治療細胞增殖紊亂所用組合物的制備方法

專利名稱：治療細胞增殖紊亂所用組合物的制備方法
技術領域：
本發明涉及用同感人類白細胞干擾素治療細胞增殖紊亂的方法。本發明還涉及同感人類白細胞干擾素的藥用組合物，此同感人類白細胞干擾素適于治療細胞增殖紊亂。
干擾素是細胞活素的一個亞類，此細胞活素呈現抗病毒及抗增殖兩種活力。在生物化學及免疫學性質的基礎上，將人類干擾素分為三類干擾素α(白細胞)、干擾素β(纖維細胞)及干擾素γ(免疫)具有不同氨基酸順序的14種α干擾素(分組為亞類型A到H)已通過將DNA分離和編序來鑒別，該DNA給這些多肽編碼。作為潛在的治療藥劑，α干擾素已受到相當注意，這是由于它們的抗病毒及抗腫瘤生長抑制作用。
在美國專利4，503，035中描述了由從全血的血沉棕黃層部分分離的人類白細胞，提純干擾素。以這種方式制備的人類白細胞干擾素包含一些不同的人類白細胞干擾素氨基酸順序的一種混合物。被提純的物質，當在MDBK牛細胞系上測定時，具有從0.9×108至4×108單位/毫克的蛋白質的比活性，當在Ag1732人類細胞系上測定時，具有從2×106至7.6×108單位/毫克的蛋白質比活性。美國專利4，241，174公開了用來確定干擾素抗病毒活力的細胞病效應抑制測定法。所測的干擾素活力對照一用于人類白細胞干擾素的參考標準來校正，此人類白細胞干擾素由國家衛生研究所提供。
美國專利4，530，901公開了重組DNA質粒的構造，該重組DNA質粒包含給至少部分人類白細胞干擾素編碼的一些順序及一種多肽在E.coli中的表達，而所述多肽具有人類白細胞干擾素的免疫及生物活力。
美國專利4，414，150、4，456，748及4，678，751公開了雜種α-干擾素基因的構造，該雜種α-干擾素包含一些不同亞類型順序的組合(例如，A和D，A和B，及A和F)。
美國專利4，695，623及4，897，471公開了新的、具有一些氨基酸順序的人類白細胞干擾素多肽，這些氨基酸順序包括一些普通或主要的氨基酸，這些氨基酸可在自然出現的α干擾素的亞類型的一些多肽中間的每個位置找到，所述那些氨基酸順序被叫作同感人類白細胞干擾素(IFN-con)。這些所公開的IFN-con氨基酸順序被命名為IFN-con1、IFN-con2及IFN-con3。所制作的給IFN-con編碼的那些基因的制備，以及所述那些基因在E.coli中的表達也被公開了。
Klein等人(J.Chromalog.454，205-215(1988)說明了提純E.coli中產生的IFN-con1。據報道，以這種方式提純的IFN-con1具有3×109單位/毫克的蛋白質比活性，這是在細胞病效應抑制測定中用T98G人類細胞系測定的(Fish等人，J.Interen Res.9，97-114(1989))。所提純的IFN-con1包括三種異構形式(isoform)，這是由等電聚焦確定的，這三種異構形式被鑒定為甲硫氨酰基IFN-con1、去甲硫氨酰基IFN-con1及帶有用乙酰基封閉它的N-末端的去甲硫氨酰基IFN-con1(Klein等人，Arch.Biochem.Biophys.276，531-537(1990))。
在美國和其它一些國家，現在已批準將α-干擾素用于治療毛發細胞白血病、性病疣、Kaposi氏肉瘤(通常折磨患獲得性免疫缺乏綜合癥(AIDS)的一些病人的一種癌)、及慢性非A型非B型肝炎。α干擾素的兩個變種在用于治療方面已得到批準干擾素α-2a以商業名稱ROFERON-A投放市場，而干擾素α-2b以商業名稱INTRON-A投放市場。在一單個位置，ROFERON-A及INTRON-A的那些氨基酸順序不同，但在其它方面與α-干擾素亞類型2(亞類型A)的上述氨基酸順序等同。
