專利名稱：促進動物生長的方法和含有殺死的梭狀芽胞桿菌屬的細菌的微生物細胞的粉末組合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種促進動物生長的方法和一種含有殺死的梭狀芽胞桿菌屬的細菌的微生物細胞的粉末組合物。
抗菌物質如抗菌素被廣泛地用作飼料添加劑，以促進飼養的家畜、家禽和人工養殖的水生動物的生長。
然而，消費者，大眾媒介等常常提出一個嚴重的問題，即在飼養的家畜、家禽和人工養殖的水生動物的肉中可能存有抗菌物質的殘留物。從而，人們做了大量的關于使用抗菌物質的研究工作，這是從給人們提供高度安全的食品的立場出發的。
另一方面，很早以來人們已經使用含有前生命期(Probiotics)物質的微生物組合物以保持哺乳動物包括人類和家畜的健康。人們一般認為這樣的組合物對于致病的細菌有對抗活性，因而認為有用的能活的細菌的存在對于所說的組合物來說是無可爭議的。
在含有前生命期物質的微生物組合物的情況下，考慮到蛋白質變性，不允許將它們加熱，從而這樣的組合物不能制成有高強度的碎屑和小丸。如果將藏有前生命期物質(如梭狀芽胞桿菌屬的細菌)的淀粉酶加入到含有α-淀粉(作為粘合劑)的糊狀飼料中(如用于人工養殖鰻鱺的飼料)，這種飼料可能會由于這種淀粉酶的作用而變質。進一步而言，如果該前生命期物質是形成孢子的細菌，就需使它們進行形成孢子處理來足以避免細菌的死亡，因此制備這樣的微生物組合物有很低的產率。
所以，本發明的一個目的是提供生長的促進物質，該物質可以安全地用于代替已知的抗菌物質和含有前生命期的物質的微生物組合物。
根據本發明，提供一種用于促進動物生長的方法，該方法包括使動物口服梭狀芽胞桿菌屬的細菌的殺死的微生物細胞。本發明還涉及一種粉末組合物，該組合物的基本成分包括梭狀芽胞桿菌屬的細菌殺死的微生物營養細胞，以及糖類和/或淀粉。
作為梭狀芽胞桿菌屬的微生物，例如可能被提到的酪酸梭狀芽胞桿菌。特別優選的是酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI(Clostridium butyricum MIYAIRI)，它作為前生命期生物制劑可從Miyarisan Co.，Ltd.，Japan購得。就所述微生物制劑來說，已經觀察到人類和家畜長時期服用后沒有任何所不希望的副作用。
作為MIYAIRI種的一個例子，可能提到酪酸梭狀芽胞桿菌株MIYAIRI 588，它已被寄存在日本的工業科學和技術株式會社的發酵研究所(the Fermentation Research Institute of the Agency of Industrial Science & Technology of Japan)作為布達佩斯條約的一個國際寄存，所給的登記號為FERM BP-2789。
為制備這種微生物的殺死細胞所用的存活的微生物細胞，可以沒有任何限制地使用形成孢子階段的和營養階段的存活的細胞。優選的是營養階段的存活細胞。用于培養這種存活的細菌的一種方法公開在美國專利4，892，731號中。
按照本發明所用的殺死的微生物細胞可以用常規的方法獲得，例如，將相應的存活的微生物細胞進行熱處理或用福爾馬林或其它殺菌劑處理。所述殺死的微生物細胞可以是已經被大量殺死的。還可以使用當被制成制劑時可被實際上殺死的存活的微生物細胞。
例如可以通過一種適宜的方法得到梭狀芽胞桿菌屬的細菌的微生物營養細胞。對于培養和分離微生物細胞的方法沒有限制。例如，有一種方法，特征是將梭狀芽胞桿菌細菌移植到一種適宜的培養基中如一種常規的含葡萄糖的肉湯，并且在30至40℃下培養14至24小時。完成上述初步培養之后，進行主培養，也就是將在初步培養中得到的液體培養產物移植到具有較大規模的相似培養基中，并在與初步培養中所用的溫度和時間條件相似的條件下培養。完成主培養后，可用適當的方式如一離心分離器分離所培養成的微生物細胞。用于所述細菌的任何培養基沒有特別的限制。例如，可以使用用于酪酸梭狀芽胞桿菌常規的肉湯，它含有0.8%的肉汁、1%的胨和0.5%的氯化鈉。一般優選的液體培養基含有葡萄糖、酵母汁和胨。
