專利名稱：3-N-烷基-3，4-二氫-2H-4-取代雜芳氨基-7，8，9，10(7，10)-四(二)氫萘并-(2，1-e)-(1，3 ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及3-N-烷基-3，4-二氫-2H-(4-取代雜芳氨基)-7，8，9，10(7，10)-四(二)氫萘并-(2，1-e)(1，3)-噁嗪衍生物，其在治療和/或預(yù)防瘧疾的用途，含有其的藥物組合物及治療和/或預(yù)防瘧疾的方法。
瘧疾是人類大眾中常發(fā)的一種傳染病，目前全世界有約2.0億瘧原蟲攜帶者且每年有約1億瘧疾患者。瘧疾的治療依賴于藥物治療，人們現(xiàn)已開發(fā)出許多抗瘧藥物，如磷酸喹哌，氨酚喹，本芴醇，甲氟喹，磷酸氯喹，蒿甲醚，青蒿素，鹽酸喹寧等。但隨著這些藥物的頻繁使用，瘧原蟲已對這些藥物普遍產(chǎn)生了耐藥性，致使這些藥物的療效大大降低。因此，開發(fā)一種既無耐藥性又具有優(yōu)良治療和/或預(yù)防瘧疾作用的抗瘧藥物是十分迫切的。
這里所用的術(shù)語“瘧疾”，主要指間日瘧和惡性瘧疾。
本發(fā)明的目的是發(fā)現(xiàn)既無耐藥性又具有優(yōu)良治療和/或預(yù)防瘧疾作用的抗瘧藥物。
本發(fā)明者經(jīng)過廣泛深入的研究，出人意料地發(fā)現(xiàn)通式(Ⅰ)化合物具有優(yōu)良的治療和/或預(yù)防瘧疾作用，且無耐藥性，
其中Ar為取代的雜芳基，優(yōu)選下式基團(tuán) X為鹵素，優(yōu)選氯和溴，R為-CH2-CH2-或-CH＝CH-，R1為直鏈或支鏈的C2-5烷基，本發(fā)明基于上述發(fā)現(xiàn)得以完成。
本發(fā)明的主題之一涉及式(Ⅰ)3N-烷基-3，4-二氫-2H-4-取代雜芳氨基-7，8，9，10(7，10)-四(二)氫萘并-(2，1-e)-(1，3)-噁嗪衍生物 其中Ar為取代的雜芳基，優(yōu)選 X為鹵素，優(yōu)選氯，溴，R為-CH2-CH2-或-CH＝CH-，R1為直鏈或支鏈的C2-5烷基。
根據(jù)本發(fā)明，通式(Ⅰ)化合物可通過下面反應(yīng)路線1制備
其中Ar，R，和R1定義同上。
步驟1步驟1中的式(Ⅱ)化合物可按類似于J.Heterocycl Chem 1982，19(3)，663-7，和org Synth Ⅳ，882中所述的方法制備。
步驟2式(Ⅲ)化合物與Ar-Cl按1∶1-2重量比在稀醇或醇類溶劑中進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)加熱攪拌3-20小時(shí)。
步驟3將式(Ⅳ)化合物用稀堿液堿化，得式(Ⅴ)化合物。
步驟4將式(Ⅴ)化合物，甲醛和H2NR1按1∶1-4∶1-2摩爾比，在乙醇中進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)回流攪拌5-25小時(shí)，得到式(Ⅰ)化合物。
在上述反應(yīng)路線中，所用的醇為C1-3烷基醇，優(yōu)選乙醇;所用的堿選自氨水，堿金屬碳酸鹽，其碳酸氫鹽或其氫氧化物;
根據(jù)本發(fā)明，在優(yōu)選的通式(Ⅰ)化合物中， X為氯或溴，R為-CH2-CH2-或-CH＝CH-，
R1為直鏈或支鏈C2-5烷基。
根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明通式(Ⅰ)化合物是一長效，速效，高效，無耐藥性和無毒性的治療和/或預(yù)防瘧疾的藥物，其無論是在體內(nèi)還是在體外都對伯氏瘧原蟲K173株及其耐藥株RC(抗氯喹株)都有優(yōu)良的殺滅作用，殺滅瘧原蟲率為100%。當(dāng)本發(fā)明通式(Ⅰ)化合物用作預(yù)防用藥時(shí)，其預(yù)防免受瘧原蟲感染的時(shí)間可長達(dá)一個(gè)月。
