專利名稱：含異甘草素的抗心律失常藥的制作方法
技術領域：
本發明涉及異黃酮類化合物的抗心律失常藥物。
《傷寒論》中指出“脈結代，心動悸，灸甘草湯主之。”臨床上也有不少重用甘草治療心律失常的報道[常章富等，《北京中醫學院學報》1989，12(2)，30-31；李留良等，《浙江中醫雜志》1993(9)，388-389]但甘草治療心律失常因三萜皂甙的激素樣副作用而不能長期用藥，且不同質量的甘草的療效差異較大。
本發明的目的是提供一種具有強抗心律失常活性，又無激素樣副作用的抗心律失常藥物。
本發明的技術解決方案是根據發明人的研究，異甘草素具有很強的抗心率失常活性，又無激素樣副作用是一種很好的抗心律失常藥物。
異甘草素具有如下分子結構
其為黃色針晶，mp198-199℃；EI-MS256[m+]，255，163，150，129，107；UVλmaxn m234(sh)，258(sh)，300(sh)，366；1HNMR(DMSO-d6)δ6.24(1H，d，3Hz)，6.38(1H，dd，9，3Hz)，6.82(2H，d，9Hz)，7.62(1H，d，14Hz)，7.72(2H，d，9Hz)，7.80(1H，d，14Hz)，8.12(1H，d，9Hz)，13.58(1H，S)。
異甘草素可以從甘草中提取分離得到
異甘草素粗品經重結晶后得黃色針晶，mp.198-199℃，經測定為異甘草素異甘草素也可由2，4-二羥基苯乙酮和對羥基苯甲醛縮合制得(徐任生等，《化學學報》1979，37(4)，289-295)異甘草素易得，可以制成含異甘草素的抗心律失常藥。
可以制成含異甘草素的抗心律失常藥靜脈注射液。
其制法是將異甘草素用堿溶液溶解，再用酸溶液調PH至8±0.3，加生理鹽水到所需濃度，灌裝，滅菌。
可按常規方法將異甘草素配輔料淀粉、糊精等混合制成含異甘草素的抗心律失常藥口服片劑，膠囊劑。
可按常規方法將異甘草素與輔料淀粉、糖、碳酸鈉混合制粒制成抗心律失常藥沖劑。
可將異甘草素用堿液溶解，再用酸液調PH至8±0.3，加糖及水到所需濃度，灌裝，滅菌制成抗心律失常藥口服液。
注射劑劑量30mg/次，1-2次/日或加入葡萄糖溶液中靜脈滴注。口服劑劑量25-50mg/次，3次/日。
根據藥理實驗結果，異甘草素能明顯減少烏頭堿誘發的大鼠心律失常持續時間，明顯減少氯仿誘發的小鼠室顫率，明顯增加出現VP、VT、VF和CA所用哇巴因劑量，明顯減少氯化鋇誘發的大鼠心律失常持續時間，明顯減少氯化鈣-乙酰膽堿混合液誘發的小鼠房顫率。
異甘草素的急性試驗1.最大口服耐受量(MTD)測定給藥方法和劑量取健康ICA小鼠20只，雌雄各半，禁食16小時后灌胃給藥。每鼠1次給藥量為異甘草素溶液0.8ml/20g(溶液濃度1.5％)，隔6小時1次，1日內連續3次，(相當于異甘草素1800mg/kg/d)。
20只小鼠在給藥后連續觀察7天，未見動物死亡。
結論上述試驗結果說明給小鼠灌服異甘草素溶液，其1日最大耐受量大于2.4ml/20g/d(相當于異甘草素1800mg/kg/d)。
該受試藥物給藥量為2.4ml/20g/d，已達最大容量；溶液濃度1.5％已不能再進一步濃縮，已達最大濃度，本實驗無法再加大給藥劑量。
2.靜脈給藥急性毒性試驗測定半數致死量(LD50)采用序貫法。將1.5％異甘草素溶液做比值為1∶0.7等比稀釋，各鼠尾iV給藥，容積均為0.2ml/10g體重，，記錄以“△”表示存活，“×”表示死亡，第1次變號的前1次作為實驗開始。在×、△中以總值較少者為陽性數(a)，以第1次出現陽性的劑量為中心組(Xo)，組序(d)按陽性增多的方向遞增，反方向則遞減。計算∑a、∑ad、∑ad2作為N、A、B，代入下列公式計算LD50＝Log-1[Xo-i(--0.5)]LD50的95％平均可信限L9595＝LD50±4.5LD50×Sm實驗結果LD50＝182.8±27.0mg/kg(95％平均可信限)。
小鼠iV異甘草素，其半數致死量(LD50)182.8±27.0mg/kg(95％平均可信限)。
本發明的含異甘草素的抗心律失常藥物，有良好的抗心律失常作用，它能取代甘草的抗心律失常藥用，且解決了甘草因激素樣副作用而不能長期用藥的問題。異甘草素急性毒性低，作用穩定可靠，是一種安全度高的治療及預防心律失常的藥物，可以靜脈注射，也可以口服。
實施例1.