還可以實行一種在日本專利KOKOKU NO.8300/1962中描述的方法，該方法中培養操作進行約14至24小時這樣相對短的時間，然后中斷該操作以獲得形成孢子階段之前的營養階段的微生物細胞，并收獲所述微生物細胞。
按照本發明所用的梭狀芽胞桿菌細菌的殺死的微生物營養細胞可以通過在空氣中將培養的微生物營養細胞過濾來獲得。如果在空氣中過濾是不夠的話，那么可以將過濾后的產物懸浮到存在空氣的水中。梭狀芽胞桿菌屬的細菌是專性的厭氧微生物，當細菌的微生物營養細胞暴露于空氣中時將會殺死，從而得到細菌的殺死的微生物營養細胞。
還可以通過將相應的存活的營養細胞進行熱處理或用福爾馬林或其它殺菌劑處理來獲得殺死的微生物營養細胞。殺死的微生物細胞可以是已被大量殺死的。另外，如果當存活的微生物細胞被制成制劑時可被大量殺死時，就可以使用存活的微生物細胞。
按照本發明，所用的殺死的微生物細胞可以是每克殺死的微生物細胞含有至少109，優選為109-1011的微生物細胞。上述微生物細胞數是用這樣的方法來計算的，將乳化的微生物細胞懸浮在一種生理鹽水中，在顯微鏡下借助于血球計數器進行計數操作。
按照本發明的微生物組合物，每克該組合物含有至少106，優選為106-1011，更優選為106-1010殺死的微生物細胞。
食用本發明的組合物的動物是除了人類以外的那些，例如包括家畜、家禽、人工養殖的水生動物等。
本發明的微生物組合物可以通過如下方法制備，培養微生物細胞后，將該微生物細胞進行殺菌處理，并將所得到的殺死的微生物細胞分離和濃縮。這樣得到的殺死的微生物細胞的干粉末可以直接制成制劑。還可以將所述干粉末與按照日本的關于飼料的安全保證和質量改進的法律所允許的一種賦形劑混合來制成制劑，所述賦形劑如脫脂米糠、小麥粉、葡萄糖、硅石、麥糠之類。而且，可以濃縮和干燥帶有殘留物的液體培養產物，以獲得含有可將被用作本發明的組合物中的有效組分的殺死的微生物細胞的滅菌混合物。本發明的組合物可以是粉末狀、片狀、丸狀、細粒狀、膠囊等。
這樣的片劑可以用傳統的方法制備，可以使用賦形劑、分解劑、粘合劑、潤滑劑等。
關于賦形劑，可能提到如糖類，如乳糖、D-甘露醇、D-山梨醇和蔗糖;淀粉和谷物淀粉如土豆淀粉;和無機鹽如磷酸鈣、硫酸鈣和沉淀的碳酸鈣。
分解劑的例子為淀粉如羥丙基淀粉、羧甲基鈉淀粉和已被部分轉化成α型的淀粉;纖維素衍生物如羧基甲基纖維素鈣、羧基甲基纖維素和具有低取代度的羥丙基纖維素;和合成的高聚物如交聯的聚乙烯吡咯烷酮。
關于粘合劑，例如可使用高分子量的物質如聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、凝膠、阿拉伯樹膠等。
潤滑劑的例子一般為天然存在物質和它們的衍生物，如滑石、蠟、膠體二氧化硅;和脂肪酸如硬脂酸及其金屬鹽、如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂酸鋁和蔗糖脂肪酸酯。
聚合物如Macrogol用于片劑中是適宜的。
當本發明的組合物用于促進動物生長時，它們一般作為飼料和飲用水的添加劑使用。所以，在這種情況下，優選將組合物制成粉末狀。這樣的粉末組合物可含有0.00005-80%，優選為0.0005-70%，更優選為0.01至50%的含有梭狀芽胞桿菌屬的細菌的殺死的微生物細胞的粉末，其余部分用載體平衡。
至于本發明的組合物，可以說所優選的組合物不僅含有殺死的微生物營養細胞，而且還含有糖類和/或淀粉，因為這類優選的組合物的生長促進活性是相當高的。這樣，優選的粉末組合物含有梭狀芽胞桿菌屬的細菌的殺死的微生物營養細胞以及糖類和/或淀粉。
關于含有殺死的微生物細胞的粉末組合物中所用的糖類，可以使用任何糖類，例如包括葡萄糖、果糖、蔗糖、低聚糖、乳糖等，優選的是乳糖。
關于淀粉，可使用任何淀粉，如小麥淀粉、土豆淀粉和谷物淀粉，優選的是谷物淀粉。
