專利名稱：維生素d的17－側(cè)鏈炔基－和20－氧孕烷－衍生物,其制法和藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的1-羥基孕鈣化醇衍生物，更具體地說，是涉及有抗黃體酮活性的1-羥基孕鈣化醇衍生物。
人們很早就已知維生素D3在鈣代謝中起關(guān)鍵作用。人們發(fā)現(xiàn)D維生素在體內(nèi)經(jīng)歷羥基化作用導(dǎo)致許多維生素D的類似物合成，對其的測定表明化合物或其代謝物若要顯示出對鈣代謝的實(shí)際作用，則1α-位和24R-或25-位上的羥基是必需的。
隨后的工作表明天然代謝物1α，25-二羥基維生素D3顯示出細(xì)胞調(diào)制活性，包括刺激細(xì)胞成熟和分化，以及免疫抑制作用，還顯示出刺激殺菌氧代謝物產(chǎn)生和白細(xì)胞的趨化效應(yīng)的免疫增強(qiáng)作用。
然而，1α，25-羥基維生素D3在這些領(lǐng)域中的治療潛力受到其對鈣代謝的強(qiáng)有力作用的嚴(yán)重限制。足以產(chǎn)生預(yù)期的細(xì)胞調(diào)制、免疫抑制或免疫增強(qiáng)作用的濃度時的劑量往往會導(dǎo)致不可接受的高鈣血癥。因此人們對合成對鈣代謝的作用降低但仍顯示出預(yù)期的對細(xì)胞代謝的作用的類似物表現(xiàn)出極大的興趣，例如WO 95/16672中概括的那樣。
DeLuca和coworkers(四面體快報(Tetrahedron Letters)35(15)(1994)，pp.2295-2298和大綱摘要(Program Abstracts)，第77次內(nèi)分泌學(xué)會年會(1995)，摘要號No.P2-662，p.456)報道在他們對這樣的維生素D類似物的研究中已測試了多種20-氧孕鈣化醇并發(fā)現(xiàn)它們在對鈣代謝的作用方面是非活性的。這些化合物只是具有一些與黃體酮相同的結(jié)構(gòu)特征并開發(fā)了化合物如RU 486，一種具有以下結(jié)構(gòu)式的19-去甲甾族化合物
并顯示出強(qiáng)抗黃體酮和抗糖皮質(zhì)類固醇活性，他們還測試了這些化合物結(jié)合黃體酮受體的能力。發(fā)現(xiàn)20-氧孕鈣化醇結(jié)合黃體酮受體，22-醛和22-羥基鈣化醇結(jié)合程度較小。對“許多其他”維生素D類似物的測試，它們沒有顯示出顯著的結(jié)合活性。特別提到1α-羥基-20-氧孕鈣化醇及其相應(yīng)的19-去甲類似物沒有這樣的結(jié)合作用。
與RU 486相對比，20-氧孕鈣化醇被認(rèn)為不結(jié)合糖皮質(zhì)激素受體，但已發(fā)現(xiàn)(大綱摘要，第76次內(nèi)分泌學(xué)會年會(1994)，摘要號No.1744，p.636)其在體外抑制人乳腺癌細(xì)胞(T47D)的生長。
本發(fā)明是基于以下令人驚奇的發(fā)現(xiàn)與DeLuca等人的發(fā)現(xiàn)完全相反，大量1-羥基孕鈣化醇事實(shí)上用作黃體酮活性的強(qiáng)拮抗劑，例如由抗生育力(例如避孕藥)活性，抗黃體酮測定和對乳腺癌T47D和MCF-7細(xì)胞系生長的抑制而證明的。甚至更令人驚奇的是，我們發(fā)現(xiàn)這些1-羥基化合物的抗黃體酮作用可以超過相應(yīng)的1-脫氧化合物。
撇開化合物1α-羥基-20-氧孕鈣化醇不說，因?yàn)樗赡芤驯籇uluca等人公開，這些1-羥基孕鈣化醇化合物及它們的O-被護(hù)衍生物是新的且構(gòu)成本發(fā)明的特征之一。
因此按照本發(fā)明的一個方面，提供了通式(I)化合物
(其中R1代表任意被護(hù)的羥基或低級烷氧基，R2代表任意被羥基、被護(hù)羥基或低級烷氧基取代的低級炔基；或R1代表基團(tuán)-C(RA)(RB)CH3其中RA是任意被羥基、被護(hù)羥基或低級烷氧基取代的低級炔基，RB是任意被護(hù)的羥基或低級烷氧基，或者RA和RB一起代表氧基，R2代表氫原子，任意被護(hù)的羥基或低級烷氧基；R3和R4可以是相同的或不同的，各自代表氫原子或O-保護(hù)基)和其相應(yīng)的5，6-反式化合物(即5E-異構(gòu)體)，但條件是當(dāng)R1代表基團(tuán)-C(RA)(RB)CH3其中RA和RB一起代表氧基且基團(tuán)-OR4為α構(gòu)型時，R2不為氫。
當(dāng)R1、R2和RB之一代表或含有低級烷氧基時，它們可以是例如C1 -6烷氧基如甲氧基，乙氧基，丙氧基和丁氧基，當(dāng)合適時，它們可以是直鏈或支鏈的。
當(dāng)R2或RA代表低級炔基時，它可以例如含有不超過6個碳原子，可以是例如鏈-1-炔-1-基如乙炔基，1-丙炔基，1-丁炔基，1-戊炔基或1-己炔基，或ω-炔基如炔丙基。羥基或低級烷氧取代基可以是例如3-羥基丙炔基和3-甲氧丙炔基。
當(dāng)R3和R4代表O-保護(hù)基時，它們可以例如是可裂開的O-保護(hù)基如本領(lǐng)域中公知的那些。合適的基團(tuán)包括醚化基如甲硅烷基(例如三(低級烷基)甲硅烷基如三甲基甲硅烷基，三乙基甲硅烷基，三異丙基甲硅烷基或叔丁基二甲基甲硅烷基；三(芳基)甲硅烷基如三苯基甲硅烷基；和混合烷基-芳基甲硅烷基)；任意被氧原子中斷的低級(例如C1-6)烷基如甲基，甲氧甲基或甲氧乙氧甲基；和環(huán)基如四氫吡喃基。酯化O-保護(hù)基包括低級(例如C1-6)鏈烷?；缫阴；?，丙?；?，異丁?；蛐挛祯；环减；?例如含有7-15個碳原子的)如苯甲酰基或4-苯偶氮基苯甲?；?；低級鏈烷磺?；?任意鹵化的)甲烷磺酰；和芳基磺酰如對甲苯磺?；?。
O-被護(hù)衍生物作為中間體用于制備式(I)的活性1，3β-二醇。另外，當(dāng)O-保護(hù)基在體內(nèi)是代謝不穩(wěn)定的時，這樣的式(I)的醚和酯可直接用于治療。
通式(I)化合物的5，6-反式異構(gòu)體作為中間體用于制備相應(yīng)的5，6-順式異構(gòu)體，例如在下文中更詳細(xì)描述的那樣。不過，當(dāng)R3和R4代表氫原子或代謝不穩(wěn)定基團(tuán)時，這樣的5，6-反式異構(gòu)體可以顯示出生物學(xué)活性，盡管一般比相應(yīng)的5，6-順式異構(gòu)體的活性低，并由此可以用于治療。
1α-羥基-20-氧孕鈣化醇和如上定義的通式(I)的活性化合物的抗促孕活性使得它們在例如激素響應(yīng)腫瘤或增生(如乳腺，前列腺或卵巢癌，子宮平滑肌瘤或子宮內(nèi)膜異位)的治療和/或預(yù)防中用作抗增殖劑，或作為黃體酮活性的抑制劑，例如在水腫，粉刺，黃褐斑或人或動物的生育力控制中(諸如象在流產(chǎn)或在避孕中)。因此本發(fā)明包括使用這些化合物來治療或預(yù)防上述疾病和制造用于這樣的治療或預(yù)防的藥劑。
雖然本發(fā)明化合物的抗增殖作用稍低于具有細(xì)胞調(diào)制活性的1α-羥基維生素D類似物，例如在我們的國際專利申請WO-A-9309093，WO-A-9426707，WO-A-9503273，WO-A-9516672和WO-A-9525718中描述的，但其仍然是顯著的并可用于治療，因?yàn)檫@些化合物對鈣代謝的作用非常小并因此顯示出有利的治療比率。因此它們可用于上面提到的申請WO-A-9309093，WO-A-9426707，WO-A-9503273，WO-A-9516672和WO-A-9525718中的任何一篇，這些申請的內(nèi)容結(jié)合在此作為參考，例如作為免疫抑制和/或抗炎劑。
人們將意識到，按照本發(fā)明的化合物可以在抗腫瘤、抗生育、抗增殖、免疫抑制和/或抗炎活性等方面顯示出不同的活性分布型?？捎靡阎姆绞绞褂贸Ｒ?guī)生物測定方法來選擇最適于特定治療應(yīng)用的特定化合物。
按照本發(fā)明的活性化合物可以配制成用于任何常規(guī)途徑給藥的制劑，例如通過口服(包括舌下)，胃腸外，直腸或通過吸入給藥；如此配制的藥物組合物構(gòu)成本發(fā)明的特征之一。
如果需要，口服給藥的組合物可以含有一種或者多種生理學(xué)上相容的載體和/或賦形劑并且可以是固體或液體。這些組合物可以采用任何常規(guī)劑型包括例如片劑，包衣片劑，膠囊，錠劑，含水或油性懸液，溶液，乳液，糖漿，酏劑和適于在使用前用水或其它合適的液體賦形劑重新混合的干燥產(chǎn)物。這些組合物可以有利地制備成單位劑型。如果需要，按照本發(fā)明的片劑和膠囊可以含有常規(guī)成分如粘合劑，例如糖漿，阿拉伯樹膠，明膠，山梨糖醇，黃蓍膠或聚乙烯吡咯烷酮；填充劑例如乳糖，蔗糖，玉米淀粉，磷酸鈣，山梨糖醇或甘氨酸；潤滑劑如硬脂酸鎂，滑石，聚乙二醇或硅石；崩解劑例如馬鈴薯淀粉；或可接受的濕潤劑如十二烷基硫酸鈉。片劑可按照本領(lǐng)域中熟知的方法包衣。
