專利名稱：：微生物調節的方法
技術領域：
：該發明涉及微生物調節過程的方法。具體地是包括呋喃酮(furanone)的方法和培養基，在微生物有機體調節過程中，這些呋喃酮對高絲氨酸內酯(HSL)和/或酰基化高絲氨酸內酯(AHL)起抑制作用。
背景技術：
：微生物有機體包括細菌，真菌和藻類對人類和動物機體的功能有重要的影響，在尋找控制微生物有機體的化合物和方法方面，人類己做了相當大的努力。為此目的，仍然需要繼續尋找新的化合物和方法，這是由于，至少部分由于這類微生物有機體能夠迅速突變，以防止這些化合物和方法對它們的抑制作用。廣泛分布于細菌包括人類病原體中的一類重要調節劑稱為高絲氨酸內酯(HSL)或酰基化高絲氨酸內酯(AHL)。細菌中的AHL調節系統是一個兩組分調節系統，它調節應答于環境條件和細胞外信號分子的胞間活性。這個系統首先在生物發光的海洋細菌哈氏弧菌(Vibrioharveyi)和費氏弧菌(V.fischeri)中發現的。它可用于控制生物發光的表達。原則上講，該系統含有兩種蛋白質-LuxR和LuxI。LuxI酶由一個LuxI基因編碼，并產生被稱為高絲氨酸內酯的相關的信號分子家族。這些信號分子與LuxR調節劑相結合，促使其激活，它既是編碼生物發光有關酶類結構基因的正調節劑，又是LuxI基因本身的正調節劑。整個系統通過自身誘導方式進行放大，另外的分子作為LuxR-LuxI系統的調節劑。雖然該系統最初是在生物發光的細菌中發現的，在許多其它微生物類中現己發現此調節系統，并參與細菌的各種活性(Swiftetal1994，Fuquaetal1994)。這些活性包括，但并不局限于此，植物病原體胡蘿卜軟腐歐文氏菌(Erwiniacarotovora)和綠膿假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)，囊性纖維變性病原體中胞外酶的產生，以及從根癌土壤桿菌(Agrobacteriumtumefaciens)轉移到植物中的Ti質粒的產生。在所有例子中，酰基化高絲氨酸內酯或高絲氨酸內酯樣化合物都是自身調節的誘導劑。由于這些調節系統廣泛分布于細菌體內，并且控制細菌侵入宿主有機體的過程。看來某些有機體會產生抵抗這類系統的防御機制，但現在還沒有發現。本發明人現己研制出一些抑制微生物生長的方法，其中使用的化合物是高絲氨酸內酯家族調節化合物的模擬物。
發明內容本發明的第一方面是由在微生物內，抑制高絲氨酸內酯(HSL)和/或酰基化高絲氨酸內酯(AHL)的調節過程的一種方法組成。包括將微生物與一種呋喃酮化合物相接觸來抑制這種調節過程。其優選的方法，該呋喃酮化合物是從藻類Deliseapulchra產生的，或其化學修飾物或其衍生物。更優選的方法該呋喃酮化合物選自式1和式2的化合物，還有更好的方法，此化合物選自圖3所示的化合物。呋喃酮化合物常用的濃度大于10ng/ml，優選的方法中其濃度為100ng～1mg/ml，更優選的方法中，其濃度為1μg～100μg/ml。可被本發明所抑制的HSL和AHL調節過程包括游動性，叢集性，游泳性，胞外酶生成性，靛蘭生成性，粘附性，附著性和發光性。本領域的技術人員應當了解，其它的AHL和/或HSL調節過程也可被本發明方法所抑制。為了抑制微生物有機體的游動或叢集生長，體外培養時，本發明的呋喃酮可加入培養基中，當游動的微生物在培養基里或表面生長時，它們的游動或叢集過程會受到抑制。本發明在下列情況下特別有用當在半固體瓊脂培養基平板上進行微生物混合培養時，由于一種游動微生物在整個平板上叢集生長時，防礙混合培養基中其它非游動微生物的分離或選擇。一種或多種呋喃酮化合物加入培養基中，使在此培養的任何由HSL和/或AHL調節的微生物的游動或叢集生長受到抑制。