每克含有殺死的微生物營養細胞的粉末應含有至少109個，優選為109-1011個的微生物細胞。
本發明的含有梭狀芽胞桿菌屬的細菌的殺死的微生物營養細胞的粉末組合物的制備可通過如下方法進行，即將含有殺死的微生物細胞的粉末與粉末狀的糖類或淀粉摻和，以形成均勻的混合物。另一種方法包括將以殺死的微生物細胞為主的濕物質與糖類或淀粉混合以形成混合物，然后將該混合物干燥和粉碎。為操作簡便起見，優選將殺死的微生物細胞與糖類和/或淀粉摻合以形成混合物，然后將該混合物懸浮在水中。將所得到的懸浮液進行噴霧干燥操作，其中熱空氣的入口溫度在120和200℃之間，優選在130和170℃之間，出口溫度在30和150℃之間，優選在50和100℃之間。至于所加的糖類和淀粉的量，一般來說每份重量的梭狀芽胞桿菌細菌的殺死的微生物營養細胞加入糖類0.04和700份(重量)，優選為0.1和70份(重量)之間，而淀粉的加入量為0.2和700份(重量)，優選為0.4和70份(重量)之間。在噴霧干燥操作情況下，顯然如果使用生理上允許的難溶于水的無機物如碳酸鈣等作為添加劑，更容易進行所述操作。以上述基本組分的總量計，所述加入的無機物的量為0.005和0.5份，優選為0.01和0.2份，更優選為0.01和0.1份(重量)之間。
用上述方法制得的含有梭狀芽胞桿菌細菌的殺死的微生物營養細胞的粉末組合物一般含有0.05-80%，優選0.5-70%，更優選5-50%以梭狀芽胞桿菌細菌的殺死的微生物細胞的粉末基準，1-50%，優選3-40%，更優選5-30%的糖類，和15-90%，優選25-80%，更優選35-75%的淀粉。所述粉末組合物可含有至少109個，優選109-1011個，更優選109-1010個的殺死的微生物細胞。在組合物還含有無機物的情況下，無機物的含量一般在0.5和50%之間，優選在1和20%之間，更優選在1和10%之間。
還可以將賦形劑加到所述粉末組合物中。作為可被提到的所用的賦形劑，例如按照日本的關于飼料的安全保證和質量改進的法律所允許的任何賦形劑，包括脫脂米糠、大豆粉末、糖屑、谷殼粉末、碳酸鈣、糖類、淀粉類、啤酒酵母和麥糊。可以使用任一種賦形劑或至少兩種賦形劑。每份重量的上述粉末組合物(重量)，所加入的賦形劑的量一般在0.01和1000份(重量)之間，優選0.1和800份(重量)之間，更優選1和500份(重量)之間。就含有賦形劑的粉末組合物來說，每克組合物所含的殺死的微生物細胞的數目一般至少約106個，優選在106和1011個之間，更優選在106和1010個之間。
含賦形劑的粉末組合物一般含有0.00005-80%，優選0.0005-70%，更優選0.01至25%的基于梭狀芽胞桿菌細菌的殺死的微生物營養細胞的粉末，0.001至50%，優選0.003-40%，更優選0.01-15%的糖類，0.015-90%，優選0.03-80%，更優選0.05-40%的淀粉，和1-99.9%，優選10-99.8%，更優選50-99.7%的賦形劑。如果上述粉末組合物是通過噴霧干燥操作制備的，還含有無機物，無機物的適宜量在0.0005和33%之間，優選在0.001和15%之間，更優選在0.002和5%之間。
當使用糖類、淀粉或無機物作為賦形劑時，組合物中賦形劑的量如下0.001-99.9%，優選為0.003-99.8%，更優選為0.01-99.7%的糖類，0.015-99.9%，優選0.03-99.8%，更優選0.05-99.7%的淀粉，和0.0005-99.9%，優選0.001-99.8%，更優選0.002-99.7%的無機物。
本發明的組合物可以加入諸如流動性改進劑、抗凝結劑、抗分散劑等的添加劑。
雖然本發明的組合物通常加到家畜、家禽或人工養殖的水生動物的飼料或飲用水中，本發明的組合物也可以施加到動物體中。如果需要，可以連續食用，通常1個月至幾年的時間。
要服用的動物的例子是家畜如牛、豬、馬和羊;家禽如小雞、母雞、鵪鶉、鴨、家養的鴨、雉和火雞;和人工養殖的水生動物如黃尾、海魚(sea-bram)、海豚、金槍魚、大菱鲆、馬鮐魚、鮭、鯉魚、鰻鱺、彩虹真鱒、淡水真鱒、龍蝦類如對蝦、小龍蝦、龍蝦屬龍蝦和黑虎(black tiger)，以及蟹類如擬石蟹屬、Chionoecetes和Erimacrus。