液體組合物可以含有常規(guī)添加劑如懸浮劑，例如山梨糖醇糖漿，甲基纖維素，葡萄糖/蔗糖漿，明膠，羥甲基纖維素，羧甲基纖維素，硬脂酸鋁凝膠或氫化食用脂；乳化劑如卵磷脂，脫水山梨糖醇單油酸酯或阿拉伯樹膠；無水賦形劑，它們可以包括食用油，例如植物油如花生油，杏仁油，精制椰子油，魚肝油，油狀酯如多乙氧基醚80，丙二醇或乙醇；和防腐劑例如對羥基苯甲酸甲酯或丙酯，或山梨酸。液體組合物可以常規(guī)地包在例如明膠膠囊中從而得到單位劑型的產(chǎn)物。
用于胃腸外給藥的組合物可以利用可注射的液體載體如無菌無熱原水，無菌無過氧化物的油酸乙酯，脫水酒精或丙二醇或脫水酒精/丙二醇混合物進(jìn)行配制，并可通過靜脈、腹腔或肌內(nèi)注射。
用于直腸給藥的組合物可以利用常規(guī)的栓劑基質(zhì)如可可油或其它甘油酯進(jìn)行配制。
用于通過吸入給藥的組合物常規(guī)地配制成用于自動推進(jìn)式釋放的形式，例如以計量劑型，如作為在推進(jìn)劑中的懸液，如在填充到配有計量分送閥的氣溶膠容器中的鹵代烴中。
在本發(fā)明的組合物中加入抗氧劑如抗壞血酸，丁基化羥基苯甲醚或氫醌對延長它們的儲存期限是有利的。
當(dāng)上述組合物中任何一種制備成單位劑型時，它們可以例如每單位劑型含有0.5-2500μg，例如1-500μg按照本發(fā)明的活性化合物。如果需要，這些組合物中可以加入一種或多種另外的活性成分，例如抗黃體酮劑如RU486，雌激素或雌激素拮抗劑。
按照本發(fā)明的活性化合物的合適的日劑量可以在例如1-5000μg如2-1000μg/天的范圍內(nèi)，可根據(jù)諸如所治療的疾病的嚴(yán)重程度和患者的年齡、體重和狀況等因素而定。
按照本發(fā)明的化合物可以利用任何常規(guī)方法制備，例如涉及到下述的一種或多種A)利用相應(yīng)的5，6-反式化合物的異構(gòu)化，優(yōu)選以1，3-二(O-被護(hù))的形式。異構(gòu)化可以通過例如用碘，用二硫化物或聯(lián)硒化物處理，或通過用紫外線照射，優(yōu)選在三重增感劑的存在下完成。這樣的5，6-反式化合物自身可以通過利用亞硒酸酯或二氧化硒或亞硒酸在醇存在下氧化相應(yīng)的1-脫氧-5，6-反式化合物而制得，例如象GB-A-2038834中描述的，其內(nèi)容結(jié)合在此作為參考。該方法將生成分別作為主要和次要產(chǎn)物的相應(yīng)的1α-和1β-羥基化合物；它們可容易地分離開，例如通過色譜法。如果需要，1-脫氧-5，6-反式起始物可以通過在氧化條件下將相應(yīng)的1-脫氧-5，6-順式化合物就地異構(gòu)化而制得。
B)通過將化合物(I)或相應(yīng)的5，6-反式異構(gòu)體(其中RA和RB一起代表氧基而R2代表氫原子，優(yōu)選以1，3-二(O-被護(hù))的形式)，或相應(yīng)的1-脫氧化合物氧化得到其中R2代表羥基的化合物。這樣的氧化可以例如利用Barton/Gardner羥基化條件來完成，如在強(qiáng)堿如低級烷氧堿金屬(如叔丁醇鉀)的存在下，優(yōu)選在相應(yīng)的低級醇(如叔丁醇)存在下，將空氣通入化合物在一種或多種極性有機(jī)溶劑中的溶液中，這些溶劑選自例如環(huán)醚(如四氫呋喃和叔酰胺如N，N-二甲基甲酰胺)。該反應(yīng)優(yōu)選在能將過氧化物基還原為羥基的低價磷化合物存在下進(jìn)行，例如磷化氫或亞磷酸酯，如亞磷酸三(低級烷基)酯如亞磷酸三乙酯。令人驚奇的是我們已發(fā)現(xiàn)無論是這些強(qiáng)氧化條件還是瞬變形成的活性17-過氧化物中間體都不能降解以分子存在的敏感三烯系統(tǒng)或與之反應(yīng)。因此這種意想不到的有效且有用的羥基化過程構(gòu)成本發(fā)明的特征之一。利用該方法制備1-脫氧化合物時，可隨后將其1-羥基化，例如通過利用合適的硒化合物進(jìn)行氧化如上述(A)中描述的那樣從而引入1α-羥基。
C)通過優(yōu)選的式(I)的1，3-二(O-被護(hù))化合物或相應(yīng)的5，6-反式異構(gòu)體(其中R1和R2一起或RA和RB一起代表氧基)與低級炔基陰離子反應(yīng)得到其中R1或RA為低級炔基而R2或RB為羥基的式(I)化合物。低級炔基陰離子可以合適的低級炔的鹽(例如堿金屬鹽如鋰鹽)形式加入，如果需要以與合適的物質(zhì)如二胺(如低級烯化二胺如乙二胺、1，2-二氨基丙烷或1，3-二氨基丙烷)的復(fù)合體的形式，或者如果需要就地生成，可以通過用強(qiáng)堿(如氨基化鈉，二異丙基氨基化鋰或正丁基鋰)處理相應(yīng)的低級炔。另外陰離子也可從相應(yīng)的甲硅烷基化低級炔通過與一種氟離子源(例如無水季銨氟化物如氟化四丁銨)反應(yīng)而就地生成。如果該反應(yīng)是針對其中RA和RB一起代表氧基而R2代表羥基的化合物(I)(例如上述(B)中制備的)進(jìn)行的，此羥基將在反應(yīng)過程中相應(yīng)地甲硅烷基化。如果合適地選擇保護(hù)基，例如如果1和3位被保護(hù)為三異丙基甲硅烷氧基而R2羥基保護(hù)為三甲基甲硅烷氧基，則后者可以被選擇性地裂解，例如通過弱酸水解，如利用乙酸或稀鹽酸。
D)通過將優(yōu)選的1，3-二(O-被護(hù))化合物(I)或相應(yīng)的其中R1、R2或RB代表羥基的5，6-反式異構(gòu)體烷基化生成相應(yīng)的其中R1、R2或RB代表低級烷氧基的化合物。這樣的烷基化作用可以常規(guī)地通過與烷基化劑如低級烷基磺酸鹽或鹵化物(例如氯化物，溴化物，或更優(yōu)選碘化物)在堿如金屬氫化物(例如堿金屬氫化物象氫化鈉或氫化鉀)的存在下進(jìn)行反應(yīng)而完成。
人們將意識到當(dāng)需要和/或希望時，上述任何一個步驟后可以接著去除任何一個O-保護(hù)基，并且當(dāng)應(yīng)用一個以上的上述步驟時，它們可以采用任何合適的順序。
一般說來，存在于1和/或3β-位上的O-保護(hù)基可以通過例如象許多文獻(xiàn)中記載的常規(guī)方法而除去，因此酯化?；梢酝ㄟ^堿水解而除去，如利用在鏈烷醇中的堿金屬烷氧化物。醚化基象甲硅烷基可以通過酸水解或者用氟化物鹽(如四烷基氟化銨)處理而除去。當(dāng)采用牽涉到強(qiáng)堿條件的反應(yīng)(如上述步驟(C)和(D)中的反應(yīng))時，使用這種不耐酸但對堿穩(wěn)定的保護(hù)基是有利的。這樣的保護(hù)基的去除一般將作為制備過程的最后階段完成。
人們將意識到用于上述步驟(B)的起始物包括1α-羥基-20-氧-膽鈣化醇及其O-被護(hù)衍生物，它們是已知的化合物。這樣的化合物可以轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的其中R1和R2一起代表氧基的化合物(I)，即用于上述步驟(C)的起始物，例如通過利用與Barton/Gardner羥基化作用類似的技術(shù)進(jìn)行氧化，在這樣的氧化條件下化合物的通常對空氣敏感的三烯系統(tǒng)具有令人驚奇的穩(wěn)定性。這樣的其中R1和R2一起代表氧基的式(I)的17-酮本身是新的，并且與上面所描述的它們的制備方法一起代表了本發(fā)明的進(jìn)一步特征。這種17-酮的1-脫氧類似物可以相似地進(jìn)行制備并隨后1-羥基化，例如通過利用合適的硒化合物如上述(A)中描述的進(jìn)行氧化從而實(shí)現(xiàn)1-羥基化作用。
下面的非限制性實(shí)施例是用來闡述本發(fā)明的。所有的溫度均為℃。制備例11α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-17-氧-9，10-斷雄甾-5(E)，7，10(19)-三烯[化合物(I)的5，6-反式類似物，其中R1+R2＝O，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]將空氣通入保持在0℃下的含有叔丁醇鉀(6ml 1M的四氫呋喃溶液)的1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-氧-5，6-反式孕鈣化醇[化合物(I)的5，6-反式類似物，其中R1＝CH3CO，R2＝H，R3＝R4＝(i-Pr)3Si](620mg)的叔丁醇溶液(10ml)中。3小時后停止通氣，將該反應(yīng)混合物用氬氣清洗20分鐘，回流加熱20分鐘，用乙醚稀釋而得到標(biāo)題化合物(250mg，用色譜法分離的)UV(Et2O)λmax268，λmin228nm；IR(CDCl3)1630，1730cm-1；NMR(CDCl3)δ0.7(s，18-H′s)，3.9-4.6(m，1，3-H′s)，4.6-5.0(bs，19-H′s)，5.3-6.3(Abq，6，7-H′s)。制備例23β-三異丙基甲硅烷氧基-17-氧-9，10-斷雄甾-5(E)，7，10(19)-三烯[化合物(I)的1-脫氧-5，6-反式類似物，其中R1+R2＝O，R3＝(i-Pr3Si]將空氣通入保持在0℃下的含有叔丁醇鉀(2.5ml 1M的四氫呋喃溶液)的3β-三異丙基甲硅烷氧基-20-氧-5，6-反式孕鈣化醇[化合物(I)的1-脫氧-5，6-反式類似物，其中R1＝CH3CO，R2＝H，R3＝(i-Pr)3Si](460mg)的叔丁醇溶液(10ml)中。以半小時間隔再加入另幾份丁醇鉀(3×2.5ml 1M的四氫呋喃溶液)，之后停止通氣，將該反應(yīng)混合物用氬氣清洗30分鐘，用乙醚稀釋而得到標(biāo)題化合物(190mg，用色譜法分離的)IR(CDCl3)1610，1720cm-1。