本發明方法可用于植物，動物和人體內微生物病原體的抑制過程。典型的植物病原體包括SerratiaLiquiaciens和胡蘿卜軟腐歐文氏菌，動物病原體包括哈氏弧菌和Vibrioanguillarum和從人類病原體包括綠膿假單胞菌和Proteusmirabilis。認為本發明方法將可通過直接或間接地應用呋喃酮處理微生物的方法進行。例如給予或應用呋喃酮于植物，動物或人體，以抑制感興趣的微生物在動植物或人體中HSL和/或AHL調節過程。呋喃酮的調節作用是減少或抑制感興趣的調節過程，而不期望對于HSL和/或AHL途徑本身的特殊作用。第二方面，本發明包括一個微生物培養基。該培養基用于在微生物中抑制高絲氨酸內酯(HSL)和/或酰基化高絲氨酸內酯(AHL)的調節過程。該培養基包括生長和/或維持成分和呋喃酮化合物。其優選方式中，呋喃酮化合物是從藻類Deliseapulchra得到的或化學修飾物或其衍生物。更優選的方式，呋喃酮化合物是選自化合物式1和式2，甚至更優選的方式，呋喃酮化合物是選自圖3中的化合物。呋喃酮化合物，在標準培養基中應用的最終濃度要大于10ng/ml，在優選方法中，呋喃酮化合物的終濃度為100ng～1mg/ml，更優選的方法中，呋喃酮化合物的終濃度為1μg～100μg/ml。這里所用術語“式1的化合物”其含意是圖1中所示呋喃酮結構化合物，其中R1是一個氫原子，一個羥基，酯或醚基團，而R2和R3可各為一個氫原子或鹵素原子。這里所用術語“式2的化合物”其含義是圖2中所示呋喃酮結構化合物，其中R1，R2，R3和R4可分別為一個氫原子，鹵素，甲基，烷基，羥基，酯和醚基團，或這些基團的組合。本發明所用的化合物包括一系列結構相關的呋喃酮。圖1中一些化合物己在以前發表的文獻中描述過，其中部分是本發明者所描述的(Kazlauskasetal1977；deNysetal1992，deNysetal1993)。在其文章中，它們的分子結構已經用核磁波譜，質譜法，紫外和紅外光譜和旋光性法(OCD)進行了闡述和表征。這些化合物全具有一個基本的碳骨架，包括一個呋喃酮部分和在基本結構的3位置處有一個烷基側鏈。其優選的結構式，在R1位置處由氫，羥基和乙酰氧基所取代，在R2，R3位置處氫、溴、氯和碘，以及由此而產生的一系列結構相關的代謝產物(圖1)。在這些位置處，最可行的取代組合可產生30個可能的結構，而其中13個已經表征。此外，本發明者觀已檢測若干個這些化合物合成的類似物(圖2和圖3)，雖然它們具有基本的呋喃酮骨架，但其烷基側鏈的長度不同。本發明包括圖1中所有30個化合物的使用，以及圖2和圖3中所示這些結構的擴展。呋喃酮化合物是AHL調節劑家族中一些結構相近的類似物(高絲氨酸內酯和相關的調節分子己在Swiftetal1994和Fuquaetal1994年文章中闡述)。事實上，這些化合物都是高絲氨酸內酯調節化合物的模擬物，呋喃酮廣泛被用于這些調節系統中競爭性抑制劑。為了更好地理解本發明，下列附圖中所舉例子可以作為參考附圖的簡述圖1表示Deliseapulchra呋喃酮的結構式1，圖2表示Deliseapulchra呋喃酮結構式2。圖3表示檢測過的呋喃酮結構(檢測化合物1-5，8，10和12-16)。圖4表示在呋喃酮對AHL調節Serratialiquifaciens叢集的抑制作用。圖5表示呋喃酮化合物4對于(a)含有1.5％瓊脂的LB10叢集，(b)0.3％瓊脂LB10游泳(c)Proteusmirabilus37℃生長情況的作用；和圖6表示Delisea粗提液鋪在塑料平板上抵抗下列情況的作用結果，(a)實驗中六個細菌菌種(b)在該領域中細菌的粘附作用。