當將組合物加到飼料中時，所加的組合物的量為使每克飼料含微生物細胞的數目至少約104個，優選為約104和107個之間，更優選為約104和106個之間。例如，當使用不含賦形劑的組合物時，所加的組合物的量可為至少0.1ppm，優選在0.1和1000ppm之間，更優選在0.1和100ppm之間。當使用含賦形劑的組合物時，組合物的量可至少為0.001%(wt)，優選在0.01和10%(wt)之間，更優選為在0.1和0.5%(wt)之間。
當組合物加到飲用水時，所加的組合物的量為每毫升飲用水含微生物細胞數目至少約104個，優選為約104和107個之間，更優選在約104和106個之間。例如，當所用組合物不含賦形劑時，所加入的組合物的量一般為至少0.05ppm，優選在0.05和500ppm之間，更優選在0.05和50ppm之間。當使用含有賦形劑的組合物時，所加的組合物的量一般至少0.0005%，優選在0.005%和5%之間，更優選在0.05和0.5%之間。
本發明及其效果將由下面的試驗結果進一步闡明。
試驗1-1彩虹真鱒的生長試驗目的為了觀察生長促進效應，進行一些試驗，將酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI的死的微生物細胞加入到彩虹真鱒的飼料中。
試驗方法樣品使用每克飼料加入105酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI的殺死的微生物細胞而制成的飼料。
步驟彩虹真鱒(rainbow trouts)的平均體重為每只20g;將它們飼養40天，使每組彩虹真鱒的數目為525只。
試驗結果示于表1中。
表1彩虹真鱒的生長試驗組 每日體重增加 飼料效率(g/魚/天)
使用殺死的微生 0.23(110) 0.73(106)物細胞使用存活的微 0.21(100) 0.69(100)生物細胞對比 0.21(100) 0.69(100)注釋括號中的數是基于對比組中得到的值為100時的相應的指數。
如表1所示，觀察到酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI的殺死的微生物細胞顯示出對彩虹真鱒有促進生長效果。
試驗1-2老鼠生長試驗目的為了觀察酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI的殺死的微生物細胞的生長促進效果，進行下面的試驗，將殺死的微生物細胞加到老鼠的飼料中。
樣品使用每克飼料加入105個或107個的酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI的殺死的微生物細胞而制成的飼料。
試驗步驟SPF鼠，平均體重為每只25克，飼養28天增重，每組鼠數為10。
試驗結果示于表2中。
表2老鼠生長試驗組 體重增加使用每克含105殺死 3.80g(129)的微生物細胞使用每克含107殺死 4.50(153)的微生物細胞對比 2.95(100)注釋括號中的數為基于對比組所得到的值為100相應的指數。
如表2所示，觀察到酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI的殺死的微生物細胞對老鼠有促進生長效果。
試驗1-3小雞生長試驗目的為了觀察酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI的殺死的微生物細胞的生長促進效果，進行下面的試驗，將殺死的微生物細胞加入到小雞的飼料中。
樣品使用每克飼料含106酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI的殺死的微生物細胞而制成的飼料。