該化合物可以利用如GB-A-2038834中描述的氧化作用和如此得到的1α-羥基化合物的合適的甲硅烷基化作用而轉(zhuǎn)化為制備例1的產(chǎn)物。制備例31α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-17α-氫過氧-20-氧-9，10-斷孕甾-5(E)，7，10(19)-三烯[化合物(I)的5，6-反式類似物，其中R1＝CH3CO，R2＝OOH，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]將空氣通入保持在0℃下的含有叔丁醇鉀(4ml 1M的四氫呋喃溶液)的1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-氧-5，6-反式孕鈣化醇[化合物(I)的5，6-反式類似物，其中R1＝CH3CO，R2＝H，R3＝R4＝(i-Pr)3Si](490mg)的叔丁醇溶液(7.5ml)中。2.5小時后停止通氣，將該反應(yīng)混合物用氬氣清洗20分鐘，用乙醚稀釋并得到標(biāo)題化合物(250mg，用色譜法分離的)IR(CDCl3)3600-3100，1620cm-1。
該化合物可以通過在堿例如堿金屬烷氧化物(如叔丁醇鉀)的存在下加熱而轉(zhuǎn)化為制備例1的產(chǎn)物。實(shí)施例1a)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-17α-羥基-20-氧-9，10-斷孕甾-5(E)，7，10(19)-三烯[化合物(I)的5，6-反式類似物，其中R1＝CH3COR2＝OH，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]將空氣通入保持在-20℃下的含有亞磷酸三乙酯(0.7ml)和叔丁醇鉀(2ml 1M的四氫呋喃溶液)的1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-氧-5，6-反式孕鈣化醇[化合物(I)的5，6-反式類似物，其中R1＝CH3CO，R2＝H，R3＝R4＝(i-Pr)3Si](440mg)在四氫呋喃(2ml)、叔丁醇(0.7ml)和N，N-二甲基甲酰胺(2ml)的混合物中的溶液中。30分鐘后反應(yīng)液用乙醚稀釋而得到標(biāo)題化合物(350mg，用色譜法分離的)UV(Et2O)λmax268，λmin228nm；IR(CDCl3)3620-3300，1690，1615cm-1；NMR(CDCl3)δ0.6(s，18-H′s)，2.22(s，21-H′s)，3.8-4.7(m，1，3-H′s)，4.7-5.0(bs，19-H′s)，5.5-6.5(ABq，6，7-H′s)。
利用在四氫呋喃中的氟化四丁銨將該產(chǎn)物(66mg)脫甲硅基化得到1α，3β，17α-三羥基-20-氧-9，10-斷孕甾-5(E)，7，10(19)-三烯[化合物(I)的5，6-反式類似物，其中R1＝CH3CO，R2＝OH，R3＝R4＝H](28mg)UV(EtOH)λmax270，λmin228nm；IR(CDCl3)3620-3200，1680，1610 cm-1；NMR(CDCl3)δ0.62(s，18-H′s)，2.25(s，21-H′s)，3.8-4.6(m，1，3-H′s)，4.7，5.0(各為s，19-H′s)，5.6-6.7(ABq，6，7-H′s)。b)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-17α-羥基-20-氧-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝CH3CO，R2＝OH，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]通過UV照射(1小時)使在含有吩嗪(36mg)的苯(10ml)中的上述(a)中得到的雙-甲硅烷基醚(60mg)光致異構(gòu)化得到標(biāo)題化合物(50mg，用色譜法分離)UV(Et2O)λmax262，λmin225nm；IR(CDCl3)3620-3340，1695，1630cm-1；NMR(CDCl3)δ0.56(s，18-H′s)，2.23(s，21-H′s)，4.0-4.7(m，1，3-H′s)，4.7，5.4(各為s，19-H′s)，5.8-6.5(ABq，6，7-H′s)。
利用在四氫呋喃中的氟化四丁銨將該產(chǎn)物(50mg)脫甲硅基化得到1α，3β，17α-三羥基-20-氧-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝CH3CO，R2＝OH，R3＝R4＝H](21mg)UV(EtOH)λmax262，λmin226nm；IR(CDCl3)3640-3300，1695，1630cm- 1；NMR(CDCl3)δ0.57(s，18-H′s)，2.18(s，21-H′s)，3.7-4.6(m，1，3-H′s)，4.7，5.3(各為s，19-H′s)，5.8-6.4(ABq，6，7-H′s)。實(shí)施例2a)17α-羥基-20-氧-3β-三異丙基甲硅烷氧基-9，10-斷孕甾-5(E)，7，10(19)-三烯[化合物(I)的1-脫氧-5，6-反式類似物，其中R1＝CH3CO，R2＝OH，R3＝(i-Pr)3Si]將空氣通入保持在-20℃下的含有亞磷酸三乙酯(0.1ml)和叔丁醇鉀(0.75ml 1M的四氫呋喃溶液)的20-氧-3β-三異丙基甲硅烷氧基-5，6-反式孕鈣化醇[化合物(I)的1-脫氧-5，6-反式類似物，其中R1＝CH3CO，R2＝H，R3＝(i-Pr)3Si](130mg)在四氫呋喃(0.75ml)、叔丁醇(0.25ml)和N，N-二甲基甲酰胺(0.75ml)的混合物中的溶液中。1小時后反應(yīng)液用乙醚稀釋而得到標(biāo)題化合物(115mg，用色譜法分離的)UV(Et2O)λmax270，λmin229nm；IR(CDCl3)3620-3300，1690，1615 cm-1；NMR(CDCl3)δ0.6(s，18-H′s)，2.22(s，21-H′s)，3.3-4.1(m，3-H)，4.4，4.9(各為s，19-H′s)，5.5-6.5(ABq，6，7-H′s)。
利用在四氫呋喃中的氟化四丁銨將該產(chǎn)物(40mg)脫甲硅基化得到3β，17α-二羥基-20-氧-9，10-斷孕甾-5(E)，7，10(19)-三烯[化合物(I)的1-脫氧-5，6-反式類似物，其中R1＝CH3CO，R2＝OH，R3＝H](28mg)UV(EtOH)λmax271，λmin229nm；IR(CDCl3)3640-3200，1690，1620cm-1；NMR(CDCl3)δ0.62(s，18-H′s)，2.27(s，21-H′s)，3.4-4.1(m，3-H)，4.5，5.0(各為s，19-H′s)，5.6-6.6(ABq，6，7-H′s)。b)17α-羥基-20-氧-3β-三異丙基甲硅烷氧基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)的1-脫氧類似物，其中R1＝CH3CO，R2＝OH，R3＝(i-Pr)3Si]通過UV照射(1小時)使在含有吩嗪(57mg)的苯(16ml)中的上述(a)中得到的甲硅烷基醚(75mg)光致異構(gòu)化得到標(biāo)題化合物(55mg，用色譜法分離)UV(Et2O)λmax263，λmin226nm；IR(CDCl3)3620-3300，1695，1630cm-1；NMR(CDCl3)δ0.6(s，18-H′s)，2.23(s，21-H′s)，3.5-4.1(m，3-H)，4.5，5.0(各為s，19-H′s)，5.6-6.2(ABq，6，7-H′s)。
