用于預防和治療近視的組合物的制作方法

專利名稱：用于預防和治療近視的組合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種用于預防和治療近視的組合物。
近視被定義為進入眼的平行光線在視網膜前聚焦的狀態。
近視一般包括以下兩類。其一是軸性近視。這是因晶狀體厚度正常時眼的長軸異常所引起的，并且在這種類型中經常發現嚴重近視。軸性近視通常始發于嬰兒期，眼軸逐漸生長，在眼底發展異常。特別是，能觀察到視網膜和脈絡膜萎縮，色素異常增加和減少，玻璃體混濁，視網膜出血導致視網膜脫離甚至失明。
另一種近視是屈光性近視，由于閱讀，眼的近距離工作如VDT(可視顯視終端)工作等使角膜和晶狀體的工作強度過重而導致角膜曲率異常或晶狀體厚度增加所引起的。其中包括假性近視，它是由睫狀平滑肌持續和生長收縮的不固定狀態所引起的。假性近視是屈光性近視中在滴注睫狀肌麻痹之前晶狀體增厚的狀態。然而滴注睫狀肌麻痹之后，晶狀體厚度變薄，且屈光誤差向遠視一方遷移1D(曲光度)或更多。
然而很難明確區分這兩種近視(軸性近視和屈光性近視)，據說，經常可看見這兩種近視共存。當前，盡管近視原因仍有待于澄清，但一般認為眼的近距離工作是近視的原因之一。特別是，當進行眼的近距離工作時，睫狀平滑肌的收縮使晶狀體增厚。這種狀態持續很長時間造成無法恢復其原來狀態，從而導致睫狀平滑肌的基質的變化引起屈光性近視，進一步引起眼后膜脆弱使眼軸生長導致軸性近視。
另外，睫狀平滑肌收縮狀態的緩解據說可治療近視。為此，局部使用藥物如托品酰胺(滴注)被用來緩解睫狀平滑肌的張力。然而該藥功效隨患者的不同而變化并且不能完全令人滿意。除用藥外，也嘗試了物理療法如低頻治療，超聲治療和向遠處瞭望訓練，卻沒有一種能得到令人滿意的效果。
如上所述，沒有令人滿意的預防和治療近視的方法或組合物。因此，患者和醫生雙方都強烈希望開發一種預防和治療近視的優良組合物的方法。
根據本發明，已發現下面式(Ⅰ)化合物出人意料地使睫狀平滑肌松弛，控制晶狀體厚度，其機理不同于一般使用的以含托品酰胺為活性成分的藥物。該化合物的作用通過使近視狀態的屈光誤差恢復到正常范圍顯示了優秀的預防和治療近視的功效，從而完成了本發明。
該化合物是本發明預防和治療近視組合物的活性成分，它同時具有，如日本專利未審公開號61-10587中所描述的，對SRS-A產物的抑制作用，抗SRS-A的拮抗作用，以及抑制源于IgE-傳遞的變應性的組胺釋放，并且已知具有強抗應變活性和抗感染活性。該化合物除具有上述功能外，本發明者第一次發現它對睫狀平滑肌的收縮具有優越的松弛作用。
因此，本發明涉及(1)一種預防和治療近視的組合物，它含有一種化合物結構式為
其中R是烷基，R1是氫或氨基，以及R2是羧基或四唑，或它們的一種鹽；(2)如上(1)中所描述的預防和治療近視的組合物，其中烷基是異丙基；(3)如上(1)所描述的預防和治療近視的組合物，用于眼睛局部施藥；(4)如上(3)中所描述的預防和治療近視的組合物，是一種眼部滴加劑；(5)如上(4)中所描述的預防和治療近視的組合物，是一種含水的眼部滴加劑；以及(6)如上(5)中所描述的預防和治療近視的組合物進一步含有一種增溶劑。