試驗步驟將平均體重為每只40g的小雞飼養28天增重，每組小雞數目為20。
試驗結果示于表3中。
表3小雞的生長試驗體重增加 飼料轉化使用殺死的微生物 882g(104) 1.57(98)細胞的組對比組 846g(100) 1.61(100)
注釋括號內的數是基于對比組中得到的值為100所相應的指數。
如表3所示，觀察到酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI對小雞有促進生長效果。
試驗1-4人工養殖的鰻鱺的飼料的變質試驗(即，飼料在水中的所不希望的消散試驗)目的進行下面的試驗，以觀察加入以酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI的存活的或殺死的微生物細胞為基質的粉末后，人工養殖鰻鱺的飼料是否出現變質試驗步驟如表4所示，將100g飼料放入一燒杯中，并與120克水混合并揉和以制成一種象飼料糕的混合物，然后在30℃下靜置10分鐘，再制成團狀樣品，每個樣品重10克。每個團狀樣品含有每克樣品約105酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI的微生物細胞。
表4樣品的組成對比組 使用存活的 使用殺死的細菌組 細菌組魚粉 80% 80% 80%轉化成α-型的淀粉 20% 19 19存活的細菌 - 1 -死的細菌 - - 1將每個樣品放入一體積為300毫升的錐形瓶中，與100ml水混合，并且用設置有加熱裝置的振動器振動30分鐘。振動后，將樣品靜置5分鐘，然后分離出上層清液。用一分光光度計在660mμ的波長下測定上層清液的透光度。每個樣品測量5次，記下平均測定值。
試驗結果示于表5中。
表5鰻鱺飼料的變質試驗(水中的消散試驗)對比組 使用存活的細菌組 使用殺死的細菌組透光度 56.5 31.8 57.6(100) (56) (102)注釋括號內的數為基于對比組中得到的值為100時相應的指數從表5中觀察到，當使用殺死的微生物細胞代替存活的微生物細胞(制成飼料)時，加入存活的微生物細胞的飼料在水中的所不希望的消散受到抑制。
試驗2-1小雞的生長試驗(1)樣品按本發明的樣品表示于實施例2-3中的殺死的微生物組合物(微生物細胞數8.7×1010/g)參考樣品示于參考實施例中的只含有殺死的微生物營養細胞的粉末(微生物細胞數5×1011/g)。
(2)試驗步驟飼養Arbor Acres種的小雞，小雞體重為約44g，每組的雞數為20(即10只雄的和10只雌的)，而且每種試驗重復做三次。用小雞飼料飼養小雞增重，所述飼料不含任何抗菌素和抗菌物質，上述樣品飼料每克含有(4.4至4.5)×105的微生物細胞。生長試驗進行4周。再者，在對比組中，用不含上述樣品的飼料飼養小雞。
(3)試驗結果示于下面給出的表中。
表小雞生長試驗組 體重增加 飼料轉化對比 845g(100) 1.85(100)使用參考樣 864g(102) 1.85(100)使用本發明 884g(105) 1.81(98)的樣品如表1-1至1-4所示，酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI的殺死的微生物細胞對家畜、家禽和人工養殖的水生動物有促進生長效果，因此可用于生產高度安全的食用肉類和人工養殖的水生動物。不象存活的微生物細胞，對于飼料的制備沒有限制。特別是，應當指出，本發明相對于使用存活的微生物細胞的效果是顯著的，因為殺死的微生物體加到人工養殖的水生動物的飼料中不會使飼料加快變質。
進一步而言，由試驗2-1的結果，我們可以說，本發明的含有酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI的殺死的微生物營養細胞以及糖類和/或淀粉的粉末組合物，比只含有所述細菌的殺死的微生物細胞的相應的粉末組合物有高得多的生長促進效應。因此，本發明的組合物對于增加家畜、家禽和水生動物的生產率是有效的。