利用在四氫呋喃中的氟化四丁銨將該產(chǎn)物(55mg)脫甲硅基化得到3β，17α-二羥基-20-氧-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)的1-脫氧類似物，其中R1＝CH3CO，R2＝OH，R3＝H]UV(EtOH)λmax262，λmin225nm；IR(CDCl3)3640-3200，1695cm-1；NMR(CDCl3)δ0.6(s，18-H′s)，2.23(s，21-H′s)，3.5-4.1(m，3-H)，4.5，5.1(各為s，19-H′s)，5.6-6.2(ABq，6，7-H′s)。
按照該實(shí)施例制得的1-脫氧化合物可以利用如GB-A-2038834中描述的氧化作用轉(zhuǎn)化為本發(fā)明的1α-羥基化合物。實(shí)施例3a)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-17α-乙炔基-17β-羥基-9，10-斷雄甾-5(E)，7，10(19)-三烯[化合物(I)的5，6-反式類似物，其中R1＝OH，R2＝CH≡C，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]將從制備例1得到的1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-17-氧-9，10-斷雄甾-5(E)，7，10(19)-三烯(115mg)和乙炔化鋰乙二胺配合物(184mg)的二噁烷溶液(3ml)在室溫下攪拌4小時。然后該反應(yīng)混合物用冰淬火，用乙醚稀釋而得。用色譜法得到未反應(yīng)的起始物(36mg)和標(biāo)題化合物(35mg)UV(Et2O)λmax268，λmin226nm；IR(CDCl3)3600，3310，1620cm-1；NMR(CDCl3)δ0.7(s，18-H′s)，2.53(s，≡CH)，3.9-4.7(m，1，3-H′s)，4.7-5.1(bs，19-H′s)，5.5-6.5(ABq，6，7-H′s)。b)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-17α-乙炔基-17β-羥基-9，10-斷雄甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝OH，R2＝CH≡C，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]通過UV照射(40分鐘)使上述(a)中得到的產(chǎn)物(50mg)在含有吩嗪(28mg)的苯(8ml)中光致異構(gòu)化得到標(biāo)題化合物(40mg，用色譜法分離)UV(Et2O)λmax259，λmin224nm。c)1α，3β，17β-三羥基-17α-乙炔基-9，10-斷雄甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝OH，R2＝CH≡C，R3＝R4＝H]上述(b)中得到的產(chǎn)物(40mg)通過用在四氫呋喃(0.4ml)中的氟化四丁銨(0.4ml)在室溫下處理3小時而脫甲硅基并用色譜法分離得到標(biāo)題化合物(18mg)UV(Et2O)λmax261，λmin226nm；IR(CDCl3)3600-3320，3300，1630cm-1；NMR(CDCl3)δ0.7(s，18-H′s)，2.53(s，≡CH)，3.9-4.6(m，1，3-H′s)，4.8，5.4(各為s，19-H′s)，5.7-6.5(ABq，6，7-H′s)。實(shí)施例4a)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-17α-乙炔基-17β-甲氧基-9，10-斷雄甾-5(E)，7，10(19)-三烯[化合物(I)的5，6-反式類似物，其中R1＝OCH3，R2＝CH≡C，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]將氫化鉀(200μl 35％在礦物油中的分散體)滴加到從上述實(shí)施例3(a)得到的產(chǎn)物(190mg)的含有18-冠醚-6(75mg)和甲基碘(200μl)的四氫呋喃溶液(4ml)中并保持在-10℃下。40分鐘后該反應(yīng)混合物用冰淬火而得到標(biāo)題化合物(185mg，用色譜法純化的)UV(Et2O)λmax267，λmin227nm；IR(CCl4)3300，1620cm-1；NMR(CCl4)δ0.63(s，18-H′s)，2.43(s，≡CH)，3.3(s，OMe-H′s)，4.0-4.7(m，1，3-H′s)，4.7-5.0(bs，19-H′s)，5.5-6.6(ABq，6，7-H′s)。b)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-17α-乙炔基-17β-甲氧基-9，10-斷雄甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝OCH3，R2＝CH≡C，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]通過UV照射(1.4小時)使上述(a)中得到的產(chǎn)物(185mg)在含有吩嗪(102mg)的苯(28ml)中光致異構(gòu)化得到標(biāo)題化合物(165mg，用色譜法純化)UV(Et2O)λmax260，λmin225nm；IR(CCl4)3300，1630cm-1；NMR(CCl4)δ0.63(s，18-H′s)，2.4(s，≡CH)，3.23(s，OMe-H′s)，4.0-4.7(m，1，3-H′s)，4.7，5.3(各為s，19-H′s)，5.8-6.3(ABq，6，7-H′s)。c)1α，3β-二羥基-17α-乙炔基-17β-甲氧基-9，10-斷雄甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝OCH3，R2＝CH≡C，R3＝R4＝H]上述(b)中得到的產(chǎn)物(165mg)通過用在四氫呋喃(1.5ml)中的氟化四丁銨(1.5ml)在室溫下處理3小時而脫甲硅基并用色譜法分離得到標(biāo)題化合物(70mg)UV(Et2O)λmax261，λmin225nm；IR(CDCl3)3620-3200，3290，1620cm-1；NMR(CDCl3)δ0.7(s，18-H′s)，2.27(s，≡CH)，3.35(s，OMe-H′s)，3.7-4.7(m，1，3-H′s)，4.8，5.4(各為s，19-H′s)，5.7-6.5(ABq，6，7-H′s)。實(shí)施例5a)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-乙炔基-20-羥基-9，10-斷孕甾-5(E)，7，10(19)-三烯[化合物(I)的5，6-反式類似物，其中R1＝CH3C(OH)(C≡CH)，R2＝H，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]將1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-氧-5，6-反式孕鈣化醇[化合物(I)的5，6-反式類似物，其中R1＝CH3CO，R2＝H，R3＝R4＝(i-Pr)3Si](321mg)和乙炔化鋰乙二胺復(fù)合物(230mg)的二噁烷溶液(10ml)在室溫下攪拌1小時。然后該反應(yīng)混合物用冰淬火，用乙醚稀釋而得。用色譜法得到未反應(yīng)的起始物(50mg)和標(biāo)題化合物(245mg)UV(Et2O)λmax268，λmin229nm；IR(CDCl3)3580，3300，1615cm-1；NMR(CDCl3)δ0.8(s，18-H′s)，2.33(s，≡CH)，3.8-4.7(m，1，3-H′s)，4.7-5.0(bs，19-H′s)，5.4-6.4(ABq，6，7-H′s)。b)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-乙炔基-20-羥基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝CH3C(OH)(C≡CH)，R2＝H，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]通過UV照射(1.75小時)使上述(a)中得到的產(chǎn)物(120mg)在含有吩嗪(65mg)的苯(18ml)中光致異構(gòu)化得到標(biāo)題化合物(100mg，用色譜法純化)UV(Et2O)λmax263，λmin229nm；IR(CDCl3)3600，3300，1610cm-1；NMR(CDCl3)δ0.8(s，18-H′s)，3.9-4.6(m，1，3-H′s)，4.6，5.3(各為s，19-H′s)，5.8-6.3(ABq，6，7-H′s)。