用于皮膚和毛發的淀粉-金屬配合物的制作方法

專利名稱：用于皮膚和毛發的淀粉-金屬配合物的制作方法
背景技術：
迄今，盡管已研制出多種藥物療法，但復原損傷和受傷皮膚的功能仍然是主要的健康問題。目前已研制出的多種皮膚愈合方法，如具有創傷愈合特性的生長因子蛋白質產物和藥物，以及傷口閉合藥膏，都超出了許多病人的經濟承受能力。在不發達國家，尤其是熱帶地區國家，諸多不完善的保健條件，普遍的皮膚真菌病，以及使用易燃物如煤油煮飯等情況以及類似情況很容易引起嚴重的皮膚傷害，因此存在著對改進的且成本低的護膚品和藥物的較大需要。對于這些國家，迫切需要能利用易得原料以低成本生產有效藥物。即使在較發達國家，對于醫學管理中的成本規模，也存在著不斷需要開發低成本的護膚產品和傷口愈合藥物的需要。傳統的做法如人院治療糖尿病性皮膚潰瘍日益被限制。因此將來需要改進的和成本經濟的傷口愈合治療方法。
人和其它動物傷口的延遲愈合或不完全愈合能引起患者的更多疼痛和痛苦。并且能顯著增大傷口并發癥及醫學成本。通常，傷口仍需要廣泛關注和醫護，以控制感染和組織壞死的慢性瘡存在。即使當傷口最終愈合，傷口區仍常常缺乏應答觸感刺激的能力，并且通常充滿了過度沉積的能產生永久性傷痕的不成熟膠原。因此迫切需要改進的傷口愈合組合物擴展用于外科手術中產生的傷口。成功的外科手術過程，尤其是對病情十嚴重或年邁病人，一般是考慮外科術后愈合程度和速度。能損傷正常愈合響應的另一方面是存在損傷或傷口皮膚的過度炎癥。盡管發炎過程和其伴隨產生的白細胞匯集痛苦區內過程為自然愈合過程的組成部分，但在某些情況下，發炎過程變得過度并延遲愈合。創傷組織在愈合過程的早期被閉塞，而不能進行完全。在這種情況下，可使用具有消炎活性的化合物，以便使愈合過程正常進行。一種有希望用于治療與炎癥和損傷傷口愈合有關病癥的方法使用了與有機分子或氨基酸，氨基酸衍生物和肽配合的金屬離子。這些配合物中的一些具有消炎活性，而其它既具有消炎活性又具有愈合作用。此外據報道還有一些其它配合物除消炎和/或愈合活性之外，還具有刺激毛發生長的作用，這些如見申請人的U.S.P.5,382,431中所述，此文獻在此全部并入本文用作參考。
在治療患有急性或慢性關節炎的患者的過程中，使用銅鹽或其配合物作為治愈胃潰瘍的消炎藥可以追溯到本世紀的四十和五十年代(參見，例如，Sorenson的綜述，Inflammation，3317-331(1976)；Agents and Actions 8305-331(1981)，以及Comprehensive Therapy 1149-64(1985)。銅鹽及其配合物，如銅-水楊酸配合物的使用似乎已被放棄，顯然這是由于初階段希望使用類固醇類消炎藥，如氫化可的松的結果。其它銅與氨基酸(色氨酸，賴氨酸)，與非甾類消炎藥(消炎痛，苯酮苯丙酸，乙酰水楊酸)或與脂肪酸(油酸，月桂酸和辛酸)形成的配合物已被研究，盡管它們很有希望，但其研究很難超出臨床前期，顯然，這是由于刺激，毒性及不適當的功效等問題造成。
盡管已報道了許多銅-配合物具有消炎性質，但其中僅有很有限部分被報道也具有愈合功能。Heintze(U.S.P.4,123,511)報道了油酸銅配合物具有消炎和皮膚愈合活性。Sorenson(U.S.P4,440,754)描述了使用銅(II)鹽與氨基酸(色氨酸或賴氨酸)，或與有機分子如3，5-二異丙基水楊酸，乙酰水楊酸或水楊酸形成的配合物預防及治愈胃腸潰瘍。利用創傷愈口模型，Townsend和Sorenson(Sorenson等人Agents and Actions 8305-325(1981)發現，水楊酸-銅能加速外科手術誘發的大鼠潰瘍的愈合速度并能改善愈合質量。同樣，Sorenson記錄了(ibid and Inflammation3317-331(1976))Townsend證實的在外科手術誘發的潰瘍模型中，銅(II)-(色氨酸)2能增大潰瘍愈合速度的結果。愈合增快大體上應歸因于傷口上表皮再愈合的較快速度和膠原的數量和質量的增加。在受治療動物體中培養出自然定向的細膠原纖維，與未治療動物相反，其中新膠原十分濃稠并由粗的，波狀非定向束，類似瘢痕的組織組成。