圖1是顯示了用下文將提到的AA-673或托品酰胺治療后氯化氨甲酰膽堿的濃度-應答曲線圖，其中由氯化氨甲酰膽堿單獨引起的最大收縮為100%。在該圖中，橫坐標軸表示氯化氨甲酰膽堿濃度(M)的一般對數值(logM)，而縱坐標軸表示收縮應答。在該圖中，O表示單獨的氯化氨甲酰膽堿的濃度-應答曲線(n=8)，而▲是用3×10-5M AA-637治療5分鐘后的濃度-應答曲線(n=7)，△是用10-4M AA-673治療5分鐘后(n=7)以及□是用10-6M托品酰胺治療5分鐘后(n=6)的濃度-應答曲線。
圖2表示使用AA-673或托品酰胺由氯化氨甲酰膽堿(3×10-5M)引起緊張收縮的松弛作用，其中以最大緊張收縮和放松狀態之差為100%。在該圖中，橫坐標軸表示藥物濃度(M)的一般對數值(logM)，而縱坐標軸表示松弛作用的百分比。在該圖中，△是AA-673(n=7)和□是托品酰胺(n=7)。
圖3表示滴入氯化氨甲酰膽堿后屈光誤差變化的圖。在該圖中，橫坐標軸表示第一次滴入氯化氨甲酰膽堿后的時間(min)。縱坐標軸表示基于初始屈光誤差(在滴注氯化氨甲酰膽堿之前的即刻值)的變化(D)。在該圖中，△表示滴注了生理鹽水后眼的屈光誤差，▲表示滴注了AA-673后眼的屈光誤差，且↓表示滴注氯化氨甲酰膽堿。每個值表示的是兩個動物的屈光誤差和標準誤差的平均變化值。
圖4是表示用下面將提到的T-19465治療后氯化氨甲酰膽堿的濃度-應答曲線圖。在該圖中，橫坐標軸表示氯化氨甲酰膽堿濃度(M)的一般對數值(logM)，而縱坐標表示收縮應答。在該圖中，O表示單獨的氯化氨甲酰膽堿的濃度-應答曲線，而□表示用10-4MT-19465治療5分鐘后的濃度-應答曲線。
圖5是表示使用T-19465后，由氯化氨甲酰膽堿(3×10-5)引起的緊張收縮的松弛作用圖。在該圖中，橫坐標軸表示T-19465濃度(M)的一般對數值(logM)，而縱坐標軸表示收縮應答。
式(Ⅰ)中的R代表的烷基
優選具有1到6個碳原子的直鏈或支鏈烷基。其例子有甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基，仲丁基叔丁基，正戊基，異戊基，新戊基和正己基。R更優選具有1到3個碳原子的直鏈或支鏈烷基，最優選的R是異丙基。
R1是氫或氨基。
R2是羧基-COOH或四唑 優選羧基。
其中R2是羧基的式(Ⅰ)化合物的物理化學性質和制備詳細描述于，如日本專利未審公開號10587/1986。
另外其中R2是四唑的式(Ⅰ)化合物的物理化學性質和制備被詳細描述于，例如，日本專利未審公開號48798/1979。
式(Ⅰ)的化合物也可以作為一種藥學上可接受的鹽被使用。作為這樣的鹽，有例如與無機堿，有機堿，無機酸或有機酸或堿性或酸性氨基酸生成的鹽。
無機堿的例子包括堿金屬如鈉和鉀，堿土金屬如鈣和鎂，鋁和銨。
有機堿的例子包括三甲胺，二乙胺，三乙胺，吡啶，甲基吡啶，乙醇胺，二乙醇胺，三乙醇胺，二環己基胺和N，N′-二芐基亞乙基二胺。
無機酸的例子包括鹽酸、氫溴酸、硝酸、硫酸和磷酸。
有機酸的例子包括甲酸、乙酸、三氟乙酸、富馬酸、草酸、酒石酸、馬來酸、檸檬酸、琥珀酸、蘋果酸、甲基磺酸、苯磺酸和對甲苯磺酸。
堿性氨基酸的例子包括精氨酸，賴氨酸和鳥氨酸。
酸性氨基酸的例子包括天冬氨酸和谷氨酸。
這些鹽可以通過實質上已知的方法如描述在例如日本專利未審公開號10587/1986的方法或類似方法制備。