c)20-乙炔基-1α，3β，20-三羥基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝CH3C(OH)(C≡CH)，R2＝R3＝R4＝H]上述(b)中得到的產(chǎn)物(100mg)通過用在四氫呋喃(1ml)中的氟化四丁銨(1ml)在室溫下處理4小時而脫甲硅基得到標(biāo)題化合物(40mg，用色譜法分離)UV(EtOH)λmax262，λmin225nm；IR(CDCl3)3620-3320，3300，1600cm-1；NMR(CDCl3)δ0.83(s，18-H′s)，1.47(s，21-H′s)，2.56(s，≡CH)，3.9-4.8(m，1，3-H′s)，4.8，5.4(各為s，19-H′s)，5.8-6.6(ABq，6，7-H′s)。實(shí)施例6a)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-乙炔基-20-甲氧基-9，10-斷孕甾-5(E)，7，10(19)-三烯[化合物(I)的5，6-反式類似物，其中R1＝CH3C(OCH3)(C≡CH)，R2＝H，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]將氫化鉀(100μl35％在礦物油中的分散體)滴加到從上述實(shí)施例5(a)得到的產(chǎn)物(120mg)的含有18-冠醚-6(50mg)和甲基碘(100μl)的四氫呋喃溶液(3ml)中并保持在-10℃下。40分鐘后該反應(yīng)混合物用冰淬火而得到標(biāo)題化合物(120mg，用色譜法純化的)UV(Et2O)λmax268，λmin228nm；IR(CDCl3)3280，1615cm-1；NMR(CDCl3)δ0.78(s，18-H′s)，1.37(s，21-H′s)，2.45(s，≡CH)，3.3(s，OMe-H′s)，4.0-4.8(m，1，3-H′s)，4.8-5.1(bs，19-H′s)，5.5-6.6(ABq，6，7-H′s)。b)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-乙炔基-20-甲氧基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝CH3C(OCH3)(C≡CH)，R2＝H，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]通過UV照射(2小時)使上述(a)中得到的產(chǎn)物(120mg)在含有吩嗪(65mg)的苯(18ml)中光致異構(gòu)化得到標(biāo)題化合物(100mg，用色譜法純化)UV(Et2O)λmax262，λmin227nm；IR(CDCl3)3300，1630cm-1；NMR(CDCl3)δ0.73(s，18-H′s)，1.37(s，21-H′s)，2.43(s，≡CH)，3.27(s，OMe-H′s)，3.9-4.6(m，1，3-H′s)，4.6，5.3(各為s，19-H′s)，5.8-6.3(ABq，6，7-H′s)。c)1α，3β-二羥基-20-乙炔基-20-甲氧基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝CH3C(OCH3)(C≡CH)，R2＝R3＝R4＝H]上述(b)中得到的產(chǎn)物(100mg)通過用在四氫呋喃(0.9ml)中的氟化四丁銨(0.9ml)在室溫下處理3小時而脫甲硅基得到標(biāo)題化合物(48mg，用色譜法分離)UV(EtOH)λmax262，λmin225nm；IR(CDCl3)3620-3320，3300，1630cm-1；NMR(CDCl3)δ0.73(s，18-H′s)，1.38(s，21-H′s)，2.63(s，≡CH)，3.27(s，OMe-H′s)，3.8-4.6(m，1，3-H′s)，4.7，5.4(各為s，19-H′s)，5.6-6.6(ABq，6，7-H′s)。實(shí)施例7a)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-丙炔基-20-三甲基甲硅烷氧基-9，10-斷孕甾-5(E)，7，10(19)-三烯[化合物(I)的5，6-反式類似物，其中R1＝CH3C(OSiMe3)(C≡CCH3)，R2＝H，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-氧-5，6-反式孕鈣化醇[化合物(I)的5，6-反式類似物，其中R1＝CH3CO，R2＝H，R3＝R4＝(i-Pr)3Si](525mg)和1-三甲基甲硅烷基丙炔(242mg)的四氫呋喃溶液(2ml)在-15℃下用氟化四丁銨(50mg，在95℃干燥并＜0.5mm 6小時)的四氫呋喃液(1ml)處理，在0℃下攪拌1小時，然后再用1-三甲基甲硅烷基丙炔(242mg)和氟化四丁銨(50mg，如上干燥)的四氫呋喃液(1ml)處理并加熱至室溫。1小時后加入乙醚而得到反應(yīng)混合物。用硅膠色譜法分離，用10％甲苯的己烷液洗脫得到標(biāo)題化合物(225mg)UV(Et2O)λmax268，λmin228nm；IR(CCl4)1620cm-1；NMR(CCl4)δ0.13(s，SiMe3-H′s)，0.7(s，18-H′s)，1.33(s，21-H′s)，1.76(s，≡CCH3)，3.8-4.7(m，1，3-H′s)，4.7-5.4(bs，19-H′s)，5.4-6.5(ABq，6，7-H′s)。
繼續(xù)用1％乙酸乙酯的已烷液洗脫得到某物質(zhì)(265mg)，確認(rèn)其為標(biāo)題化合物的類似物，其中環(huán)A的三異丙基甲硅烷基被三甲基甲硅烷基代替UV(Et2O)λmax270，λmin229nm；IR(CCl4)1615cm-1；NMR(CCl4)δ0.13(s，SiMe3-H′s)，0.7(s，18-H′s)，1.33(s，21-H′s)，1.73(s，≡CCH3)，3.8-4.6(m，1，3-H′s)，4.6-5.0(d，19-H′s)，5.4-6.4(ABq，6，7-H′s)。b)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-丙炔基-20-三甲基甲硅烷氧基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝CH3C(OSiMe3)(C≡CCH3)，R2＝H，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]通過UV照射(1.5小時－該溶液裝在兩個燒瓶中進(jìn)行照射)使上述(a)中得到的標(biāo)題化合物(225mg)在含有吩嗪(108mg)的苯(30ml)中光致異構(gòu)化得到標(biāo)題化合物(200mg，用色譜法純化)UV(Et2O)λmax262，λmin226nm；IR(CCl4)1630cm-1；NMR(CCl4)δ0.13(s，SiMe3-H′s)，0.63(s，18-H′s)，1.33(s，21-H′s)，1.76(s，≡CCH3)，3.8-4.6(m，1，3-H′s)，4.6，5.3(各為s，19-H′s)，5.6-6.3(ABq，6，7-H′s)。c)1α，3β，20-三羥基-20-丙炔基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝CH3C(OH)(C≡CCH3)，R2＝R3＝R4＝H]