Federici和Bertolotto(EP45,398,和IT9,019,948)報道了硫酸軟骨素-銅(II)配合物具有消炎活性。歐州專利EP66,283公開了“海面升降”(“ eustatic”)組合物，它包含無毒金屬離子(包括銅)和透明質酸的葡糖氨基-聚糖或硫酸軟骨素，該組合物用作結瘢劑(通過閉合愈合傷口)。
英國專利申請GB2,044,265描述了三磷酸腺苷的金屬配合物(包括銅)用作骨折以及骨質疏松和骨囊腫情況下骨組織恢復的助劑。
Konishi(U.S.P.4,461,724)報道了四肽Gly-Ser-His-Lys和有關結構的肽當與金屬如離子銅和鋅配合時，具有消炎和愈合作用。
Yu(U.S.P4,053,630)公開了使用與金屬離子如三價鐵，二價銅，鋅或鋁螯合的磺基丙氨酸及其衍生物半胱亞磺酸或高半胱氨酸形成組合物，用以緩和由角質化缺損表征的疾病癥狀，并達到緩解鱗癬，皮脂溢性皮炎和痤瘡之作用。Bertelli(U.S.P.4,156,737)提出，對氨基甲基-苯-磺酰胺的銅配合物對皮膚燒傷具有愈合和保護作用。Van Scott(U.S.P.4,283,386)報道了磺基丙氨酸，半胱亞磺酸和高半胱氨酸的金屬(銅，鋅，或鋁)鹽形式具有治療作用，用于緩解干性和破損皮膚，角化病，疣和掌及足角化過度癥。
Niwa(Dermatologica 179 S1101-106(1989)和Bergren等人(Am.Surg.，54333-336(1988))發現，消炎蛋白Cu，Zn-超氧化歧化酶也起著增快愈合過程的作用。
Pickart(參見，如PCT公開WO91/14437，WO91/12267，WO91/05797，WO91/03488，WO89/12441，WO88/26448，WO88/18851，EP專利EP190,736，EP189,182；以及U.S.P.4,767,753)描述了可用作消炎和愈合劑的Gly-L-His-L-Lys的金屬配合物的合成應用。
大量金屬配合物已用于促進頭發生長。Yamashiki(日本專利70018997)使用銅-泛酸配合物聲稱能促進毛根生長并助長皮膚功能。Morelle(英國專利GB2097256，DE專利32212448)公開了與銅和其它金屬配合的氨基酸衍生物N-丁酰基氨基酸)可用于化妝和治療目的，包括用作毛發和皮膚刺激劑。Banfi等人(U.S.P.4,503,047)公開了一種組合物，它主要含有一種或多種含硫氨基酸和銅(II)離子以及少量異硫氰酸烯丙酯和硫氰酸烯丙酯，用于產生毛發生長刺激作用。Pickart(如WO91/07431，88/08695和EP288，278)發現，大量Gly-L-His-L-Lys衍生物的金屬配合物能增大毛囊體積和毛發生長速度。
盡管上述金屬配合物存在治療希望，但許多金屬配合物存在毒性和組織刺激作用(參見，如Johnson等人，Inorg.Chem.Acta，67159-165(1982)；Pickart等人，Biochem.PHarm.，323868-3871(1983)；和Pickart等人，Lymphokines.8425-446(1983))。例如，雖然銅-水楊酸配合物和眾多銅-水楊酸類似物具有消炎活性，但其它水楊酸類似物如水楊醛苯甲酰基腙對組織卻具有高毒性。類似地，銅(II)-Gly-L-His-L-Lys能維持細胞生機并具有消炎和愈合功能，但其銅結合部位的最終合成物芳酰基腙類似物卻對細胞和組織具有極大毒性。