用于完成本發明的方法方法為了下面敘述的檢測方法，Deliseapulchra代謝產物(呋喃酮化合物)按下法進行提取該種藻類由澳大利亞，新南威爾士，Cape菌種銀行得到，冰凍保存，該組織基本上凍干，用二氯甲烷抽提，粗提液真空濃縮(reduce)，經真空液相層析，再經高分辨率液相層析將代謝產物進行分離，純化(deNysetal，1993)。純化代謝產物的結構描述是結合應用核磁共振波譜和質譜技術來進行的。圖3中所列Delisea代謝產物和合成類似物以前己經表征過，現用于生物檢測。呋喃酮化合物和它們的類似物的抵御微生物有機體的檢測如下面所述。所有檢測(生物檢測)在控制條件下的實驗室中完成的。細菌高絲氨酸內酯介導系統的抑制作用叢集，胞外酶，靛蘭生成，生物發光。所有細菌都在室溫下在LB液體培養基或LB平板上進行預培養。SerratiaLiqufaciens(叢集和胞外酶)檢測SerratiaLiqufaciens在室溫液體LB培養基中生長到450nm處光密度為0.3和穩定，接種到LB瓊脂(0.7％瓊脂)平板上，平板30℃培養和經常觀察叢集生長行為。呋喃酮化合物對叢集生長作用的檢測，是向平板中加入濃度范圍5-100μg/ml化合物1-13(圖3)(瓊脂是經滅菌和冷卻后)。SerratiaLiquifaciens外切蛋白酶生成的檢測，該菌種如上面所述進行培養和接種到LB液體培養基中，加入化合物3和4(圖3)100μg/ml檢測呋喃酮化合物的作用。從培養基中抽取小樣，離心和過濾滅菌。60微升上清液加到脫脂奶瓊脂平板的樣品孔中(在M9培養基中含有1.5％脫脂奶)。平板于室溫培養和觀察樣品孔周圍清晰區域的情況。呋喃酮化合物對SerratiaLiquifaciens生長的作用在LB培養基中進行如下測定，比較加入與未加入呋喃酮化合物的培養物的生長情況(圖3中的呋喃酮化合物1-13，100μg/ml加入不同的培養物中)用450nm處光密度測定其生長情況和跟蹤測定48小時。紫色色桿菌(ChromobacteriumViolencia)靛蘭檢測對HSL自身誘導劑呈陰性的紫色色桿菌突變體用于此檢測中。該菌種以高密度被加到LB培養基中，當培養基凝結后，鑿出樣品孔，各種HSL菌種無菌過濾上清液被加到各個樣品孔中，平板30℃培養，觀察樣品孔周圍紫色區域(由于靛蘭的產生)形成。圖3中呋喃酮化合物1和2的作用，是在LB培養基平板上，對含有濃度為100μg/ml的各種呋喃酮化合物進行檢測。這些化合物對色桿菌菌種生長的影響如上所述進行檢測。綠桿假單胞菌(彈性蛋白酶法)檢測預培養的該菌種經劃線法接種到蛋白胨-胰蛋白酶大豆瓊脂培養基上，其中含有0.3％彈性蛋白，平板37℃培養和觀測彈性蛋白水解的情況。呋喃酮化合物作用的檢測是加化合物1-4(100μg/m1)到平板上，比較平板里加入和未加入該化合物水解區域的大小。胡蘿卜軟腐歐文氏菌(胞外酶法)檢測預培養的E.carotovora接種到土豆片上，比較在土豆片上加入或未加入呋喃酮化合物(3和4)，土豆降解情況(軟化和褐色生成)。費氏弧菌和哈氏弧菌(生物發光法)檢測兩種菌株(Vibrio)開始檢測方法是劃線接種在LB瓊脂平板上(含有2％NaCl)，其加入和未加入5-100μg/ml呋喃酮化合物1-4，室溫培養24小時后，目測檢查平板生物發光的程度。進一步的檢測是，兩種菌種都生長于含有呋喃酮的液體培養基中，通過發光儀檢測生物發光的程度。呋喃酮對兩種菌種生長的作用如上所述進行檢測。表面游動和粘附的抑制作用除了特異地影響已良好確定的AHL介導的細菌特性外，呋喃酮化合物也抑制細菌的其它特性，特別是表面游動性和粘附作用。象它們干擾其他AHL系統一樣，呋喃酮干擾或抑制表面游動和叢集，同時并不必須抑制生長作用或其它微生物作用。