上述(b)中得到的產(chǎn)物(200mg)通過用在四氫呋喃(2.6ml)中的氟化四丁銨(2.6ml)在室溫下處理3小時而脫甲硅基并用色譜法分離得到標(biāo)題化合物(90mg)UV(EtOH)λmax263，λmin225nm；IR(CDCl3)3660-3100，1620cm-1；NMR(CDCl3)δ0.8(s，18-H′s)，1.43(s，21-H′s)，1.76(s，≡CCH3)，3.8-4.7(m，1，3-H′s)，4.8，5.4(各為s，19-H′s)，5.7-6.5(ABq，6，7-H′s)。實(shí)施例8a)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-17α-(3-三異丙基甲硅烷氧基丙炔-1-基)-17β-三甲基甲硅烷氧基-9，10-斷雄甾-5(E)，7，10(19)-三烯[化合物(I)的5，6-反式類似物，其中R1＝OSiMe3，R2＝-C≡C-CH2OSi(i-Pr)3，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]按照實(shí)施例7(a)的方法，用1-三甲基甲硅烷基-3-三異丙基甲硅烷氧基丙炔(340mg)處理從制備例1得到的1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-17-氧-9，10-斷雄甾-5(E)，7，10(19)-三烯(350mg)的含有干燥氟化四丁銨(50mg)的四氫呋喃溶液(1ml)，得到標(biāo)題化合物(260mg，用柱色譜法分離)UV(Et2O)λmax268，λmin227nm；IR(CDCl3)1620cm-1；NMR(CDCl3)δ0.13(s，SiMe3-H′s)，0.6(s，18-H′s)，3.8-4.6(m，1，3-H′s，≡C-CH2O-)，4.6-5.0(bs，19-H′s)，5.3-6.3(ABq，6，7-H′s)。b)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-17α-(3-三異丙基甲硅烷氧基丙炔-1-基)-17β-三甲基甲硅烷氧基-9，10-斷雄甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝OSiMe3，R2＝-C≡C-CH2OSi(i-Pr)3，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]按照實(shí)施例7(b)的方法，將上述(a)中得到的化合物(120mg)在含有吩嗪(47mg)的苯中光致異構(gòu)化得到標(biāo)題化合物(85mg，用色譜法純化)UV(Et2O)λmax261，λmin224nm；IR(CDCl3)1620 cm- 1；NMR(CDCl3)δ0.13(s，SiMe3-H′s)，0.57(s，18-H′s)，3.9-4.6(m，1，3-H′s，≡C-CH2O-)，4.6-5.3(2xbs，19-H′s)，5.5-6.3(ABq，6，7-H′s)。c)1α，3β，17β-三羥基-17α-(3-羥基丙炔-1-基)-9，10-斷雄甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝OH，R2＝-C≡C-CH2OH，R3＝R4＝H]通過實(shí)施例7(c)的方法，用氟化四丁銨(1.2ml)的四氫呋喃液(1.2ml)將上述(b)中得到的化合物(85mg)的四氫呋喃液(1.2ml)脫甲硅基得到標(biāo)題化合物(21mg，用制備型薄層層析法分離)UV(EtOH)λmax262，λmin225nm；NMR(CD3OD)δ0.63(s，18-H′s)，3.3-4.4(m，1，3-H′s，≡C-CH2O-)，4.4-5.4(2xbs，19-H′s)，5.7-6.4(ABq，6，7-H′s)。實(shí)施例9a)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-(3-三異丙基甲硅烷氧基丙炔-1-基)-20-三甲基甲硅烷氧基-9，10-斷孕甾-5(E)，7，10(19)-三烯[化合物(I)的5，6-反式類似物，其中R1＝-C(OSiMe3)(C≡C.CH2OSi(i-Pr)3)CH3，R2＝H，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]按照實(shí)施例7(a)的方法，用干燥的氟化四丁銨(100mg)和1-三甲基甲硅烷基-3-三異丙基甲硅烷氧基丙炔(2份，575mg和256mg)處理1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-氧-5，6-反式孕鈣化醇(575mg)的四氫呋喃溶液(3ml)，得到標(biāo)題化合物(315mg，用柱色譜法分離)IR(CDCl3)1610cm-1；NMR(CDCl3)δ0.73(s，18-H′s)，1.4(s，21-H′s)，3.9-4.7(m，1，3-H′s，≡C-CH2O-)，4.7-5.4(bs，19-H′s)，5.3-6.6(ABq，6，7-H′s)。b)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-(3-三異丙基甲硅烷氧基丙炔-1-基)-20-三甲基甲硅烷氧基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝-C(OSiMe3)(C≡C.CH2OSi(i-Pr)3)CH3，R2＝H，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]按照實(shí)施例7(b)的方法，將上述(a)中得到的化合物(315mg)在含有吩嗪(122mg)的苯(17ml)中光致異構(gòu)化得到標(biāo)題化合物(225mg，用色譜法分離)UVλmax261，λmin225nm；IR(CDCl3)1620cm-1；NMR(CDCl3)δ0.17(s，SiMe3-H′s)，0.7(s，18-H′s)，3.8-4.5(m，1，3-H′s，≡C-CH2O-)，4.5-5.3(2xbs，19-H′s)，5.5-6.4(ABq，6，7-H′s)。c)1α，3β，20-三羥基-20-(3-羥基丙炔-1-基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝-C(OH)(C≡C.CH2OH)CH3，R2＝R3＝R4＝H]按照實(shí)施例7(c)的方法，用氟化四丁銨(2.9ml)的四氫呋喃液(2.9ml)將上述(b)中得到的化合物(225mg)的四氫呋喃液(2.9ml)脫甲硅基得到標(biāo)題化合物(45mg，用色譜法分離)UV(EtOH)λmax261，λmin225nm；NMR(CDCl3，CD3OD)δ0.73(s，18-H′s)，1.4(s，21-H′s)，3.7-4.5(m，1，3-H′s，≡C-CH2O-)，4.6-5.3(2xbs，19-H′s)，5.5-6.4(ABq，6，7-H′s)。實(shí)施例10a)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-丙炔基-20-羥基-9，10-斷孕甾-5(E)，7，10(19)-三烯[化合物(I)的5，6-反式類似物，其中R1＝-C(OH)(CH2.C≡CH)CH3，R2＝H，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]將1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-氧-5，6-反式孕鈣化醇(445mg)的四氫呋喃溶液(12ml)在室溫下滴加到“炔丙基鋁”的溶液〔通過將炔丙基溴(769mg，80％w/w的甲苯溶液)的醚溶液(5ml)加入到鋁粉(93mg)和氯化汞的醚液(1ml)的混合物中，然后在回流下加熱5小時而制得〕。將該反應(yīng)混合物在室溫下儲存30分鐘，用乙醚稀釋，用濕硫酸鈉處理并過濾，之后將濾液真空濃縮。得到產(chǎn)物(100mg，在冷凍箱中儲存4周后用色譜法分離)UV(Et2O)λmax271，λmin228nm；IR(CDCl3)3700-3300，3280，1610cm-1；NMR(CDCl3)δ0.66(s，18-H′s)，3.8-4.5(m，1，3-H′s)，4.5-4.8(bs，19-H′s)，5.2-6.3(ABq，6，7-H′s)。b)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-炔丙基-20-羥基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝-C(OH)(CH2.C≡CH)CH3，R2＝H，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]按照實(shí)施例7(b)的方法，將上述(a)中得到的化合物(100mg)在含有吩嗪(53mg)的苯(7ml)中光致異構(gòu)化得到標(biāo)題化合物(60mg，用色譜法分離)UV(Et2O)λmax262，λmin225nm；IR(CDCl3)3660-3200，3300，1600cm-1；NMR(CDCl3)δ0.6(s，18-H′s)，1.36(21-H′s)，3.8-4.6(m，1，3-H′s)，4.6-5.3(2xbs，19-H′s)，5.5-6.4(ABq，6，7-H′s)。