治療使用的銅配合物的另一問題是銅離子與配合分子的結合親合力。雖然能合成定義明確的銅配合物，但其治療使用時是將配合物置于組織的生理環境中，該環境中實際上有多于數百個化合物進行與銅離子結合競爭，銅離子可以與多達六個單獨分子形成靜電鍵。如果銅從配合物中釋出而變成松散結合，則會產生組織損傷(參見Raju等人，J.Natl..Cancer Inst.，691183-1188(1982))。
當這類金屬配合物被制劑成載體膏或軟膏時可產生其它并發癥。向制劑中加入各種化學藥品以增大與皮膚和創傷表面的粘附力以及增強配合物滲透時靶組織的能力。然而，由于許多這些物質也可以與金屬結合，所期望的治療優點可能會變成泡影或者被顯著減少。同樣，使用洗滌劑如十二烷基硫酸鈉有助于摻合乳劑的油和水相并穩定制劑。然而，這類洗滌劑本身也是能延遲愈合的組織損傷劑。打算治療使用的金屬配合物中的許多還存在另一問題，即它們不能被熱滅菌，因此，為滿足安全要求，在制備過程中必須加入高濃度抗微生物化學藥品，以抑制微生物生長及病毒的傳遞。這些抗微生物劑還可以抑制皮膚和其它組織的保持和修復過程中所涉及的宿主細胞如巨噬細胞和成纖維細胞的生存力和機能，因此這些藥劑可以阻滯愈合響應。
本領域需要在組織保護，組織愈合，和/或刺激毛發生長方面有用的組合物，這種組合物應當很容易并且能以低成本生產。作為優選，這種組合物應可被滅菌，而不降低生物活性，并可被制劑成適合局部施用形式且不使用洗滌劑或其它可能具有損傷作用的化合物。理想的組合物還應當與皮膚和其它材料如傷口敷料(例如，粘連繃帶)牢固粘連。為縮減管理批準所需的時間和費用，組合物最好采用管理部門一般認作安全的材料制備，因此可以在最低安全關注和管理障礙下使用。非常令人驚奇的是本發明滿足了這些和其它有關要求。
發明概述本發明提供了促進溫血動物局部傷口和皮膚損傷愈合，保護皮膚免受氧化傷害作用，以及增大毛囊體積和毛發生長速率的組合物和方法，在這些方法中使用的組合物，包括藥物組合物，由被離子金屬配合的漿糊制備。
因此，本發明一方面提供了制備在促進溫血動物的局部傷口愈合或增大毛囊體積和毛發生長方面有用的藥物組合物的方法。淀粉與有效量離子金屬鹽的水溶液化合，然后調節至適合皮膚產品使用的有效酸性范圍。典型地，淀粉可以很方便地由植物產物如小表，玉米或馬鈴薯制得，淀粉然后與金屬離子，如銅(II)，錫(II)或Zn(II)配合。
所形成的水溶液混合物由淀粉和金屬離子的配合物組成。混合物可以用如水或其它物質調節，以形成粘糊狀混合物。混合物可以直接使用，或者與可藥用載體結合形成乳油或洗劑形式使用，其中淀粉-離子金屬配合物的濃度為約10％至50％或者更高。如果需要，該制品可被滅菌或施行巴氏消毒，而不會破壞淀粉-離子金屬配合物的的愈合或頭發生長刺激活性。
在另一方案中，本發明提供了促進溫血動物皮膚傷口復原的方法，這些傷口如外科手術切傷，燒傷，發炎或氧化傷害造成的不嚴重損傷等。此方法包括對皮膚傷口或損傷部位施用治療有效量或者，在某些情況下為預防有效量的包含淀粉-離子金屬配合物的組合物。由于本發明組合物的糊狀粘連性，與其它局部修補劑和制劑相比，對皮膚的再涂用次數降到最低。
而其它實施方案則涉及用于增大溫血動物，如人的毛囊體積和毛發生長速度的組合物和方法，該方法包括對希望毛發生長區的皮膚施用中以增大所述動物的毛囊體積及毛發生長量的淀粉-離子金屬配合物。典型地，組合物一般以乳油形式施用，并且在每日施用的基礎上涂敷至觀察到毛發生長為止，隨后繼續施用一段時間，該段時間應足以維持有所要數量的毛發生長。
具體實施方案的描述本發明提供了用于保護傷害皮膚并由此使之進行自然愈合過程，促進溫血動物皮膚中組織再生過程，以及刺激溫血動物毛發生長的治療用組合物及方法。所述配合物通過將取自各種來源(如小麥，玉米，馬鈴薯)的淀粉與離子金屬，如銅，鋅，銦或鋅配合而形成。
本發明的淀粉-離子金屬配合物可由從任何種類資源所得到淀粉制備。最合適的淀粉為那些相對價廉且能廣泛得到的淀粉，如小麥，玉米，馬鈴薯，燕麥，豌豆，大豆，稻谷，黃豆，以及大麥淀粉。這些淀粉能夠從商業來源廣泛得到。術語“淀粉”一般是指大分子量碳水聚合物，通常為直鏈淀粉或支鏈淀粉形式，且此聚合物的分子量一般大于100,000道爾頓。