從后面將提到的由實驗例所證明，化合物(Ⅰ)和它的鹽對睫狀平滑肌的收縮具有優越的松弛作用，因此可用作預防和治療近視的組合物。
本發明預防和治療近視的組合物可通過口服或腸胃外途徑安全地施于哺乳動物如人，兔，狗，貓，牛，馬，猴等。
可通過例如將化合物(Ⅰ)或其鹽與藥學上可接受的載體混合來制備本發明預防和治療近視的組合物。
藥學上可接受的載體的例子包括通常被用作制備材料的多種有機或無機載體。制備固體制劑，可以適當地使用賦形劑，潤滑劑，粘合劑，崩解劑等。對于液體制劑可適當使用溶劑，增溶劑、懸浮劑、增稠劑、等滲劑，緩沖劑，止痛劑等。如果需要，可以按常規方法使用制劑中的添加劑如防腐劑，螯合劑、抗氧化劑、著色劑、甜味劑、香料、芳香劑等。
賦形劑合適的例子包括乳糖、蔗糖、甘露糖醇、淀粉，晶體纖維素和輕質硅酸酐。
潤滑劑合適的例子包括硬脂酸鎂，硬脂酸鈣，滑石和膠態氧化硅。
粘合劑合適的例子包括蔗糖，甘露糖醇，multitol，淀粉，明膠，阿拉伯樹膠，黃蓍膠，晶體纖維素，糊精，羥丙基纖維素，羥丙基甲基纖維素，聚乙烯吡咯烷酮，精氨酸鈉，聚乙酰氨基葡糖和聚氨基葡糖。
崩解劑合適的例子包括淀粉，羧甲基纖維素，羧甲基纖維素鈣，Carmellose鈉鹽，羧甲基淀粉的鈉鹽，聚乙酰氨基葡糖和聚氨基葡糖。
溶劑合適的例子包括注射用水，醇(例如乙醇)，丙二醇，聚乙二醇，甘油，橄欖油，芝麻油，花生油，棉籽油，蓖麻油和玉米油。
增溶劑合適的例子包括聚乙烯吡喀烷酮，環糊精，咖啡因，聚乙二醇，丙二醇，甘露糖醇，苯甲酸芐酯，乙醇，三氨基甲烷，膽甾醇，三乙醇胺，碳酸鈉和檸檬酸鈉。
懸浮劑合適的例子包括硬脂酸三乙醇胺，月桂基磺酸鈉，氨基丙酸月桂酯，卵磷脂，氯芐烷銨，氯芐乙銨，單硬脂酸甘油酯，表面活性劑如吐溫-80和親水性聚合物如聚乙烯醇，聚乙烯吡咯烷酮，羧甲基纖維素鈉鹽，甲基纖維素，羥甲基纖維素，羥乙基纖維素，羥丙基纖維素，羥丙基甲基纖維素，阿拉伯樹膠，明膠和白蛋白。
增稠劑合適的例子包括蛋黃卵磷脂，明膠，阿拉伯樹膠，黃蓍膠，甲基纖維素，羧甲基纖維素鈉，羥乙基纖維素，羥丙基纖維素，聚乙烯醇，聚丙烯酸鈉，精氨酸鈉和果膠。
等滲劑合適的例子包括山梨糖醇，甘油，聚乙二醇，丙二醇，葡萄糖和氯化鈉。
緩沖劑合適的例子包括磷酸鹽緩沖液，硼酸鹽緩沖液，檸檬酸鹽緩沖液，酒石酸鹽緩沖液和乙酸鹽緩沖液。
止痛劑合適的例子包括苯甲醇。
防腐劑合適的例子包括對羥基苯甲酸酯，四硼酸鈉，氯代丁醇，苯甲醇，苯乙醇，甲醋吡喃酮，山梨酸和其鹽，p-chlormethaxynol，氯甲酚和鄰乙汞硫基苯酸鈉。
螯合劑的合適例子包括乙二胺四乙酸鈉，檸檬酸鈉和縮聚磷酸鈉。
抗氧化劑合適的例子包括亞硫酸鹽，抗壞血酸，維生素E和半胱氨酸。
著色劑合適的例子包括焦油著色劑，甘草提取物，維生素G和氧化鋅。
甜味劑合適的例子包括葡萄糖，蔗糖，果糖，蜜，糖精和甘草。
香料合適的例子包括香草醛，薄荷醇和玫瑰油。
芳香劑合適的例子包括茴香油，龍腦和薄荷醇。
除上面提到的以外，藥學上可接受的載體還包括瓊脂，酪蛋白和膠原。
并且可以適當地加入其它預防和治療近視的藥物如新斯的明硫酸甲酯，托品酰胺或含有這些作為活性成份的藥物，以及具有其它功效的成份。
根據化合物(Ⅰ)和其鹽的穩定性，作為水溶液的本發明預防和治療近視的組合物的pH優選從4到9。
口服制劑包括固體劑型如粉末，顆粒，片劑和膠囊，和液體劑型如乳化劑，糖漿和懸浮劑。
