個顯著優點1．服用固體制劑的尿素，可防止口腔和喉部產生的脲酶菌在其到達胃里之前將其分解。這顯著提高了這種檢查的可靠性，因為它降低了假陽性結果的幾率。
2．有關氨的存在分析，使得尿素呼出試驗可以在進行酸分泌抑制處理的過程中進行，因為氨的產生不需要較高的氫離子濃度，這與CO2的產生不同。
這會產生明顯的優勢，因為接受尿素呼出試驗的患者，是用有效的酸分泌抑制藥物進行慢性治療的，從而明顯減少了假陰性結果的出現。
3．由于膠囊、片劑或其它固體制劑中的無水尿素在較長時間內都很穩定，從而避免了尿素在水溶液中有限的化學穩定性帶來的相關問題。
對于尿素呼出試驗的推廣和應用來說，這具有顯著的實用優點。
4．與已經建立的水基檢驗液體相比，固體制劑(例如，片劑)的使用還具有劑量準確和節省時間的優點。
5．在通過測定所產生的CO2濃度而驗證幽門螺桿菌的存在時，必需使用昂貴的同位素標記的尿素，和昂貴而又復雜的質譜儀或放射學裝置，以區分由所述細菌產生的CO2和由該機體的代謝而正常產生的CO2。在驗證所產生的氨的存在時沒有必要這樣做，因為在正常情況下，機體的代謝不能產生氨。
為了能夠獲得上述顯著優點，必需制備固體制劑，使其含量不受患者口腔和咽喉部位的脲酶影響，并使其可以在胃中很快地徹底崩解。
附圖
中給出了用本發明制劑按照以下實施例進行的比較試驗所取得的結果。
本發明的技術說明按照本發明，提供了一種固體制劑，該制劑主要含有尿素，并且基本上無水，該制劑意在經口用于人體。
在一個適宜的實施方案中，所述制劑還含有固體水溶性堿，如碳酸氫鈉。加入堿有利于氨轉移到血中，并從血轉移到肺中，而且不會與胃酸反應生成鹽。在一個優選實施方案中，堿的加入量使得胃中的pH在4-8的范圍內，尤其是與制劑接近。
本發明的藥用制劑是這樣組成的即當該制劑到達胃里以后，尿素基本上可以瞬時釋放出來。該制劑可以為傳統片劑形式，可選擇性地帶有速溶包衣，不過，它也可以為膠囊形式。盡管軟明膠膠囊也可以使用，但首先考慮所謂“硬明膠膠囊”(有蓋膠囊)。該制劑的唯一條件是，其化學穩定性應當足夠高，而且該制劑的活性物質成分可以迅速釋出并溶解。作為一種原則，當活性物質和賦形劑以固體形式存在時，其化學穩定性得以改善。如果將一種油溶液與軟明膠膠囊結合在一起使用時，其穩定性通常足夠高。
也可以使用其它固體制劑。舉例來說，可以使用固溶體、固體分散劑和丸狀制劑，但并不局限于所列舉的這些可能的制劑。丸狀制劑包括通過造粒或擠壓/成團所產生的較大或較小的顆粒。然后可將活性物質摻入所述丸劑中，或附著在其表面。然后可將該活性丸劑壓縮成型為可以迅速崩解的片劑，或是將所述丸劑包在硬明膠膠囊中。
就片劑而言，它是本發明制劑的優選實施方案，該片劑可以通過賦形劑和本領域技術人員所熟知的加工步驟生產。因此，為了獲得最快速的釋放和溶解，優選使用基本上為水溶性的成分，和能加速該片劑崩解的賦形劑。所使用的賦形劑可以是本領域技術人員熟知的藥用崩解劑。在水中因為水合作用而明顯膨脹，且能比其干體積增加10-20倍的這類試劑特別適宜。這些試劑的例子有交聯聚合物形式的纖維素和淀粉衍生物，它們盡管不溶于水，但在水中會明顯膨脹。這些試劑的例子之一是聚乙烯吡咯烷酮衍生物。特別值得一提的適當藥用崩解劑包括一種改性的纖維素膠，它在水中膨脹性很高，并且已由美國的FMC公司以Ac-Di-Sol為注冊商標將其商品化。也可以使用其它類型的藥用崩解劑，而且，本領域技術人員在選擇適當的崩解劑時不會遇到任何困難。
在一種特別優選的形式中，所述活性物質尿素是以極細的顆粒形式使用。在這種形式中，其粒度優選小于200μm，更優選低于20μm。不過，這并不排除在制備該制劑時，若其它方面允許使用更粗一些的活性物質顆粒。這種判斷和評價未超出技術人員的經驗范圍。
本領域技術人員已知幾種測定氣體混合物(本文為呼出的空氣)中氨是否存在的方法。就此而言，可以使用前面所提到的披露于專利說明書US-A4,947,861中的方法。
