專利名稱：Hiv感染的聯合治療的制作方法
技術領域：
本發明的組合(combination)可用于抑制HIV蛋白酶，抑制HIV逆轉錄酶，治療HIV感染和治療AIDS和/或ARC(即，AIDS有關征候群)。可作為化合物，藥物學可接受的鹽或酯(當適當時)，藥物學組合物成分，不管是否與其它抗病毒劑，抗感染劑，免疫調節因子，抗生素或疫苗合用。治療AIDS的方法，防止HIV感染的方法，和治療HIV感染的方法也一并公開。
背景技術：
一種稱為人類免疫缺陷病毒(HIV)的逆轉錄病毒是一種復雜疾病的原因，此疾病包括免疫系統的進展性破壞(獲得性免疫缺陷綜合癥；AIDS)和中樞和外周神經系統的變性。此病毒以前稱為LAV，HTLV-III或ARV。逆轉錄病毒復制的共同特征是通過病毒編碼的蛋白酶對前體多蛋白進行徹底的轉錄后加工，以產生病毒裝配功能所需的成熟病毒蛋白。抑制此種加工可防止通常感染性病毒的產生。例如，Kohl，N.E.等，Proc.Nat′l Acad.Sci.，85，4686(1988)，證實HIV編碼的蛋白酶的遺傳學滅活導致產生不成熟的，無感染性的病毒顆粒。這些結果表明HIV蛋白酶的抑制代表了一種治療AIDS和防治HIV感染的可行方法。
HIV核苷酸序列分析顯示在一個開放閱讀框中存在pol基因[Ratner，L，等，Nature，313，277(1985)]。氨基酸序列同源性證實pol.序列編碼逆轉錄酶，一種核酸內切酶和一種HIV蛋白酶[Toh，H，等.，EMBO J.，4，1267(1985)；Power，M.D.等.，Science，231，1567(1986)；Pearl，L.H.等.，Nature，329，351(1987)]。
1992年5月12日出版的EPO541168中公布并命名為“化合物J”的化合物是一種HIV蛋白酶的強抑制因子，可用于防止HIV感染，治療HIV感染和治療AIDS或ARC而無顯著副作用或毒性。
化合物JAIDS治療中一項實際而持久存在的問題是HIV病毒發生對用于治療該疾病的單一治療學制劑產生抗藥性的能力。為解決此問題，申請人已發現了聯合療法。
申請人證實本發明的化合物聯合使用是HIV蛋白酶的有效抑制因子。
在本發明中，申請人共施予一種強HIV蛋白酶抑制因子，如化合物J，或其他化學實體，以及一種非核苷酸HIV逆轉錄酶抑制因子如nevarapine或一種α苯胺基苯乙酰胺(即，α-APA)衍生物。可選擇地，第3種組份即一種HIV逆轉錄酶的核苷酸抑制因子，如AZT，ddI或ddC，加入至組合中。這種聯合療法是促進治療AIDS的有效性和排除對單一治療學制劑產生抗藥性的一種方法。發明概要本發明涉及化合物的組合，這些化合物是化合物J和一種選自nevarapine或一種α-APA衍生物的非核苷酸HIV逆轉錄酶抑制因子，以及，可選擇地，選自AZT，ddI或ddC的一種HIV逆轉錄酶的核苷酸抑制因子，或一種其藥用鹽或酯。
在本發明的一項實施方案中是化合物J和nevarapine的組合。
在一類中是化合物J和一種α-APA衍生物的組合。
在一亞類中是α-APA衍生物為R89439的組合。
在第二亞類中是α-APA衍生物為R18893的組合。
本發明的闡明是化合物J，nevarapine和HIV逆轉錄酶的核苷酸抑制因子的組合。
本發明的進一步闡明是HIV逆轉錄酶的核苷酸抑制因子為AZT的組合。
舉例說明本發明的是一種抑制HIV蛋白酶的方法，包含向需要這種治療的合適的哺乳類施用有效量的該組合。
本發明的一個實例是一種抑制HIV逆轉錄酶的方法，包含向需要這種治療的合適的哺乳類施用有效量的該組合。
本發明的闡明是一種防止HIV感染，或治療HIV感染，或治療AIDS或ARC的方法，包含向需要這種治療的合適的哺乳類施用有效量的該組合。
更特別闡明本發明的是一種用于抑制HIV蛋白酶的藥物組合物，包含有效量的該組合，和一種藥用載體。