片劑的制備是適當地向化合物(Ⅰ)或其鹽中加入前面所提到的賦形劑，崩解劑，粘合劑，潤滑劑等，將混合物壓制成片。壓制成形后，如果需要，可以進一步加入前面所提到的甜味劑，香料，芳香劑等，或可以通過已知的方法進行包衣使藥物有腸包衣或持續釋放。可用的包衣劑有，例如，羥丙基纖維素，羥丙基甲基纖維素，醋酞纖維素，鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素，醋酸琥珀酸羥丙基甲基纖維素和乙基纖維素。
例如將化合物(Ⅰ)或其鹽懸浮于前面所提到的溶劑中來制成懸浮液。在制備中如果需要，可以使用所提到的懸浮劑。
腸胃外制劑包括如注射液和對眼局部給藥的制劑。
注射液包括皮下注射液，靜脈內注射液和肌肉內注射液。注射液可以含水或不含水，且可以是溶液或懸浮液。
對眼局部給藥的制劑包括如滴眼劑，眼膏劑和凝膠體，優選滴眼劑。滴眼劑可以含水或不含水，且可以是溶液或懸浮液。
本發明預防和治療近視的組合物優選用對眼局部給藥的制劑，特別是滴眼劑，更優選含水的滴眼劑。
當需要含水注射液時，可以通過例如將化合物(Ⅰ)或其鹽與前面所提到的防腐劑等滲劑等一起溶解于注射用水中，當需要含油的注射液時，可以將化合物(Ⅰ)或其鹽溶解或懸浮于丙二醇，橄欖油，芝麻油或棉籽油中來制成。
可以通過例如將防腐劑溶解于加熱的純水中，加入增溶劑，加入化合物(Ⅰ)或其鹽，充分溶解所加的成分來制成含水滴眼劑。同時，也可以向其中加入緩沖液，等滲劑，螯合劑，增稠劑等。
優選的增溶劑是聚乙烯吡咯烷酮、環糊精或咖啡因，特別優選聚乙烯吡咯烷酮。當使用聚乙烯吡咯烷酮時，可以大大提高化合物(Ⅰ)和其鹽的溶解度，并且能顯著地增強化合物(Ⅰ)和其鹽的穩定性。
例如，優選使用聚乙烯吡咯烷酮的平均分子量是從大約25000至大約120000，優選大約40000。加入的聚乙烯吡咯烷酮的量一般從0.2至20(W/V)%，優選從0.5至15(W/V)%，并且特別優選從1至10(W/V)%。
緩沖液優選硼酸鹽緩沖液。當使用硼酸緩沖液時，與使用其它緩沖劑如磷酸鹽緩沖劑相比，可得到具有較少刺激性作用的液體制劑。在這種情況下，硼酸加入的比例是從0.2至4(W/V)%，優選0.5至2(W/V)%。
含水滴眼劑懸浮液可以通過加入除用于上面提到的含水滴眼劑的添加劑之外的適當的上面所提到的懸浮劑來制備。
上面所提到的含水滴眼劑和含水滴眼劑懸浮液的pH值優選4到9，特別優選5到8。
不含水滴眼劑可以通過例如將化合物(Ⅰ)或其鹽溶解或懸浮于水溶性溶劑如醇(例如乙醇)，丙二醇，macrogol，甘油丙二醇，乙醇或甘油中，或于油性溶劑如橄欖油，芝麻油，花生油，棉籽油，蓖麻油或玉米油中來制備。
例如，通過適當使用凡士林，塑性基質或液體石蠟為基質材料能制備眼膏劑。
可以通過例如用羧基乙烯聚合物，亞乙基馬來酸酐聚合物，聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物或明膠(gumgelanic)作為適當的加熱無菌凈化水(800ml)，并在其中溶解對羥基苯甲酸甲酯和對羥基苯甲酸丙酯，然后再向其中溶解硼酸，四硼酸鈉，聚乙烯吡咯烷酮(平均分子量40000)，咖啡因，聚乙二醇和AA-673。冷卻后，加入無菌凈化水至總量1000ml，然后通過一個0.22μm過濾膜過濾滅菌，并裝入預先測定的容器中得到含水的滴眼劑。