實施例為了試驗并比較本發明與傳統技術(水溶液和測定呼出的空氣中的CO2濃度)，按照如下方法制備片劑在傳統旋轉混合器中混合以下組合物的成分。然后在裝配有12mm杯形沖頭的所謂外心機(excentermachine)上壓縮所述片劑。一個片劑的組成1．尿素 450mg2．甘露糖醇 63mg3．AvicelPh10160mg4．Ac-Di-Sol24mg5．硬脂酸鎂 3mg通常以顆粒形式將甘露糖醇用于所謂直接壓縮。
AvicelPh101是由美國FMC公司零售的一種微晶纖維素商品名稱。
Ac-Di-Sol是由美國FMC公司銷售的一種改性纖維素橡膠的商品名稱，它在水中會大幅度膨脹。在本發明中它起著藥用崩解劑的作用，以便迅速崩解所述片劑。
通過給患者服用兩片上述片劑(相當于900mg尿素)或含有100mg13C標記的尿素的水溶液2.5ml，對患者進行治療。
在用典型的服用同位素標記的尿素(水溶液和測定CO2含量)和本發明制劑所做的對比試驗中，在攝取所述水溶液10分鐘之后發現在該試驗中包括的10個陰性患者中，有5位其胃中本無細菌的患者呼出的氣體中證實有同位素標記的CO2的存在。
在攝入了本發明尿素制劑形式的患者中，呼出的空氣中未發現氨。
對水溶液中的同位素標記過的尿素和本發明固體制劑進行了比較，給17位已知其胃中存在所述細菌的患者服用以上制劑，在攝入所述片劑之后，所呼出的空氣中出現明顯氨氣量升高。在患者服用水溶液的情況下，在可以肯定地認為所檢測到的同位素標記的CO2源自胃中的脲酶之前，必須讓患者中的三位再等待10分鐘。
表1分別用水溶液中的同位素標記尿素和本發明固體制劑診斷幽門螺桿菌的結果匯總。
方法 假陽性假陰性 患者人數10min20min 10min 20min溶液-CO250 - - 27片劑-氨 0 0 - 27以上檢查結果同樣示于附圖中。附圖表示按照歐洲標準方法用13C尿素進行的常規呼氣試驗獲得的結果，和用本發明所發明的制劑所獲得的試驗結果的相關性示意圖。圖中的每一個點表示以短時間間隔通過常規方法用溶液中的尿素試驗一位患者，并測定其所呼出空氣中的CO2，以及用本發明的無水試劑試驗該患者，并測定其所呼出空氣中的氨。在兩種給藥形式中，均在10分鐘之后取樣。因此，理想情況是所有的點均應位于45°線上。
那些位于45°線之下的點表示用傳統溶液方法獲得的檢驗值或多或少確實有偏差，而且，顯而易見的是得到了大量的假陽性檢驗值(那些接近X軸的點)，另一方面，本發明的制劑產生正確的O值。它還表明，采用本發明制劑所取得的結果比使用傳統溶液所取得的結果更加可靠。其分析也更加簡單，因為無需對特定的碳同位素進行質譜檢測。這也大大降低了有關費用。
因此，與用于現有技術中的傳統溶液相比，將本發明的無水制劑用于驗證胃中幽門螺桿菌的存在具有多項優點，這些優點對于本領域技術人員來說不是顯而易見的。
權利要求
1．一種通過驗證呼出空氣中有氨產生而證實胃中存在與幽門螺桿菌(Helicobacter pylori)感染相關的脲酶活性所用的藥物制劑，其特征在于該制劑是由一種固體、基本上無水的組合物組成，該組合物中含有尿素，尿素會受幽門螺桿菌活性作用而生成氨。
2．如權利要求1的制劑，其特征在于該制劑的配制要使之服用之后能在胃中迅速溶解。
3．如權利要求1或2的制劑，其特征在于該制劑含有一種固體水溶性堿。
4．如權利要求3的制劑，其特征在于所述固體水溶性堿的用量使得胃的pH最低為4，最高為8，尤其是與該制劑相近。
5．如權利要求1-4中任一項的制劑，其特征在于所述尿素的粒度基本上低于200μm，優選低于20μm。
全文摘要
本發明涉及以片劑形式、膠囊形式或某些其它固體形式施用尿素的基本上無水的制劑。該制劑在胃中很快溶解。該制劑被用于證實呼出的空氣中是否存在氨,所述氨是由于胃中與幽門螺桿菌感染相關的脲酶活性提高而產生的。
文檔編號A61K49/00GK1216924SQ97194249
公開日1999年5月19日 申請日期1997年4月18日 優先權日1996年4月30日
發明者C·奈斯特倫, A·佩特爾森, T·倫德奎斯特 申請人:迪爾巴特公司