本發(fā)明另一主題涉及的是含有通式Ⅰ化合物的藥物組合物，該藥物組合物可通過本領(lǐng)域常規(guī)方法，將式(Ⅰ)化合物與制藥領(lǐng)域中常用的藥用賦形劑混合來制備。本發(fā)明的藥物組合物可配成適于藥用的各種劑型，如片劑，膠囊等。
本發(fā)明另一主題是治療和/或預(yù)防瘧疾的方法，該方法包括將有效治療和/或預(yù)防量的式Ⅰ化合物給藥于瘧疾患者或需預(yù)防瘧疾的人類。給藥途徑可是各種適于給藥途徑，優(yōu)選口服?？诜o藥劑量可在很寬范圍變化，一般為7-17mg式Ⅰ化合物/公斤體重，優(yōu)選8-13mg/公斤體重口服給藥時(shí)，優(yōu)選第一天口服5-8片，第二天口服3-5片，每片含100mg9301化合物。
下面的生物學(xué)試驗(yàn)用來進(jìn)一步說明本發(fā)明式Ⅰ化合物的優(yōu)良抗瘧效果。
1.與其它抗瘧藥比較，對伯氏瘧原蟲K173株及其抗性株的抗瘧作用
(1)試驗(yàn)材料試驗(yàn)動(dòng)物雄性瑞士種昆明遠(yuǎn)交系小白鼠，體重18-22g。
試驗(yàn)瘧原蟲伯氏瘧原蟲(plasmodium berghei)K173株，其抗性株RC-抗氯喹株(RC/K173)試驗(yàn)藥物9301-3-N-特丁基-3，4-二氫-2H-6-(7-氯-4-喹啉氨基)-7，8，9，10-四氫萘并-(2，1-e)-(1，3)-噁嗪，磷酸氨酚喹，本芴醇，鹽酸奎寧，青蒿素，蒿甲醚，磷酸氯喹，磷酸喹哌。
(2)試驗(yàn)方法取感染瘧原蟲4-5天的小鼠血液，常規(guī)計(jì)數(shù)后，用生理鹽水稀釋至0.2ml，其中含1×107個(gè)寄生的紅細(xì)胞。每只小白鼠腹腔接種0.2ml，接種日為D0，次日為D1，以此類推。每個(gè)試驗(yàn)藥物按k＝0.6分別設(shè)5-6個(gè)劑量，每個(gè)劑量加少量吐溫80研磨，然后用蒸餾水稀釋成混懸液或溶液。每只小鼠給藥0.2ml，除9301用灌胃和腹腔注射兩種給藥途徑外，其它試驗(yàn)藥物均為灌胃給藥。采用peters“4天抑制試驗(yàn)法”，接種原蟲后D0-D3連續(xù)給藥4天，每天1次。D4每試驗(yàn)組小鼠等量采血混勻后涂制血片，甲醇固定，吉氏染色后，顯微鏡檢測瘧原蟲寄生率。以給藥組與對照組寄生率之比為瘧原蟲被抑制率。用直線回歸法求出ED50和ED90，再從敏感株的ED50或ED90與抗藥株的ED50或ED90之比求出抗性指數(shù)I50或I90。
(3)結(jié)果試驗(yàn)結(jié)果歸納于表1-4中。
表 1 9301對鼠瘧K173株原蟲抑制試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)一 (4－d，p.o)
表1(續(xù)
X ED50＝0.39±0.07 ED90＝0.68±0.12注4-d＝給藥4天 PO＝口服給藥表 2 9301對鼠瘧K173株原蟲抑制試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)一 (4－d，ip開幕)
<p>表2 (續(xù))<
X ED50＝0.37±0.06ED90＝0.63±0.19注4-d＝給藥4天ip＝腹腔注射給藥表 3 9301與其他抗瘧藥比較對伯氏瘧原蟲K173株的抗瘧效價(jià)
注ED90比值為各藥ED90與9301ED90之比，所得出的各藥劑量的倍數(shù)，即為9301的抗瘧效價(jià)為各藥的倍數(shù)。