c)1α，3β，20-三羥基-20-炔丙基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝-C(OH)(CH2.C≡CH)CH3，R2＝R3＝R4＝H]按照實(shí)施例7(a)的方法，用氟化四丁銨(0.6ml)的四氫呋喃液(0.6ml)將上述(b)中得到的化合物(60mg)的四氫呋喃液(0.6ml)脫甲硅基得到標(biāo)題化合物(45mg，用色譜法分離)UV(EtOH)λmax263，λmin225nm；IR(CDCl3)3640-3200，3300，1620cm- 1；NMR(CDCl3)δ0.66(s，18-H′s)，1.33(21-H′s)，3.6-4.4(m，1，3-H′s)，4.6-5.2(2xbs，19-H′s)，5.5-6.4(ABq，6，7-H′s)。實(shí)施例11a)1β，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-丙炔基-20-三甲基甲硅烷氧基-9，10-斷孕甾-5(E)，7，10(19)-三烯[化合物(I)的5，6-反式類似物，其中R1＝-C(OSiMe3)(C≡C.CH3)CH3，R2＝H，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]按照實(shí)施例7(a)的方法，將1β，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-氧-5，6-反式孕鈣化醇(419mg)和1-(三甲基甲硅烷基)-丙炔(145mg)的四氫呋喃溶液(2ml)在0℃下用干燥的氟化四丁銨(2×50mg)的四氫呋喃液(2×1ml)處理兩次得到標(biāo)題化合物(135mg，用色譜法分離)UV(Et2O)λmax265，λmin227nm；IR(CCl4)1620cm-1；NMR(CCl4)δ0.13(s，SiMe3-H′s)，0.73(s，18-H′s)，1.36(s，21-H′s)，1.76(s，≡C-CH3)，3.3-4.4(m，1，3-H′s)，4.7-5.2(bs，19-H′s)，5.4-6.5(ABq，6，7-H′s)?！苍锈}化醇起始物是按照Claverly等人的方法(WO 90/09991)從1β，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基維生素D2制備的，或者是通過GB-A-2038834的方法將20-氧-3β-三異丙基甲硅烷氧基-5，6-反式孕鈣化醇1-羥基化得到的次要的1β-OH產(chǎn)物甲硅烷基化而制得。1β，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基維生素D2自身是通過用GB-A-2038834的方法將維生素D21-羥基化得到的次要的1β-OH產(chǎn)物分離并甲硅烷基化而制得的。〕b)1β，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-丙炔基-20-三甲基甲硅烷氧基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝-C(OSiMe3)(C≡C.CH3)CH3，R2＝H，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]按照實(shí)施例7(b)的方法，將上述(a)中得到的化合物(135mg)在含有吩嗪(65mg)的苯(18ml)中光致異構(gòu)化得到標(biāo)題化合物(130mg，用色譜法純化)UV(Et2O)λmax257，λmin225nm；NMR(CCl4)δ0.13(s，SiMe3-H′s)，0.7(s，18-H′s)，1.36(s，21-H′s)，1.76(s，≡C-CH3)，3.4-4.3(m，1，3-H′s)，4.6，5.5(各為bs，19-H′s)，5.5-6.3(ABq，6，7-H′s)。c)1β，3β，20-三羥基-20-丙炔基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝-C(OH)(C≡C.CH3)CH3，R2＝R3＝R4＝H]
按照實(shí)施例7(c)的方法，用氟化四丁銨(1.8ml)的四氫呋喃液(1.8ml)將上述(b)中得到的甲硅烷基醚(130mg)脫甲硅基得到標(biāo)題化合物(60mg，用色譜法分離)UV(EtOH)λmax261，λmin224nm；IR(CDCl3)3660-3100，1620cm-1；NMR(CDCl3)δ0.77(s，18-H′s)，1.4(s，21-H′s)，1.77(s，≡C-CH3)，3.4-4.5(m，1，3-H′s)，4.8，5.3(各為bs，19-H′s)，5.7-6.6(ABq，6，7-H′s)。實(shí)施例12a)1β，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-乙炔基-20-羥基-9，10-斷孕甾-5(E)，7，10(19)-三烯[化合物(I)的5，6-反式類似物，其中R1＝-C(OH)(C≡CH)CH3，R2＝H，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]1β，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-氧-5，6-反式孕鈣化醇(420mg)和乙炔化鋰乙二胺復(fù)合物(598mg)的二噁烷溶液(7ml)按照實(shí)施例5(a)的方法進(jìn)行處理得到標(biāo)題化合物(210mg，用色譜法分離)UV(Et2O)λmax266，λmin227nm；IR(CCl4)3600-3200，3000，1615cm-1；NMR(CCl4)δ0.77(s，18-H′s)，1.4(s，21-H′s)，2.26(s，≡CH)，3.3-4.2(m，1，3-H′s)，4.6-5.1(bs，19-H′s)，5.4-6.4(ABq，6，7-H′s)。b)1β，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-乙炔基-20-羥基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝-C(OH)(C≡CH)CH3，R2＝H，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]按照實(shí)施例7(b)的方法，通過照射(2.5小時)將上述(a)中得到的乙炔化合物(170mg)在含有吩嗪(92mg)的苯(26ml)中光致異構(gòu)化得到標(biāo)題化合物(150mg，用色譜法純化)UV(Et2O)λmax257，λmin224nm；IR(CCl4)3620-3200，3300，1630cm-1；NMR(CCl4)δ0.77(s，18-H′s)，1.43(s，21-H′s)，2.3(s，≡C-H)，3.4-4.2(m，1，3-H′s)，4.6，5.1(各為bs，19-H′s)，5.6-6.2(ABq，6，7-H′s)。c)20-乙炔基-1β，3β，20-三羥基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝-C(OH)(C≡CH)CH3，R2＝R3＝R4＝H]按照實(shí)施例7(c)的方法利用氟化四丁銨(1.5ml)將上述(b)中得到的甲硅烷基醚(150mg)脫甲硅基得到標(biāo)題化合物(68mg，用色譜法分離)UV(EtOH)λmax260，λmin224nm；IR(CDCl3)3660-3100，3280，1620cm-1；NMR(CDCl3)δ 0.8(s，18-H′s)，1.48(s，21-H′s)，2.47(s，≡C-H)，3.7-4.5(m，1，3-H′s)，4.7，5.3(各為bs，19-H′s)，5.7-6.3(ABq，6，7-H′s)。實(shí)施例13a)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-氧-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝CH3.CO-，R2＝H，R3＝R4＝(i-Pr)3Si]用實(shí)施例7(b)的方法，將按照Claverly等人(WO 90/09991)制得的化合物1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-氧-9，10-斷孕甾-5(E)，7，10(19)-三烯(170mg)在含有吩嗪(89mg)的苯(27ml)中光致異構(gòu)化得到標(biāo)題化合物(130mg，用色譜法分離)UV(Et2O)λmax261，λmin226nm；IR(CDCl3)1690，1620cm-1；NMR(CDCl3)δ0.46(s，18-H′s)，2.03(21-H′s)，3.7-4.6(m，1，3-H′s)，4.6-5.2(2xbs，19-H′s)，5.5-6.4(ABq，6，7-H′s)。b)1α，3β-二羥基-20-氧-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯[化合物(I)，其中R1＝CH3.CO-，R2＝R3＝R4＝H]按照實(shí)施例7(c)的方法，用氟化四丁銨(1.2ml)的四氫呋喃液(1.2ml)將上述(a)中得到的化合物(130mg)的四氫呋喃液(1.2ml)脫甲硅基得到標(biāo)題化合物(53mg，用色譜法分離)UV(EtOH)λmax263，λmin226nm；IR(CDCl3)3660-3200，3300，1700，1640cm-1；NMR(CDCl3)δ0.5(s，18-H′s)，2.07(21-H′s)，3.7-4.4(m，1，3-H′s)，4.7-5.4(2xbs，19-H′s)，5.6-6.6(ABq，6，7-H′s)。