實施例2含水滴眼劑制劑配方AA-6732.5g硼酸16g四硼酸鈉7g聚乙烯吡咯烷酮(平均分子量4000)20g對羥基苯甲酸甲酯0.26g對羥基苯甲酸丙酯0.14g用無菌凈化水加至總量1000ml(pH7.5)制備加熱無菌凈化水(800ml)并在加熱下將對羥基苯甲酸甲酯和對羥基苯甲酸丙酯溶于其中。將所得溶液冷卻至室溫。將硼酸，四硼酸鈉和聚乙烯吡咯烷酮，然后是AA-673溶于其中。加入無菌凈化水至總量1000ml，然后通過0.22μm過濾膜過濾滅菌并裝入預先測定的容器中得到含水的滴眼劑。
實施例3含水滴眼劑懸浮液制劑配方AA-67310g
磷酸二氫鈉50g氯化鈉9g吐溫8020g氯代丁醇3g氫氧化鈉適量加入無菌凈化水至總量1000ml(pH5.0)制備加熱無菌凈化水(800ml)，在其中溶解氯代丁醇，然后溶解磷酸二氫鈉，氯化鈉和吐溫80。將溶液冷卻至室溫。用氫氧化鈉將所得溶液調至pH5.0，并加入無菌凈化水至總量1000ml，然后通過0.22μm過濾膜過濾滅菌。使預先滅菌的AA-673均勻分布得到含水滴眼劑懸浮液。
實施例4含油滴眼劑制劑配方AA-67320g加入棉籽油至總量1000ml制備向預先滅菌的棉籽油中加入AA-673得到含油滴眼劑。
實施例5眼膏劑制劑配方AA-67310g液體石蠟100g加入白凡士林至總量1000g
制備預先把液體石蠟和白凡士林加熱滅菌。將AA-673和液體石蠟充分研磨，并與白凡士林攪拌得到眼膏劑。
實施例6凝膠體制劑配方AA-6735g羧基乙烯聚合物10g苯乙醇5g氫氧化鈉適量加入無菌凈化水至總量1000g(pH7.0)制備將苯乙醇溶解于無菌凈化水(800ml)中，并把溶液用0.22μm過濾膜過濾滅菌。將預先滅菌的AA-673懸浮于溶液中。劇烈攪拌下向其中加入無菌羧基乙烯聚合物使其溶解。用氫氧化鈉將所得溶液調至pH7.0，加入無菌凈化水至總量1000g，制得凝膠體。
實施例7片劑制劑配方AA-67310mg乳糖35g谷物淀粉150mg晶體纖維素30mg硬脂酸鎂5mg每片230mg
制備預先混合AA-673，乳糖，谷物淀粉，晶體纖維素(2/3用量)和硬脂酸鎂(1/2用量)并制成顆粒。向所得顆粒中加入剩余量的晶體纖維素和硬脂酸鎂。將混合物壓制成片劑。
實施例8膠囊制劑配方AA-67310mg乳糖90mg晶體纖維素70mg硬脂酸鎂10mg每粒膠囊180mg制備預先混合AA-673，乳糖，晶體纖維素和硬脂酸鎂(1/2用量)并制成顆粒。向所得到的顆粒中加入剩余的硬脂酸鎂，將混合物密封于明膠膠囊中得到膠囊劑。
實施例9注射劑制劑配方AA-67310mg環己六醇100mg苯甲醇20mg每安瓿130mg制備將AA-673，環己六醇和苯甲醇溶解于可注射的蒸餾水中，使總量為2ml，并將此溶液密封于一個安瓿中。整個步驟在無菌下操作。
實驗例1AA-673對由氯化氨甲酰膽堿引起的有色兔的睫狀平滑肌收縮的對抗作用。
試驗材料將重約2kg的雄性有色兔(Dutch)作為試驗動物。把對睫狀平滑肌具有收縮作用氯化氨甲酰膽堿(3×10-7M～3×10-3M)，AA-673(10-6M～10-3M)和具有蠅蕈堿受體對抗作用的托品酰胺(10-7M～3×10-5M)[Mydrin-M(商標，由SANTEN PHARMACEUTICALCO.LTD.，Osaka，日本制備的擴瞳藥和睫狀肌麻痹劑)的活性成分用作試驗藥物。括號里的數據是指最終藥物濃度，以后相同。