異甘草素抗氯仿誘發小鼠心律失常取體重32-36g，健康ICR小鼠，雌雄各半，隨機分為8組，各組分別iv(靜脈注射)或PO(口服)異甘草素和iv利多卡因及等容積生理鹽水，給藥容積均為20ml/kg。iv給藥5分鐘或PO(口服)30分鐘后，將各鼠分別置于400ml倒扣燒杯中，燒杯內放一棉球，先在其上注入5ml氯仿，(每換1鼠加0.5ml氯仿)，待小鼠呼吸停止后立即取出，剖胸檢查心室纖顫陽性率并作統計學處理。結果見表1
表1異甘草素對氯仿誘發小鼠室顫的影響(X±SD)藥物劑量(mg/kg) 給藥途徑 動物數 室顫率 P值生理鹽水--iv20 18/20 --利多卡因15iv10 3/10 ＜0.01異甘草素16PO10 5/10 ＜0.05異甘草素8 PO10 8/10 ＞0.05異甘草素16iv10 2/10 ＜0.001異甘草素8 iv10 5/10 ＜0.05P值與生理鹽水組比較表1結果表明異甘草素靜脈給藥對氯仿誘發的小鼠室顫能明顯減少室顫率，經統計學處理呈顯著性差異，表明異甘草素有抗氯仿誘發小鼠室顫的作用。
實施例2.
異甘草素對烏頭堿誘發大鼠心率失常的治療作用取體重335±25g，SD大鼠，雌雄各半，隨機分為6組，ip烏拉坦1g/kg麻醉后背位固定，聯接LMS-2B型二道生理記錄儀(成都儀器廠產)和SR-071型雙蹤示波器(江蘇揚中電子儀器廠產)，記錄II導聯心電圖。股靜脈插管，iv烏頭堿(E.Marck產品)25ug/kg，待心律失常出現且穩定10分鐘后，各組分別iv異甘草素和利多卡因及等容積生理鹽水，給藥容積均為4ml/kg。觀察給藥后各鼠心律失常的持續時間，記錄數據并作統計學處理。結果見表2表2異甘草素對烏頭堿誘發大鼠心律失常的影響(X±SD)藥物 劑量(mg/kg) 動物數 心律失常持續時間(分) 減少％生理鹽水 --1085.1±19.5 --利多卡因 101059.4±15.5**30.2異甘草素81052.4±14.6*** 38.4異甘草素41066.7±16.9* 21.6合成異甘草素81053.6±15.***37.0與生理鹽水組比較*P(0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
表2結果表明異甘草素對烏頭堿誘發的大鼠心律失常能明顯減少心律失常持續時間，經統計學處理呈顯著性差異，表明異甘草素有抗烏頭堿誘發大鼠心律失常作用。
實施例3.
異甘草素對哇巴因誘發豚鼠心律失常的預防治療作用取體重255±30g健康豚鼠，雌雄各半，隨機分為6組，iP烏拉坦15g/kg麻醉后背位固定，聯接LMS-2B二道生理記錄儀(成都儀器廠產)和SR-071型雙蹤示波器(江蘇揚中電子儀器廠產)，記錄II導聯心電圖，股靜脈插管，各組分別iv異甘草素和心得安及等容積生理鹽水，給藥容積均為4mL/kg，給藥5分鐘后，靜脈恒速注射哇巴因(Sigma產品)1ug/100g/min，觀察各鼠出現室性早搏(VP)、室速(VT)、室顫(VF)和心搏停止(CA)的時間，算出出現VP、VT、VF、CA所用哇巴因劑量(ug/kg)并作統計學處理。結果見表3*表3異甘草素對哇巴因誘發豚鼠心律失常所用劑量影響(X±SD)藥物 劑量動物 VP VT VFCA(mg/kg) 數 (ug/kg) (ug/kg) (ug/kg) (ug/kg)生理鹽水-- 10 167.4±15.5 234.7±29.0 290.1±36.9 374.8±55.5心得安 2 10 251.1±54.1**** 323.2±51.7*** 391.7±64.6**480.9±91.5**異甘草素 8 10 264.2±69.2*** 342.3±75.6**435.4±112.9** 524.1±109.2**異甘草素 4 10 233.2±51.2**309.0±67.2**362.3±70.7* 451.7±87.6*與生理鹽水組比較*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
表3結果表明異甘草素能明顯增加出現VP、VT、VE和CA所用哇巴因劑量，經統計學處理呈顯著性差異，表明異甘草素有抗哇巴因誘發豚鼠心律失常的作用。
實施例4.