特別舉例說明本發明的是一種用于抑制HIV逆轉錄酶的藥物組合物，包含有效量的該組合，和一種藥用載體。
一個進一步的實例是一種用于防治HIV感染，或治療AIDS或ARC的藥物組合物，包含有效量的該組合和一種藥用載體。發明詳述和優選的實施方案本發明是關于組合某些化合物，或其藥用鹽，用于抑制HIV蛋白酶，抑制HIV逆轉錄酶，防治HIV感染和治療它所導致的獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)。該組合定義如下化合物J和一種選自nevarapine和一種α-APA衍生物的HIV逆轉錄酶的非核苷酸抑制因子，或其藥用鹽。
該HIV蛋白酶抑制因子化合物J按照發表于1993年5月12日的EP0541168的程序合成。化合物J是N-(2-(R)-羥-1(S)-2，3二氫化茚基)-2(R)-苯基甲基-4-(S)-羥-5-(1-(4-(3-吡啶基甲基)-2(S)-N′-(叔-丁基-carboxamido)-哌嗪基))-戊烷酰胺，或其藥用鹽。
Nevarapine是11-環丙基-5，11-二羥-4-甲基-6H-二吡啶并[3，2-b2′，3′-e][1，4]-二氮雜-6-酮，
NevarapineNevarapine按照Hargrave，K.D.等人，J.Med.Chem.，34，2231-2241(1991)和Klunder，K.D.等人，J.Med.Chem.，35，1887-1897(1992)描述的步驟合成。
α-APA衍生物是具下列通式的α-苯胺基苯乙酰胺衍生物
α-APA衍生物其中R1是甲氧基，硝基或C(O)-CH3并且R2是氫或甲基。在本組合中特別有意義的是α-APA衍生物R89439和R18893。R89439是R1為C(O)-CH3且R2為甲基的α-APA衍生物。R18893是R1為硝基且R2為氫的α-APA衍生物。α-APA衍生物通過1992年1月23日發表的國際出版物No.WO92/00952，PCT專利申請中描述的步驟制造。
本發明的藥用鹽(以水-或油-溶或可分散產物的形式)包含例如從無機或有機酸或堿形成的常規非毒性鹽或季銨鹽。這種酸加成鹽的實例包括醋酸鹽，己二酸鹽，藻酸鹽，天門冬氨酸鹽，苯甲酸鹽，苯磺酸鹽，硫酸氫鹽，丁酸鹽，檸檬酸鹽，樟腦酸鹽，樟腦磺酸鹽，環戊烷丙酸鹽，二葡萄糖酸鹽，十二烷基硫酸鹽，乙烷磺酸鹽，延胡索酸鹽，葡庚糖酸鹽，甘油磷酸鹽，半硫酸鹽，庚酸鹽，己酸鹽，鹽酸鹽，氫溴酸鹽，氫碘酸鹽，2-羥乙烷磺酸鹽，乳酸鹽，順丁烯二酸鹽，甲烷磺酸鹽，2-萘烷磺酸鹽，煙酸鹽，草酸鹽，pamoate，果膠酸鹽，過硫酸鹽，3-苯基丙酸鹽，苦味酸鹽，三甲基乙酸鹽，丙酸鹽，琥珀酸鹽，酒石酸鹽，硫氰酸鹽，甲基磺酸鹽，和十一酸鹽。堿鹽包括銨鹽，堿金屬鹽如鈉和鉀鹽，堿土金屬鹽如鈣和鎂鹽，帶有有機堿的鹽如二環己基胺鹽，N-甲基-D-還原葡糖胺，以及帶有氨基酸如精氨酸，賴氨酸等的鹽，等等。另外，堿性含氮基團可被季銨化，使用試劑如低級烷基鹵化物如甲基，乙基，丙基和丁基氯化物，溴化物和碘化物；二烷基硫酸鹽如二甲基，二乙基，二丁基，和二戊基硫酸鹽，長鏈鹵化物如癸基，月桂基，肉豆蔻基和硬脂酰基氯化物，溴化物和碘化物；芳香烷基鹵化物如苯基和苯乙基溴化物及其它。其它藥用鹽包括硫酸鹽ethanolate和硫酸鹽。
本發明的組合的藥用鹽包括其中單一成分之一種是為藥用鹽形式的聯合成分，其中所有單一成分均為藥用鹽形式的聯合成分，或聯合成分的一種藥用鹽(即，聯合成分的一種鹽)。在本發明的一項實施方案中，使用聯合成分的硫酸鹽。
本發明的藥物學上可接收的酯是指非毒性酯，優選烷基酯如甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，異丁基或戊基酯，其中甲基酯最優選。然而，如果希望的話，其它酯如苯基-C1-5-烷基也可應用。