為生產本發明中有用的淀粉-離子金屬配合物，將淀粉與一種或多種離子金屬，如銅，銦，錫，鋅或其鹽配合，所述鹽如硫酸鹽，乙酸鹽，磷酸鹽，氯化物，檸檬酸鹽，琥珀酸鹽，草酸鹽，肉桂酸鹽，酒石酸鹽，富馬酸鹽，馬來酸鹽，戊二酸鹽等。術語“配合”是指淀粉與金屬離子形成靜電鍵，不過此機理僅僅是通過說明性方式而非限定性方式提出。在制備淀粉-離子金屬配合物的一個方法中，是將淀粉與足量水(在約室溫下，22-25℃)混合形成稠糊物。為得到該糊物，將小麥淀粉(1g)與約10ml水混合，而玉米淀粉(1g)和馬鈴薯淀粉(1g)則需要約3ml水。然后將糊狀物與金屬鹽(氯化銅(II)或氯化錫(II)，氯化錫(IV)，氯化銦(III)，或氯化鋅(II))的水溶液在鹽濃度為約10至50％(W/V)，較優選給20％(W/V)下混合。所加入的金屬鹽溶液的體積為得到糊狀物中最終金屬濃度為0.3至1.2％(重量比)所需要的量。不過此濃度可以變化很大。金屬的加入可能會降低糊狀物的pH至約3.0，因此可通過小心加入(例如)1N氫氧化鈉或類似物使糊狀物的pH值升至6.5。該pH值適用于皮膚制品，但其它接近中性的pH水平或稍微酸性范圍內的pH也是有效的。
稠糊物可直接涂敷到皮膚上，或者配制成濃度通常為5至20％(W/V)的乳膏和洗液，不過更高濃度也有效。所述稠糊物也可用水稀釋成能很容易涂敷于皮膚上而又不會流失的適合糊狀物。
本發明的淀粉-離子金屬配合物適用于人的各種治療，預防或化妝應用或適用于其它溫血動物的各種獸醫應用。各種獸類動物中，本發明組合物特別適于治療的種類有馬，牛，豬，綿羊，公山羊，犬，鳥，貓等。
對于預防和/或治療或化妝處理，本發明組合物和其藥用制品可設計成局部，表面，口服或非腸道(如皮下注射)給藥形式。優選的是，本發明藥物組合物以糊狀物，乳膏或油膏形式局部如表面給用。
當對溫血動物施用時，本發明的淀粉-離子金屬配合物一般滅菌并混合到藥物或獸用制劑中。包含淀粉-離子金屬配合物的組合物可以通過常規周知的滅菌技術滅菌，或者通過煮沸或巴氏滅菌法滅菌，這些滅菌方法基本上不會對淀粉-離子金屬配合物的生物活性產生不利影響。本發明組合物可以含有近似于生理條件所需要的并且根據需要制成適合方便給藥的組合物形式的藥學上可接受的輔助物質，如pH調節和緩沖劑，以及傳送載體。對于本領域技術人員而言，制備藥學上可給用的化合物的有效方法是已知的或是顯而易見的，有關它們的詳細描述見例如Remington’s Pharmaceutical Science Mack Publishing Co，Easton，PA(1985)，該文獻在此并入本文作為參考。
依據預定的給藥方式以及預定用途，本發明組合物轉化成固體，半固體，或液體劑型，如粉劑，粒劑，晶體，液體，懸浮液，脂質體，糊，乳狀懸浮液，油膏，等，并可以為適合相對準確劑量給用的單位劑量形式。組合物可包含常規藥物載體或賦形劑，另外，還可包含其它藥劑，生長因子，創傷粘封帶，載體等，見下文進一步描述。
對于半固體組合物，如與適于局部給藥的糊狀物和乳油相應的組合，淀粉-離子金屬配合物可獨立提供，或者可與常規無毒載體化合，這些載體如蘆薈膠，角鯊烷，甘油硬脂酸酯，聚乙二醇，鯨蠟醇，硬脂酸，以及丙二醇等等。這類組合物可含有約5-100％活性成分，較優選為20-40％。按照所選定的給藥特定方式，這些制劑中淀粉-離子金屬配合物的濃度可以在較寬范圍內變化，并且主要依據預定用途，粘度等選擇。制備這類劑型的有效方法對本領域技術人員而言是已知的，或者為顯而易見的；例如，參見前述的Remington的Pharmaceutical Science。在任何情形下，所給用的組合物或制劑含有中以使受治療者獲得所希望的治療或預防效果的量的淀粉-離子金屬配合物。