表 4 9301與其他抗瘧藥比較，對伯氏瘧原蟲RC株的抗瘧效價(jià)
由表1-4數(shù)據(jù)可明顯看到，本發(fā)明通式(Ⅰ)化合物對鼠瘧原蟲K173株及其抗性株具有很強(qiáng)的殺滅作用，并具有高于其它已知抗瘧藥物的抗瘧活性。
二、預(yù)防瘧疾試驗(yàn)采用用體重20±2克的小白鼠，80只，雌雄各半，分為8組，每組10只，其中，兩組按40mg/kg劑量分別口服和腹腔給予本發(fā)明9301化合物，兩組按100mg/kg劑量分別口服和腹腔給予本發(fā)明9301化合物，兩組按40mg/kg劑量分別口服和腹腔給予喹哌，兩組按100mg/kg劑量分別口服和腹腔給予喹哌，于給藥當(dāng)天、第7天、第14天和第21天，每組取10只小鼠腹腔接種8×106個(gè)瘧原蟲寄生的紅細(xì)胞，并于每次接種瘧原蟲后第5～第7天分別取尾血涂片檢查瘧原蟲，同時(shí)記錄陽性鼠數(shù)，結(jié)果見表5。
由表6可明顯看到，本發(fā)明9301化合物預(yù)防鼠瘧病原蟲感染的時(shí)間為4周，而喹哌為2周。因此本發(fā)明式(Ⅰ)化合物具有更長效的預(yù)防瘧疾作用。
3.急性毒性試驗(yàn)給每組含20只小鼠，共9組的小白鼠分別一次口服和腹腔給藥本發(fā)明9301化合物，觀察7天，記錄小白鼠死亡率。結(jié)果表明本發(fā)明9301化合物口服LD50為1500mg/kg，腹腔注射LD50為900mg。上述LD50數(shù)據(jù)表明本發(fā)明通式(Ⅰ)化合物安全范圍廣，無毒性。
本發(fā)明用下面的制備實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，但其不意味著對本發(fā)明的任何限制。
實(shí)施例1(1)α-5，6，7，8-四氫萘酚的制備取400毫升7.8%氫氧化鈉溶液置于三口燒瓶中，攪拌加熱至70℃，加入α-萘酚10克，繼續(xù)加熱至90℃。保持90-95℃，加入鋁鎳合金，用薄層層析控制反應(yīng)進(jìn)程，反應(yīng)約需50克鋁鎳合金。過濾，用鹽酸酸化，析出灰白色固體。濾集固體物，烘干，得α-5，6，7，8-四氫萘酚7.5克。產(chǎn)率77%，mp67-69℃。
(2)4-氨基5，6，7，8-四氫-1-萘酚鹽酸鹽的制備取對氨基苯磺酸鈉13.2克、水50毫升，置于燒杯中加熱溶解。用冰水冷卻至有對氨基苯磺酸鈉結(jié)晶析出，加入亞硝酸鈉5.1克溶于14毫升水的溶液中，外用冰鹽冷卻，使溫度降至0℃左右，保持此溫度，攪拌并滴入鹽酸22.5毫升，滴完后，反應(yīng)溶液變?yōu)槿榘咨?。保?℃左右，攪拌40分鐘備用。
取α-5，6，7，8-四氫萘酚10克、稀氫氧化鈉溶液85毫升，置于燒瓶中，攪拌使溶解。用冰鹽冷卻，將溫度降至0℃，保持此溫度，攪拌加入以上制備的重氮鹽溶液，于0℃左右攪拌30分鐘，置30分鐘，然后加熱，當(dāng)溫度升高至50℃時(shí)，在50-70℃間繼續(xù)攪拌，加入連二亞硫酸鈉32.2克。溶液顏色很快消失，同時(shí)析出土黃色沉淀。繼續(xù)攪拌30分鐘，停止加熱，冷卻反應(yīng)物，濾集固體，用稀連二亞硫酸鈉溶液洗滌固體，將固體做成鹽酸鹽，烘干，得4-氨基-5，6，7，8-四氫-1-萘酚鹽酸鹽9.8克，產(chǎn)率72%，mp 273-275℃(分解)。
(3)4-(7-氯-4-喹啉氨基)5，6，7，8-四氫-1-萘酚的制備取4-氨基-5，6，7，8-四氫-1-萘酚鹽酸鹽10克稀乙醇150毫升，4，7-二氯喹啉12.5克，置于三口燒瓶中，攪拌加熱，固體很快溶解，約30分鐘析出黃色固體，攪拌加熱至3-10小時(shí)，濾集析出的固體，用稀乙醇洗滌固體，然后將固體懸浮于稀氨水中，進(jìn)行堿化，濾集固體，水洗，烘干，得4-(7-氯-4-喹啉氨基)-5，6，7，8-四氫-1-萘酚13.3克，產(chǎn)率81%，mp270-9℃(分解)。