本發明將通過下面給出的實施例進一步詳細地闡述。
實施例1-1粉末組合物的配制脫脂米糠 96g大豆油 3g含有酪酸梭狀芽胞桿菌 1gMIYAIRI的殺死的微生物細胞的粉末(每克含1010個殺死的微生物細胞)上述組分相互混合以制備一種粉末組合物。
實施例1-2丸劑的制備脫脂米糠 70g麥糊 28.9g含有酪酸梭狀芽胞桿菌 1gMIYAIRI的殺死的微生物細胞的粉末(每克含1010個殺死的微生物細胞)聚丙烯酸鈉 1g這些組分相互混合，用丸劑成形機將所得的混合物制成丸劑。
實施例1-3
片劑的制備含有酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI的微生物細胞(每克含1010個殺死的微生物細胞)的1份粉末與80份乳糖、20份谷物淀粉、20份取代度低的羥丙基纖維素，和2份聚乙烯吡咯烷酮均勻混合并形成顆粒，然后與0.5份硬脂酸鎂混合。再進行片劑成形操作。
實施例1-4細顆粒的制備含有酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI的殺死的微生物細胞(每克含1010個殺死的微生物細胞)與85份甘露醇、15份羧基甲基纖維素和2.5份羥丙基纖維素均勻混合，然后制成細顆粒。
實施例2-1將一種保藏的細菌，酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI株588(FERM BP-2789)在37℃下在下述的培養基中培養。16小時后，將液體培養物進行離心分離操作以得到微生物營養細胞。
胨 1%酵母汁 1%葡萄糖 1%將如此得到的微生物細胞100g，谷物淀粉110g，乳糖50g，碳酸鈣8g懸浮在1升水中。用噴霧干燥器將所得到的懸浮液立即進行噴霧干燥操作，其中熱空氣的入口溫度在140和160℃之間，出口溫度在70和95℃之間，從而得到含有殺死的微生物營養細胞的本發明的粉末組合物。
實施例2-2
將300g含有酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI的殺死的微生物營養細胞的粉末與100g乳糖和600g谷物淀粉在一個V型混合器中混合以得到本發明的粉末組合物。
實施例2-3將含有用與下述參照實施例相似的方法得到的酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI的殺死的微生物營養細胞的粉末5.15kg與2kg乳糖、13kg谷物淀粉和1kg碳酸鈣在適量的水中乳化。將所得到的乳狀液與附加量的水混合，使乳狀液的體積增加到100升。然后用噴霧干燥器進行噴霧干燥操作以得到本發明的粉末組合物。
實施例2-4將含有酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI的殺死的微生物營養細胞的粉末2.5kg與0.5kg乳糖、7kg谷物淀粉和90kg啤酒酵母在一轉鼓型混合器中混合以得到本發明的粉末組合物。
實施例2-5將5克實施例2-1所示的噴霧干燥的產品與85克啤酒酵母和10克脫脂米糠均勻混合以得到本發明的組合物。
參照例將一種保藏的細菌，即酪酸梭狀芽胞桿菌MIRAIRI種588(FERMBP2789)在37℃在下述的培養基中培養。16小時后，將液體培養物進行離心分離操作以得到微生物營養細胞。
胨 1%酵母汁 1%葡萄糖 1%
將這樣得到的微生物細胞100g懸浮在350ml的水中。在-30℃下，將該懸浮液進行初步冷凍操作，然后進行常規的冷凍干燥操作以得到含殺死的微生物營養細胞的干粉末。
權利要求
1.一種用于促進動物生長的方法，該方法包括使動物食用梭狀芽胞桿菌屬的細菌的殺死的微生物細胞。
2.按權利要求1的方法，其特征在于所述梭狀芽胞桿菌屬的細菌是酪酸梭狀芽胞桿菌屬的細菌。
3.按權利要求2的方法，其特征在于所述酪酸梭狀芽胞桿菌屬為酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI。