Proteusmirabilis和若干個已表征的海洋分離菌種(但未作分類學上表征)用于這種檢測試驗。Proteusmirabilis和若干個海洋分離菌種(叢集檢測)其檢測方法和SerratiaLiquifacieas所述方法相同(上面)，呋喃酮對這些細菌生長抑制作用，檢測方法也如上面所述。海洋分離菌種(粘附檢測)從悉尼附近海岸水底表面分離的六個海洋細菌菌株，如上所述，在LB培養基(含有2％NaCl)進行培養。粘附檢測法是通過兩種方法來進行的。第一種，不同濃度的呋喃酮鋪于不同的塑料平皿上，這些平皿附上框架，每個框架加入含有107/ml，6種海洋菌種之一的培養基，2小時后，除去框架，徹底洗滌，用DAPI進行染色，每個平皿上粘附細菌的數目，可通過螢光顯微鏡進行計數。第二種，粘附的抑制作用，其檢測是將呋喃酮和菌種預保溫，以便細菌吸收呋喃酮化合物，應用三個不同的預保溫時間1/2，3和10小時，預保溫結束時，洗滌菌體細胞，107/ml濃度放入實驗容器中，塑料平板(未鋪層)放入容器內。2小時后，框架和平板全除去，洗滌，如上所述對粘附細胞進行計數。式2化合物對細菌和真菌生長的抑制作用除了上述檢測外，被選用的通式2化合物對細菌，一種酵母菌(Candidaalbicans)和一種真菌(Helminthosporiumsp)生長的作用進行檢測。細菌生長于含有不同濃度呋喃酮的液體培養基中，并通過光密度(OD)的改變來檢測菌體生長情況。真菌檢測是用孢子接種于瓊脂平板上，這些平板的樣品孔中含有不同濃度的呋喃酮化合物，48小時后，檢測樣品孔周圍抑制區域的大小。生物檢測的結果對AHL介導過程的作用呋喃酮對AHL依賴表型和生長的作用，用于AHL的檢測的一系列菌種，列于表1中。在所有實驗中，有些呋喃酮在不抑制生長的濃度下影響AHL依賴表型。最完整的實驗結果是從SerratiaLiquifaciens，一個兼性植物病原體獲得的。被檢測的呋喃酮無一抑制這種微生物的生長或游泳行為。被檢測的所有化合物，在不同程度上抑制菌體的叢集，這是一個AHL依賴行為。(圖4a，4b和表1)這表明存在一種機制，它可以干擾細胞和細胞之間的通訊，而限制細菌表面定居，但卻不影響細菌的生長或存活。以一種類似的方式，不同濃度化合物3和4抑制Serratiaexoproteases外切蛋白酶的產生，而不影響其生長。(在100μg/ml，該化合物無一抑制SerratiaLiquifaciens的生長)。紫色色桿菌靛蘭生成是一個HSL調節系統，化合物1和2(表2)能抑制之，這兩種化合物并不影響該細菌的生長。紫色色桿菌靛蘭陰性突變株，在應答加入的化合物1和2時并不產生色素(如化合物不能刺激靛蘭的產生)。就Serratia而言，這些化合物看來特異地干擾一個AHL介導的過程，而對該微生物沒有顯著的影響(如生長的抑制作用)。在這兩種情況下，其結果可推測發明的這些化合物對HSL類化合物有競爭性抑制作用。Chromobacterium的生長可被100μg/ml化合物4所抑制，但同樣濃度的化合物1-3對其沒有影響。該類化合物也能影響下列兩種重要病原體的AHL介導過程，它們是人類病原體綠膿假單胞菌(囊性纖維變性)和植物病原體胡蘿卜軟腐歐文氏菌(軟腐病)的。化合物1和2可刺激彈性蛋白酶的產生，此蛋白酶是綠膿桿菌AHL介導毒力因子，但又被化合物3和4所抑制。化合物2和4未檢測出對生長的影響，結構上非常類似的化合物(1和2對3和4)在彈性蛋白酶產生上卻有完全相反的作用。這種觀察的結果再一次表明該化合物在這種HSL介導的系統上具有非常特異的作用。對于胡蘿卜軟腐歐文氏菌，化合物4減少外切酶的產生，不抑制其生長。化合物3既不影響生長也不影響胞外酶的生成，進一步證明這類代謝物具有特異的作用。