除了被標記的那些指示外，α干擾素正在單獨被使用或評價，或者在各種其它細胞增殖紊亂中與一些化學治療劑一起被使用或評價，這些細胞增殖紊亂包括慢性骨髓性白血病、多骨髓瘤、表面膀胱癌、皮癌(基細胞癌和惡性黑素瘤)、腎細胞癌、卵巢癌、低度淋巴細胞及皮膚的T細胞淋巴瘤、以及神經膠質瘤。與其它一些化學治療試劑結合，用于治療一些產生于肺的硬腫瘤、結腸直腸及乳房癌，α-干擾素可以是有效的(見Rosenberg等人，癌的“生物療法的原理及應用”腫瘤學的原理及實踐，3rd ed.，Devita 等人，eds.pp.301-547(1989)，Balmer DICP，Arm Pharmacother 24，761-768(1990))。
人們知道α-干擾素影響各種細胞功能，這些功能包括在正常和反常細胞中DNA復制及RNA和蛋白質合成。這樣，干擾素的細胞毒素效應不限于感染腫瘤或病毒的細胞，而且在正常、健康細胞中也同樣有所表現。結果，在干擾素治療期間，特別是當需要大劑量時，產生一些不希望的付作用。干擾素的施藥能導致骨髓抑制(myelo-suppression)，這骨髓抑制導致紅血細胞、白血細胞及血小板含量的降少。大劑量的干擾素通常產生一些類似流感的癥狀(例如，發燒、疲乏、頭痛及寒戰)、胃腸紊亂(例如，厭食、惡心、及腹瀉)頭暈和咳嗽。減少或消除上述干擾素治療的那些不希望的付作用而不減少這種治療的治療好處將是有用的。
因此，本發明的一個目的是用IFN-con治療細胞增殖紊亂，例如毛發細胞白血病或Kaposi氏肉瘤，其中，與現在所實行的那些治療方法相比，那些伴隨的、不希望的付作用被減少或完全消除。換句話說，本發明的一個目的是在與現在實行的那些方法比較時，增加用IFN-con治療細胞增殖紊亂的治療益處，不會相應增加一些付作用的頻率及嚴重性。
本發明包括治療細胞增殖紊亂的方法，該治療涉及給哺乳動物施用有效治療劑量的同感人類白細胞干擾素(IFN-con)已經證明，IFN-con比INTRON-A具有更高的抗增殖活力。因此，用IFN-con治療細胞增殖紊亂，與其它現在實行的一些干擾素治療相比，顯示了更強的功效及安全性。特別是，IFN-con的一有效治療劑量的施藥，與現在所實行的那些方法相比，導致細胞增殖紊亂的更快、更廣泛的治療，其中，沒有出現不希望的那些伴隨的付作用的頻率或嚴重性的增加。此外，IFN-con的一有效治療劑量可少于現在所實行的那些方法中所用的一種干擾素的所述量。結果，減少劑量的IFN-con給出與更高劑量的其它那些干擾素同樣的益處，但卻減少或消除了一些不希望的付作用，這些付作用是與當前所實行干擾素療法伴隨在一起的。
在治療與癌常常伴隨在一起的細胞增殖紊亂時，IFN-con是有效的。這樣一些紊亂包括但并不限于毛發細胞白血病和Kaposi氏肉瘤。可以單獨使用IFN-con，或與其它一些用于治療癌及別的一些增殖紊亂的療法結合使用IFN-con。在一最佳實施例中，IFN-con與一有效治療劑量的一種或多種因子一起使用，該因子刺激骨髓瘤細胞增殖或分化，例如粒性白細胞集落刺激因子(G-CSF)、粒性白細胞/巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)、白細胞間素-1(interleukin-1(IL-1)、白細胞間素-3(IL-3)、白細胞間素-6(IL-6)、紅細胞生成素及干細胞因子(SCF)。
IFN-con是一種具有抗增殖活力的、非天然存在的多肽。較好的IFN-con是一種具有IFN-con1、IFN-con2或IFN-con3的氨基酸順序的多肽。IFN-con最好具有IFN-con1的氨基酸順序。
本發明還涉及藥物組合物，此組合物包括與合適的稀釋劑、輔藥、載體、保存劑和/或加溶劑一起的一有效治療劑量的IFN-con。