(4)3N-特丁基-3，4-二氫-2H-6-(7氯-4-喹啉氨基)-7，8，9，10-四氫萘并-(2，1-e)(1，3)-噁嗪取4-(7-氯-4-喹啉氨基)-5，6，7，8-四氫-1-萘酚12.5克95%乙醇150毫升、36%甲醛7.1毫升、特丁胺6毫升置于三口燒瓶中，攪拌回流，反應(yīng)10-20小時(shí)過濾，將濾液冷卻10-30小時(shí)，濾集析出的固體，用乙醇洗滌固體，烘干，得3N-特丁基-3，4-二氫-2H-6-(7氯-4-喹啉氨基)-7，8，9，10-四氫萘并-(2，1-e)(1，3)-噁嗪14.5克，產(chǎn)率85%，mp208-216℃(分解)。
圖1-3-N-特丁基-3，4-二氫-2H-6-(7-氯-4-喹啉氨基)-7，8，9，10-四氫萘并-(2，1-e)-(1，3)-噁嗪的1H-NMR光譜圖2-3-N-特丁基-3，4-二氫-2H-6-(7-氯-4-喹啉氨基)-7，8，9，10-四氫萘并-(2，1-e)-(1，3)-噁嗪的紅外光譜。
權(quán)利要求
1.通式(Ⅰ)化合物 其中Ar為取代的雜芳基，優(yōu)選下式基團(tuán) X為鹵素，優(yōu)選氯或溴，R為-CH2-CH2-，或-CH=CH-R1為直鏈或支鏈的C2-5烷基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R為-CH2-CH2-，X為氯R1為直鏈或支鏈C2-5烷基，Ar為
3.權(quán)利要求1的化合物，其中R為-CH2-CH2-X為溴R1為直鏈或支鏈C2-5烷基，Ar為
4.權(quán)利要求1的化合物，其中R為-CH＝CH-X為氯R2為直鏈或支鏈C2-5烷基，Ar為
5.權(quán)利要求1的化合物，其中R為-CH＝CH-X為溴R1為直鏈或支鏈C2-5烷基，Ar為
6.權(quán)利要求1-4的任一通式(Ⅰ)化合物用于治療和/或預(yù)防瘧疾。
7.一種用于治療和/或預(yù)防瘧疾的藥物組合物，其特征在于將權(quán)利要求1-4任一要求的式(Ⅰ)化合物作為活性成分。
8.權(quán)利要求5的藥物組合物，其中該組合物按本領(lǐng)域已知方法配成各種適于給藥劑型。
9.權(quán)利要求6的藥物組合物，其中所述劑型為片劑。
10.權(quán)利要求6的藥物組合物，其中所述劑型為膠囊。
11.治療和/或預(yù)防瘧病的方法，其包括將治療和/或預(yù)防有效量的權(quán)利要求1-4要求，通式(Ⅰ)化合物或權(quán)利要求5-8要求的藥物組合物給藥于瘧疾患者或需預(yù)防瘧疾的人類。
12.權(quán)利要求9的方法，其中給藥途徑包括任何適于給藥途徑。
13.權(quán)利要求9的方法，其中給藥途徑為口服。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)化合物，其在治療和/或預(yù)防瘧疾的用途，含有其的藥物組合物及治療和/或預(yù)防瘧疾的方法，式I中各基團(tuán)詳見說明書。
文檔編號A61K31/535GK1097422SQ9310388
公開日1995年1月18日 申請日期1993年4月6日 優(yōu)先權(quán)日1993年4月6日
發(fā)明者李福林, 李國福, 王云鈴, 高守海, 焦岫卿, 李玉蘭, 丁德本, 丁建新, 王儉, 趙京花, 楊俊德, 王效義, 烏增炎, 單承啟 申請人:中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所