呋喃酮能抑制費氏弧菌和哈氏弧菌兩菌種AHL調節的生物發光作用，但并不抑制該兩菌種的生長。表1呋喃酮化合物對酰基化高絲氨酸內酯表型各種細菌的作用。</tables>表(1續)</tables>表2Deliseapulchra粗提液最小抑制濃度和呋喃酮化合物對4種不利相關的表型游泳，附著，生長和叢集的抑制作用，所用菌種是從D.pulchra和巖石表面分離得到的菌種化合物抑制四種表型的D.pulchra菌粗提液的抑制或呋喃酮化合物1-4游泳附著生長(2)叢集(μg/ml)(μg/cm2)(μg/ml)(μg/ml)R12DCnd(1)0.01ndndD1＞50nd＞505D2＞50nd＞505D350nd＞505D425nd255R86DCnd0.01ndndD150nd＞5025D2＞50nd＞505D3＞50nd＞505D425nd255R130DCnd0.01ndndD1＞50nd＞5025D2＞50nd＞5025D3＞50nd2525D425nd255V21DCnd1.0ndndD125nd255D225nd255D325nd55D45nd55V54DCnd1.0ndndD15nd＞5025D25nd＞505D35nd255D45nd255V55DCnd1.0ndndD15nd＞505D25nd＞505D35nd55D45nd255(1)nd未做(2)在液體培養基中表面游動和粘附的抑制作用Delisea粗提液和化合物4都可抑制機會型病原體Proteusmirabilis的叢集。抑制其叢集的濃度的化合物4并不影響生長和游泳(圖5)。所有6種海洋菌種的叢集作用被并不抑制其生長的濃度呋喃酮所抑制(表2)。當Delisea非極性粗提液被鋪于實驗室檢測所制備的人工表面上，它可以抑制所有6種海洋分離菌種的粘附作用。甚至濃度低到10ng/cm2，仍存在對有些菌種抑制作用。6個菌種中有5個可被1ug/cm2所抑制(圖6A)，細菌粘附作用大田檢測(fieldassay)結果與這些結果相符。Delisea粗提液以1μg/cm2鋪于表面，可降低該大田細菌粘附作用的90％以上(圖6B)。用Delisea非極性粗提液的細菌預溫孵，接著洗滌細胞，也能大大抑制細菌對(未鋪)無生命表面的粘附作用。這種結果特別說明，上面所述AHL調節系統抑制作用的結果與此相關。這也因為預溫孵實驗表明，呋喃酮并不是簡單地改變表面特性而抑制其粘附作用。這些化合物被細胞所攝取，進而引起粘附作用抑制，這都表明一個調節系統受影響，引起粘附素生產的減少。關于受影響的調節系統為AHL所驅動的進一步的證據是下面實驗觀察所得到的。(數據未顯示)在此觀察中，細胞與AHLs預溫孵，粘附作用增加。雖然用Delisea粗提液己進行了多種粘附作用的檢測，本領域技術人員應當充分了解，這種作用是由于抽提液中所含的呋喃酮引起的。式2化合物對真菌生長的抑制作用所有化合物在至少一個檢測量中可以抑制Candidaalbicans或Helminthosporiumsp.(表3)。這類化合物在某些活性方面，對Helminthosporium比市場銷售的兩性霉素B更加有效。在高含量檢測中，Helminthosporium的生長被4種呋喃酮類完全抑制。在這一點上和兩性霉素B不同。這里應當強調的是，這些檢測法過低估算了這種化合物相對于市場售產品相比較的作用。這是因為這類化合物在瓊脂中的擴散比水溶性的兩性霉素B低得多。這些結果清楚的表明天然呋喃酮和合成的類似物(i)特異地干擾被高絲氨酸內酯或酰基化高絲氨酸內酯調節系統所調節的細菌特性。在此受影響的已知由AHL所調節的特性包含叢集，胞外酶的產生，生物發光，和色素的產生。粘附作用能被加入的AHL類所刺激，它也可能被AHL所調節，也能被檢測的呋喃酮類所抑制。