圖1到圖7表明將干擾素分別以0.1、0.5、1、5、10、50及100ngs/ml加入Eskol細胞懸浮液時，IFN-con1及INTRON(一種比較物質)在Eskol(一種毛發細胞白血病細胞系)上的抗增殖活力。
圖8顯示了在用INTRON-A、IFN-con1、或IFN-con1及γ-metGCSF治療患Kaposi氏肉瘤病人時，所獲得的最初及目前中間的MTDs。
這里所采用的同感人類白細胞干擾素(IFN-con)將意味著一種非天然存在的多肽，此多肽主要包含這樣一些氨基酸殘基(residues)這些氨基酸殘基對于所有天然存在的人類白細胞干擾素亞類型順序是共同的，而且在對所有亞類型沒有共同氨基酸的那些位置的一個或多個位置上，所述多肽包括一種主要出現在那個位置上的氨基酸，而且絕不包括任何這樣的氨基酸殘基，此氨基酸殘基在至少一種天然存在的亞類型中的那個位置上現在沒有。IFN-con包括但并不限于叫作IFN-con1、IFN-con2及IFN-con3的氨基酸順序，美國專利4，695，623及4，897，471都公開了IFN-con1、IFN-con2及IFN-con3這里作為參考引用了這兩份美國專利所公開的全部內容。一些給IFN-con編碼的DNA順序按上述那些專利中所述的那樣被合成。
IFN-con多肽是所產生的DNA順序的表達的產物，此DNA順序被轉化或被轉染進細菌宿主，特別是E.coli。即IFN-con是重組的IFN-con。通過本領域普通技術人員所熟知的那些程序，將E.coli中產生的IFN-con提純，對于IFN-con1的情況，Klein等人(supra(1988))作了一般說明。被提純的IFN-con可包含一些異構形式的一種混合物，例如，被提純的IFN-con1包含甲硫氨酰基IFN-con1、去甲硫氨酰基IFN-con1及帶有一封閉的N-末端的去甲硫氨酰基IFN-con1的一混合物(Klein等人，supra(1990))換句話說，IFN-con可包含一特異的、分離的異構形式。通過一些技術將IFN-con的一些異構形式彼此分離，例如，通過本領域普通技術人員所熟知的等電聚焦技術。
本發明主要提供了一種治療細胞增殖紊亂的方法，此法涉及進行IFN-con的一有效治療劑量的施藥。本發明的一個最佳實施例是一種治療方法，此治療方法涉及進行一有效治療劑量的IFN-con1、IFN-con2或IFN-con3的施藥。最好進行一有效治療劑量的IFN-con1的施藥。
對于治療各種細胞增殖紊亂，特別是各種癌，IFN-con是有益的。這些紊亂包括但不限于毛發細胞白血病、Kaposi氏肉瘤、慢性骨髓性白血病、多骨髓瘤、表面膀胱癌、皮癌(基細胞癌和惡性黑素瘤)、腎細胞癌、卵巢癌、低度淋巴細胞及皮膚的T細胞淋巴瘤、以及神經膠氏瘤。
將IFN-con單獨使用或與其它療法一起使用，用于治療癌及別的一些增殖紊亂。將IFN-con與一有效治療劑量的一種或多種化學治療劑一起施藥，例如，與白消安、5-氟尿嘧啶(5-FU)、疊氮胸苷(AZT)、甲酰四氫葉酸、左旋溶肉瘤素、潑尼松、環磷酰胺、氮烯咪胺、順鉑、以及潘生丁一起施藥。IFN-con也可以與細胞活素，例如白細胞間素-2(IL-2)一起給藥。
一有效治療劑量的IFN-con可以與一有效治療劑量的、一個或多個刺激骨髓分化的因子一起施藥，以便克服在干擾素治療期間所觀察到的骨髓抑制的一些效應。這樣一些藥劑，包括但并不限于G-CSF、GM-CSF、IL-1、IL-3、IL-6、紅細胞生成素及SCF。干細胞因子(SCF)刺激早期造血祖先細胞的增殖，而且已被美國專利(申請號573，616)說明了，此專利所公開的內容在此作為參考而被引用。
在所給出的一些操作例子中，已經表明，對于抗毛發細胞白血病及與艾滋病伴隨在一起的Kaposi氏肉瘤，IFN-con1是一種有效的抗增殖劑。