對早已患有如上所述的創傷，氧化皮膚傷害，炎癥性皮膚損傷的溫血動物，如人，施用本發明的組織愈合組合物，其用量應足以使愈合過程與未處理的宿主相比，進行的更快速。對于患于毛囊體積縮小和毛發生長損傷的動物，本發明的組合物以足以增大毛囊體積和毛發生長速度的量給用。滿足獲達這些效果的量被定義為“治療有效量”。對這種應用有效的量在創傷愈合情況下取決于傷口，瘡等的嚴重程度，在頭發生長損傷情況下取決于毛囊體積減小的程度，以及受治療患者的一般健康情況，但其用量范圍一般為每天每平方厘米傷口部位約1mg至約25mg淀粉-金屬配合物，通常更多使用每天每平方厘米創傷部位約5mg至約10mg的劑量。長期維持劑量可根據需要調整。對于獸用，根據需要可給用較高劑量。治療特定傷口或上述病癥所必需的淀粉-離子金屬配合物的有效量的確定可通過本領域公知的標準實驗方法進行。
在預防施用時，對易受到，或者換言之，有皮膚損傷或類似傷害危險的宿主給用含有淀粉-離子金屬配合物的組合物，用于增強宿主自身傷口愈合或抗氧化能力。這樣一種量定義為“預防有效量”。對于這種應用，確切的用量仍依賴于宿主病癥和一般健康狀況，但一般為每天每平方厘米皮膚約0.1mg至10mg，通常更多為約1mg至3mg/cm2皮膚/天。本發明組合物可以以單劑量或多劑量形式給用。
盡管不加限制使用可能會導致皮膚變色，但本發明的淀粉-離子金屬配合物仍可以相對較大的量給用而無嚴重的副作用。當給用組合物用以抑制皮膚的氧化或生化傷害或者當對僅患有輕度或刺激性或炎癥皮膚的患者給用組合物時，其劑量于是調整至較低維持水平。
本發明組合物，包括藥物組合物，可以單獨給用或作為治療或預防的輔助藥物給用。淀粉-離子金屬組合物可以與其它組合物結合使用，這些其它組合物通常見申請人所擁有且未審的5,382,4321和專利申請USSN08/218,392和08/219/047中所述，它們中的每一件均在此完全并人本文用作參考，或者與改善愈合的其它方面所已知的其它生長因子結合使用。在這種情況下，可以會產生協同效應，從而產生比單獨使用任何單一因子要高得多的臨床效果。另外，盡管此處所述的組合物能促進各種愈合過程，但臨床上傷口的性質及愈合方式可能會大大不同，從而使得人們使用本文所述的組合物與其它因子的結合物。例如，許多燒傷中的神經再生是不完全的，因此人們可加入特異神經生長因子以補充組合物促進神經在燒傷區再生能力。其它所報道的與愈合特性有關的因子的實例有表皮生長因子，成纖維細胞生長因子，生長因子，轉化生長因子，血管生長因子，肝素，纖連蛋白，血纖蛋白，血小板衍生生長因子，酶超氧化歧化酶，血液提取物或來自血液的因子，以及其它類似因子。
下述實施例為說明性的而非限制性的。
實施例I活性淀粉-金屬配合物的制備本實施例描述了在下面進一步說明的具有生物活性的淀粉-金屬配合物的制備中所使用的方法。
小麥淀粉，玉米淀粉，以及馬鈴薯淀粉如氯化銅-水合物(no C 6641)一樣購自Sigma Chemical Conpany，St Louis，MO.氯化錫(II)99％純度，購自AldrichChemical Company，Milwaukee，WI.
在制備淀粉-離子金屬配合物的一個方法中，將淀粉與足量水(在約23℃)混合形成稠糊狀。為得到此糊狀物，將小麥淀粉(1g)與10ml水混合，而玉米淀粉(1g)和馬鈴薯淀粉則僅需3ml水。糊狀物然后與氯化銅(II)或氯化錫的水溶液，(其中鹽濃度為20％(W/V)混合。其中所加入的金屬鹽溶液的體積為得到糊狀物中最終金屬濃度為0.3至1.2％(重量/重量)所需要的量。金屬鹽的加入使得糊狀物的pH值降至約3.0。然后小心加入1N氫氧化鈉使糊狀物的pH值升至6，5。此pH值適用于皮膚制品，但其它靠近中性的pH水平或稍微酸性范圍內的pH水平也是有效的。
淀粉-銅配合物可用作對傷害或損傷皮膚起皮膚屏障作用下的皮膚保護劑。膠狀糊粘附于皮膚上并形成保護屏障。在用這種組合物處理之后，傷害或損傷的皮膚能夠驚人地快速愈合。