4.按權利要求1的方法，其特征在于殺死的微生物細胞為殺死的微生物營養細胞。
5.按權利要求1的方法，其特征在于通過將殺死的微生物細胞加到飼料中使動物食用殺死的微生物細胞。
6.按權利要求5的方法，其特征在于飼料中殺死的微生物細胞數為每克飼料至少104個。
7.按權利要求1的方法，其特征在于所述動物是家畜、家禽或飼養的水生動物。
8.一種粉末組合物，含有作為基本成分的梭狀芽胞桿菌屬的細菌的殺死的微生物營養細胞，以及糖類和/或淀粉。
9.按權利要求8的組合物，其特征在于梭狀芽胞桿菌屬的細菌是酪酸梭狀芽胞桿菌屬的細菌。
10.按權利要求9的組合物，其特征在于酪酸梭狀芽胞桿菌屬的細菌是酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI。
11.按權利要求8的組合物，其特征在于殺死的微生物營養細胞數為每克組合物至少106個。
12.按權利要求8的組合物，其特征在于殺死的微生物營養細胞數為每克組合物106和1011個之間。
13.按權利要求8的組合物，其特征在于所述糖類為葡萄糖、果糖、蔗糖、低聚糖或乳糖，而所述淀粉為小麥淀粉、土豆淀粉或谷物淀粉。
14.按權利要求8的組合物，其特征在于所述組合物每份(重量)的梭狀芽胞桿菌屬的殺死的微生物營養細胞含有0.04-700份(重量)的糖類和/或0.2-700份(重量)的淀粉。
15.按權利要求8的組合物，其特征在于所述組合物含有0.00005-80W/W%的酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI的殺死的微生物營養細胞、0.001-50W/W%的糖類、0.015-90W/W%的淀粉、0.0005-33W/W%的難溶于水的無機物，和1-99.9W/W%的賦形劑，和其中殺死的微生物營養細胞數為每克組合物至少106個。
16.按權利要求15的組合物，其特征在于所述糖類為乳糖，而難溶于水的無機物為碳酸鈣。
17.一種用于制備含有梭狀芽胞桿菌屬的細菌的殺死的微生物細胞的粉末組合物的制備方法，該方法包括下述步驟將梭狀芽胞桿菌屬的細菌的微生物營養細胞的粉末以及糖類和/或淀粉懸浮在水中;將如此獲得的懸浮液進行噴霧干燥操作。
18.一種促進動物生長的組合物，該組合物包括作為有效成分的梭狀芽胞桿菌屬細菌的殺死的微生物細胞。
19.按權利要求18的組合物，其特征在于所述殺死的微生物細胞為殺死的微生物營養細胞。
20.按權利要求18的組合物，其特征在于所述梭狀芽胞桿菌屬的細菌為酪酸梭狀芽胞桿菌屬的細菌。
21.按權利要求20的組合物，其特征在于酪酸梭狀芽胞桿菌為酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI。
22.一種用于促進動物生長的組合物，該組合物包括0.00005-80%的含有梭狀芽胞桿菌屬的細菌的殺死的微生物細胞的粉末，其余部分為載體。
23.按權利要求22的組合物，其特征在于殺死的微生物細胞為殺死的微生物營養細胞。
24.按權利要求21的組合物，其特征在于組合物含0.01-50%的梭狀芽胞桿菌屬的細菌的殺死的微生物細胞的粉末。
25.按權利要求22的組合物，其特征在于梭狀芽胞桿菌屬的細菌為酪酸梭狀芽胞桿菌種的細菌。
26.按權利要求25的組合物，其特征在于酪酸梭狀芽胞桿菌種的細菌為酪酸梭狀芽胞桿菌MIYAIRI。
全文摘要
本發明提供了一種用于促進動物生長的方法，該方法包括使動物食用梭狀芽胞桿菌屬的細菌和殺死的微生物細胞，而且還提供一種粉末組合物，該組合物包括作為基本組分的梭狀芽胞桿菌屬的細胞的殺死的微生物營養細胞，以及糖類和/或淀粉。
文檔編號A61K35/74GK1075636SQ92115398
公開日1993年9月1日 申請日期1992年12月11日 優先權日1991年12月11日
發明者河野和已, 水飼康之, 水落一雄, 淺野猛, 村山隆一, 北城俊男, 田中守 申請人:日本化藥株式會社, 妙利散株式會社