試驗方法睫狀平滑肌的標本摘出有色兔的眼球，將其后面部分切除，并將前面部分分為兩個部分。從其中一部分上去除玻璃體和晶狀體，將虹膜切開。然后從鞏膜上輕輕切下睫狀平滑肌得到1mm寬，10mm長的肌肉標本。
測定將肌肉標本懸浮于10ml裝有充95%O2-5%CO2的Krebs-Ringer溶液的組織浴液中，并保持37℃。在大約30mg的張力松弛下等比例記錄了對藥物的應答。
圖1和圖2分別顯示了用AA-673(3×10-5M or 10-4M)或托品酰胺(10-6M)和用AA-673(10-6M-10-3M)或托品酰胺(10-7M-3×10-5M)治療5分鐘由氯化氨甲酰膽堿引起的階段收縮的抑制作用和由氯化氨甲酰膽堿(3×10-5M)引起的階段收縮之后的緊張收縮的松弛作用。
結論(1)兔的睫狀平滑肌顯示了對10-6M-10-4M氯化氨甲酰膽堿濃度依賴性收縮(參見圖1)。
(2)托品酰胺(10-6M)引起了氯化氨甲酰膽堿的濃度-應答曲線向高濃度方向平行移動。即，托品酰胺是一種有競爭性的拮抗藥，(參見圖1)。
在3×10-5M濃度下，AA-673抑制了大約25%由氯化氨甲酰膽堿引起的最大的收縮(100%)，而在10-4M濃度下，抑制了大約70%。以對由氯化氨甲酰膽堿引起的最大收縮的抑制作用來說，AA-673可被認為是一種非競爭性拮抗藥物(參見圖1)。
(3)在不小于3×10-7M濃度下，托品酰胺以濃度依賴性方式松弛了由氯化氨甲酰膽堿(3×10-5M)引起的緊張收縮，而它不能使松弛收縮的程度低于張力松弛狀態(張力松弛的最大緊張收縮的松弛作用作為(100%))(參見圖2)。
在不小于3×10-6M濃度下，AA-673以濃度依賴性方式松弛了由氯化氨甲酰膽堿(3×10-5M)引起的緊張收縮。而且AA-673松弛收縮的程度低于(116%)張力伸張狀態(參見圖2)。
由這些結果可以看出AA-673對兔的睫狀平滑肌有松弛作用。作為Mydrin-M的活性成份的托品酰胺顯示了階段收縮的抑制作用和后面的由氯化氨甲酰膽堿引起的緊張收縮作用的松弛作用，AA-673也是如此。托品酰胺顯示了抗氯化氨甲酰膽堿的競爭性拮抗作用，與乙酰膽堿--一種使睫狀平滑肌收縮的神經物質--位于神經末稍受體中具有相似的功能。相反，AA-673沒有顯示對抗在神經末稍受體中的氯化氨甲酰膽堿的競爭性拮抗作用，但可能通過不同機理，直接作用于睫狀平滑肌上引起松弛。由此AA-673可以通過除乙酰膽堿以外的不同神經傳遞物質來松弛睫狀平滑肌的收縮。如果近視是由除乙酰膽堿以外的物質引起的收縮而導致的，則AA-673將是預防和治療近視的有前途的物質。
實驗例2本發明預防和治療近視的組合物對使用Mydrin-M或Miopin沒有恢復視力的近視患者具有作用對5名使用Mydrin-M或Miopin(商標，一種含有新斯的明硫酸甲酯為活性成分的提高視力調節劑，由SANTENPHARMACEUTICALCO.LTD.,Osaka,日本制備)沒有恢復視力的近視患者使用在實施例2得到的含水滴眼劑(下文簡單稱作藥劑)，評估本發明預防和治療近視的組合物的效力。
測定5名據說視力近視的患者(表1中患者A至E，9歲至28歲)不帶眼鏡時間的視力(左和右眼)及屈光誤差(左和右眼)[用自動屈光儀測定，單位D(屈光度)]。結果見表1。5名患者的眼軸長度和角膜曲率半徑在正常范圍之內。