權(quán)利要求
1.通式(I)化合物
及其相應(yīng)的5，6-反式異構(gòu)體，其中R1代表羥基，被護(hù)羥基或低級烷氧基，R2代表任意被羥基、被護(hù)羥基或低級烷氧基取代的低級炔基；或者R1代表基團(tuán)-C(RA)(RB)CH3其中RA是任意被羥基、被護(hù)羥基或低級烷氧基取代的低級炔基，RB是羥基，被護(hù)羥基或低級烷氧基，或者RA和RB一起代表氧基，R2代表氫原子或羥基，被護(hù)羥基或低級烷氧基；R3和R4各自獨(dú)立地選自氫原子和O-保護(hù)基；但條件是當(dāng)R1代表基團(tuán)-C(RA)(RB)CH3其中RA和RB一起代表氧基且基團(tuán)-OR4為α構(gòu)型時，R2不為氫。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中R1代表羥基，三(低級烷基)甲硅烷氧基或甲氧基，R2代表任意被羥基，三(低級烷基)甲硅烷氧基或甲氧基取代的低級炔基；或者R1代表基團(tuán)-C(RA)(RB)CH3其中RA是任意被羥基、三(低級烷基)甲硅烷氧基或甲氧基取代的低級炔基，RB是羥基，三(低級烷基)甲硅烷氧基或甲氧基，或者RA和RB一起代表氧基，R2代表氫原子或羥基，三(低級烷基)甲硅烷氧基或甲氧基。
3.如權(quán)利要求1或2所述的化合物，其中R2或RA代表低級鏈-1-炔-1-基，基團(tuán)-OR4為α-構(gòu)型。
4.化合物1α，3β，17α-三羥基-20-氧-9，10-斷孕甾-5(E)，7，10(19)-三烯；1α，3β，17α-三羥基-20-氧-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯；1α，3β，17β-三羥基-17α-乙炔基-9，10-斷雄甾-5(Z)，7，10(19)-三烯；1α，3β-二羥基-17α-乙炔基-17β-甲氧基-9，10-斷雄甾-5(Z)，7，10(19)-三烯；20-乙炔基-1α，3β，20-三羥基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯；1α，3β-二羥基-20-乙炔基-20-甲氧基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯；和1α，3β，20-三羥基-20-丙炔基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯。
5.化合物1α，3β，17β-三羥基-17α-(3-羥基丙炔-1-基)-9，10-斷雄甾-5(Z)，7，10(19)-三烯；1α，33β，20-三羥基-20-(3-羥基丙炔-1-基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯；1α，33β，20-三羥基-20-炔丙基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯；1β，3β，20-三羥基-20-丙炔基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯；和20-乙炔基-1β，3β，20-三羥基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7，10(19)-三烯。
6.如上述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所定義的通式(I)活性化合物及其5，6-反式異構(gòu)體，包括不受權(quán)利要求1中條件限制的通式(I)活性化合物，它們用作抗腫瘤、抗生育、抗增殖、免疫抑制和/或抗炎劑。
7.如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所定義的通式(I)活性化合物或其5，6-反式異構(gòu)體，包括不受權(quán)利要求1中條件限制的通式(I)活性化合物，它們在用作抗腫瘤、抗生育、抗增殖、免疫抑制和/或抗炎劑的藥劑的制備中的應(yīng)用。
8.藥物組合物，其包含與一種或多種生理學(xué)上可接受的載體和/或賦形劑混合的如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所定義的通式(I)活性化合物或其5，6-反式異構(gòu)體，包括不受權(quán)利要求1中條件限制的通式(I)活性化合物。
9.促進(jìn)治療或預(yù)防性的抗腫瘤、抗生育、抗增殖、免疫抑制和/或抗炎作用的人或動物的治療方法，它包含給予所述對象有效量的如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所定義的通式(I)活性化合物或其5，6-反式異構(gòu)體，包括不受權(quán)利要求1中條件限制的通式(I)活性化合物。
10.如權(quán)利要求1中定義的通式(I)化合物的制備方法，它包含一個或多個步驟A)將相應(yīng)的5，6-反式異構(gòu)體異構(gòu)化；B)將通式(I)化合物或其5，6-反式異構(gòu)體或相應(yīng)的1-脫氧化合物其中R1代表基團(tuán)-C(RA)(RB)CH3而RA和RB一起代表氧基、R2代表氫原子，氧化得到其中R2代表羥基的化合物，若需要可接著在1-位羥基化；C)其中R1和R2一起或者RA和RB一起代表氧基的通式(I)化合物或其5，6-反式異構(gòu)體與低級炔基陰離子反應(yīng)得到其中R1或RA為低級炔基而R2或RB為羥基的化合物；和D)其中R1、R2或RB代表羥基的通式(I)化合物或其5，6-反式異構(gòu)體與烷基化劑反應(yīng)得到其中R1、R2或RB代表低級烷基的化合物；如果需要和/或希望可接著去除任何保護(hù)基。
11.如權(quán)利要求10所述的方法，其中在步驟(B)中通式(I)化合物或其5，6-反式異構(gòu)體或相應(yīng)的1-脫氧化合物其中R1代表基團(tuán)-C(RA)(RB)CH3而RA和，一起代表氧基、R2代表氫原子，是在強(qiáng)堿和磷化氫或亞磷酸酯存在下空氣氧化得到其中R2代表羥基的化合物的。
12.如權(quán)利要求10所述的方法，其中步驟(C)使用其中R1和R2一起代表氧基的通式(I)或其5，6-反式異構(gòu)體為起始物，該起始物是通過在強(qiáng)堿存在下空氣氧化相應(yīng)的20-氧膽鈣化醇或其O-被護(hù)衍生物或其1-脫氧類似物而制得的，需要時可接著在1-位羥基化。
13.其中R1和R2一起代表氧基而R3和R4各自獨(dú)立地選自氫原子和O-保護(hù)基的通式(I)化合物及其5，6-反式異構(gòu)體的制備方法，它包含在強(qiáng)堿存在下空氣氧化相應(yīng)的20-氧膽鈣化醇或其O-被護(hù)衍生物或其1-脫氧類似物，需要時可接著在1-位羥基化。
14.通式(I)化合物及其5，6-反式異構(gòu)體，其中R1和R2一起代表氧基而R3和R4各自獨(dú)立地選自氫原子和O-保護(hù)基。
全文摘要
式(Ⅰ)的1－羥基孕鈣化醇衍生物及其相應(yīng)的5,6－反式異構(gòu)體,其中R
文檔編號A61K31/59GK1209120SQ9618003
公開日1999年2月24日 申請日期1996年12月23日 優(yōu)先權(quán)日1995年12月21日
發(fā)明者R·H·赫斯, M·M·皮切特, S·K·S·塞蒂 申請人:醫(yī)學(xué)與化學(xué)研究所