如下進一步所述，淀粉-銅和淀粉-錫配合物可用于促進毛發生長和毛囊擴充。對于小鼠毛發生長模型，這些配合物涂敷于皮膚上8至12天之后，能產生顯著的毛發生長刺激作用。
其它種類淀粉-金屬配合物，其中淀粉來自其它植物，且鹽為金屬的其它鹽，如硫酸鹽，乙酸鹽，磷酸鹽等等，預期得到類似效果。
實施例II用淀粉-銅配合物愈合外科創傷本實施例說明了使用由淀粉-銅配合物制備的糊狀物促進動物外科手術切傷的愈合。
在已麻醉的，重35g Swiss-Webeter小鼠的背部切外科切口(1.25cm)。在外科手術后立即以及24小時后將傷口用含有上述實施例I的活性淀粉-銅配合物的薄膜包裹，對照組傷口未處理或僅用無配合金屬的淀粉處理。如表1所示，用活性淀粉-銅配合物處理的傷口比對照組傷口愈合的要快。由于快速愈合傷口往往導致收縮并且變得更加圓拱，故愈合活性與9天后傷口的長度有關。每組包括8只小鼠。
表1淀粉配合物對切口長度的作用測試組9天傷口長度(cm)對照組0.91±0.12無銅小麥淀粉 0.88±0.19小麥淀粉-1.0％銅配合物 0.25±0.09小麥淀粉-0.3％銅配合物 0.37±0.09無銅玉米淀粉 0.98±0.23玉米淀粉-1.0％銅配合物 0.31±0.14玉米淀粉-0.3％銅配合物 0.40±0.06無銅馬鈴薯淀粉 0.92±0.19馬鈴薯淀粉-1.0％銅配合物 0.41±0.15馬鈴薯淀粉-0.3％銅配合物 0.47±0.14實施例III用淀粉-銅配合物治愈燒傷本實施例表明，利用表面涂敷淀粉-銅配合物可以增快燒傷的愈合。
通過放置圓形(直徑1.25cm，傷口面積＝1.22cm2)黃銅棒(溫度100℃)與皮膚接觸7秒鐘，在麻醉小鼠的剃毛背部引起二度燒傷，緊接著燒傷后及24和48小時之后，傷口用含有上述實施例1的活性淀粉-銅配合物的糊狀物薄膜覆蓋。對照組燒傷不加處理。對麻醉小鼠的傷口進行追蹤，利用計算機掃描床數字化，并根據計算機圖像計算傷口面積。與未處理對照組燒傷相比，用活性淀粉-銅配合物處理的燒傷顯示出較低的燒傷后炎癥并且愈合也大大加快。每組包括8只小鼠。
表2淀粉-銅配合物對燒傷的作用測試組 15天后燒傷面積(cm2)對照組0.90±0.17小麥淀粉-0.3％銅配合物 0.34±0.13玉米淀粉-0.3％銅配合物 0.33±0.09馬鈴薯淀粉-0.3％銅配合物 0.42±0.12實施例IV減輕皮膚燒傷后的炎癥本實施例說明了淀粉-銅配合物減輕與輕度皮膚燒傷有關炎癥的能力。
通過放置圓形(直徑1.25cm，損傷面積＝1.22cm2)黃銅棒(60℃)與皮膚接觸5秒鐘，在麻醉小鼠(每組8只小鼠)的剃毛背部引起極輕度燒傷，該過程產生具有發紅和腫脹，便很少損失皮膚組織的特征的輕度皮膚損傷。在緊接著熱損傷引起之后，損傷區用含有下述任一種實施例I的活性配合物的糊狀物的薄膜覆蓋具有0.3％銅離子的小麥淀粉，具有0.3％銅離子的玉米淀粉，或具有0，3％銅離子的馬鈴薯淀粉。對照組不加處理或用不含金屬配合物的淀粉處理。每天觀察傷口一次。在第3天，對照組的熱傷害仍然發紅并腫脹，而用三種淀粉-銅配合物的任一種處理過的皮膚則最低程度的發紅和腫脹。
實施例V活性淀粉-銅配合物的巴氏消毒法巴氏消毒法包括加熱溶液至160F維持30分鐘，這種消毒方法可殺死大多數最具抗性的微生物。對于此試驗，可按照上面實施例I所述的方法，將各種淀粉與氯化銅配合。將所形成的糊狀物充分混合，pH值升至pH6.5，然后加熱至160F，維持30分鐘。冷卻至室溫后，按實施例II所述的，對小鼠的外科手術切口傷口施用糊狀物。愈合活性類似于施用未經巴氏消毒的活性組合物時所觀察到的活性，結果見表3中所示。每組包括6只小鼠。