含異甘草素的抗心律失常藥靜脈注射液。
將異甘草素3克、碳酸鈉10克溶于800毫升蒸餾水中，攪拌均勻，用10％乙酸溶液調節PH至7.8-8.2，加入亞硫酸鈉1.5克，加生理鹽水至1000毫升，過濾，氮氣流下灌裝，每支10毫升，100℃流通蒸汽加熱15分鐘滅菌，得含異甘草素的抗心律失常藥靜脈注射液。每支含異甘草素30毫克。
實施例5.
含異甘草素的抗心律失常藥口服片劑。
將異甘草素2.5克、淀粉2.5克、糊精2.5克混勻，噴灑50％酒精1毫升后過20目篩，在60-70℃下烘干，加硬脂酸鎂2.5克混勻，過80目篩后壓片，得含異甘草素的抗心律失常藥口服片劑。片劑每片重0.1克，含異甘草素25mg。
實施例6.
含異甘草素的抗心律失常藥口服膠囊。
將異甘草素2.5克、淀粉10克、糊精10克、糖粉10克、氯化鈉7.5克混勻，噴灑50％乙醇4毫升后過20目篩，在60-70℃下烘干，過80目篩后裝膠囊，每粒0.4克，得含異甘草素的抗心律失常藥口服膠囊，每粒膠囊含異甘草素25mg。
實施例7.
含異甘草素的抗心律失常藥口服沖劑。
將異甘草素2.5克、可溶性淀粉5克、糖粉80克、氯化鈉2.5克、碳酸鈉5克混勻，噴灑50％乙醇5毫升后過20目篩，在60-70℃下烘干，過80目篩后包裝，每包重0.5克，得含異甘草素的抗心律失常藥口服沖劑。
實施例8.
含異甘草素的抗心律失常藥口服液。
將異甘草素2.5克、碳酸鈉7.5克、蔗糖500克、苯甲醇10克溶于500ml水中，攪拌均勻，加10％乙酸溶液調節PH至7.8-8.2，加入亞硫酸鈉1.5克，加水至1000毫升，過濾，灌裝，每支10毫升。得含異甘草素的抗心律失常藥口服液。每支口服液含異甘草素25毫克。
權利要求
1.一種抗心律失常藥物，其特征是含有異甘草素。
2.根據權利要求1所述的抗心律失常藥物，其特征是靜脈注射液抗心律失常藥含有異甘草素、碳酸鈉。
3.根據權利要求2所述的抗心律失常藥物的制法，其特征是將異甘草素用堿溶液溶解，再用酸液調PH至8.0±0.3，加生理鹽水至所需濃度，灌裝，滅菌。
4.根據權利要求1所述的抗心律失常藥物，其特征是將異甘草素與輔料淀粉、糊精等混合制成的口服抗心律失常藥片劑或膠囊。
5.根據權利要求1所述的抗心率失常藥物，其特征是將異甘草素與輔料淀粉、糖、碳酸鈉混合制粒而成的抗心律失常藥沖劑。
6.根據權利要求1所述的抗心律失常藥物，其特征是將異甘草素用堿溶液溶解，再用酸液調PH至8±0.3，加糖及水至所需濃度，灌裝，滅菌制成的抗心律失常藥口服液。
全文摘要
一種抗心律失常藥，它含有異甘草素，異甘草素可以從甘草中提取，也可以用化學方法容易地合成。異甘草素具有抗氯仿、烏頭堿、哇巴因等引起的心律失常作用。用異甘草素作為抗心律失常藥物，無甘草三萜皂甙的激素樣副作用，毒性低，能取代甘草的抗心律失常藥用。它可以制成靜脈注射劑或口服藥片、膠囊、沖劑、口服液等劑型。
文檔編號A61K31/045GK1156024SQ9611683
公開日1997年8月6日 申請日期1996年2月2日 優先權日1996年2月2日
發明者胡小鷹, 彭國平, 馬允慰 申請人:南京中醫藥大學