給患者A至E的雙眼在睡覺之前滴入一滴Mgdrin-M且每天3或4次滴入一滴Miopin，給藥3個月。自初次到醫院的3個月后測定患者A-E不帶眼鏡的視力(左眼和右眼)和屈光誤差(左眼和右眼)，結果見表1。由表1可以明顯看出，五名患者不帶眼鏡的視力和屈光誤差幾乎沒有出現差異，說明它們對預防和治療近視沒有功效。
然后代替Miopin每天3-4次每次1滴給患者A-E的雙眼滴入一滴本發明藥劑并且在睡覺之前滴注一滴Mydrin-M，給藥3個月。3個月后(即自初次去醫院的第6個月)測定患者A-E不帶眼鏡的視力(左眼和右眼)和屈光誤差(左眼和右眼)，結果見表1。由表1可明顯看出，5名患者不帶眼鏡的視力恢復到不小于1.0，并且屈光誤差也明顯提高。

由這些結果可以發現，當本發明藥劑與Mydrin-M結合使用時，對患者近視的預防和治療是有效的，而結合使用一般預防和治療近視的制劑Miopin和Mydrin-M沒有出現改善情況。因此，確定本發明制劑對預防和治療近視是有用的。
實驗例3對近視患者預防和治療近視的本發明藥劑的功效對5名近視患者施用本發明藥劑并測定該藥劑預防和治療近視的功效。
測定5名據說視力不好的患者，表2中患者F-J，年齡9歲至28歲)不帶眼鏡時的視力(左眼和右眼)及屈光誤差(左眼和右眼)[用自動屈光儀，單位D(屈光度)]。結果見表2。5名患者的眼軸長度和角膜曲率半徑在正常范圍內。
每日3或4次給患者F至J的兩眼滴注本發明的藥劑，給藥3個月。3個月后測定患者F至J不帶眼鏡時的視力(左眼和右眼)以及屈光誤差(左眼和右眼)，結果見表2。由表2可明顯看出，5名患者不帶眼鏡的視力恢復到不小于1.0，并明顯提高屈光誤差。
由事實可以看出，用于本發明實驗例的患者具有正常范圍的眼軸長度，并且其角膜曲率半徑沒有變化，他們被認為是患者有由睫狀平滑肌緊張(收縮)引起的屈光性近視。因此，可以表明，由于對睫狀平滑肌收縮的松弛作用，本發明藥劑對預防和治療近視患者的近視是有效的。從而得出結論，本發明的藥劑在預防和治療近視方面具有優越的效果，它可以用作預防和治療近視的藥劑。
實驗例4AA-673對治療猴的由滴注氯化氨甲酰膽堿誘導的急性近視的功效。
試驗動物用重約3kg的兩只雄性猴(Cynomolgus)作為試驗動物。用氯化氨甲酰膽堿作為試驗藥物通過收縮睫狀平滑肌改變晶狀體放大率引起近視，使用苯福林[Neosynesin(商標；由KOWACOMPANY,LTD.,日本制備的擴瞳孔藥物的活性成分]，它可刺激α-受體通過收縮擴張平滑肌引起瞳孔擴大，和使用實驗藥物AA-673。
試驗方法以30分鐘間隔對兩眼滴注氯化氨甲酰膽堿(0.75%)并隨著時間測定屈光誤差。測定在滴注氯化氨甲酰膽堿之前和第一次滴注氯化氨甲酰膽堿之后從30分鐘算起每15分鐘間隔進行，直到瞳孔直徑變得不大于ca.1mm，在這種程度下得不到測定值。在滴注氯化氨甲酰膽堿之前90分鐘算起以每5分鐘的間隔給一只眼滴注AA-673(實驗藥物)，而在另一只眼里滴注生理鹽水，共4次。為測定屈光誤差保持瞳孔擴大，在滴注氯化氨甲酰膽堿之前120分鐘算起，以每5分鐘的間隔給兩眼6次滴注5%苯福林。每次滴注藥物20μl。
原始記錄如下