例1示出了在Eskol細胞(一毛發細胞白血病細胞系)上所測定的IFN-con1及INTRON-A的抗增殖活力。它表明，在一廣泛的濃度范圍，IFN-con1比INTRON-A具有更大的抗增殖活力。將IFN-con1與ROFERON-A比較時，得到類似的結果。這些結果表明，當與INTRON-A按同樣含量施藥時，IFN-con1具有更大的治療功效。換句話說，要顯示等效于INTRON-A的治療功效，需要較低的IFN-con1含量。
例2說明了在治療伴隨有艾滋病的Kaposi氏肉瘤時，對IFN-con1及INTRON-A所作的比較研究。它表明，接受IFN-Con1的病人比接受INTRON-A的病人獲得更高的單位劑量。此外，接受IFN-Con1及GCSF的病人比單獨接受IFN-con1的病人獲得更高的劑量(見圖8)。在這個研究中，所有病人接受了AZT，作為治療他們的HIV感染的一部分。單獨施藥AZT對Kaposi氏肉瘤無效。
當進行IFN-Con1施藥時，通過3度毒性頻率的減少判斷出，IFN-Con1比INTRON-A更安全。用IFN-Con1治療表明，與INTRON-A治療相比，中性白細胞減少癥及肝機能障礙的影響減少，而用IFN-Con1及γ-metGCSF治療，完全消除了3度毒性(見表2)。
還提供了藥物組合物，此藥物組合物包含藥物可接受的載體、輔藥、稀釋劑、保存劑和/或加溶劑，和一有效治療劑量的IFN-con。IFN-con的藥物組合物包括具有一個范圍的PH值及離子強度的各種緩沖劑的稀釋劑(例如，Tris-HCl、乙酸鹽、磷酸鹽)、載體(例如，人類血清白蛋白)、加溶劑(例如，吐溫、多乙氧基醚)以及保存劑(例如，乙汞硫代水揚酸鈉、苯甲醇)。一般說來，藥物成分的各組分可從那些與干擾素及其它抗增殖劑共同使用的成份中選取，這些是本領域普通技術人員所熟知的。將IFN-con的藥物成分作為一種注射溶液或作為一種凍干粉末來提供，這種凍干粉末在注射前在一相應的稀釋劑中再構成。
本領域普通技術人員考慮到這樣一些變化時，如IFN-con制劑的半衰期、施藥途徑及正在被檢驗的細胞增殖紊亂，就能確定IFN-con的有效治療劑量。一般說來，對于治療細胞增殖紊亂，IFN-con的有效劑量是在2×106到60×106單位范圍內，對每個病人每星期施藥幾次。在治療毛發細胞白血病時，該范圍的低劑量部分是有效的，而該范圍的高劑量部分適用于治療Kaposi肉瘤。有效治療劑量的IFN-con將較理想地導致腫瘤緩解20-80%，這取決于特殊的腫瘤類型，這是對于至少6個月的一段時間。
較好的施藥途徑將是通過注射進哺乳動物的血液，這里的注射可以是靜脈內注射、肌內注射、皮下注射或病灶內(intralesional)注射。對于一給定的施藥途徑，一給定藥物成分的適用性對本領域普通技術人員是顯而易見的。
提供下面這些例子以更充分地說明本發明，但并不能被看作是對本發明范圍的限制。
例1IFN-con1及INTRON-A的抗增殖活力在Eskol細胞系(印第安那大學醫學院的E.Srour博士所分離的毛發細胞白血病細胞系)上檢驗IFN-con1及INTRON-A的抗增殖活力。在RPMI介質(Gibco)中孵育3mlEskol細胞培養物，在37℃時，在含有10%胎兒腓腸(calf)血清的5%的CO2中，按1×105細胞/毫升孵育12小時。將IFN-con1或INTRON-A(干擾素α-2b;Schering公司)加到100μl介質中的0.1至100ngs/ml的最終蛋白質濃縮物中。通過一種Bradford蛋白質測定，確定IFN-con1的蛋白質濃度(Bradford，Anal.Biochem.72，248-254(1976))，而由比活性(2×108國際單位/毫克蛋白質)及由制造商所提供的單位濃度，來計算INTRON-A的濃度。通過臺盼蘭(trypanblue)(Sigma)的排除，在24小時間隔，確定有活力的細胞數。在24小時間隔，將100μl的IFN-con1或INTRON-A加到所指出的最終濃縮物中。有活力的細胞計數是四個獨立試驗的平均值，而每個試驗有一些復制樣品。在24到48小時中的細胞計數變化范圍約為5%，到更長時間點的變化范圍約為2%。圖1至7所示結果是有活力的細胞計數的比值，這是在由百分比所表達的各種時候對于有或沒有干擾素的情況。