醇的酯化，如本發明的化合物J，使用多種常規步驟進行，包括將該醇基團與合適的酐，羧酸或酰基氯反應。這些反應，以及其它將醇酯化的方法，對于熟練的技術人員是顯而易見的。
醇與合適的酐的反應的進行需有酰基化催化劑存在，如4-DMAP(4-二甲基氨基吡啶，亦稱為N，N-二甲基氨基吡啶)，吡啶，或1，8-雙[二甲基氨基]萘。
醇與合適的羧酸的反應的進行需有脫水劑存在，和任選的酰基化催化劑。用于通過去除水而促進反應的脫水劑選自二環己基碳二亞胺(DCC)，1-[3-二甲基氨基丙基]-3-乙基碳二亞胺(EDC)或其它水溶性脫水劑。
另外，在三氟乙酸酐存在下，并且可加或不加吡啶，將醇與合適的羧酸反應也可導致酯化。還有一種變化是在N-N-羰基二咪唑和吡啶存在下將醇與合適的羧酸反應。
醇與酰基氯的反應在酰基化催化劑如4-DMAP或吡啶的存在下進行。
化合物J的選擇性酯化通過熟練技術人員公知的多種方法進行。在一種方法中，醇先用三氯乙基衍生物(如單三氯乙基琥珀酸鹽)酯化。層析分離優選的酯后，通過與乙酸中的鋅粉反應進行三氯乙基基團的還原性去除。另外，另一種選擇性能化的方法是二酯的水解。
本發明的化合物組合可用于抑制HIV蛋白酶，抑制HIV逆轉錄酶，防治人類免疫缺陷病毒(HIV)感染和治療其產生的病理學狀態如AIDS。治療AIDS或防治HIV感染定義為包括，但不限于，治療HIV感染的相當大范圍內的不同狀態AIDS，ARC，有癥狀的無癥狀的，和對HIV的實際或潛在的暴露。例如，本發明的化合物可用于治療懷疑過去暴露于HIV后被HIV感染，這種暴露如輸血，體液的交換，咬傷，意外的針頭刺傷，或在外科手術中暴露于病人的血液。
為這些目的，本發明的組合可經口服，胃腸道(包括皮下注射，靜脈內，肌肉內，胸骨內注射和輸注技術)，經吸入噴霧，或經直腸，以含有常規非毒性藥物學可接受載體，佐劑和載體的劑量單位配方形式給藥。
因此，根據本發明，進一步提供了用于治療HIV感染和AIDS的一種治療的方法和一種藥物組合物。這種治療涉及向需要這種治療的病人施用一種藥物組合物，該藥物組合物包含按照本發明聯合使用的藥用載體和治療有效量的每種化合物。
這些藥物組合物中制成可口服的懸液或片劑；經鼻噴霧劑；滅菌的可注射制劑，例如，作為滅菌的可注射水性或油性懸液或栓劑。
按照本發明的方法，組合的每種成分可在治療過程中在不同時間分別用藥或以分開的或單一的組合形式同時給藥。例于，對于兩成分組合，即HIV蛋白酶抑制劑化合物J，和一種非核苷酸HIV逆轉錄酶抑制劑nevarapine，來說，nevarapine的治療可開始于化合物J治療開始之前，之后或與之同時。因此本發明應被理解為包含所有這些同時的或交替的治療方案，并且術語“用藥”也被相應地如此予以理解。
當作為懸液口服用藥時，這些組合物可按照藥物配方領域中公知的技術制備，并可含有本領域中公知的微結晶纖維素用于給出體積，藻酸或藻酸鈉作為懸溶劑，甲基纖維素作為粘度增強劑，以及甜味/加味劑。作為即刻釋放片，這些組合物可含有本領域中公知的微結晶纖維素，磷酸二鈣，淀粉，硬脂酸鎂和乳糖和/或其它賦形劑，結合劑，補充劑(extender)，崩解劑稀釋劑和潤滑劑。
當經鼻氣霧劑或吸入用藥時，這些組合物可按照藥物配方領域中公知技術進行制備，可制備成鹽水溶液，采用本領域公知的苯乙醇或其它合適的防腐劑，吸收促進因子以增加生物利用度，氟烴和或其它增溶劑或分散劑。
可注射溶液或懸液可按照公知的技術配方，使用合適的非毒性，胃腸外可接受的稀釋劑或溶劑，如甘露醇，1，3-丁二醇，水，林格氏溶液或等滲氯化鈉溶液，或合適的分散或潤濕和懸溶劑，如滅菌的，溫和的，不易揮發的油，包括合成的單或二甘油酯，和脂肪酸，包括油酸。
當以栓劑形式經直腸用藥時，可通過將合適的非刺激性賦形劑混入藥物制備這些組合物，這些賦形劑如，可可脂，合成甘油酯或聚乙二醇，它們在常溫下是固體，但在直腸腔內液化和/或溶解以釋放藥物。