表3巴氏消毒法對活性配合物的作用測試組 9天后傷口長度(cm)對照組 0.89±0.15小麥淀粉-1.0％銅配合物0.29±0.13玉米淀粉-1.0％銅配合物0.35±0.16馬鈴薯淀粉-1.0％銅配合物 0.47±0.21實施例VI利用煮沸對活組化合物滅菌本實施例表明，淀粉-銅配合物可通過煮沸滅菌，而仍能保持基本上所有未滅菌制劑的活性。這樣通過避免在組合物中包括致敏抗菌劑的需要，該方式能提供很多優點。
煮沸滅菌實質上能殺死所有微生物。對于此試驗，按上面實施例I中所述的方法，將10g大豆淀粉與氯化銅配合。向大豆淀粉溶液內加入氯化銅溶液之后，將所形成的溶液充分混合，pH值升至pH6.5，然后在沸水浴中加熱10分鐘。冷卻至室溫后，按上面實施例I所述制備活性組合物，然后按實施例II中所述的方式，涂敷到小鼠的外科手術傷口。施用滅菌淀粉-銅配合物所觀察到的愈合活性類似于施用未滅菌的活性組合物所得到的結果。每組包括6只小鼠。
表4滅菌對活性淀粉-金屬配合物作用測試組 9天后傷口長度(cm)對照組 0.89±0.15小麥淀粉-1.0％銅配合物 0.31±0.16玉米淀粉-1.0％銅配合物 0.39±0.19馬鈴薯淀粉-1.0％銅配合物 0.42±0.18實施例VII淀粉-銅配合物對皮膚的粘連性本實施例說明，使用淀粉-銅活性配合物能改善傷口敷料對皮膚表面的粘連性。因此，使用淀粉-銅配合物和敷料能更有效地覆蓋和密封傷口。并且，用于固定醫學傳感器到皮膚上的多種膠帶或靜脈中的導管能引起皮膚損傷。向這類膠帶上所用的膠粘劑中摻入淀粉-銅配合物將會減輕這種皮膚損傷和傷害。對于測試，將粘性繃帶(商標Band AidTM)的傷口覆蓋部分切去粘性部分。將對皮膚無粘附性能的膠帶傷口覆蓋部分涂布配合有0.3％銅離子的小麥淀粉。將涂布有糊狀物的膠帶施加到人的上臂上并在辦公室正常工作狀態期間使之留在所敷部分。在隨后的8小時試驗期間，膠帶與皮膚能很好粘連。這說明，這類傷口愈合糊狀物對人皮膚具有顯著的粘連特性。
實施例VIII刺激毛發生長本實施例描述了使用含有淀粉-金屬配合物刺激溫血動物的毛囊生長情況。
本試驗中使用的模型為小鼠模型，已發現此模型能成功預測對人的治療響應(參見，如U.S.P.5,118,665，該文獻在此并入本用作參考)。毛發生長通過活性生長期(毛發生長初期)，繼之通過休眠期(毛發生長終期)進行。測試方法一般包括對毛發生長終期的小鼠皮膚涂擦毛發生長刺激劑。雌性，Swiss-Webster鼠在約45天齡時開始毛發生長終期，該期持續至約90天齡。在涂敷活性物質之后，在10至14天內能觀察到毛發生長增強。對于此試驗，使用50天齡小鼠。含有銅(II)和錫(II)的淀粉組合物被測試。為進行試驗，將淀粉-金屬糊狀物與鹽水混合(按重量計25％淀粉組合物和75％生理鹽水)。鼠被剃毛，然后通過注射。0.05ml混合物立即滲透到皮膚下面。對照組鼠注射等體積鹽水或不含金屬的淀粉。每組包括10只小鼠。12天后，比較各組。測定注射部位有毛發生長的小鼠百分數，并測定毛發生長響應的相對強度(以1至5的標度表示，其中1表示幾乎看不到毛發生長，而5則表示有極濃密的毛發生長)。
結果見表7中所示。該結果表明，所有組合物均為活性毛發生長刺激劑，且淀粉-錫(II)配合物是最有效的藥劑。
表5淀粉-金屬配合物對毛發的刺激作用注射部位有毛發生長的百分率 毛發生長的平均強度對照組小鼠 0 0小麥淀粉-無銅(II)0 0小麥淀粉-1％銅(II) 90 2.5小麥淀粉-1％錫(II) 100 4.0實施例IX局部施用刺激毛發生長本實施例中使用的模型與實施例VlII中所述的模型一樣，只是活性淀粉-金屬糊狀物表面涂敷到皮膚上。將動物剃毛，然后連續四天盡可能光滑地將0.1g糊狀物涂敷到剃毛區。對照動物用鹽水或未與金屬配合的淀粉拭抹。每組包含10只小鼠。14天后，比較各鼠組。測定剃毛區中心部分有毛發生長的小鼠的百分率并測定毛發生長響應的相對強度(以1至5標度表示，其中1表示幾乎看不到有毛發生長，5表示有極濃密毛發生長)。所有組合物均其有活性，且含錫(II)組合物為最有效的藥劑。