通過測量3H-胸(腺嘧啶脫氧核)甘結合進Eskol細胞，來確定有活力細胞計數，此Eskol細胞是在有IFN-con1或INTRON-A的情況下孵育的。在120小時的孵育時間后，抽出200μl細胞懸浮液并在存在5μCi/ml的3H-胸(腺嘧啶脫氧核)甘(Amersham)的情況下，將此細胞懸浮液在37℃孵育3小時。采用Cambridge細胞采集機(Cambridge技術)收獲所述這些細胞，將這些細胞用蒸餾水沖洗七次，并用95%的乙醇沖洗兩次，而用液體閃爍計數來確定被結合的3H-胸(腺嘧啶脫氧核)甘的量。所觀察到的3H-胸(腺嘧啶脫氧核)甘的被Eskol細胞的吸收(uptake)正比于細胞生存能力計數，這Eskol細胞是在有IFN-con1或INTRON-A的情況下孵育了120小時。
例2對具有Kaposi氏肉瘤(KS)的病人進行IFN-con1施藥的安全性、允許劑量及功效。
進行了一隨機的，顯明標記的研究，此研究為估價IFN-con1及INTRON-A的安全性及允許劑量，并確定IFN-con1及INTRON-A的最大允許劑量(MTD)。IFN-con1及INTRON-A每個都與疊氮胸苷(AZT)一起，對具有伴隨有艾滋病的KS的病人施藥。此外，當IFN-con1與AZT及E.coli產生的重組粒性白細胞集落刺激因子一起施藥時，確定IFN-con1的安全性、允許劑量及MID，該E.coli產生的重組粒性白細胞集落刺激因子，在多肽(γ-metGCSF)的氨終端，具有一蛋氨酸殘基。在該研究中的三個治療組是1.INTRON-A和AZT2.IFN-con1和AZT3.IFN-con1、AZT和γ-metGCSF。
每個治療組中至少包括12個可估價的病人。
A.產品說明用美國專利4，695，623及4，897，471中所述的方法，在E.coli中產生IFN-con1。用Klein等人(supra(1988))等人概括說明的步驟來提純IFN-con1。對于目前研究中的皮下施藥，將IFN-con1作為磷酸鈉緩沖劑中的無菌蛋白質來提供。若需要的話，將稀釋劑制成無菌鹽水。
由Burroughs-Wellcome公司得到疊氮胸苷(AZT)，并按包裝插頁上所指示的那樣使用此疊氮胸苷。
由Shering公司獲得INTRON-A的無菌、凍干配制劑，將此制劑按包裝插頁上所指示的那樣再懸浮在稀釋劑中。
用美國專利4，810，643中所概括說明的方法在E.coli中產生γ-metGCSF，這里參考引用了該專利所公開的內容。將γ-metGCSF制備成在10mM乙酸鈉、5%的甘露醇及0.004%吐溫80中的、PH4.0的、濃度0.3mg/ml的無菌蛋白質溶液。若需要的話，稀釋成無菌的5%的葡萄糖水溶液(D5W)。
B.用量及方案AZT.按一固定劑量每四小時口服100mg，對所有病人施藥，而對于全部5個劑量或每日500mg來說，所述病人是醒著的。γ-metGCSF.對于那些被隨機地從包括γ-metGCSF的治療組中選出的病人，γ-metGCSF的劑量是每天1微克/每公斤體重，作為一單獨的大丸劑注射皮下施藥。若必需的話，這個用量以1μg/kg/天(不超過6μg/kg/天)的增量增加，或相應地以0.5μg/kg/天(或更少)的減少量減少，以獲得5000到15000/mm3的絕對中性白細胞計數(ANC)指標范圍。