本發明的化合物可以對每種化合物特定的劑量范圍施用于人類。化合物J或其藥用鹽以約40～4000mg/日的劑量范圍口服施用，可一日一次至四次應用。Nevarapine或其藥用鹽，以約12～500mg/日的劑量范圍口服施用，可一日一次用藥。α-APA衍生物，特別是R89439和R18893，或其藥用鹽，以約100～1000mg/日的劑量范圍口服施用，可一日一次至三次用藥。然而，應當理解，對每個特定病人來說特定的劑量和用藥頻度可以不同，取決于許多因素，包括所使用的特定化合物的活性，該化合物的代謝穩定性和作用的時間長短，年齡，體重，一般健康狀況，性別，飲食，用藥的模式和時間，排除速度，藥物聯合，特定疾病的嚴重性，以及接受治療的宿主。
本發明的組合也可與或不與第3種抗病毒成分即HIV逆轉錄酶的核苷酸抑制因子。例如，本發明的組合可與本領域普通技術人員公知的有效量的AIDS抗病毒藥物AZT，ddI，或ddC組合，不管是在預先暴露和/或過去暴露期間。
表1抗病毒劑藥物表 制造商 指征ddI Bristol-Myers AIDS，ARC雙脫氧次黃苷 (New York，NY)ddC Hoffman-LaRoche AIDS，ARC二脫氧胞苷 (Nutley，NJ)齊多夫定AZT Burroughs-Wellcome AIDS，adv，ARC，
(Research Triangle Park) 兒科AIDS，卡波濟氏肉瘤無癥狀HIV感染不嚴重HIV疾病神經系統受累聯合其它治療AZT通過J.P.霍維茨等，有機化學雜志，29，2076(1964)；R.P.格林斯基等.，有機化學雜志，38，4299(1973)；和C.K.楚等.，TetrahedronLetters，29，5349(1988)的方法合成。AZT作為治療藥物在AIDS的治療中的應用公開于美國專利第4724232號。
化合物ddC通過J.P.霍維茨等.，有機化學雜志，32，817(1967)；R.Marumoto和M.Honjo，Chem.Pharm.Bull.，22，128(1974)；和T-S.林等.，Chem.Pharm.Bull.，30，440(1987)的方法合成。ddC作為治療藥物在AIDS治療中的應用公開于美國專利第4879277和5028595號。
化合物ddI按照美國專利第5011774號和V.Bhat等，SyntheticCommun.，22(10)，1481-86(1992)的方法合成。ddI作為治療藥物在AIDS的治療中的應用公開于美國專利第5254539號中。
優選的組合是HIV蛋白酶抑制因子和HIV逆轉錄酶的非核苷酸抑制因子的同時或交替治療。在本組合中可選的第3種成分是一種HIV逆轉錄酶的核苷酸抑制因子，如AZT，ddC或ddI。這些組合對限制HIV的傳播有協同作用。因此，本發明包括HIV蛋白酶抑制因子化合物J，以及一種選自nevarapine或α-APA的非核苷酸HIV逆轉錄酶抑制因子和選自AZT，ddI或ddC的核苷酸HIV逆轉錄酶抑制因子。
實施例1聯合治療與只用nevarapine藥代動力學評價的方案這是一個固定次序，隨機化，二階段，平行方案，以測定nevarapine在血清陰性病人中對一種HIV-1蛋白酶抑制劑化合物J的藥代動力學和安全性和耐受性的作用。在基線(階段I)測定并在施用nevarapine 400mg每日1次(或用安慰劑代替nevarapine)6天后再次測定單一口服劑量600mg化合物J的藥代動力學和安全性。研究設計在表中詳細列出。化合物J的血漿濃度在給藥后0，0.25，0.5，0.75，1，1.5，2，3，4，6，8，10和12小時后測定。實驗室安全性在用藥前和化合物J第1天用藥后12小時后測定。
化合物J的總血漿清除率以劑量除以從0至無限大的血漿濃度時間曲線下總面積來計算。表觀半衰期通過適合于log血漿濃度時間曲線的終末相的斜率來估算，使用最小方差法。在血漿或血漿濾過液中化合物J的濃度通過HPLC測定法，在220nm處監測吸收率而確定。