類似地，Proteusmirabilis和一些海洋分離菌種的叢集作用，也可被呋喃酮所抑制。應當指出的是，其它AHL調節過程或在此未檢測的特性，也可能被呋喃酮所抑制。其中包括魚類病原體Vibrioanguillarum的病毒性，根癌農桿菌質粒轉移特性。(ii)一些被檢測化合物(式2)也抑制細菌和真菌的生長和/或殺死它們。表3呋喃酮對真菌生長的抑制作用。數據是用抑制區域寬度(mm)來表示Candidaalbicans加入的量(μg)1001010.1化合物對照無抑制作用乙醇無抑制作用兩性霉素B1.146-105-72-4化合物11-2000化合物22-3000化合物32-31-200化合物53-8100化合物80000化合物131000Helminthosporiumsp加入的量(μg)1001010.1化合物對照無抑制作用乙醇無抑制作用兩性霉素B7-106-862化合物1202-500化合物2202-400化合物36-206-900化合物5209-132-40化合物820000化合物130000因此這類化合物，作為整體來看，能干擾微生物有機體AHL驅動的系統，并抑制一些菌種的生長。作用是高度特異的，并依賴于呋喃酮化合物的濃度，檢測的菌種、呋喃酮的結構和給定的AHL有關系統。在不抑制生長的情況下，呋喃酮能特異地用于抑制HSL系統，或者用于抑制生長。由于細菌中廣泛存在HSL介導的動能，呋喃酮在許多應用方面是很有用的，不僅僅限于生物醫學，農業和防治污染方面的應用。應當指出的是，作為生物殺蟲劑，對這類化合物的活性己做了不少研究，特別是Reichelt和Borowitzka(1984)所報導的結果。他們的結果表明呋喃酮式1中一些化合物抑制細菌的生長，但是并沒有指出或談到呋喃酮能影響特異的調節系統。本發明者己發現呋喃酮強烈地抑制一些細菌的特性(胞外酶產生，叢集作用等)。這類化合物能夠在體外和體內各種系統中用于影響這些特性。本領域技術人員應當理解的是對于具體實施方案所示的本發明可以做出多種變動和修改而不偏離泛文描述的本發明的精神和范圍。因而本發明的實施例在各方面應被認為是說明性而非限制性的。參考文獻deNys，R.，Coll，J.C.，BoWden，B.F.(1992)。DeliseaPulchra(cf.fimbriata)revisited.來自紅藻Deliseapulchra的兩種新代謝產物的結構確定。Aus.J.Chem.451625-1632。deNys，R.，Wright，A.D.，Konig，G.M.，Sticher，O.(1993)。來自海藻Deliseapulchra的新的鹵代呋喃酮(cf.fimbriata)。四面體4911213-11220。Fletcher，R.L.(1989)。使用海洋污染綠藻Enteromorpha的生物分析技術。Int.Biodeterioration25407-422。Fuqua，W.C.，Winans，S.C.，Greenderg，細菌中法定人數檢測細胞密度應答的轉錄調節因子的LuxR-LuxI家族。J.Bacteriology176269-275。Jefford，C.W.，Jaggi，D.，Boukouvalas，J(1988)J.Chem，Soc.，Chem.Comm.1595Jefford，C.W.，Jaggi，D.，Sledeski，A.W.，Boukouvalas，J.(1989)Stud.Nat.Prod.Chem.，3157。Kazlauskas，R.，Murphy，P.T.，Quinn，R.J.，Wells，R.J.(1977)。一類新的來自于紅藻Deliseafimbrata(Bonnemaisoniaceae)的鹵代內酯.Tet.Lett.137-40。