干擾素.病人按一劑量提高方案接受IFN-con1或INTRON-A。用量根據每一種干擾素的相等單位。然而，因為兩種干擾素的比活性不同(對INTRON-A為2×108IU/mg，而對IFN-con1至少為1×109IU/mg，如美國專利4，695，623中所述的抗病毒細胞病測定所確定的那樣)，對任何給定劑量的，按重量(毫克)計的蛋白質的量，對INTRON-A和IFN-con1是不同的。下面表1顯示了所用的劑量提高方案。表1對每種干擾素還顯示了，對應每個劑量等級(國際單位)，蛋白質的劑量(以毫克為單位)。
表1對于INTRON-A及IFN-con1的劑量提高方案劑量劑量×106劑量(以蛋白質毫克數為單位)等級 IU INTRON-A IFN-Con11 3 0.015 0.0032 9 0.045 0.0093 12 0.060 0.0124 15 0.075 0.0155 18 0.090 0.0186 21 0.105 0.0217 24 0.120 0.0248 27 0.135 0.0279 30 0.150 0.030上面表明，對三個治療組中的每一組的病人進行IFN-con1或INTRON-A的施藥，在提高到下個最高劑量等級之前，每天從劑量等級1開始進行一星期。在第8、15、22、29、36、43、50及57天呈現劑量提高。不斷進行提高，直到每個病人達到MTD，或直到獲得每日最大30×106IUs的干擾素劑量。對一個病人的MTD定義為出現劑量極限毒性的等級以下的劑量等級。采用世界衛生組織建立的、而且為Miller等人(Cancer 47，210-211(1981))所進一步說明的判斷標準，將毒性分為0(無毒性)到4(劇毒)這樣一個標度等級。劑量極限毒性被定義為3度或4度有害作用，這有害作用被判別為至少可能與干擾素有關。發燒及寒戰持續少于24小時，疲勞、頭痛、或2度或更少的毒性，并沒被用來確定MTD，除非它們被確定為對單個病人是不能忍受的。
在上述提高階段完成時，繼續對病人維持治療，這治療包括或每日按病人的MTD劑量治療、或每日按30×106IUs的最大劑量(如果得到這個劑量的話)治療。繼續進行維持治療，直到疾病的進展或其它被證明為是正確的判據將該病人從此研究中排除。
在維持治療期間，允許由于毒性原因而減少兩種干擾素劑量。在減少兩個劑量后，不允許進一步修改干擾素劑量，而且從該方案中撤出需要進一步減少的病人。這步驟的一個例外是當劑量極限毒性是中性白細胞減少癥的情況(ANC≤1000/mm3在約一星期期間中的兩天)。在這個例子中，允許保持研究該病人，而無需進一步減少干擾素劑量，但對末接受γ-metGCSF的那些病人開始γ-metGCSF治療，以每天每公斤體重1微克的量進行皮下施病。對于已經在γ-metGCSF治療組中的那些病人，進行施藥的γ-metGCSF的劑量被提高到下一個最高等級(1微克/公斤/天的增加量)。
C.選擇病人全部49個病人已在本研究中登記。在本研究中登記一個單個人只是在滿足所有蘊含及排斥判據之后。對于蘊含的顯著判據是血清學確證了的HIV感染、病理組織學確定了的Kaposi氏肉瘤(此Kaposi氏肉瘤具有一(些)適度(measurable)的皮或口的損害)、可接受的免疫功能(如由CD4淋巴細胞含量所測得的)及少于一年的AZT治療。
由這個研究撤回一個病人的那些原因中有在上述劑量提高階段出現第二次3度或更高的毒性、在已確定單個病人的MTD后第三次出現劑量極限毒性以及該病人正在進行維持治療、或KS的發展。