↑*1苯福林滴注劑↑*2滴注AA-673或生理鹽水↑*3滴注氯化氨甲酰膽堿**4屈光誤差的測定結論第二次滴注氯化氨甲酰膽堿15分鐘后用生理鹽水滴注發現眼有15D近視。相反，用1%AA-673滴注的眼沒有顯示出屈光誤差的變化。當滴注氯化氨甲酰膽堿兩次以上，用生理鹽水滴注的眼近視的更嚴重，而AA-673幾乎完全抑制了近視的發展(參見圖3)。
以上結果與兔睫狀平滑肌中AA-673抗氯化氨甲酰膽堿引起的收縮結果相一致。因此，本發明模型證明的功效被認為是歸因于AA-673對氯化氨甲酰膽堿所引起的收縮的抑制作用和松弛作用。從而可表明AA-673對睫狀平滑肌處于收縮狀態的屈光性近視是有效的。
實驗例5T-19465對氯化氨甲酰膽堿所引起的有色兔睫狀平滑肌收縮作用的拮抗作用。
試驗材料用重約2kg的雄性有色兔(Dutch)作為試驗動物。用氯化氨甲酰膽堿(3×10-7M-10-4M)和T-19465(10-6-3×10-4M)作為實驗藥物。括號里的數據是指最終藥物濃度。
試驗方法睫狀平滑肌的標本摘除有色兔的眼球，切除其后面部分，并把前面分為兩部分。從其中的一半上去除玻璃體和晶狀體，將虹膜切開。然后從鞏膜上輕輕切下睫狀平滑肌得到1mm寬，10mm長的肌肉標本。
測定將上述制備的肌肉標本懸于10ml裝有充95%O2充5%CO2的Krebs-Ringer溶液的組織浴液中，并保持37℃。在大約30mg的張力松弛下等比例記錄該肌肉標本對藥物的應答。
圖4和圖5分別顯示了用10-4M T-19465治療5分鐘對氯化氨甲酰膽堿引起的階段收縮的抑制作用，以及通過T-19465(10-6-3×10-4M)對氯化氨甲酰膽堿(3×10-5M)引起的階段收縮之后緊張收縮的松弛作用。
結論氯化氨甲酰膽堿的濃度-應答曲線見表4。用10-4M T-19465治療5分鐘產生了對氯化氨甲酰膽堿收縮的抑制作用并且為28%左右地抑制了由氯化氨甲酰膽堿引起的最大收縮。然而，氯化氨甲酰膽堿所引起收縮的濃度-應答范圍沒有改變。
圖5顯示了用T-19465松弛由氯化氨甲酰膽堿引起的緊張收縮。結果表明3×10-4M T-19465 72%左右地松弛了氯化氨甲酰膽堿所引起的最大緊張收縮。
本發明預防和治療近視的組合物不只顯示了對兔睫狀平滑肌有松弛作用，也顯示了對使用一種常用的預防和治療近視的制劑Mydrin-M沒有效果的患者有預防和治療近視的優越功效。另外，本發明組合物沒有顯示出瞳孔擴大應答，能夠有益地用于預防和治療近視。
權利要求
1.一種預防和治療近視的組合物，含有式(Ⅰ)化合物或其一種鹽。 其中R是烷基，R1是氫或氨基，R2是羧基或四唑。
2.權利要求1的組合物，其中R是具有1到6個碳原子的烷基。
3.權利要求1的組合物，其中R是異丙基。
4.權利要求1的組合物，其中R1是氨基。
5.權利要求1的組合物，其中R2是羧基。
6.權利要求1的組合物，其中式(Ⅰ)的化合物具有下式
7.權利要求1的組合物，用于對眼局部給藥。
8.權利要求7的組合物，是一種滴眼劑。
9.權利要求8的組合物，是一種含水滴眼劑。
10.權利要求9的組合物，還可含有增溶劑。
11.權利要求10的組合物，其中增溶劑是聚乙烯吡咯烷酮。
全文摘要
預防和治療近視的組合物，含有下式的化合物或其鹽。其中R是烷基，R
文檔編號A61K31/35GK1108095SQ9411863
公開日1995年9月13日 申請日期1994年10月7日 優先權日1993年10月7日
發明者重光利朗, 渡邊則子 申請人:千壽制藥株式會社