Reichelt，J.L.，Borowitzka，M.A.(1984)來自海藻的抗微生物活性；大規模篩選結果。Hydrobiologia116/117158-168。Swift，S.，Bainton，N.J.Winson，M.K.(1994)。N-乙酰高絲氨酸內酯的革蘭氏陽性細菌通訊一種通用語言嗎？TrendsinMicrobiology2193-198。權利要求1.一種在微生物中，抑制高絲氨酸內酯(HSL)和/或酰基化高絲氨酸內酯(AHL)調節過程的方法包含將微生物有機體經呋喃酮化合物處理，以便抑制調節過程。2.根據權利要求1的方法，呋喃酮化合物是從藻類Deliseapulchra得到的或化學修飾物或衍生物。3.根據權利要求2的方法，呋喃酮化合物選自上面定義的式1和式2的化合物。4.根據權利要求3的方法，呋喃酮化合物選自圖3的化合物。5.根據權利要求1-4之任一的方法，其中調節過程選自游動，叢集，游泳，胞外酶，靛蘭生成，發光，粘附，附著。6根據權利要求1-5之任一的方法，其中呋喃酮化合物所用的濃度大于10ng/ml。7.根據權利要求6的方法，呋喃酮化合物所用濃度是10ng～1mg/ml。8.根據權利要求7的方法，呋喃酮化合物所用濃度是1μg～100μg/ml。9.根據權利要求5的方法，其中調節過程是游動性或叢集性，呋喃酮化合物參入進微生物培養基中，其濃度要大于10ng/ml，以便微生物有機體的游動性和叢集性基本上得到抑制。10.根據權利要求9的方法，呋喃酮化合物參入進培養基中其濃度為1μg～100μg/ml。11.根據權利要求5的方法，該調節過程是粘附作用或附著作用和呋喃酮化合物濃度大于1ng/cm2用于表面，以便微生物對表面的粘附作用或附著作用基本受到抑制。12.根據權利要求11的方法，用于表面的呋喃酮化合物濃度為10ng～10μg/cm2。13.根據權利要求1-12中任何一項要求所提出的方法，其中微生物有機體是植物，甲殼類，魚，動物或人類的病原體。14.根據權利要求13的方法，植物病原體選自SerratiaLiquiaciens和胡蘿卜軟腐歐文氏菌。15.根據權利要求13的方法，甲殼類病原體是哈氏弧菌。16.根據權利要求13的方法，魚類病原體是Vibrioanguillarum。17.根據權利要求13的方法，人類病原體選自綠膿假單胞菌和Proteusmirabilis。18.一種用于抑制微生物有機體高絲氨酸內酯(HSL)和/或酰基化高絲氨酸內酯(AHL)調節過程的微生物培養基，該培養基含有生長和/或維持成分和一個呋喃酮化合物。19.根據權利要求18的培養基，其中呋喃酮化合物是從藻類Deliseapulchra中得到的或化學修飾物或其衍生物。20.根據權利要求19的培養基，該培養基中，呋喃酮化合物選自上文所定義的式1和式2化合物。21.根據權利要求20的培養基，其呋喃酮化合物選自圖3的化合物。22.根據權利要求18～21之任一的培養基，其呋喃酮化合物包含在培養基中，給出的最終濃度要大于10ng/ml。23.根據權利要求22中的培養基，其呋喃酮化合物具有的最終濃度為100ng～1mg/ml。24.根據權利要求23的培養基，其呋喃酮化合物的最終濃度為1μg～100μg/ml。全文摘要一個方法和一個微生物培養基,其在微生物有機體中應用呋喃酮化合物來抑制高絲氨酸內酯(HSL)和/或酰基化高絲氨酸內酯(AHL)的調節過程。文檔編號A61K31/365GK1185173SQ96194117公開日1998年6月17日申請日期1996年3月25日優先權日1995年3月23日發明者S·謝爾貝里,P·斯丁貝里,P·C·德賴斯,R·馬思米利恩,M·馬內費爾德,M·古斯科夫,L·格拉姆申請人:單一檢索有限公司