表面涂敷淀粉-金屬配合物刺激毛發生長的作用注射部位有毛發生長的百分率 毛發生長的平均強度對照組小鼠 100.2小麥淀粉100.0小麥淀粉-1％銅(II) 902.0小麥淀粉-1％錫(II) 1004.0根據上述結果，顯然，本發明提供了用于表面皮膚，傷口和外科治療以保護傷害皮膚并促進自然愈合過程，增強組織在表皮中的再生過程，以及刺激溫血動物毛發生長的淀粉-金屬配合物。本發明還提供了制備和配制局部給藥用的組合物的經濟方法。
盡管為了清楚理解本發明，上面已通過說明和實施例的方式進行了更詳細的描述，但顯然，在附屬的權利要求范圍之內，可以進行某些變化和改進。
權利要求
1.促進溫血動物局部傷口愈合的方法，該方法包括對傷口施用治療有效量的包含與離子金屬配合的淀粉的組合物。
2.權利要求1的方法，其中所述的離子金屬為銅(II)，及其治療上可接受的鹽。
3.權利要求1的方法，其中所述的離子金屬為錫(II)。
4.權利要求1的方法，其中所述的淀粉由小麥，玉米，馬鈴薯，或大豆制得。
5.增強溫血動物皮膚損傷復原的方法，包括對皮膚損傷部分施用治療有效量的包含與離子金屬配合的淀粉的組合物。
6.權利要求5的方法，其中所述的離子金屬為銅(II)。
7.權利要求5的方法，其中所述淀粉由小麥，玉米，馬鈴薯，或大豆制得。
8.保護溫血動物皮膚免受氧化傷害以及幫助溫血動物皮膚傷口復原的方法，包括對皮膚或傷口部位施用預防或治療有效量包含與離子金屬配合的淀粉的組合物。
9.權利要求8的方法，其中所述的離子金屬為銅(II)，及其治療上可接受的鹽。
10.權利要求8的方法，其中所述淀粉由小麥，玉米或馬鈴薯或大豆制得。
11.增加溫血動物的毛囊體積以及毛發生長速度的方法，包括對所述動物的皮膚施用組合物，該組合物包含可以增加所述動物毛囊體積以及毛發生長速度的量的與離子金屬配合的淀粉。
12.權利要求11的方法，其中所述組合物局部施用于皮膚。
13.權利要求11的方法，其中所述組合物通過皮下注射施用。
14.權利要求12的方法，其中所述組合物是每天對希望增強毛發生長的皮膚區域局部施用。
15.權利要求11的方法，其中所述的離子金屬為銅(II)或錫(II)，以及它們治療上可接受的鹽。
16.權利要求11的方法，其中所述的離子金屬為錫(II)。
17.權利要求11的方法，其中所述淀粉由小麥，玉米，馬鈴薯或大豆制得。
18.用于促進溫血動物局部傷口愈合的藥物組合物，該組合物包括治療有效量的與離子金屬配合的淀粉以及可藥用載體。
19.權利要求18的藥物組合物，其中所述的離子金屬為銅(II)或錫(II)，以及它們治療上可接受的鹽。
20.權利要求18的藥物組合物，其中所述淀粉由小麥，玉米，大豆或馬鈴薯制得。
21.權利要求18的藥物組合物，其中所述的淀粉-離子金屬配合物在組合物中以10％至50％的濃度存在。
22.用于增加溫血動物的毛囊體積和毛發生長速度的藥物組合物，該組合物包括毛發生長刺激量的淀粉-離子金屬配合物和可藥用載體。
23.權利要求22的藥物組合物，其中所述的淀粉-金屬配合物在組合物中以5％至25％濃度存在。
24.權利要求22的藥物組合物，其中所述的離子金屬為銅(II)或錫(II)，以及它們的治療上可接受的鹽。
25.權利要求22的藥物組合物，其中所述淀粉由小麥，玉米，大豆或馬鈴薯制得。
全文摘要
本發明提供了制備組合物的方法，所述組合物適于保護損傷害皮膚免受進一步的氧化和生化傷害并由此允許進行自然愈合過程，該組合物還適于促進燒傷和外科手術傷口的愈合速度以及增加毛囊體積和毛發生長速度。該組合物一般包括各種植物淀粉與離子金屬如銅(II)和錫(II)鹽，配合形成的沉淀物。
文檔編號A61P17/00GK1145031SQ95192395
公開日1997年3月12日 申請日期1995年3月27日 優先權日1994年3月28日
發明者勞倫·R·皮卡特 申請人:皮膚生物學公司