表2階段I(第0天)階段I(第1天)- 化合物J單一600mg劑量化合物J 血漿濃度曲線(12小時)藥代動力學階段I至II期中 nevarapine 400mg每日1次治療(第2至7天)實施例2聯合治療與只用nevarapine的方案在本方案中顯示在HIV血清陰性受試者中與nevarapine一起給予的化合物J的治療方案的抗病毒活性，化合物J是每劑600mg 1日4次施用而nevarapine以每劑400mg1日1次施用。通過在組合治療前和期間測定HIV p24抗原的血清水平，HIV RNA的血清水平，和CD4淋巴細胞計數來測定抗病毒活性。
實施例3聯合治療與只用α-APA的藥代動力學評價方案本方案顯示α-APA衍生物對化合物J在HIV血清陰性受試者中的血漿濃度曲線的作用。這是一個固定次序，隨機化，兩階段，平行實驗方案。單1600mg口服劑量化合物J的藥代動力學和安全性在基線測定1次(階段I)并在以25mg-500mg劑量1日1-3次施用α-APA衍生物(或代替α-APA衍生物的安慰劑)6天后再測定1次(階段II)。
實施例4聯合治療與只用α-APA的方案本方案顯示在HIV血清陰性受試者中與α-APA衍生物一起使用的化合物J治療的抗病毒活性，化合物J以600mg的劑量1日4次施用而α-APA衍生物以25mg～500mg的劑量范圍1日1次至3次施用。通過在組合治療前和期間測定HIV p24抗原的血清水平，HIV RNA的血清水平，和CD4淋巴細胞計數來測定抗病毒活性。
上述說明講述了本發明的原則，并提供了用于闡明目的實施例，應理解到本發明的實踐包括所有通常的變化，適應，或修改，如下列權利要求書和其等同物所包括之范圍。
權利要求
1.一種多種化合物的組合，這些化合物是化合物J和選自nevarapine或一種α-APA衍生物的非核苷酸HIV逆轉錄酶抑制因子，和，任選的，一種選自AZT，ddI或ddC的HIV逆轉錄酶的核苷酸抑制因子，或其藥用鹽或酯。
2.權利要求1的組合，該組合是化合物J和nevarapine。
3.權利要求1的組合，該組合是化合物J和一種α-APA衍生物。
4.權利要求3的組合，其中該α-APA衍生物是R89439。
5.權利要求3的組合，其中該α-APA衍生物是R18893。
6.權利要求1的組合，該組合是化合物J，nevarapine和HIV逆轉錄酶的核苷酸抑制因子。
7.權利要求6的組合，其中該HIV逆轉錄酶的核苷酸抑制因子是AZT。
8.抑制HIV蛋白酶的一種方法，包含向需要這種治療的合適的哺乳動物施用有效量的權利要求1的組合。
9.抑制HIV逆轉錄酶的一種方法，包含向需要這種治療的合適的哺乳動物施用有效量的權利要求1的組合。
10.防止HIV感染，治療HIV感染，或治療AIDS或ARC的一種方法，包含向需要這種治療的合適的哺乳類施用有效量的權利要求1的組合。
11.一種用于抑制HIV蛋白酶的藥物組合物，包含有效量的權利要求1的組合，和藥用載體。
12.一種用于抑制HIV逆轉錄酶的藥物組合物，包含有效量的權利要求1的組合，和藥用載體。
13.一種用于防治HIV感染，或治療AIDS或ARC的藥物組合物，包含有效量的權利要求1的組合，和藥用載體。
全文摘要
聯合使用HIV蛋白酶抑制因子化合物J和nevarapine或α-APA衍生物之一或多種可用于抑制HIV蛋白酶，抑制HIV逆轉錄酶，防止或治療HIV感染和治療AIDS。可以化合物，藥物學可接受的鹽，藥物組合物成分形式應用，不管是否與其它抗病毒劑，免疫調節因子，抗生菌或疫苗合用。治療AIDS的方法和防治HIV感染的方法也一并予以描述。
文檔編號A61K31/55GK1155841SQ95194689
公開日1997年7月30日 申請日期1995年6月23日 優先權日1995年6月23日
發明者E·A·艾明尼, J·R·哈夫 申請人:麥克公司