D.對于IFN-con1及INTRON-A的MTDs的確定采用上述劑量提高方案用于1至9星期的研究，接著進行維持治療，并當合適的時候減少劑量，確定對所述三個治療組的INTRON-A及IFN-con1的最初及現在中間的MTDs，并在圖8中示出。每組包括15個病人。組1(INTRON-A及AZT)在劑量提高期間，達到9×106IUs的最初MTD，并達到6×106IUs的現在的MTD;組2(IFN-con1及AZT)達到15×106IUs的最初及現在的MTDs;組3(IFN-con1、γ-metGCSF和AZT)分別達到24×106IUs和21×106IUs的最初和現在的MTDs。
E.INTRON-A及IFN-con1治療安全性評估INTRON-A及IFN-con1治療安全性由有害效果的嚴重程度來確定，這有害效應要求減少干擾素劑量。結果總結在表2中。
表2在三個治療組中毒性引起的劑量減少出現的頻率(%)INTRON-A IFN-con＊1IFN-con1和γ-metGCSF＊2度不能忍受(類似流感的 20 70 65綜合癥)3度中性白細胞減少癥 40 10 03度肝功能試驗 30 10 0＊對于IFN-con1以及IFN-con1和γ-metGCSF治療組的各百分比求和不等于100%，因為這些組中的某些病人達到30×106IU的最大劑量而無有害效果。
自從開始研究以來，還沒有病人由于明顯產生于INTRON-A或IFN-con1的施藥的毒性而撤回。
F.確定IFN-con1及INTRON-A治療的功效抗腫瘤反應.在治療四個月后，用艾滋病臨床試驗團體(ACTG)腫瘤學委員會的標準反應判據(Krown等人，J.Clin.Oncol7，1201-1207(1989))估價抗腫瘤反應。
免疫功能.在上述研究期間，每個月獲取CD4淋巴細胞計數，共進行6個月，以評價病人對HIV感染的免疫反應。
在所有治療組中，Kaposi氏肉瘤的一些損害反應和CD4淋巴細胞含量(levels)是等價的。
已根據一些最佳實施例說明了本發明，應這樣理解，本領域普通技術人員將作出一些變化和改進。因此，打算使所附的權利要求書復蓋所有這樣的變化，這些變化是屬于本發明所要求保護的范圍。
權利要求
1.一種制備在細胞增殖紊亂治療中用的組合物的方法，包括確定同感人類白細胞干擾素的一有效治療劑量；并將所述劑量與藥物可接受的稀釋劑、輔藥、載體、保存劑和/或加溶劑結合。
2.如權利要求1所述的一種方法，其中將所述組合物單獨施藥，與一有效治療劑量的化學治療劑一起施藥，或與一有效治療劑量的G-CSF、GM-CSF、IL-1、IL-3或SCF一起施藥。
3.如權利要求1所述的一種方法，其中通過靜脈內、肌內、皮下或病灶內這些途徑施用所述組合物。
4.如權利要求1所述的一種，其中所述組合物適于對哺乳動物施藥。
5.如權利要求1所述的一種方法，其中所述組合物作為一種注射液或一種被凍干的粉末提供。
6.如權利要求1所述的一種方法，其中所述細胞增殖紊亂是毛發細胞白血病或Kaposi氏肉瘤。
7.如權利要求1所述的一種方法，其中所述同感人類白細胞干擾素選自IFN-con1、IFN-con2和IFN-con3。
8.如權利要求7所述的一種方法，其中所述的同感人類白細胞干擾素是IFN-con1。
9.如權利要求1所述的一種方法，其中所述同感人類白細胞干擾素是一外源DNA順序的原核生物表達的產物。
10.如權利要求1所述的一種方法，其中所述同感人類白細胞干擾素的有效治療劑量是對每個病人從2×106到60×106單位。
全文摘要
公開了用同感人類白細胞干擾素治療細胞增殖紊亂的一些方法。還公開了同感人類白細胞干擾素的藥物組合物。
文檔編號A61K38/00GK1064018SQ9111107
公開日1992年9月2日 申請日期1991年10月17日 優先權日1990年10月17日
發明者L·M·布拉特, M·W·泰勒 申請人:安姆根有限公司